目的 分析内凝集蛋白1(ITLN1)在卵巢癌中的生物信息学信息及其体外抗增殖作用.方法 2021年3月至2022年3月,采用基因表达数据库(GEO)来分析筛选卵巢癌组织中的差异基因.利用基因表达谱交互分析工具(GEPIA)来分析ITLN1在卵巢癌肿瘤组织与正常组织中的表达水平.利用癌症基因组图谱-基因型组织表达(TCGA-GTEx)数据制作受试者操作特征曲线(ROC曲线),利用Kaplan Meier-plotter分析ITLN1低表达或高与卵巢癌病人总生存率的曲线关系.利用LinkedOmics筛选ITLN1在卵巢癌中的相关基因,然后采用京都基因与基因组数据库(KEGG)进行通路富集分析.细胞实验分组:空载体对照组(vector),TLN1过表达载体组(TLN1),ITLN1+740 Y-P组.通过蛋白质印迹法检测ITLN1、磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)、磷酸化PI3K(p-PI3K)、蛋白激酶B(Akt)以及磷酸化Akt(p-Akt)在卵巢癌细胞中蛋白表达水平.通过5-乙炔基-2'-脱氧尿苷(EdU)法与细胞计数试剂盒(CCK-8)法检测细胞增殖.结果 ITLN1在卵巢癌组织(0.45±0.17)和人卵巢癌细胞株A2780(0.72±0.08)、CAOV3(0.57±0.05)、SKOV3(0.44±0.08)中的表达量均显著降低(P<0.05).并且,ITLN1在卵巢癌中具有诊断价值(ROC曲线下面积为0.88),ITLN1高表达组的卵巢癌病人总生存率高于ITLN1低表达组(风险比0.74,P<0.05).ITLN1通过抑制PI3K/Akt信号通路从而降低卵巢癌细胞的增殖能力(0.55±0.02).结论 ITLN1表达水平可以成为卵巢癌病人的预后判断标志物,是潜在的卵巢癌治疗的靶点.这为卵巢癌的分子靶向治疗提供了新的理论基础.

目的:探讨miR-1182在卵巢癌组织中的表达及对肿瘤细胞增殖与转移的影响。方法:使用反转录聚合酶链式扩增（RT-PCR）技术检测正常卵巢组织和卵巢癌及相应癌旁组织中的miR-1182表达水平。用miR-1182 mimics病毒转染人卵巢癌细胞株SKOV-3，并用RT-PCR和Western Blot检测细胞的miR-1182和hTERT蛋白的表达水平。用噻唑兰法检测转染后的SKOV-3细胞的增殖与侵袭情况。结果:卵巢癌组织中miR-1182的表达水平明显低于正常卵巢组织与癌旁组织（均 P<0.05）。对于miR-1182表达水平，不同肿瘤分期、组织分化程度的患者间的差异有统计学意义（均 P<0.05），但患者年龄与肿瘤类型间的差异无统计学意义（均 P>0.05）。与空白病毒组和对照组相比，转染miR-1182后，转染组SKOV-3细胞的miR-1182表达水平明显升高（均 P<0.05），而hTERT蛋白表达明显降低（均 P<0.05）。转染组SKOV-3细胞在转然后24、48、72 h细胞增殖和迁移能力受到明显抑制（均 P<0.05）。 结论:miR-1182在卵巢癌组织中低表达，过表达miR-1182可抑制卵巢癌的增殖与侵袭能力，其可能通过靶向调节hTERT的表达实现调控作用。

目的:探讨微小RNA(miRNA，miR)-4699-3p在卵巢癌细胞株中的表达，观察其靶向调控线粒体核糖体蛋白S23(MRPS23)表达的能力及对卵巢癌细胞迁移和增殖的影响。方法:实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测miR-4699-3p在卵巢癌细胞株(OVCAR-3、SKOV-3、HO-8910、OC3、A2780)和正常卵巢上皮细胞(IOSE80)中的表达。采用脂质体转染法分别将miR-4699-3p模拟物或阴性对照miR-NC转染至miR-4699-3p表达最低的细胞株，定义为实验组和对照组。