目的 旨在探究微RNA(miR)-181a-5p对肾病综合征大鼠细胞凋亡的调控机制.方法 该研究起止年限为2021年1月至2022年12月.使用阿霉素(ADR)构建肾病综合征大鼠模型及体外肾病综合征损伤模型,转染miR-181a-5p inhibitor/NC至体外细胞模型.使用生化分析仪分析血清肌酐、血尿素氮、血清白蛋白和尿蛋白,实时荧光定量逆转录聚合酶链反应(qRT-PCR)检测肾组织及大鼠肾足细胞miR-181a-5p表达水平,通过TargetScan(http://www.targetscan.org/vert_72/)预测miR-181a-5p的下游靶基因,双萤光素酶报告实验来验证miR-181a-5p与沉默信息调节因子1(Sirt1)靶向结合关系.使用CCK-8试剂盒检测细胞增殖,流式细胞术检测细胞凋亡,通过蛋白质印迹法检测Sirt1及过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARγ)蛋白水平.结果 肾病综合征大鼠miR-181a-5p相对表达水平为3.50±0.30,敲低miR-181a-5p,使得Sirt1蛋白表达水平从0.36±0.02上调至0.87±0.06,PPARγ蛋白表达水平从0.26±0.02上调至0.78±0.05.结论 miR-181a-5p通过抑制Sirt1/PPARγ信号通路活性促进肾足细胞凋亡.

机体特异性免疫应答是一个需要一系列免疫细胞和免疫分子共同参与的异常复杂的过程，这些免疫细胞及分子之间相互调节又相互制约。目前大多数肾脏疾病发病机制尚不明确。B7(CD80)位于调节CD4 +和CD8 +T细胞的抗原提呈细胞上，通过与细胞上的糖蛋白CD28结合发挥信号传递作用、增强或放大免疫反应的功能，或者与细胞毒性T细胞蛋白-4(cytotoxic T lymphocyte-associated antigen4 CTLA-4)结合后抑制免疫应答。通常肾组织不表达或低表达B7，然而某些肾小球疾病的发生与B7的增加有关，其降低了足细胞附着肾小球基底膜的能力，增加炎症反应及肾脏纤维化。当B7与CTLA-4相结合时，免疫反应就会被减弱。因此通过阻断CD28或增强CTLA-4信号可能阻止疾病的发生。该文就共刺激分子B7/CD28在足细胞损伤、原发性肾小球肾炎、紫癜性肾炎、狼疮性肾炎等肾脏疾病的发病机制中的作用，以及B7阻滞剂在部分肾脏疾病靶向治疗的研究进展进行综述。

1,25(OH) 2维生素D 3是体内维生素D的最有效状态，与维生素D受体结合后发挥生物学活性作用，而维生素D缺乏在慢性肾脏病患者中普遍存在。研究发现，在慢性肾脏病患者中，维生素D除了通过调节钙、磷代谢的经典作用外，还可在阻断肾素-血管紧张素系统、抑制炎症、减轻足细胞损害、延缓肾纤维化等方面发挥肾脏保护作用，延缓慢性肾脏病进展。该文就维生素D在慢性肾脏病中的保护机制作进行综述。

