目的:探讨初诊重型再生障碍性贫血（SAA）患者外周血CD8 +T细胞信号转导淋巴细胞激活分子家族6（SLAMF6）表达与穿孔素、颗粒酶B的相关性及其临床意义。 方法:收集2016年1月至2019年6月河南省人民医院收治的32例初诊SAA患者的血常规及骨髓象等指标并采集外周血标本进行回顾性分析，采用流式细胞术检测患者初诊时及治疗结束后半年［移植11例，免疫抑制治疗（IST）21例］的标本中CD8 +T细胞SLAMF6表达量、穿孔素及颗粒酶B分泌量。采用Pearson法分析临床指标与标本检测结果相关性，并以10名健康人的外周血标本（正常对照组）及13例初诊骨髓增生异常综合征/阵发性睡眠性血红蛋白尿症（MDS/PNH）患者（MDS/PNH组）为对照进行SLAMF6表达量、穿孔素及颗粒酶B分泌量的比较。 结果:（1）初诊时：SAA组SLAMF6表达量为（56.40±6.37）%，明显低于正常组的（84.34±5.81）%和MDS/PNH组的（82.24±4.98）%（ P均<0.001）；SAA组穿孔素的表达量为（32.73±8.46）%，高于正常组的（23.75±5.10）%和MDS/PNH组的（26.12±5.53）%（ P均<0.05）；SAA组颗粒酶B的表达量为（36.23±7.94）%，高于正常对照组的（21.67±5.05）%和MDS/PNH组的（21.79±5.10）%（ P均<0.001）。SAA患者SLAMF6表达量与血红蛋白（ r=0.804）、网织红细胞绝对值（ r=0.656）、骨髓粒系百分比（ r=0.643）、骨髓红系百分比（ r=0.622）均呈正相关（ P均<0.05），与CD8 +T细胞穿孔素（ r=-0.792）、颗粒酶B（ r=-0.908）均呈负相关（ P均<0.001）。（2）治疗后：30例SAA存活患者外周血CD8 +T细胞SLAMF6表达量高于治疗前［（79.19±12.69）%比（56.40±6.37）%， P<0.001］，穿孔素、颗粒酶B表达量均低于治疗前（ P均<0.05）。11例移植患者CD8 +T细胞SLAMF6表达量高于移植前［（86.54±3.75）%比（56.40±7.35）%， P<0.001］，穿孔素、颗粒酶B表达量低于移植前（ P均<0.05）。12例IST有效患者CD8 +T细胞SLAMF6表达量高于初诊时，其穿孔素、颗粒酶B表达量均低于治疗前（ P均<0.05）；7例IST无效患者CD8 +T细胞SLAMF6表达量、穿孔素、颗粒酶B表达量与治疗前比较，差异无统计学意义（ P均>0.05）。 结论:SLAMF6在初诊SAA患者中低表达，与CD8 +T细胞效应因子呈负相关，或作为负性调控因子参与SAA患者CD8 +T细胞免疫调控，SLAMF6在造血恢复后明显上调，而治疗无效患者无明显变化，或可作为诊断SAA或评价SAA临床疗效的指标。

目的:运用生物信息学方法探讨甲型流感病毒所致肺损伤的可能机制。方法:从Gene Expression Ominbus（GEO）数据库中选择基因表达谱GSE57455、GSE63786和GSE64800，通过GEO2R工具在线分析，筛选出差异表达基因（DEGs），基于STRING构建蛋白互作网络图，筛选出显著模块；并对获取的DEGs进行Gene Ontology（GO）分析和Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes（KEGG）通路富集分析。通过Cystoscape软件筛选出具有高度连接性的关键基因，并构建生物学功能图。结果:筛选得到119个交集DEGs，其中上调基因有106个，下调基因13个。GO分析显示，DEGs显著富集于免疫应答、细胞分裂等生物学过程中；显著富集于细胞外间隙、胞外区部分等细胞组成上；显著富集于趋化因子活性、细胞因子受体结合等分子功能上。KEGG通路富集显示，DEGs显著富集于细胞因子及受体相互作用信号通路、趋化因子等信号通路。同时，共筛选得到7个关键基因：FIGNL1、GBP5、ICOS、ARG1、IRF7、CYSLTR1和SLMAF8，其富集作用主要在免疫应答、精氨酸代谢、B细胞反应等生物学功能。结论:FIGNL1介导的肺组织细胞受损、IRF7和GBP5介导的Ⅰ型IFN反应、ARG1介导的精氨酸代谢以及ICOS、CYSLTR1和SLAMF8介导的趋化因子和炎性因子的活化与甲型流感病毒所导致的肺损伤密切相关。