qRT-PCR验证转染效率。生物信息学技术预测miR-4699-3p的候选靶基因，双荧光素酶报告基因实验鉴定其对靶基因的调控能力。qRT-PCR和Western blot检测MRPS23在mRNA和蛋白水平的表达变化。细胞计数法(CCK-8)和Transwell迁移实验分别检测miR-4699-3p对卵巢癌细胞增殖和迁移能力的影响。结果:miR-4699-3p在卵巢癌细胞株中的表达明显低于正常卵巢上皮细胞( P<0.05)，在OVCAR-3细胞中的表达最低( P<0.01)。转染miR-4699-3p后，实验组OVCAR-3细胞中miR-4699-3p表达量显著升高( P<0.01)，证明转染成功。生物信息学软件预测，miR-4699-3p的候选靶基因可能是线粒体核糖体蛋白S23(MRPS23)，双荧光素酶报告基因实验证实miR-4699-3p可直接靶定MRPS23基因mRNA的3′-非翻译区(UTR)( P<0.01)。与对照组OVCAR-3细胞相比，实验组过表达miR-4699-3p后，MRPS23基因在mRNA和蛋白表达水平均明显降低( P<0.01)，细胞转移和细胞周期调控蛋白Twist、Slug、CDK6、Cyclin D3表达均降低( P<0.05)，OVCAR-3细胞的增殖能力降低( P<0.05)，OVCAR-3细胞迁移能力降低( P<0.01)。 结论:miR-4699-3p在卵巢癌细胞株中低表达，上调OVCAR-3细胞中的miR-4699-3p表达可通过干扰MRPS23基因表达，抑制卵巢癌细胞增殖和迁移能力。

目的:探讨circBIRC6对卵巢癌细胞顺铂耐药性的影响及其分子机制。方法:体外培养卵巢癌细胞株SKOV3、卵巢癌顺铂耐药细胞株SKOV3/DDP，采用脂质体介导法将si-NC、si-circBIRC6、si-circBIRC6+anti-miR-NC、si-circBIRC6+anti-miR-367-3p转染至SKOV3和SKOV3/DDP细胞，分别记作DDP+si-NC组、DDP+si-circBIRC6组、DDP+si-circBIRC6+anti-miR-NC组和DDP+si-circBIRC6+anti-miR-367-3p组，各组细胞中分别加入2 μg/ml的顺铂处理24 h。采用四甲基偶氮唑蓝法检测细胞增殖抑制率，计算顺铂半数抑制浓度(IC 50)值，实时荧光定量聚合酶链反应检测circBIRC6、miR-367-3p的基因表达水平，流式细胞术检测细胞凋亡率，双荧光素酶报告实验验证circBIRC6、miR-367-3p的靶向关系，Western blot法检测细胞周期蛋白1(Cyclin D1)、Bcl-2、p21、Bax蛋白的表达水平。 结果:SKOV3细胞中circBIRC6的表达水平为1.00±0.05，低于SKOV3/DDP细胞(3.04±0.24， P<0.001)；SKOV3细胞中miR-367-3p的表达水平为1.00±0.08，高于SKOV3/DDP细胞(0.54±0.05， P<0.001)。SKOV3细胞、SKOV3/DDP细胞增殖抑制率分别为(22.47±2.04)%和(8.84±0.71)%，IC 50值分别为6.65±0.94和28.18±4.91，差异均有统计学意义(均 P<0.05)。DDP+si-NC组SKOV3细胞增殖抑制率和细胞凋亡率[(22.19±2.19)%和(10.98±1.12)%]低于DDP+si-circBIRC6组[(74.18±5.36)%和(32.91±3.19)%，均 P<0.05]；DDP+si-NC组SKOV3/DDP细胞增殖抑制率和细胞凋亡率[(8.71±0.87)%和(7.39±0.63)%]低于DDP+si-circBIRC6组[(40.85±4.07)%和(25.31±2.53)%，均 P<0.05]。