目的:探讨Orai1介导钙池操纵的钙内流（SOCE）在脓毒症小鼠CD4 + T细胞免疫功能损害中的作用。 方法:采用清洁级雄性Balb/c小鼠建立盲肠结扎穿孔（CLP）脓毒症模型，分别于术后1、3、5 d 处死小鼠，无菌留取脾脏，免疫磁珠法分选CD4 + T细胞，Western印迹法检测各组脾脏CD4 + T细胞Orai1蛋白表达，流式细胞术检测SOCE，流式细胞术检测CD4 + T细胞凋亡，CCK-8细胞计数试剂盒检测CD4 + T细胞增殖，酶联免疫吸附法（ELISA）检测干扰素（IFN）-γ和白细胞介素（IL）-4水平。然后调节Orai1蛋白的表达，实验分为4组，sham组、CLP3组、Orai1下调组（Orai1-down组）、Orai1上调组（Orai1-up组），进一步检测小鼠脾脏CD4 + T细胞SOCE和免疫功能。 结果:sham组脾脏CD4 + T细胞Orai1蛋白的相对表达量为1.03±0.16，与sham组相比，CLP组的Orai1蛋白水平明显降低（ F=19.64， P=0.000 5）。与sham组相比，CLP组SOCE水平明显降低（ F=30.01， P=0.001）。sham组的CD4 + T细胞早期和晚期凋亡比率为8.7%±1.5%，与sham组相比，CLP组明显升高（ F=32.29， P=0.000 1）。与sham组相比，CLP组小鼠脾脏CD4 + T细胞增殖能力明显降低，差异有统计学意义（ F=7.26， P=0.001 8）。与sham组相比，CLP组小鼠脾脏CD4 + T细胞分泌IFN-γ和IL-4的能力均明显降低，差异均有统计学意义（ F=19.690、6.183，均 P<0.05）。与sham组相比，CLP组IFN-γ/IL-4比值变小（ F=11.23， P=0.003 1）。与CLP3组相比，Orai1-down组CD4 + T细胞SOCE的水平明显下降，早期和晚期凋亡比率明显升高，脾脏CD4 + T细胞增殖能力显著下降，分泌IFN-γ和IL-4下降，IFN-γ/IL-4值下降，差异均有统计学意义（ t=4.819、7.952、2.988、28.760、3.140、7.670，均 P<0.05）；而Orai1-up组则均获得相反的结果，差异亦均有统计学意义（ t=2.983、6.796、9.390、19.670、3.692、15.870，均 P<0.05）。 结论:Orai1介导SOCE减轻脓毒症小鼠CD4 + T细胞免疫功能障碍。

目的:探讨Stormorken综合征(Stormorken syndrome，STRMK)的临床特征及基因变异特点。方法:回顾性分析1例基质相互作用分子1(stromal interaction molecule 1，STIM1)突变致STRMK患儿的临床资料，在中国知网、万方数据库、维普数据库、PubMed数据库中检索并复习相关文献。结果:患儿以抽搐、反复血小板减少为主要表现，完善基因检测提示STIM1基因存在c326A>G杂合突变，该突变非新发突变，确诊STRMK。文献复习共检索到19篇英文文献，共报道52家系87例STRMK患者，主要由STIM1 EF-hand、STIM1 CC1、ORAI1突变后诱发，该例突变位点位于STIM1 EF-hand，其中7例和该例患儿突变类型相同。结论:STIM1 EF-hand和ORAI1突变以肌肉系统受累为主，前者以肌无力及运动障碍为主要表现，后者常表现为肌肉挛缩、痉挛及脊柱强直。而STIM1 CC1突变主要影响血液系统、生长及语言发育等。对于儿童不明原因的抽搐、血小板减少，除常见原因外，需警惕STRMK，积极完善基因检测有助于早期诊断。

帕金森病(PD)是世界上第二常见的神经退行性疾病，它的发病机制与线粒体功能障碍、氧化应激反应以及钙稳态失衡有关。近年来，PD与Ca 2+的关系成为研究热点，钙稳态失衡可通过不同的途径导致PD。细胞内Ca 2+水平取决于钙库操纵性钙内流(SOCE)，而SOCE由钙释放激活钙通道调节分子1(Orai1)、基质相互作用分子1(STIM1)及瞬时受体电位通道1(TRPC1)相互作用组成的功能复合体调节。常见的PD神经毒素可通过降低Orai1-STIM1-TRPC1复合体功能，损伤SOCE及其下游的信号通路选择性损伤多巴胺能神经元，并且Orai1-STIM1-TRPC1复合体可能通过作用于小胶质细胞以及内质网调控神经炎症、自噬现象以影响PD的发生发展。因此恢复Orai1-STIM1-TRPC1复合体表达及功能，维持钙稳态可能成为PD的有效治疗靶点。

