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miR-1182在卵巢癌组织中的表达及对肿瘤细胞增殖与转移的影响
编辑人员丨6天前
目的:探讨miR-1182在卵巢癌组织中的表达及对肿瘤细胞增殖与转移的影响。方法:使用反转录聚合酶链式扩增(RT-PCR)技术检测正常卵巢组织和卵巢癌及相应癌旁组织中的miR-1182表达水平。用miR-1182 mimics病毒转染人卵巢癌细胞株SKOV-3,并用RT-PCR和Western Blot检测细胞的miR-1182和hTERT蛋白的表达水平。用噻唑兰法检测转染后的SKOV-3细胞的增殖与侵袭情况。结果:卵巢癌组织中miR-1182的表达水平明显低于正常卵巢组织与癌旁组织(均 P<0.05)。对于miR-1182表达水平,不同肿瘤分期、组织分化程度的患者间的差异有统计学意义(均 P<0.05),但患者年龄与肿瘤类型间的差异无统计学意义(均 P>0.05)。与空白病毒组和对照组相比,转染miR-1182后,转染组SKOV-3细胞的miR-1182表达水平明显升高(均 P<0.05),而hTERT蛋白表达明显降低(均 P<0.05)。转染组SKOV-3细胞在转然后24、48、72 h细胞增殖和迁移能力受到明显抑制(均 P<0.05)。 结论:miR-1182在卵巢癌组织中低表达,过表达miR-1182可抑制卵巢癌的增殖与侵袭能力,其可能通过靶向调节hTERT的表达实现调控作用。
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编辑人员丨6天前
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红景天苷通过LINC01207-miRNA-1182信号通路对前列腺癌细胞增殖和侵袭的影响
编辑人员丨6天前
目的:探讨红景天苷对前列腺癌PC-3M细胞增殖和侵袭的影响及可能的分子机制。方法:分别采用不同浓度(0、50、100、150、200 nmol/L)的红景天苷处理PC-3M细胞48 h。采用MTS法检测红景天苷对PC-3M细胞增殖的影响。选择抑制作用最显著的红景天苷浓度处理的PC-3M细胞为红景天苷组,采用以0.9% NaCl注射液处理的PC-3M细胞为对照组。采用Transwell实验检测红景天苷对PC-3M细胞侵袭的作用。通过GEPIA数据库在线分析LINC01207在前列腺癌组织和癌旁组织中的表达差异。采用实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测红景天苷作用后PC-3M细胞中LINC01207和miRNA-1182的表达情况。采用蛋白质印迹法检测红景天苷作用后PC-3M细胞中增殖和侵袭相关蛋白的表达。结果:采用0、50、100、150、200 nmol/L红景天苷处理后,前列腺癌PC-3M细胞吸光度( A)值分别为0.98±0.17、0.72±0.08、0.47±0.10、0.12±0.03、0.42±0.05,差异有统计学意义( F=42.02, P<0.05),150 nmol/L的红景天苷抑制作用最明显,选择150 nmol/L红景天苷(红景天苷组)用于后续实验。对照组和红景天苷组PC-3M细胞侵袭数分别为(80±11)个和(36±13)个( t=5.15, P<0.05)。通过GEPIA数据库在线分析显示,LINC01207在前列腺癌组织中的表达高于癌旁组织( P<0.01)。qRT-PCR结果显示,对照组和红景天苷组PC-3M细胞中LINC01207的相对表达量分别为6.2±1.1和1.2±0.7,红景天苷组PC-3M细胞中LINC01207表达低于对照组( t=7.88, P<0.01);miRNA-1182的相对表达量分别为1.00±0.20和7.02±0.35,红景天苷组PC-3M细胞中miRNA-1182表达高于对照组( t=30.07, P<0.01)。蛋白质印迹法结果显示,红景天苷处理PC-3M细胞后,细胞增殖蛋白CDK2、cyclin E表达均降低,细胞侵袭蛋白CD147、基质金属蛋白酶(MMP)-2、MMP-9表达亦均降低。 结论:红景天苷通过下调LINC01207表达激活miRNA-1182表达,从而抑制前列腺癌PC-3M细胞增殖和侵袭。