DDP+si-circBIRC6组SKOV3、SKOV3/DDP细胞中Cyclin D1和Bcl-2蛋白表达水平低于DDP+si-NC组，p21和Bax蛋白表达水平高于DDP+si-NC组(均 P<0.05)。双荧光素酶报告实验显示，miR-367-3p为circBIRC6的靶基因，抑制miR-367-3p的表达可降低抑制circBIRC6的表达对卵巢癌细胞增殖、凋亡及顺铂耐药性的作用。 结论:抑制circBIRC6的表达可能通过上调miR-367-3p的表达而抑制卵巢癌顺铂耐药细胞增殖及诱导细胞凋亡，从而降低细胞对顺铂的耐药性。

目的:探讨miR-485-5p对顺铂耐药卵巢癌细胞的影响及其机制。方法:RT-qPCR检测人正常卵巢上皮细胞株（IOSE-80）及卵巢癌细胞株（A2780、SKOV3、OVCAR3、OVCA433）中miR-485-5p的表达。构建顺铂（DDP）耐药卵巢癌细胞并检测miR-485-5p与EGFR的表达。CCK8法检测各组细胞增殖能力，流式细胞术测定细胞凋亡。结果:相对于IOSE-80细胞，各卵巢癌细胞株中miR-485-5p的表达显著下降，EGFR表达上升（均 P<0.05）。SKOV3/DDP细胞株（0.17±0.02）中miR-485-5p表达较SKOV3细胞（0.32±0.04）进一步下降（ t=5.81, P=0.004）。而SKOV3/DDP细胞中EGFR表达则较SKVO3进一步上升（ P<0.05）。SKOV3/DDP细胞转染miR-485-5p mimic能抑制细胞增殖活力、诱导细胞凋亡，转染miR-485-5p inhibitor则相反（均 P<0.05）。SKOV3/DDP细胞转染EGFR能促进细胞增殖并抑制细胞凋亡，该作用被miR-485-5p mimic部分抵消。 结论:miR-485-5p参与调控卵巢癌细胞的顺铂耐药，过表达miR-485-5p能提高卵巢癌化疗敏感性，该作用可能是通过负调控EGFR实现的。

目的:探讨阿帕替尼及氟唑帕利对人卵巢癌顺铂耐药细胞增殖能力的影响。方法:选择人卵巢癌细胞株SKOV3和人卵巢癌顺铂耐药细胞株SKOV3／DDP。使用不同浓度顺铂（1、2、4、8、16、32、64、128 μg／ml）处理SKOV3、SKOV3／DDP细胞不同时间，CCK-8法检测SKOV3、SKOV3／DDP细胞增殖率及半数抑制浓度（ IC50），并计算SKOV3／DDP细胞的耐药倍数。使用不同浓度阿帕替尼（4、8、16、32、64 μmol／L）、氟唑帕利（148.15、222.22、333.33、500.00、750.00 μmol／L）分别处理SKOV3／DDP细胞24、48、72 h，采用CCK-8法检测细胞增殖率并计算 IC50。将SKOV3／DDP细胞分为空白对照组（未进行药物处理的细胞）、顺铂组、顺铂+阿帕替尼组、顺铂+氟唑帕利组、顺铂+氟唑帕利+阿帕替尼组，分别给予相应药物干预，CCK-8法检测每组细胞的增殖率。 结果:相同浓度顺铂作用相同时间，SKOV3细胞增殖率均低于SKOV3／DDP细胞，差异均有统计学意义（均 P<0.05）。4、8、16、32、64 μmol／L阿帕替尼作用于SKOV3／DDP细胞24 h时 IC50为742.1 μmol／L，48 h为156.8 μmol／L，72 h为77.5 μmol／L；与对照组比较，有效浓度大于32 μmol／L的阿帕替尼作用SKOV3／DDP细胞的细胞增殖率明显降低，差异均有统计学意义（均 P<0.05）。