目的:探讨IgG排泄分数(FE IgG)对特发性膜性肾病(IMN)患者药物反应性及病情缓解的预测意义。方法:回顾性分析2014年4月至2017年8月本院经临床及病理资料确诊并定期随访的IMN患者82例，利用ROC曲线确定预测临床缓解时间的FE IgG界值，对比基线不同FE IgG水平临床缓解时间的差别，分析不同FE IgG水平对免疫抑制治疗(他克莫司或环磷酰胺)及支持治疗的药物反应性的影响。结果:绘制eGFR、24 h尿蛋白定量及FE IgG预测临床缓解时间的ROC曲线，曲线下面积(AUC)分别为0.509、0.701、0.948；确定FE IgG界值为0.029，所有患者分为高水平组(FE IgG>0.029)、低水平组(FE IgG<0.029)；接受治疗前，两组患者性别、年龄、平均动脉压及eGFR差异均无统计学意义( P>0.05)，两组间FE IgG、24 h尿蛋白定量、血清白蛋白差异有统计学意义( P<0.05)；两组临床缓解时间分别为(18.75±6.81)个月、(8.46±3.74)个月，差异有统计学意义( P<0.001)。FE IgG低水平免疫抑制治疗组与FE IgG低水平支持治疗组缓解时间比较差异无统计学意义( P＝0.265)，二者均低于FE IgG高水平免疫抑制治疗组( P<0.001)；FE IgG高水平组中他克莫司组较环磷酰胺组缓解时间缩短，但差异无统计学意义( P＝0.131)；FE IgG高、低水平组间他克莫司治疗缓解时间比较差异有统计学意义( t＝6.734， P<0.001)；电镜下，FE IgG高水平组足突广泛融合及足细胞弥漫空泡变性比例均较低水平组高，差异有统计学意义( P<0.001)。 结论:FE IgG可作为预测IMN患者药物反应性及病情缓解的临床指标，对早期识别高危患者及制定临床决策至关重要，高FE IgG患者早期开始免疫抑制治疗可能获益更大。

目的:构建阿霉素(ADR)诱导的局灶节段性肾小球硬化(FSGS)小鼠模型，探究足细胞损伤的分子机制。方法:取24只8周龄雄性BALB/c小鼠分为生理盐水组(对照组，n＝6)和FSGS模型组(ADR组，n＝18)，分别按照10 mg/kg的剂量尾静脉注射生理盐水和ADR，采集注射ADR后的7、14、28 d小鼠以及注射生理盐水后的28 d小鼠的血液、尿液和肾组织，检测血液和尿液中血肌酐﹑尿肌酐﹑尿蛋白含量，将肾组织进行HE和MASSON染色，观察其形态变化，然后采用实时定量PCR和Western blot法检测肾皮质组织中Synaptopodin和RhoA的表达。结果:与对照组比较，注射ADR 7 d后，ADR组小鼠的尿蛋白与尿肌酐比值升高，血肌酐水平升高，差异均有统计学意义(均 P<0.05)；注射ADR 7 d后，与对照组比较，ADR组小鼠的肾皮质组织中Synaptopodin 、RhoA的mRNA和蛋白质表达量均降低，差异均有统计学意义(均 P<0.05)；注射ADR 28 d后，ADR组小鼠出现肾小球硬化程度恶化、肾小管损伤和间质病变纤维化，表现为严重的肾脏损伤。 结论:ADR可成功诱导小鼠FSGS，Synaptopodin和RhoA的表达下调可能导致足细胞损伤，进而促进小鼠形成FSGS。

