-
SoxC基因家族在肿瘤发生发展中的作用及其临床意义
编辑人员丨6天前
SoxC转录因子组是一类参与基因转录、翻译和表达的重要蛋白质分子,可以通过特异性结合相应靶基因或蛋白调节基因的表达。SoxC基因家族具有独特的分子结构特征,其成员Sox4、Sox11、Sox12分别在多种肿瘤中出现异常表达,可作为不同种肿瘤的诊断及预后标志物。研究SoxC转录因子家族的致病机制及其临床意义,可以增加SoxC作为肿瘤治疗靶点的证据。
...不再出现此类内容
编辑人员丨6天前
-
SOX家族基因在男性性别决定及男性生殖功能中的作用研究进展
编辑人员丨6天前
SOX家族基因由于与SRY基因结构域相似而得名。在SOX家族基因中,SRY基因是哺乳动物性腺分化决定基因,直接决定了性腺向睾丸分化的方向;SOX9基因是性别分化过程中启动睾丸发育程序的重要基因;与SOX9结构域相似的SOX8、SOX2基因则在男性性发育与维持男性生殖功能中起到一定的作用。这些SOX家族基因的序列中都包含一段高度保守的结构域HMG序列。HMG的编码产物中都包含一组由79个氨基酸组成的蛋白质,起到结合和弯曲DNA的作用。因此,这些SOX家族基因的功能类似。该文综述了SRY、SOX9、SOX8、SOX2等SOX家族基因在男性性别决定及男性生殖功能中的作用研究进展。
...不再出现此类内容
编辑人员丨6天前
-
基于甲基丙烯酸酐化明胶悬滴培养小鼠毛乳头细胞制备仿生毛乳头球的生物活性及其在裸鼠中的毛发诱导功能
编辑人员丨6天前
目的:探讨基于甲基丙烯酸酐化明胶(GelMA)仿生微环境与悬滴法三维培养小鼠毛乳头细胞(DPC)制备仿生毛乳头球的生物活性及其在裸鼠中的毛发诱导功能。方法:采用实验研究方法。采用酶消化法获取雄性5~6周龄C57BL/6J小鼠触须毛的DPC以及1 d龄C57BL/6J小鼠皮肤角质形成细胞(KC),经免疫荧光法鉴定前者第3代细胞稳定表达DPC标志物神经细胞黏附分子、碱性磷酸酶(ALP)、β连环蛋白及α平滑肌肌动蛋白,后者原代细胞稳定表达KC标志物角蛋白15。取第8代DPC,用GelMA重新悬浮并接种至Transwell孔板插件底面,光交联后倒置培养,于光学显微镜下观察培养0(即刻)、3 d GelMA悬滴中DPC聚集情况(聚集成球即仿生毛乳头球),采用活/死染色试剂盒检测培养3 d仿生毛乳头球中细胞活性。将传统二维培养的原代DPC、第8代DPC以及按前述方法制备的仿生毛乳头球分别设为原代DPC组、第8代DPC组、仿生毛乳头球组,利用高通量测序技术平台对每组培养3 d的3个样本中DPC进行转录组测序,利用基迪奥生物信息云工具平台(OmicShare Tools)对转录组数据进行主成分分析、Pearson相似性分析、差异表达基因筛选,利用时间序列趋势分析软件对差异表达基因进行表达模式聚类分析,利用基迪奥生物信息云工具平台对具有特定表达模式的差异表达基因进行京都基因与基因组百科全书(KEGG)和基因本体论(GO)富集分析。同前进行细胞分组,采用随机数字表法从差异表达基因中抽取性别决定区Y框蛋白8( SOX8)、基质金属蛋白酶9( MMP- 9)、26型胶原纤维α1( COL26A1)、无翅型MMTV整合位点家族成员6( Wnt6),采用实时荧光定量反转录PCR(RT-PCR)法验证差异表达基因mRNA表达情况与测序结果的一致性(样本数为9);采用实时荧光定量RT-PCR法检测DPC生物功能标志物成纤维细胞生长因子7(FGF7)、Wnt10a、淋巴样增强因子1(LEF1)、ALP、β连环蛋白、多功能蛋白聚糖、SOX2的mRNA表达情况(样本数为9)。取3只5~6周龄雄性BALB/c裸鼠,分别设为原代DPC组、第8代DPC组、仿生毛乳头球组,将原代DPC、第8代DPC、仿生毛乳头球分别与原代KC以2∶1细胞数比例混合后分别注射至相应组别裸鼠皮下,每只注射6个区域。