目的:探讨围绝经期骨质疏松患者的血清SET结构域分支型1（SET domain bifurcated 1，SETDB1）、环氧合酶-2（cyclooxygenase-2，COX-2）水平与骨代谢指标的相关性。方法:选取2018年8月至2021年8月海宁市妇幼保健院收治的71例围绝经期骨质疏松患者作为观察组，另选取50例健康人作为对照组。对两组的一般资料、骨密度和骨代谢指标进行测定。ELISA检测血清中SETDB1、COX-2的浓度。相关性分析明确血清SETDB1、COX-2水平与骨代谢指标的相关性。ROC曲线分析血清SETDB1、COX-2水平在诊断围绝经期骨质疏松中的价值。结果:与对照组比较，观察组的骨密度、PINP、骨钙素水平均降低，但CTX水平增强（均 P<0.001）。此外，与对照组（52.85±7.96）（4.88±1.00）比较，观察组的血清SETDB1浓度（40.25±7.08）降低，但COX-2浓度（7.28±2.09）增强（ t=9.16， P<0.001； t=5.62， P<0.001）。SETDB1浓度与PINP和骨钙素呈正相关，与CTX浓度呈负相关（ r=0.36、-0.40、0.34， P<0.001）。但COX-2浓度与PINP和骨钙素呈负相关，与CTX浓度呈正相关（ r=-0.35、0.42、-0.37， P<0.001）。血清SETDB1和COX-2均能作为围绝经期骨质疏松诊断的有效指标（AUC=0.81， P<0.001；AUC=0.79， P<0.001）。 结论:血清SETDB1和COX-2水平能作为围绝经期骨质疏松患者的诊断指标，且二者和骨代谢指标有相关性。

目的:探讨SET结构域分支型组蛋白赖氨酸甲基转移酶1（SETDB1）基因在卵巢高级别浆液性癌（HGSOC）组织中的表达，并探讨其对卵巢上皮性癌（卵巢癌）细胞增殖、侵袭能力的影响及其分子机制。方法:（1）收集2009年1月至2014年12月在郑州大学第一附属医院接受初次手术治疗且临床病理资料完整的90例HGSOC患者的癌组织标本，以同期收治的30例因子宫肌瘤行子宫及双侧附件切除术患者的正常卵巢组织标本为对照。应用荧光定量PCR技术、免疫组化法检测SETDB1 mRNA、蛋白在HGSOC组织、正常卵巢组织中的表达，分析SETDB1蛋白表达与HGSOC患者临床病理特征、预后的关系；（2）荧光定量PCR技术检测卵巢癌细胞系A2780、COC1、OVCAR3、SKOV3细胞中SETDB1 mRNA的表达。（3）过度表达及沉默SETDB1基因的卵巢癌细胞株的构建及筛选后，活细胞计数法检测转染后卵巢癌细胞的增殖能力，穿膜（transwell）小室实验检测转染后卵巢癌细胞的侵袭和迁移能力。（4）蛋白印迹（western blot）法检测转染后卵巢癌细胞中磷脂酰肌醇3激酶（PI3K）/蛋白激酶B（Akt）信号通路关键分子［包括磷酸化Akt（p-Akt）、磷酸化雷帕霉素靶蛋白（p-mTOR）］及上皮-间质转化（EMT）相关蛋白［包括E-钙黏蛋白（E-cadherin）、N-钙黏蛋白（N-cadherin）、锌指转录因子（Slug）、波形蛋白（vimentin）］的表达。结果:（1）与正常卵巢组织比较，HGSOC组织中STEDB1 mRNA、蛋白的表达水平均显著增高（ P均<0.01），且STEDB1蛋白表达与HGSOC患者的手术病理分期、淋巴结转移状态均显著有关（ P均<0.05）；Kaplan-Meier法生存分析显示，SETDB1蛋白阳性表达患者的中位总生存时间显著短于SETDB1阴性表达者（分别为31.0、43.4个月， P=0.020）。（2）卵巢癌细胞系A2780、COC1、OVCAR3、SKOV3细胞中SETDB1 mRNA的表达水平，均显著高于正常卵巢细胞系T29细胞（ P均<0.01）。（3）沉默SETDB1基因表达的SKOV3-shSETDB1-1、SKOV3-shSETDB1-2细胞的增殖、侵袭和迁移能力，均显著低于其对照SKOV3-NC细胞（ P均<0.01）；过度表达SETDB1基因的OVCAR3-SETDB1细胞的增殖、侵袭和迁移能力，均显著高于其对照OVCAR3-NC细胞（ P均<0.01）。（4）与对照SKOV3-NC细胞比较，沉默SETDB1基因表达的SKOV3-shSETDB1-1、SKOV3-shSETDB1-2细胞中p-Akt、p-mTOR、N-cadherin、Slug、vimentin蛋白的表达强度均显著降低，E-cadherin蛋白的表达强度均显著增高；与对照OVCAR3-NC细胞比较，过度表达SETDB1基因的OVCAR3-pSETDB1细胞中p-Akt、p-mTOR、N-cadherin、Slug、vimentin蛋白的表达强度显著增高，E-cadherin蛋白的表达强度显著降低。 结论:SETDB1基因在HGSOC组织和卵巢癌细胞中均呈高表达，过度表达SETDB1基因可促进卵巢癌细胞的增殖和侵袭，其作用机制可能与激活PI3K/Akt信号通路及促进肿瘤细胞EMT相关。

