目的:探讨乳腺X线和MRI参数联合外周血红细胞分布宽度-淋巴细胞比值（red cell distribution width to lymphocyte ratio，RLR）水平预测乳腺癌改良根治术后复发转移的价值。方法:纳入2021年6月至2023年12月在建德市第一人民医院接受改良根治术的104例女性乳腺癌患者作为研究对象。术前对每位受试者使用韩国GENORAY MX300乳腺数字化摄影钼靶机进行检查，记录原发肿瘤病灶的X线征象，包括最大直径、乳腺密度、钙化、肿块形态、血管征象和肿瘤边缘。使用飞利浦Achieva磁共振成像仪和专用乳腺检查线圈对肿瘤原发灶进行MRI评估，测量并自动计算出表观扩散系数（apparent diffusion coefficient，ADC）值，并记录RLR。结果:术后复发转移者31例，未复发转移者73例。术后复发转移组中腋窝淋巴结转移和Ki67>14%者的比例相较于未复发转移患者显著升高。术后复发转移组中出现钙化、血管增粗、增多、肿块边缘毛刺者的比例相较于未复发转移患者显著升高。乳腺癌术后复发转移患者的ADC值为0.93±0.12，未复发转移患者的ADC值为1.08±0.15，前者显著低于后者，差异有统计学意义（ t=5.64， P<0.001）。乳腺癌术后复发转移患者的外周血RLR为21.36±2.39，未复发转移患者外周血RLR为19.93±2.14，前者显著高于后者，差异有统计学意义（ t=4.37， P<0.001）。多因素Logistic回归分析结果显示，Ki67高表达、血管增多、增粗、肿块边缘毛刺、较小的ADC值、较大的外周血RLR是乳腺癌术后发生复发转移的独立危险因素（ P<0.05）。ROC曲线结果显示基于上述因素构建的logistic回归模型预测乳腺癌术后复发转移的曲线下面积为0.860（0.798~0.921），灵敏度为80.4%，特异度为81.8%。 结论:乳腺X线、MRI参数联合外周血RLR水平预测乳腺癌改良根治术后复发转移有一定价值。

目的:探讨手术前后红细胞分布宽度与淋巴细胞计数比值（RLR）对非转移性结直肠癌患者无病生存（DFS）的预测价值。方法:回顾性分析解放军总医院海南医院2012年12月至2020年1月经术后病理确诊的108例非转移性结直肠腺癌患者资料，计算RLR，分析不同临床病理特征患者RLR差异。采用受试者工作特征（ROC）曲线分析手术前后RLR对患者DFS的预测价值，根据约登指数确定RLR界值；按RLR界值分层，Kaplan-Meier法分析不同分层患者间DFS，并行log-rank检验。采用Cox比例风险回归模型进行单因素和多因素分析。结果:手术前后RLR对患者DFS预测的约登指数分别为8.86%和9.15%，以此分为术前RLR<8.86%组（73例）和术前RLR ≥8.86%组（35例）、术后RLR<9.15%组（48例）和术后RLR ≥9.15%组（60例）。经ROC曲线分析，手术前后RLR预测患者DFS的曲线下面积（AUC）分别为0.66（95% CI 0.55~0.77， P=0.01）和0.62（95% CI 0.51~0.74， P=0.04），以手术前后RLR界值预测患者3年DFS率的灵敏度分别为51.60%和71.00%，特异度分别为76.60%和50.60%。经Kaplan-Meier法分析，术前RLR<8.86%组DFS优于RLR ≥8.86%组（ χ2=7.35， P<0.01），而术后RLR ≥9.15%组和<9.15%组间DFS差异无统计学意义（ χ2=3.69， P=0.06）。术前RLR是患者DFS独立影响因素（ HR=1.13，95% CI 1.04~1.22， P<0.01）。 结论:手术前后RLR对非转移性结直肠癌患者3年DFS率预测有一定的价值，术前RLR是患者DFS的独立影响因素，RLR较低的患者预后较好。

