目的:分析子痫前期患者胎盘组织P57kip2 mRNA水平及与血清可溶性fms样酪氨酸激酶1(sFlt-1)、胎盘生长因子(PLGF)的关系.方法:选择济宁医学院附属医院2021年1月-2022年4月确诊的剖宫产或自然分娩的子痫前期孕妇80例作为子痫前期(PE)组,选择同期在我院分娩的正常孕妇80例作为对照组.依据临床检查将PE组孕妇分为轻度PE组(n=51例)和重度PE组(n=29例).采用实时定量逆转录聚合酶链反应法(RT-PCR)测定上述不同分组孕妇胎盘组织中P57kip2 mRNA表达,采用酶联免疫吸附试验测定分娩前孕妇血清sFlt-1、PLGF表达;采用Pearson相关性分析P57kip2 mRNA表达与sFlt-1 mRNA和PLGF mRNA的关系,使用受试者工作特征曲线(ROC)预测P57kip2基因表达、sFlt-1 mRNA和PLGF指导PE诊断和严重程度鉴别的效能.结果:PE组P57kip2 mRNA与sFlt-1均高于对照组,PLGF低于对照组(P＜0.05);重度PE组P57kip2 mRNA与sFlt均高于轻PE度组,PLGF低于轻度PE组,差异有统计学意义(P＜0.05);Pearson相关性分析结果示,PE患者P57kip2与sFlt-1 呈正相关(r=0.478,P＜0.05),P57kip2 与 PLGF 呈负相关(r=-0.351,P＜0.05);ROC 曲线结果示,P57kip2、sFlt-1和PLGF诊断PE及鉴别轻度与重度PE的效能均较好,其中P57kip2的cut-off值分别为1.07、1.47时诊断PE和鉴别轻度与重度PE的效能最高,其曲线下面积(AUC)分别为0.860、0.802,约登指数分别为0.725和0.587,敏感度和特异度分别为86.25％、86.25％和72.41％、86.27％.结论:P57kip2 mRNA水平与PE患者病情严重程度密切相关,其中P57kip2 mRNA与sFlt-1水平呈正相关,P57kip2mRNA与PLGF水平呈负相关,且三者中以P57kip2 mRNA诊断PE疾病发展效能最高,其能为临床预测PE的发生与进展提供指导.

目的 观察父源性印迹基因p57kip2和细胞周期负性调控因子p27kip1在不同类型水泡状胎块中的表达情况,探讨p57kip2和p27kip1在水泡状胎块中的表达及两者对于鉴别不同类型水泡状胎块的意义.方法 采用免疫组织化学染色方法,检测30例完全性水泡状胎块、86例部分性水泡状胎块及30例正常绒毛组织中p57kip2和p27kip1的表达情况,分析p57kip2和p27kip1在两种不同类型水泡状胎块中的表达及两者之间的差异和相关性.结果 p57kip2和p27kip1在完全性水泡状胎块组的表达均低于部分性水泡状胎块组和正常流产绒毛组,差异有统计学意义(P<0.05),p57kip2和p27kip1在完全性水泡状胎块中表达呈正相关(r=0.750,P<0.01),在部分性水泡状胎块中表达呈负相关(r= -1.000,P<0.01).结论 p57kip2和p27kip1在完全性水泡状胎块和部分性水泡状胎块中的表达差异对鉴别不同临床类型的水泡状胎块有一定指导价值,联合检测p57kip2和p27kip1可以对水泡状胎块的诊断和分型起到有效的辅助作用.

目的 基于短串联重复序列(short tandem repeat,STR)基因分型技术在葡萄胎与非葡萄胎妊娠鉴别诊断中的应用,侧重探讨其在非葡萄胎妊娠诊断中的应用价值及非葡萄胎妊娠的组织学特征.方法 收集北京妇产医院病理科2015年7月至2017年9月临床水肿性流产和/或葡萄胎可疑的流产组织样本656例.应用Simplex OUPTM FFPE DNA组织提取试剂盒提取核酸DNA.基因分型选用PowerPlex 16 HS试剂盒.结果 本研究中成功进行STR分析的有649例,包括葡萄胎妊娠215例和非葡萄胎妊娠434例.非葡萄胎妊娠中二倍体流产占大多数(375例,86.4％),各类三体共计53例(12.2％;包括2?、3?、4?、7?、8?、13?、16?、18?和21?三体),双雌单雄三倍体2例(0.5％),包括4例(0.9％)罕见的单亲同二倍体和单亲异二倍体.对组织形态学疑似葡萄胎的196例样本,经过STR分析得以精确诊断并分型.其中,59例葡萄胎低诊断为二倍体流产,28例二倍体流产过诊断为葡萄胎.将各种类型非葡萄胎妊娠的组织形态学特征与部分性葡萄胎对比分析,发现组织学特征基本无差异;此外,p57kip2蛋白表达在部分性葡萄胎组、三体组及二倍体水肿性流产组中差异无统计学意义(P=0.247).结论 STR分子分型技术解决了非葡萄胎妊娠与早期葡萄胎的鉴别难题,纠正了形态组织学的错误诊断,避免了非葡萄胎妊娠的过诊断问题,并通过分子分型为指导患者的个体化处置方案提供帮助.

