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神经元五环素1对腰椎间盘突出症术后瘢痕成纤维细胞增殖和迁移的影响
编辑人员丨2天前
目的:观察NPTX-1基因对腰背部术后瘢痕成纤维细胞增殖及迁移的影响。方法:收集2018年9月至2020年9月于青岛大学附属医院诊断为腰椎间盘突出症术后并接受取内固定的二次手术患者的瘢痕组织6例。体外分离培养瘢痕成纤维细胞;将瘢痕成纤维细胞分为实验组(A组)和对照组(B组),其中A组转染敲除NPTX-1基因的小干扰RNA(siRNA),B组转染NPTX-1基因的阴性对照序列(NC)。采用实时荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)和蛋白质印迹(Western blot)检测NPTX-1和PCNA的表达。细胞计数试剂盒(CCK8)检测细胞增殖能力。细胞迁移实验(Transwell实验)检测细胞迁移能力。采用独立样本 t检验比较两组的均数。 结果:RT-qPCR结果显示,A组细胞NPTX-1表达低于B组(0.18±0.03比1.56±0.04, t=49.691, P<0.01),差异有统计学意义。Western blot结果显示,A组细胞NPTX-1蛋白表达低于B组(0.29±0.04比0.68±0.01, t=15.302, P<0.05),差异有统计学意义。CCK-8结果显示,A组细胞在24、48、72 h的490 nm吸光度( A490 nm)值低于B组(0.93±0.04比1.06±0.05、1.42±0.05比1.66±0.08、1.65±0.06比1.99±0.07, t=4.469、4.958、6.192, P<0.01),差异有统计学意义。RT-qPCR结果显示,A组细胞PCNA表达低于B组(0.36±0.02比0.96±0.01, t=55.164, P<0.01),差异有统计学意义。Western blot结果显示,A组细胞PCNA蛋白表达低于B组(0.25±0.04比0.45±0.03, t=6.871, P<0.05),差异有统计学意义。Transwell结果显示,A组细胞迁移数量低于B组[(138.67±4.51)个比(275.00±5.00)个, t=35.072, P<0.01],差异有统计学意义。 结论:下调瘢痕成纤维细胞的NPTX-1基因可抑制瘢痕成纤维细胞的增殖能力和迁移能力,并抑制PCNA的表达。
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编辑人员丨2天前
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Nptx2在阿尔茨海默病中通过抑制补体系统逆转小胶质细胞诱发突触损失的研究
编辑人员丨1个月前
目的 在阿尔茨海默病(AD)模型中探究神经元正五聚蛋白Ⅱ(Nptx2)对补体系统、小胶质细胞活化和突触密度的影响.方法 将6个月龄APPswe/PS1dE9双转基因C57BL/6小鼠分为模型组(脑室注射AAV-Veh 1 × 1010 GC)和模型+AAV-Nptx2组(脑室注射AAV-Nptx2 1 × 1010 GC),将同龄野生型C57BI/6小鼠分为对照组(脑室注射AAV-Veh 1 × 1010 GC)和对照+AAV-Nptx2组(脑室注射AAV-Nptx2 1 × 101 0 GC),每组12只.给药1个月后,用Morris水迷宫法评估小鼠的认知功能,用蛋白质印迹法检测Nptx2与钙离子结合接头分子1(Iba1)蛋白的表达水平,用酶联免疫吸附试验法检测补体相关蛋白的含量,用高尔基体染色法评估突触可塑性.结果 对照组、对照+AAV-Nptx2组、模型组和模型+AAV-Nptx2组的平台象限停留时间分别为(44.72±10.92)、(53.32±10.29)、(21.92±3.80)和(36.47±6.41)s,穿越平台次数分别为(10.08±2.64)、(9.58±3.09)、(2.25±1.29)和(5.92±1.38)次,Nptx2蛋白相对表达水平分别为0.33±0.06、0.63±0.10、0.09±0.03和0.57±0.22,Iba1 蛋白 相对表达水平分别为 0.17±0.06、0.23±0.08、0.97±0.16与 0.40±0.14,突 触密度分别为 22.75±4.27、29.25±4.78、8.25±2.99和23.75±4.86.模型组的上述指标与模型+AAV-Nptx2组和对照组比较,在统计学上差异均有统计学意义(均P<0.05).结论 Nptx2蛋白过表达可以抑制补体系统激活,降低小胶质细胞活化,增加突触密度,达到减轻AD小鼠认知功能损伤的作用.