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编辑人员丨6天前
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非小细胞肺癌组织miR-1179、miR-1182表达水平与Notch信号通路、临床病理特征和预后的关系
编辑人员丨2023/12/30
目的:探讨非小细胞肺癌(NSCLC)组织微小核糖核酸(miRNA)-1179、miR-1182表达与缺口(Notch)信号通路、临床病理特征和预后的关系.方法:选取2018年1月~2019年12月武汉市中医医院收治的118例NSCLC患者,收集手术切除的癌组织和癌旁组织标本,采用实时荧光定量聚合酶链式反应检测miR-1179、miR-1182和Notch信号通路相关分子表达.分析miR-1179、miR-1182表达与Notch信号通路相关分子和NSCLC患者临床病理特征的关系.根据NSCLC组织中miR-1179、miR-1182表达均值分为高、低表达组,采用K-M法绘制不同miR-1179、miR-1182表达NSCLC患者生存曲线,多因素Cox回归分析NSCLC患者预后的影响因素.结果:与癌旁组织比较,NSCLC组织中miR-1179、miR-1182表达降低,Notch受体1(Notch1)信使核糖核酸(mRNA)、Notch2 mRNA、Notch3 mRNA、Notch4 mRNA 表达升高(P<0.05).Pearson 相关性分析显示,NSCLC 组织中 miR-1179、miR-1182 表达与 Notch1 mRNA、Notch2 mRNA、Notch3 mRNA、Notch4 mRNA 表达均呈负相关(P<0.05).不同分化程度、TNM分期、淋巴结转移NSCLC患者miR-1179、miR-1 182表达比较有统计学差异(P<0.05).118例NSCLC患者随访3年,失访5例,3年总生存率为55.75%.K-M生存曲线分析显示,miR-1179、miR-1 182高表达组总生存率高于低表达组(P<0.05).多因素Cox回归分析显示,低分化、TNM分期Ⅲ期、淋巴结转移为NSCLC患者预后的独立危险因素,miR-1179、miR-1182升高为其独立保护因素(P<0.05).结论:NSCLC组织中miR-1179、miR-1 182低表达,与Notch信号通路、分化程度、TNM分期、淋巴结转移和预后有关,miR-1179、miR-1182表达可能通过抑制Notch信号通路发挥抑癌作用.
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编辑人员丨2023/12/30
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Circ_0080425通过miR-1182/FGF9轴影响高糖环境下血管内皮细胞功能
编辑人员丨2023/9/30
目的 探讨circ_0080425 调控高糖环境下内皮功能的作用及分子机制.方法 采用qRT-PCR检测在高糖环境下培养的人血管内皮细胞(human vascular endothelial cells,HUVECs)中circ_0080425 的表达变化,通过小干扰RNA(siRNA)对circ_0080425 进行敲低,并利用CCK-8、平板克隆、Transwell和流式细胞术,观察circ_0080425 对高糖培养下的HUVECs增殖、迁移以及凋亡等生物学特性的影响.利用生物信息学网站预测circ_0080425 的下游miRNA以及靶基因,并通过双荧光素酶报告实验验证分子间的相互结合.此外,通过sponge慢病毒以及质粒转染对目标分子的表达水平进行调控,并采用CCK-8、平板克隆、Transwell和流式细胞术等进行功能学验证.结果 Circ_0080425 在高糖培养条件下HUVECs中表达上调,且circ_0080425可通过miR-1182/FGF9轴调控高糖条件下HUVECs的增殖、迁移和凋亡(P<0.05).结论 Circ_0080425可通过miR-1182/FGF9 轴影响高糖环境下的血管内皮功能.