目的:探究CLEC14A在阿霉素诱导局灶节段性肾小球硬化(FSGS)小鼠模型中对足细胞损伤的保护作用，并通过半胱氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)、B淋巴细胞癌-2相关蛋白(Bax)和B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)信号通路探讨其机制。方法:将30只C57BL/6小鼠随机分成Sham组(n＝10)、Model组(n＝10)和CLEC14A siRNA组(siRNA组，n＝10)。将小鼠足细胞MPC5分为对照组、FSGS组、FSGS-siCLEC14A组。采用定量聚合酶链反应(qPCR)检测小鼠肾脏中CLEC14A mRNA及血管内皮生长因子(VEGF)mRNA的水平。采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测小鼠肾脏组织中Caspase-3、Bax和Bcl-1水平。结果:FSGS组及FSGS-siCLEC14A组各时间点的细胞增殖能力低于对照组，差异均有统计学意义(均 P<0.05)。FSGS-siCLEC14A组的48 h及72 h细胞增殖能力均低于FSGS组，差异均有统计学意义(均 P<0.05)。与对照组比较，FSGS组和FSGS-siCLEC14A组的细胞凋亡率、Caspase-3、Bax水平上升，而Bcl-2水平下降，差异均有统计学意义(均 P<0.05)；与FSGS组比较，FSGS-siCLEC14A组的Caspase-3、Bax水平增加，而Bcl-2水平下降，差异均有统计学意义(均 P<0.05)。与对照组比较，FSGS组和FSGS-siCLEC14A组的24 h尿蛋白定量(24 h UTP)、血肌酐(Scr)及血尿素氮(BUN)水平增加，差异均有统计学意义(均 P<0.05)；与FSGS组比较，FSGS-siCLEC14A组的24 h UTP、Scr及BUN水平增加，差异均有统计学意义(均 P<0.05)。与Sham组比较，Model组和siRNA组小鼠的CLEC14A mRNA水平下降，VEGF mRNA上升，差异均有统计学意义(均 P<0.05)；与Model组比较，siRNA组小鼠的CLEC14A mRNA水平下降，VEGF mRNA上升，差异均有统计学意义(均 P<0.05)。与Sham组比较，Model组和siRNA组小鼠肾脏中的Caspase-3、Bax水平上升，而Bcl-2水平下降，差异均有统计学意义(均 P<0.05)；与Model组比较，siRNA组小鼠肾脏中的Caspase-3、Bax水平升高，而Bcl-2水平下降，差异均有统计学意义(均 P<0.05)。 结论:CLEC14A可通过抑制Caspase-3、Bax、Bcl-2信号通路起到保护FSGS小鼠足细胞的作用。

Background::Atrial natriuretic peptide (ANP) and its natriuretic peptide receptors A (NPR-A) and C (NPR-C) are involved in the regulation of physiological and pathophysiological process of blood pressure. The present study aimed to determine the role of NPR-C in the development of salt-sensitive hypertension.Methods::The Dahl salt-sensitive (DS) and salt-resistant (DR) rats were used in this study. Animals were matched according to their age and weight, and then placed on either a high-salt (HS, 8%) or a normal-salt (NS, 0.4%) diet for 6 weeks randomly using random number table. The systolic blood pressure (SBP), plasmatic sodium concentration (PL Na), urinary sodium excretion (UV Na), and serum creatinine concentration (Scr) were measured. The concentration of ANP in blood and tissues (heart and kidney) was detected by enzyme-linked immunosorbent assay. The expression of ANP, NPR-A, and NPR-C in kidney was evaluated with western blot analysis. Regarding renal redox state, the concentration changes in malondialdehyde (MDA), lipofuscin, nicotinamide adenine dinucleotide phosphate (NADPH) oxidase (Nox), and nitric oxide synthase (NOS) in kidney were detected by a spectrophotometric method. The kidney damage was evaluated using pathological techniques and the succinodehydrogenase (SDHase) examination. Furthermore, after an intra-peritoneal injection of C-atrial natriuretic peptide (ANP) 4-23 (C-ANP 4-23), an NPR-C receptor agonist, the SBP, biochemical values in blood and urine, and renal redox state were evaluated. The paired Student’s t test and analysis of variance followed by the Bonferroni test were performed for statistical analyses of the comparisons between two groups and multiple groups, respectively. Results::The baseline SBP in all groups was within the normal range. At the end of the 6-week experiment, HS diet significantly increased the SBP in DS rats from 116.63 ± 2.90 mmHg to 162.25 ± 2.15 mmHg ( t = -10.213, P < 0.001). The changes of SBP were not significant in DS rats on an NS diet and DR rats on an NS diet or on an HS diet (all P > 0.05). The significant increase of PL Na, UV Na, and Scr related to an HS diet was found in both DS and DR rats (all P < 0.05). However, significant changes in the concentration ( t= -21.915, P < 0.001) and expression of renal ANP ( t= -3.566, P = 0.016) and the expression of renal NPR-C ( t = 5.864, P = 0.002) were only observed in DS hypertensive rats. The significantly higher desmin immunochemical staining score ( t = -5.715, P = 0.005) and mitochondrial injury score ( t = -6.325, P = 0.003) accompanied by the lower SDHase concentration ( t= 3.972, P = 0.017) revealed mitochondrial pathologic abnormalities in podocytes in DS rats with an HS diet. The distinct increases of MDA ( t= -4.685, P= 0.009), lipofuscin ( t= -8.195, P= 0.001), and Nox ( t= -12.733, P < 0.001) but not NOS ( t = -0.328, P = 0.764) in kidneys were also found in DS hypertensive rats. C-ANP 4-23 treatment significantly decreased the SBP induced by HS in DS rats ( P < 0.05), which was still higher than NS groups with the vehicle or C-ANP 4-23 treatment ( P < 0.05). Moreover, the HS-induced increase of MDA, lipofuscin, Nox concentrations, and Nox4 expression in DS rats was significantly attenuated by C-ANP 4-23 treatment as compared with those with HS diet and vehicle injection (all P < 0.05). Conclusions::The results indicated that the renal NPR-C might be involved in the salt-sensitive hypertension through the damage of mitochondria in podocytes and the reduction of the anti-oxidative function. Hence, C-ANP 4-23 might serve as a therapeutic agent in treating salt-sensitive hypertension.