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编辑人员丨1个月前
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基于全长转录组分析探讨熊果酸抗癫痫和神经保护的机制
编辑人员丨1个月前
基于转录组分析探讨熊果酸(ursolic acid,UA)抗癫痫和改善癫痫诱导的GABAergic神经元损伤的可能机制.选取对照组(NC组)、癫痫组(SE组)及癫痫UA给药组(UA组)大鼠的海马组织进行全长转录组测序;测序数据利用GO(gene ontology,GO)、KEGG(kyoto encyclopedia of genes and genomes,KEGG)及PPI(protein-protein interaction networks,PPI)对差异基因(differential genes,DEGs)进行分析;利用RT-qPCR验证海马组织中关键差异基因的表达量;最后在原代神经元上构建体外癫痫模型,采用RT-qPCR对差异基因的表达量进行验证,并利用免疫荧光、Western blot进一步检测神经元上GABAA受体γ2亚基(GABRG2)的表达量.两两样本表达量相关性热图及DEGs聚类分析结果显示:SE组距离NC组最远,UA治疗后,总体向正常组偏移.SE组与UA组对比,共筛选出 220个差异基因,其中 143个基因上调,77个基因下调.GO富集分析显示:在一级分类中涉及生物过程、细胞成分和分子功能 3个过程.KEGG通路富集分析表明,DEGs涉及cAMP信号通路、钙信号通路等 36条生物学通路.PPI分析表明DEGs与GABA及炎症关系密切.RT-qPCR结果表明UA处理增加了海马组织中GABA受体相关基因(Gng4)、GABA合成相关基因(Camk2a、Vgf和Npy)、炎症相关基因(Timp1和Spp1)的表达量,降低了GABA合成相关基因(Nptx2)、cAMP相关通路基因(Gnas)的表达量;并进一步证实UA处理增加了神经元上Gng4、Camk2a的表达量,降低了Gnas的表达量.免疫荧光与Western blot结果显示,与SE组相比,UA给药后原代神经元上GABRG2的表达量增加.本研究丰富了UA抗癫痫的转录组数据,也为深入研究UA抗癫痫和神经保护奠定理论基础.
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编辑人员丨1个月前
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MKRN3基因与儿童中枢性性早熟
编辑人员丨2023/8/6
中枢性性早熟是一种常见的儿童性发育异常性疾病,其发病机制暂不明确.环指蛋白3基因的功能丧失性突变是中枢性性早熟的重要致病因素.在目前已证实的中枢性性早熟相关致病基因中,环指蛋白3基因所致性早熟的发病率相对较高.本文综述了环指蛋白3基因的结构,突变,以及对于青春期时间可能的影响.
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编辑人员丨2023/8/6
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脊髓和三叉神经脊束核尾侧亚核投射神经元亚群负责痛觉和痒觉信息加工
编辑人员丨2023/8/5
初级感觉神经元和脊髓背角的中间神经元传递痛觉和痒觉相关信息,并具有显著的分子和功能异质性,而将痛、痒信息传递到脑的投射神经元分子标签目前尚不清楚.该研究使用逆行示踪-TRAP(翻译核糖体亲和纯化)和RNA测序技术,揭示了脊髓和三叉神经脊束核到臂旁核的投射神经元存在分子异质性.该研究在鉴定出的众多基因中,重点关注了Cck+、Nptx2+、Nmb+和Crh+投射神经元的不同亚群.结合逆行标记神经元的原位杂交和基于Fos表达变化的检测分析,也阐明了它们显著的功能异质性,包括痛觉和痒觉刺激输入在NK1R和非NK1R投射神经元不同亚群上的汇聚和分散.