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编辑人员丨2023/9/30
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circFAT1对胶质母细胞瘤细胞生物过程的机制研究
编辑人员丨2023/8/26
目的 探讨circFAT1吸附miR-1182调控转化生长因子(TGF)-β/Smad信号通路对胶质母细胞瘤(GBM)增殖、侵袭、上皮-间充质转化(EMT)的调控作用及机制.方法 收集50例GBM样本和5例非瘤脑组织(NBT)样本,随机抽取3例GBM和3例NBT样本进行组织RNA测序.体外培养GBM细胞系U87、U251、T98G、LN229及星形胶质细胞系NHA,通过qRT-PCR检测组织和细胞系中circFAT1表达.通过RNase R选择性降解线性转录本以明确circFAT1成环特性.将GBM细胞分为sh-对照组和sh-circFAT1组,采用慢病毒进行转染.转染后集落形成实验、Transwell实验、Western blot实验分别检测细胞增殖、侵袭及EMT能力.荧光原位杂交(FISH)检测circFAT1在GBM细胞内定位,通过双萤光素酶报告基因和RNA免疫共沉淀(RIP)实验验证circFAT1和miR-1182的相互作用.Western blot实验验证敲低circFAT1后或抑制miR-1182表达对TGF-β/Smad信号通路的调控作用.结果 circFAT1在GBM组织和细胞中表达增加(P<0.05).RNase R可减少线性FAT1表达(P<0.05),而不影响circFAT1.敲除circFAT1抑制了GBM细胞的增殖、侵袭和EMT(P<0.05).双萤光素酶报告基因和RIP实验证实circFAT1靶向结合miR-1182.敲低circFAT1后TGFB2、p-SMAD2、p-SMAD3蛋白表达下降,抑制miR-1182表达后GFB2、p-SMAD2、p-SMAD3蛋白表达升高.结论 敲除circFAT1可抑制GBM细胞增殖、侵袭和EMT,其作用机制可能与吸附miR-1182调控TGF-β/Smad信号通路有关.
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编辑人员丨2023/8/26
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鼻咽癌易感TERT基因的多种靶microRNA在鼻咽癌患者血清中表达量变化及其临床诊断价值
编辑人员丨2023/8/6
目的 探讨鼻咽癌易感TERT基因多种靶 miRNA在鼻咽癌患者血清中含量对临床诊断的价值.方法 收集在本医院就诊60例鼻咽癌者及60例健康者外周血,RT-PCR法检测外周血中mir-138、mir-491、mir-181、 mir-1207、mir-346、mir-512-5P、mir-299、mir-1266、 mir-1182相对表达量差异,分析mir-1182含量与鼻咽癌患者临床病理特征相关性.结果 鼻咽癌患者血液中mir-346、 mir-512-5P、mir-299、mir-1266、 mir-1182含量低于健康对照组,mir-1182差异显著 (P<0. 01) ; Ⅲ~Ⅳ期、肿瘤直径≥5 cm及癌转移者血清中mir-1182含量分别低于I-Ⅱ期、肿瘤直径<5 cm及无转移患者(P<0. 05) ; mir-1182诊断 AUC为0. 851 (95%CI: 0. 782~0. 919),灵敏度65%,特异度93. 3%.结论 鼻咽癌患者血清中mir-1182含量与肿瘤大小、有无淋巴结转移、TNM分期、病理分期负相关,可见mir-1182有较好诊断效能,具有鼻咽癌临床诊断运用价值.