目的:探讨斑点型锌指结构蛋白[speckle-type POZ(pox virus and zinc finger protein) protein, SPOP]在肠道病毒71型(EV71)感染中的作用。方法:免疫共沉淀分析SPOP对EV71非结构蛋白2A蛋白酶(2A pro)泛素化水平的影响，Western blot检测干扰素调节因子3(IRF3)蛋白磷酸化水平，过表达或敲低细胞中SPOP后感染EV71，RT-qPCR分析IFN-β转录水平，RT-qPCR和Western blot检测EV71结构蛋白VP1的转录水平及蛋白质水平。 结果:过表达HA-SPOP后感染EV71，发现EV71感染RD细胞受抑，同时EV71-2A pro的泛素水平呈HA-SPOP梯度依赖增多。转染shSPOP质粒进行内源性SPOP敲低后，黑色素瘤分化相关基因5(MDA5)、接头蛋白线粒体抗病毒信号蛋白(MAVS)、磷酸化干扰素调节因子3 (p-IRF3)水平呈剂量依赖地减少，而转染HA-SPOP质粒后，MDA5、MAVS、p-IRF3蛋白质水平呈剂量依赖地增加。SPOP高、低表达促进或降低EV71感染的细胞表达IFN-β mRNA，同时抑制和增加VP1在mRNA或蛋白质水平表达。 结论:SPOP可提高EV71-2A pro的泛素化水平从而促进2A pro降解，推测SPOP可通过抑制2A pro对视黄酸诱导基因蛋白-Ⅰ(RIG-Ⅰ)样受体(RLR)信号通路中关键分子MAVS和MDA5的降解，从而上调IRF3磷酸化水平促进IFN-β释放，最终活化宿主细胞抗病毒固有免疫抑制EV71复制。

Objective:Anemoside B4(AB4),the most abundant triterpenoidal saponin isolated from Pulsatilla chinen-sis,inhibited influenza virus FM1 or Klebsiella pneumoniae-induced pneumonia.However,the anti-SARS-CoV-2 effect of AB4 has not been unraveled.Therefore,this study aimed to determine the antiviral activ-ity and potential mechanism of AB4 in inhibiting human coronavirus SARS-CoV-2 in vivo and in vitro.Methods:The cytotoxicity of AB4 was evaluated using the Cell Counting Kit-8(CCK8)assay.SARS-CoV-2 infected HEK293T,HPAEpiC,and Vero E6 cells were used for in vitro assays.The antiviral effect of AB4 in vivo was evaluated by SARS-CoV-2-infected hACE2-IRES-luc transgenic mouse model.Furthermore,label-free quantitative proteomics and bioinformatic analysis were performed to explore the potential antiviral mechanism of action of AB4.Type Ⅰ IFN signaling-associated proteins were assessed using Western blotting or immumohistochemical staining.Results:The data showed that AB4 reduced the propagation of SARS-CoV-2 along with the decreased Nucleocapsid protein(N),Spike protein(S),and 3C-like protease(3CLpro)in HEK293T cells.In vivo antivi-ral activity data revealed that AB4 inhibited viral replication and relieved pneumonia in a SARS-CoV-2 infected mouse model.We further disclosed that the antiviral activity of AB4 was associated with the enhanced interferon(IFN)-β response via the activation of retinoic acid-inducible gene I(RIG-1)like receptor(RLP)pathways.Additionally,label-free quantitative proteomic analyses discovered that 17 pro-teins were significantly altered by AB4 in the SARS-CoV-2 coronavirus infections cells.These proteins mainly clustered in RNA metabolism.Conclusion:Our results indicated that AB4 inhibited SARS-CoV-2 replication through the RLR pathways and moderated the RNA metabolism,suggesting that it would be a potential lead compound for the development of anti-SARS-CoV-2 drugs.

目的 分析红细胞体积分布宽度标准差(RDW-SD)、RDW-SD与血小板比值(RPR)、RDW-SD与淋巴细胞比值(RLR)对原发性胆汁性胆管炎(PBC)肝硬化失代偿期的评估价值.方法 回顾性分析2019年1月至2021年6月该院收治的68例PBC肝硬化患者的血常规指标,根据诊断标准分为代偿期(n=36)和失代偿期(n=32).清晨空腹抽取静脉血2 mL,检测红细胞(RBC)、平均红细胞体积(MCV)、血红蛋白(Hb)、红细胞比容(HCT)、平均红细胞血红蛋白含量(MCH)、平均红细胞血红蛋白浓度(MCHC)、RDW-SD、白细胞(WBC)、中性粒细胞绝对值(N#)、淋巴细胞绝对值(L#)、血小板计数(PLT)、平均血小板体积(MPV)、血小板体积分布宽度(PDW)等,计算血小板与淋巴细胞比值(PLR)、RPR、RLR.二元logistic回归分析PBC肝硬化失代偿期的影响因素,受试者工作特征(ROC)曲线分析不同指标对PBC肝硬化失代偿期的诊断价值.结果 PBC肝硬化代偿组和失代偿组的年龄、RBC、Hb、HCT、RDW-SD、L#、PLT、RPR、RLR比较差异有统计学意义(P＜0.05).二元 logistic 回归分析显示,年龄(OR=1.087,95％CI:1.015～1.165,P＜0.05)、RDW-SD(OR=1.144,95％CI:1.030～1.270,P＜0.05)及 RLR(OR=1.041,95％CI:1.007～1.075,P＜0.05)是PBC肝硬化代偿期患者进展为失代偿期的独立影响因素.ROC曲线分析显示,RDW-SD、RPR和RLR单独诊断PBC肝硬化失代偿期的曲线下面积(AUC)分别为0.726、0.778和0.798,比较差异无统计学意义(P＞0.05).结论 结合年龄要素,定期监测RDW-SD、RPR和RLR,对PBC肝硬化代偿期向失代偿期的发展有较高的预测价值.