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编辑人员丨2023/8/5
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七氟烷通过调控miRNA表达影响人脑胶质瘤的生物学特性
编辑人员丨2023/8/5
目的 探讨七氟烷对胶质瘤细胞生物学特性的影响及其作用机制.方法 实验分为七氟烷组和对照(NC)组,七氟烷组分别通入1.25%、2.50%、5.00%的七氟烷和5%CO2+95%O2培养细胞,气流量均为1 L/min;对照(NC)组只通入5%CO2+95%O2.将pcDNA和pcDNA-NPTX1质粒分别转染至A172细胞中再用5.00%的七氟烷处理,分别记为Sevoflu-rane+pcDNA组、Sevoflurane+pcDNA-NPTX1组;转染均采用脂质体法.四甲基偶氮唑盐比色法(MTT)检测细胞存活率;Tran-swell检测细胞迁移和侵袭;Western印迹检测基质金属蛋白酶(MMP)-9、MMP-2、神经元五聚蛋白(NPTX)1、上皮钙黏蛋白(E-cadherin)、波形蛋白(Vimentin)、神经钙黏蛋白(N-cadherin)表达水平;实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测miR-139-5p和NPTX1 mRNA表达水平;双荧光素酶报告基因检测miR-139-5p和NPTX1的靶向关系.结果 一定浓度的七氟烷处理A172细胞后,细胞存活率、迁移和侵袭数量显著降低,NPTX1、MMP-2、MMP-9、Vimentin、N-cadherin表达水平显著降低,miR-139-5p、E-cadherin表达水平显著升高.miR-139-5p靶向调控NPTX1,过表达NPTX1逆转了七氟烷对胶质瘤细胞增殖、迁移、侵袭和上皮间质转化(EMT)的抑制作用.结论 七氟烷可抑制胶质瘤细胞增殖、迁移、侵袭和EMT,其机制可能是与miR-139-5p、NPTX1相关.
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编辑人员丨2023/8/5
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基于生物信息学和机器学习的心肌梗死后心室重构关键基因的筛选
编辑人员丨2023/8/5
目的:利用生物信息学和机器学习筛选心肌梗死后心室重构(VRpMI)中的关键基因,并探索其对VRp-MI的诊断价值.方法:从GEO数据库分别下载GSE132143中健康人和VRpMI患者心室组织的测序数据,猪心肌梗死后6个月梗死区和梗死远端区组织的测序数据,GSE775中小鼠心肌梗死后48 h、8周及正常小鼠心室组织的表达谱数据.基于健康人和VRpMI患者心室组织的测序数据,利用edgeR包和加权基因共表达网络分析筛选重要差异表达基因(DEG);通过LASSO算法和SVM-RFE算法筛选关键基因,并利用自身数据和猪、小鼠数据分析关键基因诊断VRpMI的价值;最后,对关键基因开展单基因的基因集富集分析.结果:共获得355个重要DEG,从中筛选出1个关键基因即神经元正五聚蛋白2(NPTX2).NPTX2在自身数据和小鼠、猪验证数据中的AUC(95%CI)分别为0.996(0.984~1.000)、0.972(0.895~1.000)和0.963(0.882~1.000).单基因的基因集富集分析显示,NPTX2富集于心肌收缩、鞘脂类代谢、细胞凋亡、谷胱甘肽代谢等19个信号通路.结论:NPTX2可能为诊断VRpMI的潜在生物标志物.