目的:研究嘌呤霉素(PAN)致肾小球足细胞损伤中白细胞介素27(IL-27)mRNA和蛋白表达的变化，探讨他克莫司(FK506)在肾小球足细胞损伤中的保护作用机制。方法:体外培养小鼠肾小球足细胞，分为3组：对照组、PAN组和FK506组。3组足细胞经处理8 h、24 h、48 h后在显微镜下观察细胞形态，应用酶联免疫吸附试验(ELISA)观察IL-27水平的变化，并收集培养的足细胞行实时荧光定量PCR(qPCR)检测IL-27 mRNA表达的变化，采用Western blot检测IL-27蛋白表达的变化。结果:1．足细胞形态：在各个时间点(8 h、24 h、48 h)，PAN组细胞体积较对照组缩小，形态改变；FK506组较PAN组体积偏大并饱满，趋于正常。2.IL-27的水平：在各个时间点(8 h、24 h、48 h)，PAN组[(110.00±3.52) ng/L、(302.00±6.23) ng/L、(397.00±8.92) ng/L]均高于对照组[(90.00±5.12) ng/L、(85.00±4.21) ng/L、(88.00±4.20) ng/L]，差异均有统计学意义(均 P<0.05)；FK506组[(96.00±4.17) ng/L、(107.00±4.86) ng/L、(112.00±6.24) ng/L]均低于PAN组，差异均有统计学意义(均 P<0.05)。3.IL-27 mRNA表达量：在各个时间点(8 h、24 h、48 h)，PAN组(1.25±0.11、1.57±0.08、1.73±0.13)均高于对照组(1.02±0.02、1.10±0.04、0.96±0.02)，差异均有统计学意义(均 P<0.05)；FK506组8 h时(1.10±0.06)无明显升高，24 h和48 h时(1.21±0.04、1.30±0.09)表达量稍有升高；与PAN组比较，FK506组均低于PAN组，差异均有统计学意义(均 P<0.05)。4.IL-27蛋白的表达量：在各个时间点(8 h、24 h、48 h)，PAN组(0.94±0.04、1.56±0.07、1.63±0.04)均高于对照组(0.83±0.04、0.85±0.03、0.83±0.05)，差异均有统计学意义(均 P<0.05)；FK506组(0.84±0.05、0.89±0.04、0.91±0.06)与PAN组比较，8 h无明显差异，24 h后IL-27蛋白表达下降，差异有统计学意义( P<0.05)，48 h后IL-27蛋白表达下降更为明显，差异有统计学意义( P<0.05)。 结论:IL-27参与肾脏疾病的发病，FK506通过降低IL-27的表达，抑制肾小球足细胞的损伤，为临床应用FK506治疗肾脏病提供一定依据。