目的:使用机器学习算法预测模型探究影响颈内动脉非急性闭塞（NAOICA）血管内再通治疗成功的因素，并比较其与传统预测模型的预测效能。方法:收集2016年1月至2021年12月因NAOICA在北京医院神经外科接受血管内再通术的患者的临床数据。采用包括正则化的Logistic回归（RLR）、支持向量机（SVM）、决策树（DT）、随机森林（RF）和极限梯度提升（XGBoost）在内的机器学习算法构建预测血管内再通技术成功的模型，评估其受试者工作特征曲线（ROC）的曲线下面积（AUC），并与基于变量筛选的传统Logistic回归模型比较其预测价值。结果:共纳入NAOICA闭塞再通术患者69例（73例次），其中男性62例，年龄为（64.8±8.8）岁，技术成功率为67.1%。在预测血管内再通成功与否方面，表现最差的机器学习模型（DT）仍取得了与标准Logistic回归模型近似的效能（平均AUC分别为0.66和0.65），其他机器学习模型的表现均明显优于标准模型（平均AUC为0.74~0.84）。在大部分机器学习模型中，前交通动脉的代偿、亚急性闭塞、自发再通征象和闭塞段远端显影管腔部位是对模型贡献较大的重要预测变量。结论:在NAOICA患者中，机器学习模型对血管内再通技术成功的预测效能要优于标准Logistic回归模型。

目的 探讨小切口延长与关节镜下外侧支持带松解术(RLR)联合髌股韧带重建(MPFL-R)术治疗复发性髌骨脱位(RDP)的效果.方法 回顾性分析2017年3月至2018年1月商洛市中心医院收治的132例RDP患者的临床资料,根据治疗方法分组,其中54例实施开放性内侧支持带紧缩术(MRP)者记为A组,78例实施小切口延长与关节镜下RLR联合MPFL-R术者记为B组.术后6个月、12个月复查.比较两组患者的手术指标、胫骨结节股骨滑车沟(TT-TG)距离、适合角及外侧髌骨角、膝关节活动度(ROM)、股四头肌及股内侧肌肌力、膝关节与髋关节功能及并发症发生情况.结果 B组患者的术中出血量、手术时间、住院时间分别为(65.74±13.12)mL、(1.31±0.26)h、(9.32±1.71)d,明显少(短)于A组的(89.82±17.85)mL、(1.85±0.37)h、(12.46±2.83)d,差异均具有统计学意义(P<0.05);两组患者术后6个月、12个月TT-TG距离均短于术前,且B组患者术后6个月、12个月的TT-TG距离分别为(12.63±0.22)mm、(15.80±0.24)mm,A组分别为(12.95±0.23)mm、(15.79±0.22)mm,差异均具有统计学意义(P<0.05);两组患者术后6个月、12个月适合角、外侧髌骨角、ROM、股四头肌及股内侧肌肌力、Lysholm评分、Kujala评分均大于术前,且B组患者术后6个月和12个月的上述各项指标均大于A组,差异均有统计学意义(P<0.05);B组患者的并发症总发生率为7.69%,明显低于A组的25.93%,差异具有统计学意义(P<0.05).结论 小切口延长与关节镜下RLR联合MPFL-R术治疗RDP创伤小、效果好且安全性较高.