目的:探讨雌激素受体(estrogen receptor,ER)拮抗剂[他莫昔芬(tamoxifen,TAM)和氟维司群(fulvestrant或ICI-182780)]对高分化人子宫内膜样癌Ishikawa细胞增殖的影响,以及可能的作用机制.方法:体外培养Ishikawa细胞,实验分为6组:TAM、ICI-182780、β-雌二醇(β-estradiol)单药组以及TAM、ICI-182780联合β-雌二醇组,以未用任何药物处理的Ishikawa细胞作为对照组.采用MTT法检测细胞的增殖情况,分别在光学显微镜和电子显微镜下观察细胞形态的变化,实时荧光定量PCR法和蛋白质印迹法检测细胞中p57kip2以及cyclin E mRNA和蛋白的表达情况.结果:与对照组相比,TAM组细胞的增殖能力稍有增强(P＞0.05),其余各组细胞的增殖能力均有减弱(P值均＜ 0.05);与β-雌二醇组相比,TAM组、β-雌二醇+TAM组细胞的增殖能力增强,而ICI-182780组、β-雌二醇+ICI-182780组细胞的增殖能力减弱(P值均＜0.05).与对照组相比,β-雌二醇+ICI-182780组细胞密度明显减少,其余各组细胞则无明显变化;各实验组细胞表面微绒毛均有减少,TAM组和β-雌二醇组中仅有个别细胞出现内质网轻度肿胀,ICI-182780组出现部分细胞内质网中度肿胀,β-雌二醇十TAM组和β-雌二醇+ICI-182780组中多数细胞内质网和线粒体明显肿胀,自噬现象增多.与对照组相比,TAM组中p57kip2 mRNA和蛋白的表达水平均有所下调,cyclin E mRNA和蛋白的表达水平则被上调,在其余各组中p57kipmRNA和蛋白的表达水平均被有所上调,cyclin E mRNA和蛋白的表达水平均被下调;与β-雌二醇组相比,在ICI-182780组和β-雌二醇+ICI-182780组中p57kip2 mRNA和蛋白的表达水平均有上调,cyclin E mRNA和蛋白的表达水平均为下调,在TAM组和β-雌二醇+TAM组中p57kip2 mRNA和蛋白的表达水平均为下调,cyclin E mRNA和蛋白的表达水平则为上调.结论:ICI-182780可抑制Ishikawa细胞的增殖,而TAM则微弱促进Ishikawa细胞增殖,ICI-182780和TAM对子宫内膜样癌的作用并不完全一致.这可能与ICI-182780能上调抑癌基因p57kip2表达,下调癌基因cyclin E表达;TAM则是微弱下调p57kip2表达,上调cyclin E表达有关.ICI-182780可能比TAM更适合子宫内膜样癌患者的内分泌个体化治疗.

目的 探讨miR-222表达水平变化对膀胱癌细胞增殖行为的调控作用及可能机制,阐明miR-222在膀胱癌中可能作用的靶向蛋白及其作用位点.方法 利用qRT-PCR法检测正常膀胱上皮细胞和膀胱癌细胞中的miR-222的表达水平;利用CCK8法和EdU染色法检测各组细胞的增殖能力;利用细胞周期试剂盒检测各组细胞周期的分布;利用Western blot法和qRT-PCR检测各组细胞内抑癌基因p27kip1和p57kip2的表达;利用TargetScan Human 7.1软件预测miR-222与p27kip1和p57kip2 mRNA 3 非编码区(UTR)的结合位点;利用双荧光素酶法验证miR-222与p27kip1和p57kip2的靶向结合位点.结果 miR-222在膀胱癌细胞中的表达水平显著高于正常膀胱上皮细胞;miR-222表达水平的上调会明显促进细胞的增殖并且抑制p27kip1和p57kip2的表达,下调则会抑制细胞的增殖,引起膀胱癌细胞的细胞周期GO/G1期滞留,并促进了p27kip1和p57kip2的表达;miR-222通过靶向结合目标蛋白p27kip1和p57kip2 mRNA的3'-UTR抑制其转录.结论 miR-222在膀胱癌中特异性高表达,通过与p27kip1和p57kip2 mRNA的3'-UTR特异性结合抑制其表达水平,并促进膀胱癌细胞周期由G1期向S期转变,从而促进了癌细胞的增殖.