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编辑人员丨2023/8/5
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血管性痴呆患者血清神经调节蛋白1、神经元正五聚蛋白2的表达及临床意义
编辑人员丨2023/8/5
目的 探究血清神经调节蛋白1(NRG-1)、神经元正五聚蛋白2(NPTX-2)水平与血管性痴呆(VaD)患者认知功能、神经功能和预后的关系.方法 选取100例VaD患者为VaD组,同期选取100名健康体检者为正常对照组.采用ELISA法检测两组血清NRG-1和NPTX-2水平,应用Pearson相关性分析其与VaD患者MMSE评分、NIHSS评分、蒙特利尔认知评估量表(MoCA)评分以及日常生活活动量表(ADL)评分的关系,并进行单因素分析.采用Logistic回归分析并绘制ROC曲线,探究其与VaD患者预后功能障碍分级差的关系及其预测意义.结果 正常对照组血清NRG-1和NPTX-2水平显著高于VaD组(均P<0.05).随着MMSE评分、MoCA评分、ADL评分降低和NIHSS评分升高,VaD组血清NRG-1和NPTX-2水平降低,组间两两比较差异有统计学意义(均P<0.05).Pearson相关性分析显示,VaD患者血清NRG-1和NPTX-2水平与MMSE评分(r=0.413,P=0.021;r=0.566,P=0.000)、MoCA评分(r=0.522,P=0.000;r=0.463,P=0.000)以及ADL评分(r=0.419,P=0.018;r=0.488,P=0.000)呈正相关,与NIHSS评分(r=-0.385,P=0.035;r=-0.427,P=0.014)呈负相关.非条件Logistic回归分析显示,血清NRG-1、NPTX-2水平升高是VaD预后差的保护因素(均P<0.05,均OR<1),而高龄、合并关键基础疾病、吸烟是VaD预后差的危险因素(均P<0.05,均OR>1).血清NRG-1、NPTX-2联合应用时曲线下面积为0.886,高于其单独应用,诊断效能较高.结论 VaD患者的血清NRG-1和NPTX-2水平下降,且其改变幅度与认知功能、神经功能和预后具有明显相关性.检测血清NRG-1和NPTX-2可为临床诊治VaD、预测病情进展和评估预后提供一定的参考依据.
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编辑人员丨2023/8/5
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AD患者血清NPTX2、Netrin-4水平与认知障碍的关系
编辑人员丨2023/8/5
目的 分析阿尔茨海默病(AD)患者血清神经元正五聚蛋白2(NPTX2)、轴突生长诱向因子4(Netrin-4)水平与认知障碍的关系.方法 选取2021年11月至2022年11月首都医科大学附属北京天坛医院神经病学中心收治的85例存在认知障碍AD患者作为研究组,另外选取同期80例认知功能正常的健康体检者作为对照组.所有对象入院后检测血清NPTX2、Netrin-4水平,并进行各组比较.采用Pearson相关性分析血清NPTX2、Netrin-4水平与MMSE评分的关系,采用受试者工作特征曲线(ROC)分析血清NPTX2、Netrin-4对AD患者认知障碍的评估价值,采用多因素Logistic回归分析影响AD患者认知障碍的相关因素.结果 研究组患者血清NPTX2、Netrin-4水平明显低于对照组(P<0.05).Pearson相关分析显示,AD患者血清NPTX2、Netrin-4水平与MMSE评分均呈正相关(rNPTX2=0.485、rNetrin-4=0.425,均P<0.001).ROC曲线结果显示:血清NPTX2评估AD患者认知障碍的曲线下面积为0.845,截断值为20.52,敏感度、特异度分别为92.94%、61.25%;Netrin-4评估AD患者认知障碍的曲线下面积为0.872,截断值为73.56ng·mL-1,敏感度、特异度分别为92.94%、67.50%;血清NPTX2联合Netrin-4评估AD患者认知障碍的曲线下面积为0.929,敏感度、特异度分别为85.88%、86.25%.多因素Logistic回归分析显示,血清NPTX2、Netrin-4、年龄均为影响AD患者认知障碍的相关因素(P<0.05).结论AD患者血清NPTX2、Netrin-4水平均降低,并与患者认知障碍密切相关,可作为AD患者认知障碍的评估指标.
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编辑人员丨2023/8/5