目的 观察微小RNA(miR)-381-3p对口腔癌细胞增殖、侵袭、迁移能力的调控作用,并基于甲基转移酶SETDB1基因调控探讨相关机制.方法 采用RT-PCR法检测口腔癌细胞系CAL-27和正常口腔黏膜上皮细胞系ATCC中的miR-381-3p.培养CAL-27细胞,分为模拟物组、阴性对照组和未转染组,模拟物组和阴性对照组分别转染miR-381-3p模拟物和miR-381-3p阴性对照,未转染组不进行转染;采用CCK-8法检测细胞增殖能力,Transwell小室实验检测细胞侵袭能力,划痕愈合实验检测细胞迁移能力.采用TargetScan(http://www.targetscan.org/vert_80/)预测miR-381-3p与SETDB1结合位点,应用双荧光素酶报告基因分析进行验证;采用RT-PCR法检测CAL-27细胞和ATCC细胞中的SETDB1 mRNA,Western blotting法检测SETDB1蛋白;将CAL-27细胞分为模拟物组、阴性对照组和未转染组,模拟物组、阴性对照组分别转染miR-381-3p模拟物和阴性对照,未转染组不进行转染,采用RT-PCR法检测SETDB1 mRNA.结果 CAL-27细胞中miR-381-3p表达低于ATCC细胞(P<0.05).模拟物组在培养12、24、36、48 h时细胞增殖能力低于阴性对照组和未转染组(P均<0.05).模拟物组细胞迁移距离、穿膜细胞数均低于阴性对照组和未转染组(P均<0.05).SETDB1存在连续的、可以与miR-381-3p互补的核苷酸序列;共转染SETDB1-WT和miR-381-3p质粒的CAL-27细胞相对荧光素酶活性低于其他组细胞(P均<0.05);CAL-27细胞中SETDB1 mRNA和蛋白表达高于ATCC细胞(P均<0.05);模拟物组SETDB1 mRNA表达低于阴性对照组和未转染组(P均<0.05).结论 miR-381-3p能够抑制口腔癌细胞的增殖、侵袭和迁移能力,其作用机制可能与调节SETDB1表达有关.

