钩藤始载于《名医别录》,应用历史悠久.本文查阅钩藤化学成分和药理作用的相关研究文献,发现钩藤主要含有生物碱类、三萜类、酚类、甾醇类、黄酮类、醌类、香豆素类和木脂素类等成分,具有降压、抗氧化应激、抗神经细胞凋亡、调节炎症因子及其相关通路、降脂、抗脑缺血再灌注损伤、抗纤维化、抗抑郁、抗癌和调整肠道菌群等作用,主要作用于心血管和中枢神经系统,通过调节RhoA/ROCK1、ERK/MAPK、p38MAPK/MAPK、JNK/MAPK、Akt/eNOS、PI3K/Akt、ERK1/2、p27Kip1、PI3K/Akt/GSK-3β、Src/STAT3和HIF-1α/EMT信号通路,发挥治疗高血压、阿尔茨海默病、帕金森、肺纤维化等疾病的作用.

目的 观察蟾毒灵联合索拉非尼对肝癌HepG2细胞增殖、迁移及侵袭能力的干预作用及对Ras同源基因蛋白A(RhoA)/含Rho关联卷曲螺旋蛋白激酶(ROCK)/缺氧诱导因子1α(HIF1α)通路相关蛋白表达的影响.方法 取对数生长期的肝癌HepG2细胞,分别加入蟾毒灵、索拉非尼单药或联合处理24 h,CCK-8方法检测细胞增殖情况,明确后续实验药物干预浓度;将肝癌HepG2细胞分为空白对照组、蟾毒灵组、索拉非尼组、蟾毒灵联合索拉非尼组,空白对照组不进行任何处理,其余组加入相应药物培养24 h,观察肝癌HepG2细胞增殖、迁移及侵袭情况,West-ern blot 法检测RhoA/ROCK/HIF1α通路相关蛋白表达情况.结果 蟾毒灵、索拉非尼均可抑制肝癌HepG2细胞增殖,选择蟾毒灵4 μg/mL、索拉非尼20 μmol/L为后续实验干预浓度.各药物组肝癌HepG2细胞的迁移与侵袭率和索拉非尼组、蟾毒灵联合索拉非尼组肝癌HepG2细胞中RhoA、ROCK1、ROCK2、HIF1α蛋白相对表达量均明显低于空白对照组(P均＜0.05),且蟾毒灵联合索拉非尼组肝癌HepG2细胞的迁移与侵袭率和各蛋白相对表达量均明显低于蟾毒灵组和索拉非尼组(P均＜0.05).结论 蟾毒灵联合索拉非尼可通过调控RhoA/ROCK/HIF1α通路加强对肝癌HepG2细胞增殖、迁移及侵袭的抑制作用,可能是两者联合使用抑制肝癌复发转移的潜在机制.

目的 观察复方斑蝥胶囊对化学致癌剂MNNG诱导的大鼠胃癌组织中RhoA/ROCK信号通路的影响,探讨复方斑蝥胶囊防治胃癌的可能机制.方法 50只Wistar大鼠,按随机数字表法分为空白对照组(空白组)10只、模型组20只、复方斑蝥胶囊组20只.空白组予普通标准饲料喂养,自由饮用蒸馏水;模型组饮用含N-甲基-N'-硝基-亚甲基胍(MNNG)100 mg/L的蒸馏水10个月;复方斑蝥胶囊组除饮用含MNNG100 mg/L蒸馏水和10％NaCl溶液灌胃外,并灌喂复方斑蝥胶囊(0.5 g/kg生药量)1次/日,给药10个月.比较各组动物胃癌发生率的差异,应用免疫组化及Western blot法检测胃癌组织RhoA、ROCKⅠ、PI3K、HIF-1α蛋白表达.结果 空白组、模型组、复方斑蝥胶囊组胃癌的发生率分别为0％(0/10)、70％ (14/20)和30％(6/20),病理组织学证实为腺癌.与模型组比较,复方斑蝥胶囊组腺胃癌的发生率明显降低(30％ vs.70％,P=0.026),肿瘤体积明显减小[(16.1±15.7) mm3vs.(50.4±30.5) mm3,P=0.004],胃癌组织中RhoA、ROCKⅠ、PI3K、HIF-1α表达水平明显降低(P＜0.05).结论 复方斑蝥胶囊能够降低MNNG诱导的大鼠胃腺癌发生率,其机制可能为抑制RhoA/ROCK信号通路及相关细胞因子的表达而影响胃癌的发生发展.

目的 探讨抑制缺氧诱导因子1(HIF-1)α表达对糖尿病小鼠RhoA/Rho相关卷曲螺旋形成的蛋白激酶(ROCK)信号转导通路的影响.方法 糖尿病小鼠33只随机数字表法分为3组-模型组、NC组与抑制组,每组各11只小鼠.NC组与抑制组在玻璃体腔分别注射含siRNA NC序列、HIF-1α序列和转染试剂的混合液,模型组注射等剂量的磷酸盐缓冲液.建模后12周,测定3组小鼠的血糖水平、体重、心脏重量、心脏重量/体重比;采用黄嘌呤氧化法测超氧化物歧化酶(SOD)含量,采用硫代巴比妥酸法测定丙二醛(MDA)含量;用Image-Pro图像分析软件计算RhoA、ROCK蛋白的相对表达量.结果 建模后12周,抑制组小鼠的血糖水平、体重、心脏重量、心脏重量/体重比、SOD含量、MDA含量、RhoA、ROCK蛋白相对表达量分别为(16.83±1.22)mmol/L、(30.11±2.13)g、(0.09±0.02)g、(2.99±0.12)mg/g、(294.29±12.40)U/mgprot、(1.30±0.22)nmol/mgprot、(0.77±0.09)、(0.87±0.10).NC组分别为(16.29±1.44)mmol/L、(23.98±1.11)g、(0.12±0.01)g、(5.00±0.14)mg/g、(176.88±14.85)U/mgprot、(2.70±0.42)nmol/mgprot、(2.39±0.15)、(2.48±0.17).模型组分别为(8.22±0.33)mmol/L、(23.10±0.32)g、(0.12±0.02)g、(5.19±0.26)mg/g、(178.09±16.02)U/mgprot、(2.68±0.87)nmol/mgprot、(2.37±0.16)、(2.45±0.22).抑制组小鼠的血糖水平、心脏重量、心脏重量/体重比、MDA含量、RhoA、ROCK蛋白相对表达水平低于NC组与模型组,差异均有统计学意义(P<0.05).抑制组小鼠体重、血清SOD含量高于NC组与模型组,差异均有统计学意义(P<0.05).NC组与模型组各指标比较,差异无统计学意义(P>0.05).结论 抑制HIF-1α表达在糖尿病小鼠的应用能抑制RhoA/ROCK信号转导通路的激活,降低血清MDA表达,促进SOD的释放,从而降低糖尿病小鼠的血糖水平与心脏重量、心脏重量/体重比,促进恢复正常体重.