注射后2周,取注射区域全厚皮,计数再生毛发,行苏木精-伊红染色后观察再生毛囊情况。对数据行单因素方差分析、Tukey检验并进行Bonferroni校正。 结果:培养3 d,DPC在GelMA悬滴中由培养0 d的分散状态聚集成仿生毛乳头球,制备的仿生毛乳头球中细胞活性良好。培养3 d,主成分分析显示,相比于第8代DPC组,原代DPC组、仿生毛乳头球组组内样本间变异程度较低,仿生毛乳头球组与原代DPC组组间样本变异程度最低,3组DPC样本超过90%的基因谱数据变异可由第1个和第2个主要成分来解释;Pearson相似性分析显示,组内样本重复性好,原代DPC组和仿生毛乳头球组样本间的相关系数为0.84~0.95,原代DPC组和第8代DPC组样本间的相关系数为0.72~0.87;3组DPC间差异表达基因分析筛选出642个组间交集差异表达基因,对其进行表达模式聚类显示有2种基因表达模式有显著趋势( P<0.05),分别为第8代DPC组基因表达显著低于原代DPC组/仿生毛乳头球组、第8代DPC组基因表达显著高于原代DPC组/仿生毛乳头球组,共包含411个差异表达基因;KEGG富集分析显示这411个差异表达基因在Wnt信号通路以及磷脂酰肌醇3激酶-蛋白激酶B信号通路显著富集( P<0.05),GO富集分析表明细胞外基质、经典Wnt信号通路、细胞分化等GO术语被显著富集( P<0.05)。与原代DPC组、仿生毛乳头球组比较,第8代DPC组细胞基因 SOX8、MMP- 9、COL26A1、Wnt6 mRNA表达量均明显下降( q=15.950、8.854、11.890、11.050,9.851、5.884、7.418、4.870, P<0.01),与测序数据一致。与原代DPC组、仿生毛乳头球组比较,第8代DPC组细胞生物功能标志物FGF7、Wnt10a、LEF1、ALP、β连环蛋白、多功能蛋白聚糖、SOX2 mRNA表达量均明显下降( q=11.470、9.795、4.165、9.242、10.970、10.570、8.005,7.472、4.976、3.651、4.784、5.236、6.825、5.214, P<0.05或 P<0.01)。注射后2周,第8代DPC组裸鼠无毛发再生,仿生毛乳头球组与原代DPC组裸鼠再生毛发数量相近( q=1.852, P>0.05)且均显著高于第8代DPC组( q=18.980、17.130, P<0.01);第8代DPC组裸鼠注射区域皮肤仅形成了坏死灶,而仿生毛乳头球组与原代DPC组裸鼠注射区域皮肤均观察到再生毛囊且毛囊横断切面有黑色素沉着。 结论:基于GelMA仿生微环境与悬滴法三维培养小鼠DPC制备仿生毛乳头球的培养模型可一定程度上恢复高传代DPC在裸鼠中的毛发诱导能力,且其生物特性更加类似于原代DPC,可实现DPC的扩增后特性恢复。
...不再出现此类内容
编辑人员丨6天前
-
血小板计数、癌胚抗原和蛋白基因产物9.5对晚期非小细胞肺癌患者疗效和预后的价值
编辑人员丨6天前
目的:探究血小板计数(PLT)、癌胚抗原(CEA)和蛋白基因产物9.5(PGP9.5)水平对晚期非小细胞肺癌(NSCLC)患者疗效和预后的预测价值。方法:本研究为回顾性队列研究。采用非随机抽样的方法纳入2016年1月至2022年12月在空军军医大学唐都医院确诊并接受紫杉类+顺铂化疗方案治疗的62例晚期NSCLC患者。采用电话和门诊随访的方式对患者的预后情况进行追踪调查,随访时间至少半年,随访截止日期为2023年6月。评估所有患者化疗后6个月的疗效,根据实体瘤疗效评价标准将所有患者分为进展组(疾病进展,37例)和缓解组(完全缓解+部分缓解+疾病稳定,25例)。