目的 探讨红细胞分布宽度与淋巴细胞比值(RLR)在乙型肝炎病毒相关性肝硬化(HBV-LC)诊断中的应用价值.方法 选择2021年1-10月宿迁市第一人民医院感染科确诊133例HBV-LC患者为HBV-LC组,126例慢性乙型肝炎(CHB)患者为CHB组,同期115名健康体检者作为对照组.检测其血常规、凝血、生化等指标,分析各指标在3组间的差异,采用受试者工作特征(ROC)曲线评估红细胞分布宽度与淋巴细胞比值(RLR)、中性粒细胞与淋巴细胞比值(NLR)、淋巴细胞与单核细胞比值(LMR)、血小板比率指数(APRI)、谷氨酰转肽酶与血小板比值(GPR)、血清铁蛋白(SF)等指标对HBV相关性肝硬化的诊断效能.结果HBV-LC组患者RLR、GPR、APRI、NLR和SF高于CHB组和对照组,差异均有统计学意义(F=190.679、149.386、202.355、65.354、79.880,P均＜0.05),LMR低于CHB组和对照组,差异有统计学意义(F=84.421,P＜0.05).ROC曲线结果显示,RLR、GPR、APRI、LMR、NLR和SF曲线下面积分别为0.871、0.822、0.821、0.732、0.722、0.622,联合检测时RLR+GPR的诊断效能最高,曲线下面积为0.934,对应的敏感度为88.7％,特异度为88.1％.Logisitic回归结果显示,RLR和APRI是HBV-LC的独立危险因素,随着肝纤维化加重,RLR、GPR、APRI、NLR和SF均呈现升高趋势,LMR呈现降低趋势.有门静脉高压、消化道出血、腹水和肝性脑病并发症的患者RLR水平明显高于无并发症患者(Z=-2.366、-2.916、-3.239、-3.459,P均＜0.05).结论 RLR可作为HBV-LC诊断的监测指标,RLR与GPR、APRI、NLR、LMR和SF联合检测可提高对于HBV相关性肝硬化诊断效能.

目的 研究泛素特异性蛋白酶 26(ubiquitin-specific protease 26,USP26)通过调控 RLR信号通路影响肠道病毒 71 型(EV71)感染的机制和功能,深入了解 EV71 感染及其逃逸免疫防御关系,为临床治疗 EV71 感染提供依据.方法 利用RT-PCR和Western blot分别检测EV71 感染横纹肌肉瘤细胞(RD)0、2、4、8、12、24 h后的USP26 mRNA、VP1 mRNA及其蛋白质的表达水平;在RD细胞中设置转染USP26-siRNA(实验组)和转染阴性对照siRNA(对照组),再用EV71 感染RD细胞,收集感染 8、12 和 24h时的mRNA样本,RT-PCR检测VP1 mRNA的表达情况;收集感染 8h时的蛋白质样本,Western blot检测细胞中MDA5、p-IRF3、IRF3 蛋白的表达水平并计算 p-IRF3/IRF3 的相对比值;利用空斑试验检测病毒滴度水平.结果Western blot和RT-PCR结果表明,EV71 感染过程中USP26 的表达上调(P＜0.05);RD细胞转染后实验组EV71 中VP1 mRNA的表达水平明显低于同一时间的对照组(P＜0.05),感染 8h实验组中MDA5 蛋白和p-IRF3 蛋白的表达水平均显著高于对照组(P＜0.05);两组IRF3 总蛋白的表达水平差异无统计学意义;空斑试验中实验组EV71 的病毒滴度显著低于对照组(P＜0.05).结论 USP26 可通过负性调控RLR信号通路参与抗病毒免疫反应,敲减USP26 可抑制EV71 在细胞中的复制.

目的:克隆鳜鱼MDA5基因cDNA序列,研究聚肌苷酸胞苷酸[Poly(I:C)]感染过程中MDA5的表达规律.方法:利用RT-PCR和RACE技术克隆鳜鱼MDA5全长序列,构建Poly(I:C)感染模型,分析MDA5在鳜鱼脾脏和鳃组织中的表达规律.结果:鳜鱼MDA5 cDNA全长3556 bp,包括142 bp 5'UTR、438 bp 3'UTR和2976 bp开放读框,共编码991个氨基酸残基.MDA5蛋白具有RLR家族的典型特征,即N端含有2个CARD结构域,C端含有DEXDc、解旋酶和RD结构域,序列分析发现鳜鱼的MDA5与横斑石鲷、大黄鱼的同源性较高,分别达85.4％、79.8％.组织表达谱分析显示,鳜鱼MDA5基因在不同组织中普遍表达,用Poly(I:C)抗原刺激后,MDA5 mRNA表达显著上调,其中脾脏组织在诱导8h后达到峰值,而在鳃组织中表达持续显著上调.结论:MDA5在鳜鱼免疫应答中起重要作用.