目的 观察甲基化转移酶SETDB1对口腔鳞状癌细胞迁移、侵袭能力的影响,并探讨其相关机制.方法 以不同浓度(0、0.2、0.4、0.6、0.8 μmol/L)甲基化转移酶抑制剂GSK3685032作用于口腔鳞状癌细胞CAL-27,MTT法测算细胞增殖活力,筛选得到GSK3685032最佳作用浓度为0.6 μmol/L.将CAL-27细胞分为对照组与实验组,对照组加入有机溶剂DMSO进行处理,实验组加入0.6 μmol/L的GSK3685032处理.采用RT-qPCR法检测细胞SETDB1 mRNA,Western blotting法检测细胞SETDB1蛋白,细胞划痕实验观察细胞迁移能力,Transwell小室侵袭实验观察细胞侵袭能力,焦磷酸测序检测细胞内SOX7甲基化水平.结果 实验组细胞SETDB1 mRNA及蛋白表达均低于对照组(P均<0.05);实验组细胞迁移距离小于对照组,穿膜细胞数少于对照组(P均<0.05);实验组细胞内SOX7甲基化率小于对照组(P<0.05).结论 甲基化转移酶SETDB1可抑制口腔鳞状癌细胞的迁移、侵袭能力,其机制可能与下调细胞内SOX7甲基化水平有关.

目的:探讨乙肝相关性肝癌组织Bcl-2相关转录因子-1(BCLAF1)、组蛋白甲基化酶SET结构域分支型1(SETDB1)表达与临床病理特征和术后预后的关系.方法:选择2018年1至2020年6月南方医科大学珠江医院和高州市人民医院收治的127例行根治性手术切除的乙肝相关性肝癌患者,取手术切除的癌组织和旁组织,采用免疫组化法检测BCLAF1、SETDB1表达,分析BCLAF1、SETDB1表达与临床病理特征的关系.术后随访3年,Kaplan-Meier生存曲线分析BCLAF1、SETDB1不同表达患者生存差异,多因素Cox回归分析影响乙肝相关性肝癌患者预后的因素.结果:癌组织BCLAF1、SETDB1阳性表达率高于癌旁组织(P＜0.05).低分化、TNM分期Ⅲa期、门脉侵犯、淋巴结转移患者癌组织中BCLAF1、SETDB1阳性表达率高于中高分化、TNM分期Ⅰ～Ⅱ期、无门脉侵犯、无淋巴结转移患者癌组织(P＜0.05).BCLAF1阳性表达、SETDB1阳性表达乙肝相关肝癌患者3年总生存(OS)率低于BCLAF1阴性表达、SETDB1阴性表达乙肝相关肝癌患者(P＜0.05).多因素Cox回归分析显示淋巴结转移、BCLAF1阳性表达、SETDB1阳性表达是乙肝相关肝癌患者预后不良的危险因素(P＜0.05).结论:乙肝相关肝癌组织中BCLAF1、SETDB1阳性表达率增高,BCLAF1、SETDB1阳性表达与低分化、TNM分期、门脉侵犯、淋巴结转移和预后不良有关.

背景:Atf7ip是否参与成骨分化的调控尚未明确,研究其对成骨分化的影响及具体机制具有重要意义.目的:探讨Atf7ip对骨形态发生蛋白2促小鼠胚胎成骨细胞前体细胞(MC3T3-E1)成骨分化的影响.方法:将体外培养的MC3T3-E1细胞分为正常组、干扰组(NC-siRNA组、Atf7ip-siRNA组)、高表达组(CMV-VC组、CMV-Atf7ip组),转染处理24 h,然后使用200 ng/mL骨形态发生蛋白2分别处理0,12,24,48 h,qRT-PCR检测各组细胞中Atf7ip、碱性磷酸酶、骨钙素、Ⅰ型胶原α1的mRNA表达水平,Western blot检测成骨分化标记分子Sp7、Runx2的蛋白表达以及Atf7ip结合分子SETDB1、组蛋白H3、H3K9me3甲基化的表达,并进行碱性磷酸酶活性分析.结果与结论:①随骨形态发生蛋白2处理时间增加,Atf7ip的蛋白及mRNA表达减少,而Sp7、Runx2的蛋白表达和骨钙素、碱性磷酸酶的mRNA表达显著增加(P<0.05);Atf7ip结合分子SETDB1的蛋白表达并无明显改变;②与NC-siRNA组比较,Atf7ip-siRNA组Sp7、Runx2的蛋白表达和骨钙素、Ⅰ型胶原α1的mRNA表达显著上调(P<0.05),碱性磷酸酶活性明显增强,且H3K9甲基化明显降低(P<0.05);③与CMV-VC组比较,CMV-Atf7ip组Sp7、Runx的蛋白表达和骨钙素、碱性磷酸酶、Ⅰ型胶原α1的mRNA表达显著下调(P<0.05),碱性磷酸酶活性显著减弱,而CMV-Atf7ip组的H3K9甲基化蛋白较对照组明显上调(P<0.05);④结果表明,Atf7ip在骨形态发生蛋白2诱导MC3T3-E1成骨分化过程中表达降低,敲降Atf7ip后成骨分化显著增强,过表达Atf7ip后成骨分化显著减弱,即Atf7ip是骨形态发生蛋白2促MC3T3-E1细胞成骨分化的负调节因子.