收集患者的一般资料(性别、年龄、吸烟史、手术史、临床分期和病理类型),化疗前1周PLT、肿瘤标志物[鳞状细胞癌相关抗原(SCC)、铁蛋白(FRT)、细胞角蛋白19片段(CYFRA21-1)、CEA、肿瘤标志物糖类抗原50(CA50)、神经元特异性烯醇化酶(NSE)、糖类抗原125(CA125)]水平和肺癌自身抗体(抑癌基因53(P53)、PGP9.5、肿瘤/睾丸抗原G抗原7(GAGE7)、三磷酸腺苷结合RNA解旋酶自身抗体4-5(GBU4-5)、性别决定基因家族2(SOX2)、黑色素瘤抗原A1(MAGEA1)、肿瘤相关基因(CAGE))水平。比较2组患者一般资料,化疗前PLT、肿瘤标志物和肺癌自身抗体的水平。采用受试者操作特征(ROC)曲线分析化疗前PLT、肿瘤标志物和肺癌自身抗体对晚期NSCLC患者疗效的预测效能。采用多因素logistic回归分析确定影响晚期NSCLC患者疗效的独立危险因素。采用Kaplan-Meier法绘制生存曲线,Log-rank检验比较不同表达水平的各独立危险因素患者的生存状态。结果:缓解组中男17例,女8例,年龄62.0(53.0,69.0)岁;进展组中男27例,女10例,年龄63.0(56.0,69.0)岁。2组患者的临床分期比较差异有统计学意义( χ2=1.98, P=0.048);性别、年龄、吸烟史、手术史和病理类型比较,差异均无统计学意义(均 P>0.05)。进展组患者化疗前PLT、CEA、CA125、PGP9.5、GBU4-5和CAGE的表达水平均高于缓解组,差异均有统计学意义(均 P<0.05)。2组患者化疗前FRT、NSE、CYFRA21-1、CA50、SCC、P53、SOX2、GAGE7和MAGEA1水平比较,差异均无统计学意义(均 P>0.05)。ROC曲线分析显示,PLT、CEA、CA125、PGP9.5、GBU4-5和CAGE预测NSCLC患者疗效的曲线下面积分别为0.756(95% CI:0.614~0.874)、0.854(95% CI:0.746~0.947)、0.760(95% CI:0.633~0.887)、0.788(95% CI:0.664~0.912)、0.739(95% CI:0.604~0.875)和0.741(95% CI:0.608~0.875),最佳截断值分别为221.00×10 9/L、5.00 U/L、35.00 U/L、3.08 U/ml、9.91 U/ml和0.37 U/ml,预测效能良好。多因素logistic回归分析显示,PLT>221.00×10 9/L、CEA>5.00 U/L和PGP9.5>3.08 U/ml是影响晚期NSCLC患者疗效的独立危险因素( OR值分别为1.015、1.191、1.906,均 P<0.05)。所有患者总体的中位生存时间为12.22个月(95% CI:9.02~15.43)。PLT高表达(>221.00×10 9/L)患者的中位生存时间为22.00个月(95% CI:18.65~25.35),PLT低表达(≤221.00×10 9/L)的中位生存时间为27.00个月(95% CI:19.28~34.73),化疗前PLT低表达患者的生存状态优于PLT高表达患者( χ2=9.00, P=0.003)。CEA高表达(>5.00 U/L)患者的中位生存时间为18.80个月(95% CI:13.12~22.89),CEA低表达(≤5.00 U/L)的中位生存时间为27.30个月(95% CI:24.31~29.69),化疗前CEA低表达患者的生存状态优于CEA高表达患者( χ2=7.29, P=0.016)。PGP9.5高表达(>3.08 U/ml)患者的中位生存时间为7.76个月(95% CI:4.76~9.24),PGP9.5低表达(≤3.08 U/ml)的中位生存时间为25.31个月(95% CI:22.81~27.16),化疗前PGP9.5低表达患者的生存状态优于PGP9.5高表达患者( χ2=21.66, P<0.001)。 结论:PLT、CEA和PGP9.5的表达水平可用于晚期NSCLC患者化疗疗效预测和预后评估。
...不再出现此类内容
编辑人员丨6天前
-