目的:观察在先天性巨结肠(Hirschsprung's disease，HSCR)结肠平滑肌上钙库操纵性钙通道(store-operated calcium channel，SOCC)的相关的基因及蛋白Orai1和Stim1表达，初步探索SOCC与HSCR结肠动力障碍机制的相关性。方法:选择2017年4月至2018年7月在上海交通大学医学院附属新华医院及嘉兴市妇幼保健院接受手术治疗的HSCR患儿24例。其中，男17例，女7例，均为常见型巨结肠；年龄为(8.6±3.6)个月，范围为6～14个月。采用蛋白质印迹法、荧光定量PCR、免疫组织化学等技术，在24例HSCR患儿手术切除的近端切缘段(正常段)、狭窄段和扩张段结肠平滑肌标本中检测与SOCC相关的基因及蛋白Orai1和Stim1的表达情况。结果:蛋白质印迹法结果显示24例HSCR患儿结肠狭窄段Orai1及Stim1蛋白的表达水平与扩张段相比明显增加，差异具有统计学意义( t＝2.746， P＝0.012； t＝2.779， P＝0.011)；扩张段Orai1及Stim1蛋白的表达水平与近端切缘段相比也明显增加，差异具有统计学意义( t＝2.296， P＝0.031； t＝2.403， P＝0.025)；狭窄段Orai1及Stim1蛋白的表达水平显著高于近端切缘，差异具有统计学意义( t＝5.915， P<0.01； t＝7.726， P<0.01)。荧光定量PCR结果显示和扩张段相比，狭窄段Orai1和Stim1的mRNA的表达明显增加，差异具有统计学意义( t＝2.330， P＝0.029； t＝2.698， P＝0.013)；扩张段Orai1和Stim1的mRNA的表达也较近端切缘明显增加，差异具有统计学意义( t＝2.425， P＝0.024； t＝2.186， P＝0.039)；狭窄段Orai1及Stim1的mRNA的表达显著高于近端切缘，差异具有统计学意义( t＝7.332， P<0.01； t＝18.052， P<0.01)。免疫组织化学结果也显示与扩张段相比，Orai1和Stim1蛋白在狭窄段的表达明显增加，扩张段Orai1和Stim1蛋白的表达较近端切缘段亦明显增加。 结论:HSCR患儿结肠病变部位平滑肌层的SOCC的表达明显增强，说明该信号通路的异常可能与HSCR的结肠动力障碍机制相关。

钙释放激活钙调节蛋白1(calcium release-activated calcium modulator 1， ORAI1)基因编码基质相互作用分子1(stromal interaction molecule 1，STIM1)及ORAI1蛋白，二者在细胞膜上广泛表达， ORAI1基因的表达可通过影响二者的功能及结构，进而影响机体对于Ca 2+的存储及转运，最终导致机体免疫系统功能紊乱而发病，本文围绕近年来 ORAI1基因的表达及相关疾病的研究进展进行综述。

钙稳态失衡和自噬异常是PD、AD及肌萎缩侧索硬化症(ALS)等神经退行性疾病的重要发病机制，二者之间存在相关性。研究显示，细胞不同储钙区室可经钙通道或钙离子(Ca 2+)相关信号蛋白影响自噬，例如细胞膜钙释放激活钙通道调节分子1(Orai1)和瞬时受体电位通道(TRPC)、内质网钙通道肌醇1，4，5-三磷酸受体(IP3R)途径、线粒体Ca 2+摄取相关的钙单向转运体(MCU)、溶酶体钙通道瞬时受体电位通道粘蛋白1(TRPML1)和两孔通道、胞浆钙调素依赖蛋白激酶的激酶β(CaMKKβ)/腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)途径等。本文现围绕神经退行性疾病中细胞内不同储钙区室和胞浆Ca 2+调控自噬的研究进展进行综述，以期加深临床同道对其的认识。

目的 探讨内皮素-1(ET-1)对心房颤动(AF)大鼠心房纤维化的作用和机制.方法 14 只成年雄性SD大鼠随机分配为对照(NC)组、房颤(AF)组;采用连续 1 周每日尾静脉注射1 次氯化钙-乙酰胆碱混合液 0.1 ml/100 g的方法建立AF大鼠模型,NC组同等方式注射等量生理盐水;各组均在第1 天及第8 天记录窦性或AF心电图,超声心动图监测心房大小和心功能;采用HE染色及Masson染色观察心房组织纤维化情况;采用Western blot 法检测心房组织中内皮素-1(ET-1)、Ⅰ型胶原(COL-Ⅰ)、转化生长因子(TGF)-β、钙库操纵性钙通道(SOCC)蛋白Orai1 和基质相互作用分子1(STIM1)的表达;培养小鼠心房肌细胞HL-1 细胞,以梯度浓度的ET-1 处理 24h后,采用Western blot法观察HL-1细胞ET-1/SOCC/TGF-β信号通路中TGF-β、Orai1 及STIM1蛋白表达变化;利用siRNA转染方法敲低HL-1 细胞中Orai1表达,以合适浓度的ET-1 处理细胞 24 h,Western blot检测HL-1 细胞中 TGF-β 蛋白的表达情况.结果 与 NC 组相比,超声心动图显示AF大鼠心脏左房内径(LAD)增加(P<0.05);HE和Masson染色结果显示AF组大鼠心房组织纤维化(P<0.05),Western blot 检测结果提示AF组心房组织中ET-1、Orai1、STIM1、TGF-β、COL-Ⅰ蛋白表达较NC组增加(P<0.05).ET-1 处理HL-1 细胞后,HL-1 细胞Orai1、STIM1、TGF-β蛋白表达增多(P<0.05).敲低 HL-1 细胞中 Orai1表达后,ET-1 的处理不再使TGF-β的表达上调.结论 AF大鼠心房组织ET-1 表达增多,并通过ET-1/SOCC/TGF-β信号通路促进心房纤维化.