多发性骨髓瘤(MM)是常见的血液肿瘤，患者预后较差，目前其主要治疗方法为多药联合治疗。其中，单克隆抗体与免疫调节药(IMiD)联合治疗MM是相关研究热点，并取得可观临床效果。埃罗妥珠单抗(elotuzumab)是一种人源化免疫球蛋白(Ig)Gκ单克隆抗体，靶向作用于MM细胞中高表达的信号淋巴细胞激活分子(SLAMF)7，是MM的首个免疫刺激疗法药物。埃罗妥珠单抗与IMiD(来那度胺、沙利度胺、泊马度胺)联合治疗复发/难治性MM(RRMM)，对延长患者生存期具有重要意义。近年来，埃罗妥珠单抗联合IMiD治疗新诊断MM的临床试验亦正在开展中，但疗效尚存争议。笔者拟对埃罗妥珠单抗的作用机制，埃罗妥珠单抗联合IMiD治疗RRMM和新诊断MM患者的疗效及不良反应的研究进展进行综述，旨在对单克隆抗体联合IMiD应用于MM患者的治疗提供理论依据。

目的 探讨细胞表面受体信号淋巴细胞激活分子家族成员 7(signaling lymphocytic activation molecule family member 7,SLAMF7)在小鼠肠道正常组织和炎症组织中的表达及意义.方法 选择 8～10 周龄C57BL/6J野生型(wild-type)雄性小鼠5只,正常饮用水喂养,提取其结肠固有层淋巴细胞(lamina propria lymphocytes,LPLs)和肠上皮细胞(intestinal epithelial cells,IECs),Trizol试剂提取细胞总RNA,逆转录聚合酶链式反应(reverse transcription polymerase chain reaction,RT-PCR)和实时荧光定量聚合酶链式反应(real-time fluorescence quantitative polymerase chain reaction,RT-qPCR)检测细胞中SLAMF7的mRNA表达情况.选择8～10周龄C57BL/6J野生型雄性小鼠10 只,随机分为对照组和模型组,每组各5只.对照组用正常饮用水喂养,模型组用含2.5%葡聚糖硫酸酯钠盐(dextran sodium sulfate,DSS)的饮用水喂养,建立小鼠溃疡性结肠炎(ulcerative colitis,UC)模型.于喂养第5 天处死两组小鼠,采用流式细胞术检测对照组与模型组SLAMF7在免疫细胞亚群中的表达情况.结果 相较于结肠IECs,SLAMF7在结肠LPLs中表达显著升高(P=0.017);DSS诱导肠炎后,SLAMF7在中性粒细胞中的表达上调(P=0.001),在CD4+T淋巴细胞、CD8+T淋巴细胞、CD19+B淋巴细胞、巨噬细胞、经典树突状细胞(conventional dendritic cells,cDCs)中的表达无明显变化(P均＞0.05).结论 SLAMF7可能通过中性粒细胞相关途径在UC的发生发展过程中发挥重要作用.

目的:探讨嘌呤能受体X1(P2RX1)与浆液性卵巢癌(OV)患者的临床病理指标及肿瘤微环境免疫细胞浸润的关系,为OV免疫治疗提供新的线索.方法:以OV患者的血清和卵巢癌组织为研究对象,分别以健康成年人和非癌症患者为对照,采用免疫组织化学(IHC)、逆转录荧光定量PCR(RT-qPCR)、酶联免疫吸附试验(ELISA)及生物信息学方法研究OV中P2RX1的表达模式.利用TCGA数据库分析P2RX1 mRNA的表达水平与OV患者不同临床病理指标的相关性;筛选差异基因,分析OV中P2RX1参与的信号通路及其生物学功能;分析P2RX1与免疫细胞浸润丰度、肿瘤免疫相关基因、免疫检查点等的相关性.结果:IHC检测结果显示,P2RX1主要表达于正常卵巢上皮中;RT-qPCR检测结果显示,与非癌组织相比,P2RX1 mRNA在OV中低表达(P<0.05);ELISA分析结果显示,与正常对照血清相比,P2RX1蛋白在OV患者血清中低表达(P<0.05).检索TCGA数据库,结果显示高表达P2RX1的OV患者总生存期较长,预后较好(P<0.05).P2RX1与OV患者的肿瘤纯度和年龄有关(P<0.05).富集分析结果显示不同P2RX1表达水平的OV患者其差异表达基因主要富集于免疫细胞分化、发育等生物学进程.P2RX1与OV中TGFB1、SLAMF7、CD27等多个免疫检查点有关.P2RX1与B细胞标记包括CD79A、CD79B、CD19明显正相关(均为r>0.4,P<0.05).结论:在OV中P2RX1的低表达与患者预后不良有关,P2RX1可能参与OV肿瘤微环境免疫细胞浸润、分化等进程.

浆母细胞淋巴瘤(plasmablastic lymphoma,PL/PBL)是一种罕见的淋巴瘤类型,具有较强的侵袭能力,预后差,目前缺乏严格的诊断及治疗标准,除了传统的浆细胞标记物作为诊断依据,SLAMF7可能是PBL诊断标志物的有用补充.高强度的化疗方案联合硼替佐米或来那度胺可能有望成为PBL的一线治疗选择.在二线治疗中,免疫检查点抑制剂、CAR-T及新型靶向药物等新的治疗方法似乎能进一步改善PBL患者的生存.本文主要就PBL的诊断及鉴别、一线治疗及复发难治性PBL的治疗等方面进行综合性回顾,以便对该病进行进一步探究.