萝卜硫素通过促进前额发育和神经元分化促进大脑类器官生长
编辑人员丨6天前
目的:通过比较不同时期大脑类器官脑区分化和神经细胞标志物的改变,分析萝卜硫素对大脑类器官发育的影响及可能机制。方法:使用萝卜硫素处理人诱导多能干细胞分化形成的大脑类器官。实验组为不同浓度(1 μmol/L、2 μmol/L、5 μmol/L)萝卜硫素处理组,对照组为空白对照组,每组20个类器官。采用免疫荧光、苏木精-伊红染色法观察比较萝卜硫素处理后不同时期脑区标志物和神经细胞标志物表达特点;RNA测序分析差异表达基因并进行基因本体论(Gene Ontology,GO)和京都基因与基因组百科全书(Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes,KEGG)功能富集分析;实时定量反转录聚合酶链反应(real-time quantitative reverse transcriptase-mediated polymerase chain reaction,qRT-PCR)进一步筛选验证可能参与萝卜硫素促进大脑类器官生长潜在基因或可能的靶点。结果:加入萝卜硫素处理40 d的大脑类器官中性别决定区Y框蛋白2(sex determining region Y-box 2,SOX2)、前脑标志蛋白叉头框G1(forkhead box G1,FOXG1)、前额叶皮质孤独症易感候选基因2(autism susceptibility candidate 2,AUST2)、配对盒基因6(paired box 6,PAX6)表达明显增强;加入萝卜硫素处理70 d大脑类器官中神经元标志蛋白神经元Ⅲ型β-微管蛋白(β-tubulin,TUJ1)、神经元核(neuronal nuclei,NeuN)、微管相关蛋白2(recombinant microtubule associated protein 2,MAP2)、T脑蛋白家族1(T-brain-1,TBR1)等表达增强。RNA测序分析显示,相比于对照组,实验组显著上调基因105个,下调基因512个,共617个。qRT-PCR验证差异表达基因(SFTPC、AKR1C3、CXCR6、PRAP1、TMC8、GPR182、F2RL2、KCNJ10)的转录水平与测序结果基本一致。结论:差异表达基因AKR1C3、KCNJ10可能参与萝卜硫素促进大脑类器官前额发育和神经元分化,这有助于为萝卜硫素改善精神疾病和神经退行性疾病患者的认知和症状提供证据支持。
...不再出现此类内容
编辑人员丨6天前
-
肿瘤相关自身抗体检测在肺癌早期筛查及诊断中的研究进展
编辑人员丨6天前
肺癌发病率及死亡率高,患者5年生存率较低,低剂量CT是主要的筛查方式,但存在假阳性率高和辐射暴露的问题。因此,需要开发更经济有效和无创的筛查方法。目前研究较热的肺癌相关自身抗体,常见的有抑癌基因产物 p53、性别决定区Y框蛋白( SOX2)、蛋白基因产物9.5( PGP 9.5)以及肿瘤-睾丸基因家族,包括肿瘤相关基因( CAGE) 、三磷酸腺苷结合RNA解旋酶自身抗体4-5( GBU4-5)、G抗原7( GAGE7)、黑色素瘤抗原A1( MAGEA1)。肿瘤相关自身抗体谱检测或与肿瘤自身抗原联合检测在肺癌的早期筛查及早期诊断中都显示出较好的特异度及灵敏度;联合低剂量CT可提高早期肺癌诊断的特异度,降低假阳性率,在一定程度上提高早期肺癌的诊断效能。本文就肿瘤相关自身抗体在肺癌早期筛查及诊断领域的研究进展进行综述。
...不再出现此类内容
编辑人员丨6天前
-
46,XX男性性反转综合征1例报道并文献复习
编辑人员丨1个月前
46,XX男性性反转综合征是一种罕见的性分化异常疾病,发病率约为 1:20 000[1],患者具有女性核型却为男性表型,此类患者睾丸发育不良,无精子发生,少数患者伴有尿道下裂和男性乳房发育,大多数因为生育障碍就诊时而被发现[2].