148.15、222.22、333.33、500.00、750.00 μmol／L氟唑帕利作用于SKOV3／DDP细胞24 h IC50为878.5 μmol／L，48 h为406.7 μmol／L，72 h为283.3 μmol／L；氟唑帕利作用24 h时，药物有效浓度≥333.33 μmol／L后SKOV3／DDP细胞的细胞增殖率降低，与对照组比较差异均有统计学意义（均 P<0.05）；作用48 h和72 h时，药物有效浓度≥148.15 μmol／L后SKOV3／DDP细胞的细胞增殖率降低，与对照组比较差异均有统计学意义（均 P<0.05）；顺铂5 μg／ml+阿帕替尼64 μmol／L组较顺铂5 μg／ml组细胞增殖率降低[（40.4±1.4）%比（62.7±1.4）%， t＝20.22， P<0.001]；顺铂5 μg／ml+氟唑帕利290 μmol／L组较顺铂5 μg／ml组细胞增殖率降低[（5.2±0.4）%比（62.7±1.4）%， t＝52.04， P<0.001]；顺铂5 μg／ml+阿帕替尼64 μmol／L+氟唑帕利290 μmol／L组较顺铂5 μg／ml组细胞增殖率降低[（0.3±0.8）%比（62.7±1.4）%， t＝53.98， P<0.001]；顺铂5 μg／ml+阿帕替尼64 μmol／L+氟唑帕利290 μmol／L组SKOV3／DDP细胞增殖率最低，低于顺铂5 μg／ml+阿帕替尼64 μmol／L组及顺铂5 μg／ml+氟唑帕利290 μmol／L组（均 P<0.001）。 结论:阿帕替尼、氟唑帕利均增强人卵巢癌顺铂耐药细胞SKOV3／DDP的顺铂敏感性，且联合用药后抑制更强，可逆转卵巢癌顺铂耐药。

目的:探讨SET结构域分支型组蛋白赖氨酸甲基转移酶1（SETDB1）基因在卵巢高级别浆液性癌（HGSOC）组织中的表达，并探讨其对卵巢上皮性癌（卵巢癌）细胞增殖、侵袭能力的影响及其分子机制。方法:（1）收集2009年1月至2014年12月在郑州大学第一附属医院接受初次手术治疗且临床病理资料完整的90例HGSOC患者的癌组织标本，以同期收治的30例因子宫肌瘤行子宫及双侧附件切除术患者的正常卵巢组织标本为对照。应用荧光定量PCR技术、免疫组化法检测SETDB1 mRNA、蛋白在HGSOC组织、正常卵巢组织中的表达，分析SETDB1蛋白表达与HGSOC患者临床病理特征、预后的关系；（2）荧光定量PCR技术检测卵巢癌细胞系A2780、COC1、OVCAR3、SKOV3细胞中SETDB1 mRNA的表达。（3）过度表达及沉默SETDB1基因的卵巢癌细胞株的构建及筛选后，活细胞计数法检测转染后卵巢癌细胞的增殖能力，穿膜（transwell）小室实验检测转染后卵巢癌细胞的侵袭和迁移能力。（4）蛋白印迹（western blot）法检测转染后卵巢癌细胞中磷脂酰肌醇3激酶（PI3K）/蛋白激酶B（Akt）信号通路关键分子［包括磷酸化Akt（p-Akt）、磷酸化雷帕霉素靶蛋白（p-mTOR）］及上皮-间质转化（EMT）相关蛋白［包括E-钙黏蛋白（E-cadherin）、N-钙黏蛋白（N-cadherin）、锌指转录因子（Slug）、波形蛋白（vimentin）］的表达。结果:（1）与正常卵巢组织比较，HGSOC组织中STEDB1 mRNA、蛋白的表达水平均显著增高（ P均<0.01），且STEDB1蛋白表达与HGSOC患者的手术病理分期、淋巴结转移状态均显著有关（ P均<0.05）；Kaplan-Meier法生存分析显示，SETDB1蛋白阳性表达患者的中位总生存时间显著短于SETDB1阴性表达者（分别为31.0、43.4个月， P=0.020）。（2）卵巢癌细胞系A2780、COC1、OVCAR3、SKOV3细胞中SETDB1 mRNA的表达水平，均显著高于正常卵巢细胞系T29细胞（ P均<0.01）。（3）沉默SETDB1基因表达的SKOV3-shSETDB1-1、SKOV3-shSETDB1-2细胞的增殖、侵袭和迁移能力，均显著低于其对照SKOV3-NC细胞（ P均<0.01）；过度表达SETDB1基因的OVCAR3-SETDB1细胞的增殖、侵袭和迁移能力，均显著高于其对照OVCAR3-NC细胞（ P均<0.01）。