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编辑人员丨2023/8/6
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泌尿系统肿瘤长链非编码RNA UCA1的生物信息学分析
编辑人员丨2023/8/6
目的 分析长链非编码RNA (lncRNA) UCA1在泌尿系统肿瘤中的表达及其对肿瘤患者的意义,并对UCA1的下游靶基因预测, 为UCA1在泌尿系统肿瘤中的功能研究提供生物信息学数据.方法 利用UALCAN数据库分析人膀胱癌 ( bladder carcinoma, BC) 中UCA1的差异表达, 并对UCA1进行生存分析;利用RegRNA2. 0和HMDD预测UCA1调控的膀胱癌的microRNAs; 通过Real-time PCR实验验证筛选出的靶基因; 利用TargetScan、 StarBase和miRDB平台软件预测microRNAs下游的靶基因; 采用FunRich平台对预测的靶基因进行Gene Ontology (GO) 分析、 KEGG信号通路及转录因子富集分析.结果 通过分析UAL-CAN数据库发现, UCA1在膀胱癌表达量相比正常膀胱组织有明显升高, 在肾透明细胞癌 ( KIRC) 中的表达量和正常肾组织无显著差别, 而在乳头状肾细胞癌 ( KIRP) 中UCA1 的表达相比正常反而降低.随着UCA1的表达升高患者总生存期下降, 病理分级越高UCA1的表达量越高, 男性中的UCA1表达量明显高于女性. RegRNA软件和HMDD v3. 0数据库预测, 发现hsa-miR-1182和hsa-miR-203-3p与膀胱癌中UCA1呈正相关.经Real-time PCR验证筛选 UCA1 与 hsa-miR-203-3p 表达趋势一致.在生物学功能研究过程中, hsa-miR-203-3p的靶基因在碱基、核苷、核苷酸及核酸代谢及基因转录等过程中发挥重要的调节功能.对KEGG信号通路分析中, microRNA靶基因主要富集在LKB1信号通路调控过程.对hsa-miR-203a-3p靶基因调节的转录因子分析, 发现主要集中在POU2 F1和EGR1两个转录因子.结论 UCA1在膀胱肿瘤中高表达, 有望成为肿瘤诊断和治疗的潜在分子标志物.通过生物信息学方法对UCA1的靶基因预测, 可为深入研究UCA1调控BC的作用机制提供更全面的研究线索.
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编辑人员丨2023/8/6
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血清miR-1182、CRNDE水平与鼻咽癌淋巴结转移的相关性
编辑人员丨2023/8/5
目的 探讨鼻咽癌(NPC)患者血清微小核糖核酸-1182(miR-1182)、结直肠肿瘤差异表达基因(CRNDE)的表达及其与NPC淋巴结转移的关系.方法 前瞻性选取93例NPC患者为研究对象,参照相关标准评估淋巴结转移情况并分组;设计基线资料填写表,记录并比较2组基线资料,重点比较2组血清miR-1182、CRNDE表达,分析miR-1182、CRNDE与NPC淋巴结转移的关系.结果 93例NPC患者,56例发生淋巴结转移,转移率为60.22%.淋巴结转移组血管内皮生长因子(VEGF)、CRNDE表达高于未转移组,miR-1182表达低于未转移组,差异有统计学意义(P<0.05),组间其他基线资料比较差异无统计学意义(P>0.05);经二元Logistic回归分析后建立多元回归模型,结果显示,VEGF、miR-1182、CRNDE异常表达可能与NPC患者淋巴结转移有关,VEGF过表达、miR-1182低表达、CRNDE过表达可能是NPC患者淋巴结转移的风险因子(OR>1,P<0.05).绘制ROC曲线发现,当miR-1182、CRNDE cut-off值分别取0.585、3.565时,预测NPC淋巴结转移风险的AUC分别为0.809、0.808,均有一定预测价值.结论 NPC患者就诊时多数已伴有淋巴结转移,可能与miR-1182低表达、CRNDE过表达有关.未来可考虑通过检测NPC患者就诊时的血清miR-1182、CRNDE水平来辅助评估患者淋巴结转移情况,可能对指导早期合理治疗的展开有积极意义.