...不再出现此类内容
编辑人员丨1个月前
-
SOX2影响PD-L1表达参与乳腺癌细胞免疫逃逸的机制探讨
编辑人员丨2024/6/15
目的:探讨转录因子性别决定区Y框蛋白2(SOX2)基因通过诱导程序性死亡因子配体1(PD-L1)表达,促进乳腺癌细胞免疫逃逸的作用机制.方法:qRT-PCR和Western blot法检测人乳腺癌细胞系MDA-MB-231、SK-BR-3和正常乳腺上皮细胞系MCF10A中SOX2、PD-L1、T细胞免疫球蛋白及粘蛋白结构域分子3(TIM3)和核受体亚家族4A组成员1(NR4A1)的mRNA表达量及对应蛋白表达量.分别构建SOX2敲减质粒NC和si-SOX2并转染MDA-MB-231,与细胞因子诱导的杀伤细胞构建共培养体系,连续培养48h,MTT法检测细胞增殖率,TUNEL法检测细胞凋亡率,乳酸脱氢酶(LDH)释放实验检测T细胞杀伤率,ELISA检测T细胞活化标志物IL-2和IFN-γ,qRT-PCR检测T细胞耗竭标志物PD-1、TIM3和NR4A1 mRNA表达量.结果:与MCF10A相比,MDA-MB-231与SK-BR-3中SOX2、PD-L1、TIM3、NR4A1的mRNA表达量及对应蛋白表达量均显著升高(P<0.05).与空白组和NC组相比,si-SOX2组SOX2 mRNA和PD-L1蛋白表达量明显下降,细胞增殖率显著下降,细胞凋亡率增加,T细胞杀伤率增加,IL-2和IFN-γ水平升高,PD-1、TIM3和NR4A1 mRNA表达量降低(P<0.05).结论:SOX2基因可能通过诱导PD-L1高表达,进而促使乳腺癌细胞免疫逃逸的能力增强,沉默SOX2表达可以增强T细胞杀伤力,抑制肿瘤增殖,SOX2基因有望成为乳腺癌干预的重要分子靶点.
...不再出现此类内容
编辑人员丨2024/6/15
-
示-环指长比与6个指骨发育相关基因多态性的关联性
编辑人员丨2024/5/11
目的 探讨 6 个指骨发育相关基因,即成纤维细胞生长因子受体 2(FGFR2)、印度刺猬信号分子(IHH)、Msh同源盒 1(MSX1)、Runx家族转录因子 2(RUNX2)、SRY盒转录因子 9(SOX9)及 Wnt家族成员 5A(WNT5A)13 个位点单核苷酸多态性(SNP)与人类示-环指长比(2D∶4D)的关联性.方法 采用数码相机拍摄宁夏地区 731 名在校大学生(男性 358 名,女性 373 名)手部正面照片,采用GraphPad Prism 8.0 图像分析软件标记解剖点并测量示(2)指及环(4)指指长;多重PCR法进行 6 个基因 13 个SNP位点(rs1047057、rs755793、rs41258305、rs3731881、rs3100776、rs12532、rs3821949、rs45585135、rs3749863、rs1042667、rs12601701、rs1829556 和rs3732750)的基因分型;单因素方差分析或独立样本t检验间接评估 2D∶4D与 13 个SNP位点间的关联性.结果 宁夏大学生女性左手和右手 2D∶4D均显著高于男性(均P<0.01);13 个SNP位点基因型、等位基因频率在不同性别间的差异均无显著统计学意义(均P>0.05);不同性别中,男性左手 2D∶4D与SOX9 基因rs12601701 位点基因型显著关联(P<0.05),右手 2D∶4D与WNT5A基因rs1829556 位点基因型显著关联(P<0.05);女性右手2D∶4D与MSX1 基因rs12532(P<0.01)和rs3821949(P<0.05)位点基因型显著关联.结论 SOX9(rs12601701)、WNT5A(rs1829556)、MSX1(rs12532 和rs3821949)基因多态性可能与宁夏地区人群 2D∶4D的形成有关.