目的 探寻能有效区分类风湿关节炎(RA)和骨关节炎(OA)的潜在生物标志物,并探讨二者在生物信息学方面差异的意义.方法 从基因表达综合(GEO)数据库下载2份RA和OA作为相互对照样品的公开可用基因表达谱(GSE55235、GSE55457数据集),并筛选OA与RA的差异表达基因(DEG).采用LASSO 回归模型和SVM-RFE算法识别并筛选生物标志物,在验证组(GSE55584数据集)中进行受试者操作特征(ROC)曲线验证,利用ROC曲线下面积(AUC)值评估辨别能力.利用CIBERSORT算法与筛选出的生物标志物预估RA与OA的生物信息学关联.结果 共鉴定出410个DEG,涉及多种信号通路、细胞组分、分子功能和疾病.特征基因有COPZ2、FAH、IL15RA、LTC4S、SCRG1、SFRP1和SLAMF8共7个,且ROC曲线验证结果符合预期.免疫细胞浸润分析显示,巨噬细胞M1、CD8+T细胞、静息肥大细胞、浆细胞、静息树突状细胞等与特征基因相关.结论 基于免疫细胞浸润的模型可用于预测RA与OA的鉴别诊断,为RA与OA的治疗靶点提供了新的视角.

目的 研究树突状细胞(dendritic cell,DC)经沙棘黄酮(Seabuckthorn flavones,SF)处理后形态、表型与基因表达谱的变化.方法 DC培养液中添加SF 200μg/ml,培养7 d后光镜观察形态学变化;流式细胞术检测DC表面标记;构建RNA文库进行数字基因表达谱(DGE)分析,筛选差异表达基因,分析富集的gene ontology(GO)以及Kyoto encyclopedia of genes and genomes(KEGG)信号通路.结果 SF处理后,流式结果显示DC显著上调表达HLA-DR、CD80、CD83、CD86;DGE筛选出差异表达基因355个,上调176个,下调179个,GO富集主要在调节免疫系统过程、免疫系统发育等生物学途径;信号通路分析表明,显著富集的途径与炎症、免疫系统和癌症等疾病密切相关.结论 SF能促进DC共刺激分子与促成熟分子的上调表达,并对CD11a、SLAMF6、LMCD1、TSC22D3和IKZF3等免疫相关基因的表达有调节作用.

多发性骨髓瘤(MM)是一种浆细胞恶性肿瘤,目前仍无法治愈.嵌合抗原受体T细胞(CAR-T)疗法是一种前景乐观的MM治疗方法,其作用机制与标准MM治疗方法完全不同.CAR是一种包含抗原识别域和T细胞信号域的融合蛋白,通过基因改造后表达CAR的T细胞可以特异性识别抗原.理想的CAR靶向抗原要求仅在恶性细胞上表达,而正常细胞缺失或少量表达.目前正在研究的作为CAR靶向的MM抗原包括B细胞成熟抗原、CD138、CD38、淋巴细胞激活信号分子7(SLAMF7)、K轻链以及CD19等.MM基因和表型的异质性,使得对MM进行有效治疗的CAR-T需要靶向多个抗原;CAR-T联合其他骨髓瘤治疗也是未来研究的一个重要领域.MM的CAR-T疗法尚处于早期发展阶段,但有望改善MM的治疗.

目的 检测系统性红斑狼疮(SLE)患者外周血中CCR7loPD-1hi滤泡辅助性T细胞(Tfh)的比例,并探讨其临床意义.方法 收集31例SLE患者、29例类风湿关节炎(RA)患者、12例干燥综合征(SS)患者和37名健康对照的外周血样本.采用流式细胞术检测Tfh表面C-X-C趋化因子受体3(CXCR3)、诱导型共刺激分子(ICOS)和信号淋巴细胞激活分子家族成员5(SLAMF5)的表达水平,以及外周血中CCR7loPD-1hi Tfh和CCR7hiPD-1lo Tfh的比例.分析SLE患者外周血中CCR7loPD-1hi Tfh的比例与临床指标、成浆细胞比例的相关性.结果 相比CCR7hiPD-1lo Tfh,CCR7loPD-1hi表面CXCR3、ICOS和SLAMF5的表达水平较高(t=3.73、5.06、8.27,P均<0.01).SLE和RA患者外周血中CCR7loPD-1hi Tfh的比例分别为5.79％(2.97％,8.95％)和4.57％(2.51％,7.60％),均高于健康对照组[2.93％(1.63％,5.21％),U=314.5、332.5,P均<0.01],而SS患者外周血中CCR7loPD-1hi Tfh的比例与健康对照相比差异无统计学意义(U=183.0,P>0.05).SLE患者外周血中CCR7loPD-1hi Tfh的比例与系统性红斑狼疮疾病活动指数(SLEDAI)、抗双链DNA抗体滴度、成浆细胞比例均呈正相关(r=0.4471、0.5174、0.4669,P均<0.05).结论 SLE患者外周血中CCR7loPD-1hi Tfh比例增加与SLEDAI升高和成浆细胞比例的增加相关,检测患者外周血Tfh亚群可间接反映生发中心及B淋巴细胞的功能状态,对SLE的诊断、监测和预后有重要意义.