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编辑人员丨2023/8/5
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circ_0000218通过靶向吸附miR-1182对宫颈癌HeLa细胞增殖、迁移和侵袭的影响
编辑人员丨2023/8/5
目的:探讨环状RNA 0000218 (circ_0000218)是否通过靶向吸附miR-1182从而影响宫颈癌HeLa细胞增殖、迁移和侵袭。方法:采用实时荧光定量PCR (RT-qPCR)技术分析43例宫颈癌患者癌组织、癌旁组织中circ_0000218和miR-1182的表达水平。根据转染序列不同分为si-NC组、si-circ_0000218组、miR-NC组、miR-1182组、pcDNA组、pcDNA-circ_0000218组、si-circ_0000218+anti-miR-NC组、si-circ_0000218+anti-miR-1182组。运用细胞计数试剂盒(CCK-8)法、Transwell实验分析circ_0000218和miR-1182表达对HeLa细胞增殖、迁移和侵袭的影响。蛋白质印迹法检测Ki-67、基质金属蛋白酶2 (MMP-2)和MMP9蛋白表达。双荧光素酶报告实验和RT-qPCR分析circ_0000218和miR-1182的靶向关系。癌旁组织与宫颈癌组织比较采用配对t检验,两组间比较采用独立样本t检验进行统计学分析。结果:宫颈癌组织中circ_0000218表达量高于癌旁组织(4.17±0.32比1.00±0.05),而miR-1182表达量低于癌旁组织(0.33±0.03比1.00±0.05),差异具有统计学意义(P均< 0.001)。与si-NC组比较,si-circ_0000218组HeLa细胞增殖活力(0.86±0.04比0.37±0.03)、迁移数量[(86.73±7.13)个比(38.52±3.19)个]和侵袭数量[(66.80±4.95)个比(26.58±2.55)个]以及Ki-67 (0.57±0.05比0.18±0.02)、MMP-2 (0.74±0.07比0.28±0.03)和MMP-9蛋白表达量(0.64±0.04比0.22±0.02)降低,差异有统计学意义(P均< 0.001)。与miR-NC组比较,miR-1182组HeLa细胞增殖活力(0.88±0.04比0.46±0.04)、迁移数量[(89.74±5.53)个比(46.63±3.79)个]和侵袭数量[(68.03±4.34)个比(34.63±3.37)个]以及Ki-67 (0.59±0.04比0.24±0.02)、MMP- 2 (0.76±0.05比0.33±0.03)和MMP-9蛋白表达量(0.66±0.04比0.29±0.03)降低,差异有统计学意义(P均< 0.001)。circ_0000218靶向负调控miR-1182表达。与si-circ_0000218+ anti-miR-NC组比较,si-circ_0000218+ anti-miR-1182组HeLa细胞增殖活力(0.35±0.03比0.76±0.04)、迁移数量[(35.58±3.11)个比(77.04±4.08)个]和侵袭数量[(25.44±2.29)个比(57.61±3.47)个]以及Ki-67 (0.16±0.02比0.46±0.04)、MMP- 2 (0.26±0.02比0.65±0.04)和MMP-9蛋白表达量(0.20±0.02比0.57±0.04)升高,差异有统计学意义(P均< 0.001)。结论:circ_0000218通过靶向吸附miR-1182可促进宫颈癌HeLa细胞增殖、迁移和侵袭。
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编辑人员丨2023/8/5
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circ_0000069通过靶向miR-1182调控骨肉瘤MG-63细胞增殖、迁移和侵袭的机制研究
编辑人员丨2023/8/5
目的 探讨circ_0000069对骨肉瘤MG-63细胞增殖、迁移和侵袭的影响及其分子机制.方法 选取该院2017年1月至2019年1月的30例骨肉瘤组织及匹配的癌旁组织;体外培养MG-63细胞,将其分为si-NC、si-circ_0000069、miR-NC、miR-1182、si-circ_0000069+anti-miR-NC、si-circ_0000069+anti-miR-1182组;RT-qPCR检测circ_0000069和miR-1182的表达;分别利用MTT、Transwell、Western blot检测细胞的活性、迁移侵袭和相关蛋白表达;双荧光素酶报告基因实验检测circ_0000069和miR-1182的靶向关系.结果 与癌旁组织比较,骨肉瘤组织中circ_0000069表达显著升高,miR-1182表达显著降低(P<0.05).敲除circ_0000069或过表达miR-1182显著降低MG-63细胞的OD值、迁移和侵袭细胞数及CyclinD1、MMP-2、MMP-9蛋白表达,升高p21蛋白表达(P<0.05).circ_0000069靶向调控miR-1182表达(P<0.05).下调miR-1182逆转了敲除circ_0000069对MG-63细胞增殖、迁移和侵袭的影响(P<0.05).结论 敲除circ_0000069可能通过靶向上调miR-1182抑制骨肉瘤MG-63细胞的增殖、迁移和侵袭.
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编辑人员丨2023/8/5
