目的 旨在探究微RNA(miR)-181a-5p对肾病综合征大鼠细胞凋亡的调控机制.方法 该研究起止年限为2021年1月至2022年12月.使用阿霉素(ADR)构建肾病综合征大鼠模型及体外肾病综合征损伤模型,转染miR-181a-5p inhibitor/NC至体外细胞模型.使用生化分析仪分析血清肌酐、血尿素氮、血清白蛋白和尿蛋白,实时荧光定量逆转录聚合酶链反应(qRT-PCR)检测肾组织及大鼠肾足细胞miR-181a-5p表达水平,通过TargetScan(http://www.targetscan.org/vert_72/)预测miR-181a-5p的下游靶基因,双萤光素酶报告实验来验证miR-181a-5p与沉默信息调节因子1(Sirt1)靶向结合关系.使用CCK-8试剂盒检测细胞增殖,流式细胞术检测细胞凋亡,通过蛋白质印迹法检测Sirt1及过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARγ)蛋白水平.结果 肾病综合征大鼠miR-181a-5p相对表达水平为3.50±0.30,敲低miR-181a-5p,使得Sirt1蛋白表达水平从0.36±0.02上调至0.87±0.06,PPARγ蛋白表达水平从0.26±0.02上调至0.78±0.05.结论 miR-181a-5p通过抑制Sirt1/PPARγ信号通路活性促进肾足细胞凋亡.

目的:探讨巨噬细胞Bruton酪氨酸激酶（Btk）基因特异性敲除对糖尿病小鼠肾脏损害的作用及机制。方法:选用巨噬细胞Btk基因特异性敲除（Btk -/-）小鼠和C57BL/6N小鼠链脲菌素（STZ，50 mg/kg）造模成功后随机分为正常组、糖尿病组、Btk -/-组和Btk -/-糖尿病组。12周后测定小鼠一般指标，观察肾组织病理学改变，免疫荧光检测肾组织巨噬细胞标志物CD68表达，免疫组化检测足细胞标志物WT1和Nephrin的表达，Western印迹检测细胞外基质纤维连接蛋白（FN）、IV型胶原（IV-Col）及转化生长因子β1（TGF-β1），巨噬细胞激活标志物诱导型一氧化氮合酶（iNOS）、磷酸化（p）-Btk，炎性因子白细胞介素1β（IL-1β）、肿瘤坏死因子α（TNF-α）和丝裂原活化蛋白激酶（MAPK）信号通路p-p38MAPK、p-JNK、p-ERK以及核因κB（NF-κB）通路p-p65、p-IκB蛋白水平变化；实时荧光定量PCR检测炎性因子IL-1β、TNF-α、单核细胞趋化蛋白1（MCP-1）mRNA表达。 结果:与糖尿病组相比，Btk -/-糖尿病组尿白蛋白明显减少，肾组织损伤明显减轻，肾脏巨噬细胞CD68表达明显减少，足细胞标志物WT1及Nephrin表达明显增加，细胞外基质FN、IV-Col及TGF-β1表达明显减少，炎性因子IL-1β、TNF-α及MCP-1表达明显降低，p-JNK、p-ERK、p-p38MAPK及p-p65、p-IκB表达明显下调（均 P<0.05）。 结论:巨噬细胞Btk特异性敲除可能通过MAPK、NF-κB通路降低炎性因子的表达从而对糖尿病小鼠肾脏起到保护作用。

机体特异性免疫应答是一个需要一系列免疫细胞和免疫分子共同参与的异常复杂的过程，这些免疫细胞及分子之间相互调节又相互制约。目前大多数肾脏疾病发病机制尚不明确。B7(CD80)位于调节CD4 +和CD8 +T细胞的抗原提呈细胞上，通过与细胞上的糖蛋白CD28结合发挥信号传递作用、增强或放大免疫反应的功能，或者与细胞毒性T细胞蛋白-4(cytotoxic T lymphocyte-associated antigen4 CTLA-4)结合后抑制免疫应答。通常肾组织不表达或低表达B7，然而某些肾小球疾病的发生与B7的增加有关，其降低了足细胞附着肾小球基底膜的能力，增加炎症反应及肾脏纤维化。当B7与CTLA-4相结合时，免疫反应就会被减弱。因此通过阻断CD28或增强CTLA-4信号可能阻止疾病的发生。该文就共刺激分子B7/CD28在足细胞损伤、原发性肾小球肾炎、紫癜性肾炎、狼疮性肾炎等肾脏疾病的发病机制中的作用，以及B7阻滞剂在部分肾脏疾病靶向治疗的研究进展进行综述。