（4）与对照SKOV3-NC细胞比较，沉默SETDB1基因表达的SKOV3-shSETDB1-1、SKOV3-shSETDB1-2细胞中p-Akt、p-mTOR、N-cadherin、Slug、vimentin蛋白的表达强度均显著降低，E-cadherin蛋白的表达强度均显著增高；与对照OVCAR3-NC细胞比较，过度表达SETDB1基因的OVCAR3-pSETDB1细胞中p-Akt、p-mTOR、N-cadherin、Slug、vimentin蛋白的表达强度显著增高，E-cadherin蛋白的表达强度显著降低。 结论:SETDB1基因在HGSOC组织和卵巢癌细胞中均呈高表达，过度表达SETDB1基因可促进卵巢癌细胞的增殖和侵袭，其作用机制可能与激活PI3K/Akt信号通路及促进肿瘤细胞EMT相关。

目的:探讨下调视黄醇结合蛋白2(RBP2)基因表达对卵巢癌细胞生物学特性的影响及其机制。方法:建立稳定下调RBP2表达的顺铂(DDP)耐药卵巢癌细胞株SKOV3/DDP-RBP2i，并设置阴性对照组和空白对照组。采用细胞计数盒8(CCK-8)法检测细胞增殖能力，流式细胞术检测细胞凋亡情况，划痕实验和Transwell侵袭实验检测细胞迁移和侵袭能力，实时荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)和Western blot法检测上皮-间质转化(EMT)相关分子标志物的表达。通过裸鼠移植瘤实验验证RBP2对卵巢癌生长的影响，采用美国TCGA数据库中的卵巢癌临床数据分析RBP2表达与肿瘤转移和患者预后的关系。结果:下调RBP2的表达后，SKOV3/DDP细胞的增殖能力明显下降，第5天时，SKOV3/DDP-RBP2i组、阴性对照组和空白对照组的增殖活性分别为(56.67±4.16)%、(84.67±3.51)%和(87.00±4.00)%，差异开始有统计学意义( P<0.001)。SKOV3/DDP-RBP2i组的凋亡率为(14.19±1.50)%，高于阴性对照组[(8.77±0.75)%]和空白对照组[(7.48±0.52)%， P<0.001]；侵袭细胞数为(55.20±2.39)个，低于阴性对照组和空白对照组[分别为(82.60±5.18)个和(80.80±7.26)个， P<0.001)]；划痕愈合率为(28.47±2.72)%，低于阴性对照组和空白对照组[分别为(50.58±4.06)%和(48.92±4.63)%， P<0.001]。SKOV3/DDP-RBP2i组细胞中E-cadherin的mRNA和蛋白表达量高于阴性对照组( P＝0.015， P<0.001)和空白对照组( P＝0.006， P<0.001)，N-cadherin的mRNA和蛋白表达量低于阴性对照组( P＝0.012， P<0.001)和空白对照组( P＝0.005， P<0.001)，vimentin的mRNA和蛋白表达量也低于阴性对照组( P＝0.016， P＝0.001)和空白对照组( P＝0.011， P＝0.001)。裸鼠接种细胞后，自第5周开始，SKOV3/DDP-RBP2i组、阴性对照组和空白对照组的肿瘤体积差异有统计学意义，SKOV3/DDP-RBP2i组的肿瘤体积小于阴性对照组和空白对照组( P＝0.001)。生物信息学分析显示，发生转移的卵巢癌患者RBP2表达量高于未转移者( P＝0.043)，RBP2高表达卵巢癌患者的生存时间(中位生存时间为41个月)短于RBP2低表达患者(中位生存时间为69个月， P<0.001)。 结论:下调RBP2表达可抑制卵巢癌细胞的迁移和侵袭能力，其机制可能与抑制EMT有关。