...不再出现此类内容
编辑人员丨2024/5/11
-
CircRHOT1调节miR-187-3p/SOX4轴对乳腺癌细胞增殖、凋亡和免疫逃逸的影响
编辑人员丨2024/4/27
目的:研究环状RNA ras同源物基因家族成员T1(CircRHOT1)调节miR-187-3p/性别决定区Y框蛋白4(SOX4)轴对乳腺癌细胞增殖、凋亡和免疫逃逸的影响.方法:采用实时荧光定量PCR和Western blot检测体外培养的人正常乳腺上皮细胞MCF-10A和乳腺癌细胞MCF-7、Hs-578T、MDA-MB-231中CircRHOT1、miR-187-3p与SOX4表达;将体外培养的MCF-7细胞随机分为对照组、CircRHOT1敲低(转染CircRHOT1 siRNA质粒)组、miR-187-3p mimics(转染miR-187-3p mimics)组、共转染阴性对照(转染空载质粒和miR-187-3p inhibitor阴性对照)组、CircRHOT1敲低+miR-187-3p inhibitor(转染Cir-cRHOT1 siRNA质粒和miR-187-3p inhibitor)组,分组转染后,采用实时荧光定量PCR和免疫印迹检测各组细胞CircRHOT1、miR-187-3p与SOX4表达;采用EdU染色和平板集落形成实验检测各组细胞增殖;采用流式细胞术检测各组细胞凋亡;采用免疫荧光染色检测各组细胞凋亡相关蛋白Bax和Bcl-2表达比值(Bax/Bcl-2).各组细胞与人外周血淋巴细胞共培养并分组转染后,采用流式细胞术检测各组人外周血淋巴细胞中活化CD8+T细胞比例;采用MTT法检测人外周血淋巴细胞对各组MCF-7细胞的杀伤率.采用双荧光素酶报告实验检测MCF-7细胞CircRHOT1对miR-187-3p、miR-187-3p对SOX4的靶向调控.结果:与人正常乳腺上皮细胞MCF-10A相比,人乳腺癌MCF-7、Hs-578T、MDA-MB-231细胞CircRHOT1、SOX4蛋白与mRNA表达明显升高(P<0.05),miR-187-3p表达明显降低(P<0.05).与对照组相比,CircRHOT1敲低组、miR-187-3p mimics组细胞SOX4蛋白与mRNA表达、EdU阳性率、集落生成率降低(P<0.05),miR-187-3p表达、凋亡率、Bax/Bcl-2、人外周血淋巴细胞中活化CD8+T细胞比例及其对MCF-7细胞杀伤率升高(P<0.05).与CircRHOT1敲低组相比,CircRHOT1敲低+miR-187-3p inhibitor组细胞CircRHOT1表达差异无统计学意义(P>0.05),SOX4蛋白与mRNA表达、EdU阳性率、集落生成率升高(P<0.05),miR-187-3p表达、凋亡率、Bax/Bcl-2、人外周血淋巴细胞中活化CD8+T细胞比例及其对MCF-7细胞杀伤率降低(P<0.05);共转染阴性对照组细胞各指标差异无统计学意义(P>0.05).结论:敲低CircRHOT1可通过上调miR-187-3p而降低SOX4表达,从而减弱乳腺癌细胞增殖活性,并促进其凋亡,还可抑制CD8+T细胞活化并增强其癌细胞杀伤力,减弱乳腺癌细胞免疫逃逸.
...不再出现此类内容
编辑人员丨2024/4/27