目的:构建阿霉素(ADR)诱导的局灶节段性肾小球硬化(FSGS)小鼠模型，探究足细胞损伤的分子机制。方法:取24只8周龄雄性BALB/c小鼠分为生理盐水组(对照组，n＝6)和FSGS模型组(ADR组，n＝18)，分别按照10 mg/kg的剂量尾静脉注射生理盐水和ADR，采集注射ADR后的7、14、28 d小鼠以及注射生理盐水后的28 d小鼠的血液、尿液和肾组织，检测血液和尿液中血肌酐﹑尿肌酐﹑尿蛋白含量，将肾组织进行HE和MASSON染色，观察其形态变化，然后采用实时定量PCR和Western blot法检测肾皮质组织中Synaptopodin和RhoA的表达。结果:与对照组比较，注射ADR 7 d后，ADR组小鼠的尿蛋白与尿肌酐比值升高，血肌酐水平升高，差异均有统计学意义(均 P<0.05)；注射ADR 7 d后，与对照组比较，ADR组小鼠的肾皮质组织中Synaptopodin 、RhoA的mRNA和蛋白质表达量均降低，差异均有统计学意义(均 P<0.05)；注射ADR 28 d后，ADR组小鼠出现肾小球硬化程度恶化、肾小管损伤和间质病变纤维化，表现为严重的肾脏损伤。 结论:ADR可成功诱导小鼠FSGS，Synaptopodin和RhoA的表达下调可能导致足细胞损伤，进而促进小鼠形成FSGS。

目的:探究CLEC14A在阿霉素诱导局灶节段性肾小球硬化(FSGS)小鼠模型中对足细胞损伤的保护作用，并通过半胱氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)、B淋巴细胞癌-2相关蛋白(Bax)和B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)信号通路探讨其机制。方法:将30只C57BL/6小鼠随机分成Sham组(n＝10)、Model组(n＝10)和CLEC14A siRNA组(siRNA组，n＝10)。将小鼠足细胞MPC5分为对照组、FSGS组、FSGS-siCLEC14A组。采用定量聚合酶链反应(qPCR)检测小鼠肾脏中CLEC14A mRNA及血管内皮生长因子(VEGF)mRNA的水平。采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测小鼠肾脏组织中Caspase-3、Bax和Bcl-1水平。结果:FSGS组及FSGS-siCLEC14A组各时间点的细胞增殖能力低于对照组，差异均有统计学意义(均 P<0.05)。FSGS-siCLEC14A组的48 h及72 h细胞增殖能力均低于FSGS组，差异均有统计学意义(均 P<0.05)。与对照组比较，FSGS组和FSGS-siCLEC14A组的细胞凋亡率、Caspase-3、Bax水平上升，而Bcl-2水平下降，差异均有统计学意义(均 P<0.05)；与FSGS组比较，FSGS-siCLEC14A组的Caspase-3、Bax水平增加，而Bcl-2水平下降，差异均有统计学意义(均 P<0.05)。与对照组比较，FSGS组和FSGS-siCLEC14A组的24 h尿蛋白定量(24 h UTP)、血肌酐(Scr)及血尿素氮(BUN)水平增加，差异均有统计学意义(均 P<0.05)；与FSGS组比较，FSGS-siCLEC14A组的24 h UTP、Scr及BUN水平增加，差异均有统计学意义(均 P<0.05)。与Sham组比较，Model组和siRNA组小鼠的CLEC14A mRNA水平下降，VEGF mRNA上升，差异均有统计学意义(均 P<0.05)；与Model组比较，siRNA组小鼠的CLEC14A mRNA水平下降，VEGF mRNA上升，差异均有统计学意义(均 P<0.05)。与Sham组比较，Model组和siRNA组小鼠肾脏中的Caspase-3、Bax水平上升，而Bcl-2水平下降，差异均有统计学意义(均 P<0.05)；与Model组比较，siRNA组小鼠肾脏中的Caspase-3、Bax水平升高，而Bcl-2水平下降，差异均有统计学意义(均 P<0.05)。 结论:CLEC14A可通过抑制Caspase-3、Bax、Bcl-2信号通路起到保护FSGS小鼠足细胞的作用。