目的:探讨SETDB1通过SOX7甲基化抑制口腔癌上皮-间充质转化(epithelial mesenchymal transition,EMT)、迁移和侵袭机制.方法:应用qRT-PCR和Western印迹法检测口腔癌KB细胞和口腔黏膜上皮ATCC细胞中SET-DB1和SOX7 mRNA和蛋白表达水平.构建SETDB 1si-RNA,以脂质体介导法转染口腔癌KB细胞.si RNA-SETDB1为实验组(si-S),siRNA空载体为阴性对照组(si-N),未转染KB细胞为空白对照组(NC).qRT-PCR和Western印迹法检测SETDB1 mRNA和蛋白表达水平,验证转染效果;焦磷酸测序检测SOX7甲基化水平.Western印迹法检测N-钙黏蛋白(N-cadherin)、Vimentin、β-catenin和Slug蛋白表达,MTT法检测细胞存活能力,流式细胞术检测细胞凋亡,划痕愈合实验检测细胞迁移能力,Transwell小室实验检测细胞侵袭能力.采用SPSS 21.0软件包进行统计学分析.结果:Rt-qPCR和Western印迹法检测结果显示,si-S组SETDB1 mRNA和蛋白表达量显著下降(P＜0.05).焦磷酸测序检测结果显示,下调SETDB1可显著降低SOX7甲基化率,增加SOX7蛋白表达.Western印迹法检测结果显示,下调SETDB1可显著抑制口腔癌KB细胞中EMT相关蛋白N-cadherin、Vimentin、β-catenin和Slug的表达(P＜0.05).细胞功能学结果显示,下调SETDB1可显著抑制KB细胞的存活、迁移和侵袭能力.结论:下调SETDB1可通过调控SOX7甲基化水平,抑制口腔癌细胞EMT、迁移和侵袭,为口腔癌临床诊断和治疗提供新思路和靶点.

目的 分析SET结构域分叉组蛋白赖氨酸甲基转移酶 2(SETDB2)、半乳糖凝集素 3(Gal-3)、pleckstrin同源结构域S1(PLEKHS1)在甲状腺乳头状癌组织中的表达情况,以及三者对患者预后的预测价值.方法 (1)选择118 例甲状腺乳头状癌患者作为研究组,45 例甲状腺良性结节患者作为对照组.采用免疫组化法检测甲状腺乳头状癌组织和甲状腺良性结节组织中SETDB2、Gal-3、PLEKHS1 蛋白表达情况.比较研究组与对照组之间,以及不同特征甲状腺乳头状癌患者之间病灶组织中SETDB2、Gal-3、PLEKHS1 蛋白的阳性表达率.(2)随访1 年,记录甲状腺乳头状癌患者的生存情况.分析SETDB2、Gal-3、PLEKHS1 蛋白阳性表达和阴性表达患者的生存率;比较预后良好和预后不良患者SETDB2、Gal-3、PLEKHS1 蛋白的阳性表达率.采用受试者工作特征(ROC)曲线分析SETDB2、Gal-3、PLEKHS1 对甲状腺乳头状癌患者预后的预测价值.结果 (1)与对照组相比,研究组病灶组织中SETDB2 蛋白阳性表达率较低,Gal-3、PLEKHS1 蛋白阳性表达率较高(P<0.05).在甲状腺乳头状癌患者中,Ⅲ～Ⅳ期、浸润深度≥1/2、组织中低分化、淋巴结转移、肿瘤直径>1cm的患者病灶组织中SETDB2 蛋白阳性表达率更低,Gal-3、PLEKHS1 蛋白阳性表达率更高(P<0.05).(2)在甲状腺乳头状癌患者中,SETDB2 蛋白阳性表达患者生存率高于SETDB2 蛋白阴性表达患者,Gal-3、PLEKHS1 蛋白阳性表达患者生存率低于Gal-3、PLEKHS1 蛋白阴性表达患者(P<0.05);预后良好患者的SETDB2 蛋白阳性表达率高于预后不良患者,Gal-3、PLEKHS1 蛋白阳性表达率低于预后不良患者(P<0.05).ROC 曲线分析结果显示,SETDB2、Gal-3、PLEKHS1 蛋白总评分预测甲状腺乳头状癌患者预后不良的曲线下面积分别为 0.826、0.841、0.859.结论 在甲状腺乳头状癌中,SETDB2 呈低表达,而Gal-3、PLEKHS1 呈高表达,三者均与患者的病情严重程度相关,且对预后具有一定的预测价值.