目的:探讨长链非编码RNA（lncRNA）FAM224A调控miRNA-590-3p（miR-590-3p）表达对卵巢癌细胞增殖及迁移的影响。方法:选择人卵巢癌细胞株OC3、SKOV-3、HO-8910、A2780及人正常卵巢上皮细胞株IOSE80，采用实时荧光定量聚合酶链反应（qRT-PCR）检测FAM224A在各个细胞株中的相对表达水平，筛选FAM224A相对表达水平最低的细胞株进行后续实验。将细胞分为FAM224A组（转染FAM224A模拟质粒）和对照组（转染对照模拟质粒），分别采用CCK-8法和细胞划痕实验检测两组细胞增殖和迁移能力。采用生物信息学网站LncBase v.2预测FAM224A可能互补结合的靶基因为miR-590-3p。qRT-PCR检测miR-590-3p和叉头框蛋白A2（FOXA2）mRNA的相对表达水平，蛋白质印迹法检测相关蛋白的表达情况。结果:卵巢癌细胞株OC3、SKOV-3、HO-8910、A2780及正常卵巢上皮细胞株IOSE80中FAM224A的相对表达水平分别为0.23±0.04、0.65±0.05、0.45±0.03、0.63±0.08和1.02±0.11，差异有统计学意义（ F=14.78， P<0.01），其中FAM224A相对表达水平最低的细胞株是OC3。CCK-8法检测结果显示，培养第2、3、4、5天，FAM224A组OC3细胞增殖能力均低于对照组（均 P<0.05）。FAM224A组和对照组OC3细胞的划痕愈合率分别为（18.6±2.3）%和（71.7±7.2）%，差异有统计学意义（ t=6.99， P<0.01）。FAM224A组和对照组OC3细胞中FAM224A相对表达水平分别为12.36±1.45和1.14±0.24（ t=13.08， P<0.01）；miR-590-3p相对表达水平分别为0.19±0.06和1.04±0.20（ t=4.01， P<0.01）；FOXA2 mRNA相对表达水平分别为6.37±1.37和1.05±0.08（ t=3.86， P<0.01）。与对照组比较，FAM224A组OC3细胞FOXA2蛋白表达升高，细胞增殖蛋白细胞周期蛋白依赖激酶2（CDK2）、cyclin D3表达均降低，细胞迁移蛋白Snail表达降低。 结论:FAM224A在卵巢癌细胞株中低表达，FAM224A通过抑制miR-590-3p表达降低卵巢癌OC3细胞的增殖和迁移能力。

目的:探索白头翁皂苷B4对卵巢癌SKOV3细胞株细胞增殖、凋亡及迁移的影响及其机制。方法:体外培养卵巢癌SKOV3细胞，利用CCK-8法检测不同浓度白头翁皂苷B4处理SKOV3细胞后其增殖情况，并计算IC 50值；流式细胞术检测IC 50值浓度下不同时间白头翁皂苷B4处理细胞后的凋亡情况；Transwell法检测IC 50值浓度白头翁皂苷B4处理细胞不同时间后细胞迁移和侵袭情况；Western blot检测细胞内相关蛋白表达量变化。 结果:白头翁皂苷B4能有效抑制SKOV3细胞的增殖，呈现出浓度依赖性，IC 50值为（6.08±0.56）μM，且抑制效果强于阳性对照药物顺铂，差异具有统计学意义（ P<0.05）；流式细胞术显示白头翁皂苷B4处理24 h后SKOV3细胞的凋亡比例为52.3%，且降低了Bcl-xl表达，上调了Bax，cleaved-caspase-3和PARP表达，且与0 h组相比差异具有统计学意义（ P<0.05）；白头翁皂苷B4能下调N-cadherin的表达，上调E-cadherin表达，进而抑制SKOV3细胞的迁移；白头翁皂苷B4能抑制JAK/STAT3信号通路蛋白的表达。 结论:白头翁皂苷B4能有效抑制卵巢癌细胞的增殖，并通过调控JAK/STAT3信号通路影响SKOV3细胞凋亡并抑制其发生迁移，白头翁皂苷B4在卵巢癌的治疗及新药开发中具有研究潜力。