Background::Atrial natriuretic peptide (ANP) and its natriuretic peptide receptors A (NPR-A) and C (NPR-C) are involved in the regulation of physiological and pathophysiological process of blood pressure. The present study aimed to determine the role of NPR-C in the development of salt-sensitive hypertension.Methods::The Dahl salt-sensitive (DS) and salt-resistant (DR) rats were used in this study. Animals were matched according to their age and weight, and then placed on either a high-salt (HS, 8%) or a normal-salt (NS, 0.4%) diet for 6 weeks randomly using random number table. The systolic blood pressure (SBP), plasmatic sodium concentration (PL Na), urinary sodium excretion (UV Na), and serum creatinine concentration (Scr) were measured. The concentration of ANP in blood and tissues (heart and kidney) was detected by enzyme-linked immunosorbent assay. The expression of ANP, NPR-A, and NPR-C in kidney was evaluated with western blot analysis. Regarding renal redox state, the concentration changes in malondialdehyde (MDA), lipofuscin, nicotinamide adenine dinucleotide phosphate (NADPH) oxidase (Nox), and nitric oxide synthase (NOS) in kidney were detected by a spectrophotometric method. The kidney damage was evaluated using pathological techniques and the succinodehydrogenase (SDHase) examination. Furthermore, after an intra-peritoneal injection of C-atrial natriuretic peptide (ANP) 4-23 (C-ANP 4-23), an NPR-C receptor agonist, the SBP, biochemical values in blood and urine, and renal redox state were evaluated. The paired Student’s t test and analysis of variance followed by the Bonferroni test were performed for statistical analyses of the comparisons between two groups and multiple groups, respectively. Results::The baseline SBP in all groups was within the normal range. At the end of the 6-week experiment, HS diet significantly increased the SBP in DS rats from 116.63 ± 2.90 mmHg to 162.25 ± 2.15 mmHg ( t = -10.213, P < 0.001). The changes of SBP were not significant in DS rats on an NS diet and DR rats on an NS diet or on an HS diet (all P > 0.05). The significant increase of PL Na, UV Na, and Scr related to an HS diet was found in both DS and DR rats (all P < 0.05). However, significant changes in the concentration ( t= -21.915, P < 0.001) and expression of renal ANP ( t= -3.566, P = 0.016) and the expression of renal NPR-C ( t = 5.864, P = 0.002) were only observed in DS hypertensive rats. The significantly higher desmin immunochemical staining score ( t = -5.715, P = 0.005) and mitochondrial injury score ( t = -6.325, P = 0.003) accompanied by the lower SDHase concentration ( t= 3.972, P = 0.017) revealed mitochondrial pathologic abnormalities in podocytes in DS rats with an HS diet. The distinct increases of MDA ( t= -4.685, P= 0.009), lipofuscin ( t= -8.195, P= 0.001), and Nox ( t= -12.733, P < 0.001) but not NOS ( t = -0.328, P = 0.764) in kidneys were also found in DS hypertensive rats. C-ANP 4-23 treatment significantly decreased the SBP induced by HS in DS rats ( P < 0.05), which was still higher than NS groups with the vehicle or C-ANP 4-23 treatment ( P < 0.05). Moreover, the HS-induced increase of MDA, lipofuscin, Nox concentrations, and Nox4 expression in DS rats was significantly attenuated by C-ANP 4-23 treatment as compared with those with HS diet and vehicle injection (all P < 0.05). Conclusions::The results indicated that the renal NPR-C might be involved in the salt-sensitive hypertension through the damage of mitochondria in podocytes and the reduction of the anti-oxidative function. Hence, C-ANP 4-23 might serve as a therapeutic agent in treating salt-sensitive hypertension.

局灶节段性肾小球硬化(FSGS)以局灶节段分布的肾小球硬化及足细胞的足突融合为特征，是儿童终末期肾脏病的主要原因。其发病机制尚未完全阐明，但近年来随着分子遗传学的发展，已在FSGS患者中定位超过30个致病基因，为足细胞结构和功能的破坏在其发病机制中提供了证据。现将FSGS的常见致病基因研究进展进行综述。