目的 探讨脯氨酸-谷氨酸-亮氨酸富集蛋白1(PELP1)及SET结构域分支型组蛋白赖氨酸甲基转移酶1(SETDB1)在卵巢癌组织中的表达及意义.方法 收集2016年7月至2022年5月该院妇产科行手术治疗且临床病理资料完整的35例卵巢癌患者组织标本,另选取同期收治因子宫肌瘤行子宫及双侧附件切除术的17例患者的正常卵巢组织作为对照.采用实时荧光定量逆转录PCR检测PELP1、SETDB1 mRNA在卵巢癌细胞系(A2780、OVCAR3、SKOV3)及人正常卵巢上皮细胞系(IOSE80)中的相对表达水平,免疫组织化学检测PELP1、SETDB1蛋白的表达水平,分析PELP1、SETDB1蛋白表达情况与患者临床病理特征的关系.结果 卵巢癌细胞系A2780、OVCAR3、SKOV3中PELP1、SETDB1 mRNA相对表达水平均明显高于正常卵巢上皮细胞系IOSE80(P<0.05).与正常卵巢组织比较,卵巢癌组织PELP1蛋白表达水平明显增高(P<0.05),但SETDB1蛋白表达无明显差异(P>0.05).不同国际妇产科联盟(FIGO)分期、淋巴结转移情况的PELP1蛋白阳性表达比较,差异有统计学意义(P<0.05).结论 PELP1在卵巢癌组织中表达水平异常升高,PELP1可能对SETDB1有一定的调控作用.

目的:研究乳腺癌超声弹性成像定量参数与病灶内癌细胞凋亡、侵袭异常的相关性.方法:选择在本院接受手术切除的乳腺肿瘤患者作为研究对象,根据术后病理检查结果判断病灶性质并分为恶性组、良性组.术前进行超声弹性成像检查并测定弹性量值;术后采集病灶组织并测定凋亡基因及侵袭基因的表达量.结果:恶性组乳腺癌病灶的弹性量值显著高于良性组患者乳腺纤维腺瘤病灶;恶性组乳腺癌病灶内TNFR1、XIAP、Livin、MMP2、Sam68、SETDB1的mRNA表达量显著高于良性组患者乳腺纤维腺瘤病灶,TCEAL7、ARHI、ARID1A、YAP、LAIR1的mRNA表达量均显著低于良性组患者乳腺纤维腺瘤病灶;恶性组中高弹性量值的乳腺癌病灶内 TNFR1、XIAP、Livin、MMP2、Sam68、SETDB1的mRNA表达量显著高于低弹性量值的乳腺癌病灶,TCEAL7、ARHI、ARID1A、YAP、LAIR1的mRNA表达量均显著低于低弹性量值的乳腺癌病灶.结论:乳腺癌超声弹性成像定量参数弹性量值的升高与病灶内癌细胞异常的凋亡、侵袭密切相关.