目的:探讨重复肾活检诊断为原发性局灶节段性肾小球硬化症（focal segmental glomerulosclerosis，FSGS）患儿的临床病理特点。方法:回顾性收集2000年1月1日至2020年12月31日在东部战区总医院经重复肾活检诊断为原发性FSGS患儿的临床病理资料，总结和分析患儿临床表现特征、两次肾活检病理类型及治疗反应。结果:共34例原发性FSGS患儿入选本研究，男性22例，女性12例，首次肾活检中位年龄14岁（1~18岁），重复肾活检中位间隔时间6个月（1~151个月）。31例表现为肾病综合征，其中22例伴有镜下血尿，4例血肌酐升高；余3例中，2例表现为血尿、蛋白尿，1例表现为蛋白尿。首次肾活检时有16例患儿诊断为微小病变性肾小球病，14例诊断为系膜增生性肾小球肾炎，2例诊断为IgA肾病，2例诊断为IgM肾病。34例患儿均表现为对激素和免疫抑制剂治疗反应差。首次肾活检部分患儿肾脏病理表现为球囊粘连（2/34）、袢足细胞附着减少（2/34）、外周袢向尿极延伸（2/34）、肾小管反流（4/34）、毛细血管腔内血栓形成（2/34）及IgM沉积（12/34）。结论:FSGS发病初期临床病理表现不典型，易漏诊，对激素和免疫抑制剂治疗反应差。肾脏病理表现为球囊粘连、袢足细胞附着减少、外周袢向尿极延伸、肾小管反流、毛细血管腔内血栓形成及IgM沉积的患儿需加强随访，必要时行重复肾活检，明确FSGS诊断。

目的:分析赖氨酸特异性去甲基化酶6B（KDM6B）在乙型肝炎相关性肾炎（HBV-GN）患者肾组织及乙型肝炎病毒X基因（HBx）转染的人足细胞中的表达，及其在HBx介导的足细胞-巨噬细胞转分化（PMT）中的作用。方法:选取2013至2018年在上海交通大学附属第一人民医院经肾穿刺活检病理诊断为HBV-GN的48例患者肾活检标本，以30例原发性肾小球肾炎（PGN）肾活检标本及15例肾肿瘤患者癌旁正常肾组织作为对照。利用免疫荧光及免疫组化法观察HBV-GN患者肾组织KDM6B及巨噬细胞标志物F4/80的表达。分析肾组织KDM6B表达水平与HBV-GN患者临床特征的关系。Western印迹法检测足细胞中KDM6B、F4/80、主要组织相容性复合体Ⅱ（MHC-Ⅱ）以及共刺激分子CD40的表达；ELISA法测定细胞上清中γ干扰素（IFN-γ）、白细胞介素（IL）-6的含量；同时利用KDM6B小干扰RNA（siRNA）沉默HBx质粒转染的人足细胞中KDM6B基因表达后，Western印迹法检测细胞中KDM6B、F4/80及组蛋白H3第27位赖氨酸三甲基化（H3K27me3）的表达变化。结果:与正常对照组相比，HBV-GN患者肾组织KDM6B表达增加（0.022±0.004比0.006±0.002， P=0.006）。HBV-GN不同病理类型组间KDM6B阳性率差异无统计学意义（ P=0.139）。此外，在HBV-GN患者足细胞中可观察到KDM6B和F4/80的共表达。估算肾小球滤过率（eGFR）<60 ml·min -1·（1.73 m 2） -1或尿蛋白≥3.5 g/d的患者肾组织KDM6B表达分别高于eGFR≥60 ml·min -1·（1.73 m 2） -1或尿蛋白<3.5 g/d的患者（均 P<0.05）。HBx转染人足细胞后KDM6B、F4/80、MHC-Ⅱ以及CD40表达均上调（均 P<0.05），上清IFN-γ和IL-6含量均增加（均 P<0.05）；将KDM6B基因沉默后，HBx所诱导的足细胞F4/80表达下调，H3K27me3表达则上调（均 P<0.05）。 结论:HBx可通过诱导足细胞KDM6B表达启动PMT，可能参与HBV-GN局部组织免疫微环境紊乱的发生。