目的:建立及鉴定诱导多能干细胞分化肾脏类器官的高通量培养平台。方法:选择人尿源诱导多能干细胞，以适合的细胞密度接种铺板，第1～6天在CHIR99021/成纤维细胞生长因子9/肝素等小分子化合物诱导下分化；在第7天将适合密度的细胞消化后重悬，加入到96孔V型细胞培养板进行3D悬浮培养24 h，待细胞形成球体之后，继续加入成纤维细胞生长因子9/肝素诱导分化。第24天诱导分化成熟，与已报道的分化方案（Transwell方案）所获得的肾脏类器官进行免疫荧光和透射电镜比较。结果:两种方案均可成功分化出肾脏类器官。免疫荧光结果显示肾脏主要细胞标志物LTL、GATA-3、Synaptopodin均有表达，形成成熟的肾脏类器官。透射电镜结果显示肾脏类器官形成许多相互交错穿插、分布均匀及排列整齐的足突，符合肾脏足细胞特有细胞结构的特征。在1.0×10 7相同中间中胚层细胞数下，Transwell方案获得约7个肾脏类器官，而高通量培养方案获得约1 000个肾脏类器官。 结论:肾脏类器官高通量培养平台成功建立，可获得大量的成熟且结构和功能完善的肾脏类器官，极大地提高了肾脏类器官的分化效率。

目的:分析赖氨酸特异性去甲基化酶6B（KDM6B）在乙型肝炎相关性肾炎（HBV-GN）患者肾组织及乙型肝炎病毒X基因（HBx）转染的人足细胞中的表达，及其在HBx介导的足细胞-巨噬细胞转分化（PMT）中的作用。方法:选取2013至2018年在上海交通大学附属第一人民医院经肾穿刺活检病理诊断为HBV-GN的48例患者肾活检标本，以30例原发性肾小球肾炎（PGN）肾活检标本及15例肾肿瘤患者癌旁正常肾组织作为对照。利用免疫荧光及免疫组化法观察HBV-GN患者肾组织KDM6B及巨噬细胞标志物F4/80的表达。分析肾组织KDM6B表达水平与HBV-GN患者临床特征的关系。Western印迹法检测足细胞中KDM6B、F4/80、主要组织相容性复合体Ⅱ（MHC-Ⅱ）以及共刺激分子CD40的表达；ELISA法测定细胞上清中γ干扰素（IFN-γ）、白细胞介素（IL）-6的含量；同时利用KDM6B小干扰RNA（siRNA）沉默HBx质粒转染的人足细胞中KDM6B基因表达后，Western印迹法检测细胞中KDM6B、F4/80及组蛋白H3第27位赖氨酸三甲基化（H3K27me3）的表达变化。结果:与正常对照组相比，HBV-GN患者肾组织KDM6B表达增加（0.022±0.004比0.006±0.002， P=0.006）。HBV-GN不同病理类型组间KDM6B阳性率差异无统计学意义（ P=0.139）。此外，在HBV-GN患者足细胞中可观察到KDM6B和F4/80的共表达。估算肾小球滤过率（eGFR）<60 ml·min -1·（1.73 m 2） -1或尿蛋白≥3.5 g/d的患者肾组织KDM6B表达分别高于eGFR≥60 ml·min -1·（1.73 m 2） -1或尿蛋白<3.5 g/d的患者（均 P<0.05）。HBx转染人足细胞后KDM6B、F4/80、MHC-Ⅱ以及CD40表达均上调（均 P<0.05），上清IFN-γ和IL-6含量均增加（均 P<0.05）；将KDM6B基因沉默后，HBx所诱导的足细胞F4/80表达下调，H3K27me3表达则上调（均 P<0.05）。 结论:HBx可通过诱导足细胞KDM6B表达启动PMT，可能参与HBV-GN局部组织免疫微环境紊乱的发生。

分析2013—2022年间我国糖尿病肾病发病机制的研究热点及发展趋势。本研究利用文献计量学方法，基于中国学术期刊全文数据库、万方数据知识服务平台、中文科技期刊数据库、中国生物医学文献数据库、科学网核心合集数据库和美国国家医学图书馆生物医学信息检索系统，借助VOSviewer软件对2013—2022年间中国研究人员发表的有关糖尿病肾病发病机制领域的文献进行可视化分析。研究共纳入中文文献1 664篇，英文文献2 149篇，结果显示：2013—2022年间，国内糖尿病肾病发病机制研究成果总体呈逐年增长趋势。共现分析显示：国内糖尿病肾病发病机制领域研究热点集中于足细胞、氧化应激、炎症、肾纤维化、尿蛋白等领域，前沿热点有生物标志物、Nrf2、肠道菌群、NLRP3炎症小体、细胞凋亡、微小RNA等。通过可视化分析可以直观呈现国内糖尿病肾病发病机制的研究热点及前沿趋势，进而为糖尿病肾病发病机制的后续研究提供新的思路和方向。