钙离子(Ca2+)作为细胞内的第二信使,参与影响神经元的氧化应激、能量代谢、免疫应答、释放神经递质、调节信号通道等活动,在神经退行性疾病中发挥重要作用.钙通道家族是钙信号的主要来源之一,由基质相互作用分子1(STIM1)和钙释放激活钙调节蛋白1(Orai1)组成钙库操纵的Ca2+内流(SOCE)通道是重要的钙通道家族成员,参与影响神经元的Ca2+内流.SOCE通道活性及相关蛋白表达变化在阿尔茨海默病、帕金森病、脑缺血性疾病、亨廷顿病等神经退行性疾病发病过程中发挥重要作用.SOCE通道通过影响钙稳态、磷酸酶系统、能量合成、神经递质表达等机制参与神经退行性疾病的发病过程.基于SOCE通道的调控有望为上述疾病治疗提供新的思路.

目的 基于钙通道调节分子 1(ORAI1)/T细胞核因子(NFAT)信号轴探讨镇心安神方(龙骨、牡蛎、淡竹叶、骨碎补、茯苓)对特应性皮炎(AD)小鼠的作用及机制.方法 将 36 只BALB/c小鼠随机分为空白对照组、模型组、西替利嗪组(1.3 mg·kg-1)及镇心安神方组(36.36 g·kg-1),每组 9 只.采用 1-氯-2,4-二硝基苯(DNCB)诱导建立AD小鼠模型.灌胃给药,每日 1 次,连续给药 2 周.给药结束后,测定皮损面积,并对皮损严重程度进行评分;测定脾脏质量,计算脾脏指数;采用HE染色法观察皮损组织病理变化;ELISA法检测血清中白细胞介素 4(IL-4)、IL-13 及胸腺基质淋巴细胞生成素(TSLP)的含量;Western Blot法检测皮损组织中ORAI1、钙调磷酸酶A(CaN)、T细胞核因子 2(NFAT2)蛋白表达水平.结果 与空白对照组比较,模型组小鼠的皮损评分显著升高(P＜0.01),皮损面积显著扩大(P＜0.01);表皮层及真皮层厚度显著增加(P＜0.01),表皮过度角化,棘层肥厚,真皮层可见嗜酸性粒细胞、淋巴细胞等炎性细胞浸润;脾脏指数及血清IL-4、IL-13、TSLP水平显著升高(P＜0.01);皮损组织中CaN、NFAT2、ORAI1 蛋白表达水平显著升高(P＜0.01).与模型组比较,镇心安神方组小鼠的皮损评分显著降低(P＜0.01),皮损面积显著缩小(P＜0.01);表皮层及真皮层厚度显著降低(P＜0.01),表皮过度角化减轻,棘层轻度肥厚,真皮层有少量炎性细胞浸润;脾脏指数及血清IL-4、IL-13、TSLP水平显著降低(P＜0.01);皮损组织中CaN、NFAT2、ORAI1 蛋白表达水平显著降低(P＜0.01).结论 镇心安神方能够改善DNCB诱导AD小鼠的皮肤病理损伤,可能与其抑制ORAI1、CaN及NFAT2 蛋白表达,降低血清TSLP、IL-4、IL-13 等 2 型炎症因子水平,通过免疫调节改善皮肤炎症及瘙痒有关.

目的:观察在体人参皂苷Rb1预处理对慢性低氧(CH)肺动脉高压大鼠肺动脉平滑肌细胞钙库操纵性钙内流(SOCE)的影响.方法:将30只雄性SD大鼠随机分为正常对照组(control组)、CH肺动脉高压模型组(CH组)和Rb1(30 mg/kg)组,每组10只.检测各组右心室收缩压、右心室质量指数和肺动脉血管环张力.体外培养大鼠肺动脉平滑肌细胞,采用细胞动态荧光检测游离Ca2+浓度.分别采用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)和western blotting检测基质相互作用分子2(STIM2)和钙释放激活钙调节因子 2(Orai2)基因和蛋白表达.结果:与CH组比较,Rb1组大鼠右心室收缩压和右心室质量指数均明显降低(P＜0.01),环匹阿尼酸(CPA)诱发的肺动脉收缩张力和钙内流量明显减少(P＜0.01),STIM2和Orai2 mRNA和蛋白相对表达量明显降低(P＜0.05).结论:Rb1可明显改善CH肺动脉高压大鼠的肺动脉压,其作用机制可能与减弱肺动脉SOCE功能和STIM2和Orai2表达有关.