目的 评估基因组拷贝数变异测序(CNV-seq)结合短串联重复序列(STR)多态性分析技术在检测孕早期(≤9周)流产物组织中潜在葡萄胎病例的应用价值.方法 收集行流产物组织CNV-seq结合STR多态性检测的孕早期病例,挑取部分新鲜绒毛组织进行CNV-seq结合STR多态性检测,其余组织常规固定后进行病理组织学检测.结果 共纳入782例孕早期病例,经CNV-seq结合STR多态性检测共检出66例(8.44％)潜在葡萄胎病例,其中57例(7.29％)为三倍体,9例(1.15％)为全基因组同源单亲二倍体.57例三倍体中有52例随访到病理形态学结果,其中19例提示为宫腔内绒毛,12例为部分绒毛间质水肿,12例为偶见绒毛、极少许绒毛和少许绒毛,9例未见绒毛.病理形态学提示未见绒毛和少许绒毛的3例三倍体病例的STR基因分型检测示染色体异常三倍体2例、部分性葡萄胎1例.9例全基因组同源单亲二倍体中,经病理形态学及p57Kip2蛋白免疫组织化学染色提示为完全性葡萄胎8例,余1例病理形态学提示少许绒毛,随后经STR基因分型检测证实该病例也为完全性葡萄胎.结论 CNV-seq结合STR检测孕早期流产物对发现潜在的葡萄胎病例有一定的价值,特别是完全性葡萄胎;相较于病理组织学检测,STR基因分型检测在孕早期葡萄胎标本中更易获得可靠的结果.

一、病例摘要患者女,27岁.因停经9个月余,于2019年9月21日就诊.超声检查显示:胎儿双顶径9.4 cm,头围32.6 cm,腹围35.8 cm,股骨长7.3 cm,肝脏明显增大,双肾增大,左肾5.4 cm×3.2 cm,右肾6.2 cm×3.7cm,双肾皮质回声欠均质,双肾盂轻度扩张,右肾为著(图1).上唇回声连续,胎儿舌体肥大、持续伸于口外,舌尖明显增厚(图2).下颌短小.羊水最大深度8.9 cm、指数28 cm.患者平素月经规律,周期5/28 d,末次月经2018年12月20日,预产期2019年9月27日,核对预产期准确.妊娠期顺利,未做过产前检查,无家族遗传病史及中毒外伤史,胎儿父母体健,非近亲结婚,孕1产0.入院后查无明显禁忌证,宫颈Bishop评分6分,遂行缩宫素引产.分娩后新生儿Apgar评分:1分钟4分、5分钟5分.新生儿大体检查:颜面部苍白,舌体明显大、充满口腔、持续伸于口外,耳垂有折痕,腹部形态饱满.脐带血检测IGF2双等位基因表达,P57KIP2无表达,产后胎儿存活1d后死亡,家属拒绝尸检.

目的 分析微小RNA-873(miR-873)、p57kip2、转移相关基因2(MTA2)在子宫内膜癌组织中的表达及其与患者病理特征的相关性.方法 选取2020年2月至2021年2月在保定市第二中心医院治疗的70例晚期子宫内膜癌患者作为研究组,取研究组患者的癌组织与癌旁组织;另外选取70例在保定市第二中心医院体检的健康女性作为对照组.采用实时荧光定量聚合酶链反应法检测两组血清中及研究组患者癌组织、癌旁组织中miR-873、p57kip2、MTA2的表达,分析miR-873、p57kip2、MTA2在晚期子宫内膜癌发展过程中的表达变化及三者与病理特征的相关性,绘制受试者工作特征(ROC)曲线分析三者对晚期子宫内膜癌病情的预测价值.结果 与对照组相比,研究组血清中miR-873表达降低,p57kip2、MTA2表达升高(P<0.05);与癌旁组织相比,癌组织中miR-873表达降低,p57kip2、MTA2表达升高(P<0.05).与Ⅲ期、高分化、无淋巴结转移、<1/2肌层浸润的子宫内膜癌患者相比,Ⅳ期、中低分化、有淋巴结转移、≥1/2肌层浸润的子宫内膜癌患者miR-873表达显著降低,p57kip2、MTA2表达显著升高(P<0.05).Pearson相关性分析显示,miR-873与p57kip2呈负相关(r=-0.491,P=0.001),miR-873与MTA2呈负相关(r=-0.477,P=0.001),p57kip2与MTA2呈正相关(r=0.453,P=0.001).ROC曲线显示,与miR-873、p57kip2、MTA2单项预测相比,三项联合对晚期子宫内膜癌患者病情的预测价值更高(P<0.05).结论 晚期子宫内膜癌患者血清及组织中miR-873表达降低,p57kip2、MTA2表达升高,随着疾病的发展,miR-873表达逐渐降低,p57kip2、MTA2表达逐渐升高,且三者联合可用于对晚期子宫内膜癌患者病情的预测.