目的 制备靶向抗T细胞免疫球蛋白-ITIM结构域蛋白(T cell immune receptor with Ig and ITIM domains,TIGIT)和脊髓灰质炎病毒受体相关免疫球蛋白结构域蛋白(Poliovirus re-ceptor-related immunoglobin domain-containing protein,PVRIG)双特异抗体,探究其体外生物学活性.方法 用PVRIG人源化抗体hP1和TIGIT人源化抗体hT1构建KY-TIGIT-hlgG4M-PVRIG-SCFV双特异性抗体,将纯化得到KY-TIGIT-hlgG4M-PVRIG-SCFV抗体进行SDS-PAGE凝胶电泳、热稳定性检测和稳定性分析;采用流式细胞术(Fluorescence activated cell sor-ting,FACS)检测双特异性抗体的结合活性;采用生物干涉膜技术(Bio-layer interferometry,BLI)检测双特异性抗体亲和力;用 Jurkat-NFAT-Luc2-PD1-TIGIT-PVRIG 细胞和 293T-OS8-PVRL2-PDL1细胞中检测双特异性抗体KY-TIGIT-hlgG4M-PVRIG-SCFV对于TIGIT/PVRIG靶点的阻断作用;采用CMV recall assay法检测IFN-r在上清液中的浓度.结果 SDS-PAGE凝胶电泳结果显示KY-TIGIT-hlgG4M-PVRIG-SCFV双特异性抗体纯度＞95％;Tm结果为Tm1:66.34,Tm2:80.95.采用SEC-HPLC对双特异性抗体KY-TIGIT-hlgG4M-PVRIG-SCFV进行稳定性分析,其纯度均＞90％.KY-TIGIT-hlgG4M-PVRIG-SCFV抗体和PVRIG的人源化抗体hP1与293T-PVRIG cell line 的 EC50 分别为 0.168 70 μg/mL 和 0.038 65 μg/mL,与 293T-cyno-PVRIG cell line 的 EC50 分别为 0.037 14 μg/mL 和 0.031 98 μg/mL,与 Human PVRIG Protein,His Tag的亲和力为 1.74E-10M 和 1.69E-10M.KY-TIGIT-hlgG4M-PVRIG-SCFV 抗体和 TIGIT 的人源化抗体 hT1 与 293T-PVRIG cell line 的 EC50 分别为 0.070 27 μg/mL 和 0.031 21 μg/mL;与293T-cyno-TIGIT cell line 的 EC50 分别为 0.020 28μg/mL 和 0.028 22 μg/mL;与 Human TIGIT Protein,His Tag 的亲和力为 8.50E-10M 和 8.47E-10M.KY-TIGIT-hlgG4M-PVRIG-SCFV 抗体具有阻断 PD1/PDL1/TIGIT/PVRIG 相互作用活性,且 KY-TIGIT-hlgG4M-PVRIG-SCFV 的 EC50为 0.007 μg/mL,优于单独人源化抗体 hT1(EC50为 0.013 μg/mL)和 hP1(EC50为 0.048 μg/mL)的作用.在含 pp65 peptide 条件下 KY-TIGIT-h1gG4M-PVRIG-SCFV 抗体分泌 IFN-r 为 349.72 pg/mL,明显高于其他抗体.结论 KY-TIGIT-hlgG4M-PVRIG-SCFV抗体具有高亲和力和良好的生物学活性,有望开发成为肿瘤免疫治疗的抗体药物.

目的:探讨再生障碍性贫血（AA）患者外周血CD8 +T细胞中胸腺细胞选择相关高迁移率族蛋白（TOX）与不同抑制性受体的表达水平，并进行相关性分析。 方法:回顾性选择2019年9月至2020年11月天津医科大学总医院血液科AA患者27例，其中男21例，女6例，年龄［ M（ Q1， Q3）］48（30，72）岁。健康对照者33名，其中男17名，女16名，年龄 46（27，69）岁。通过流式细胞术检测AA患者及健康对照者外周血CD8 +T细胞中TOX、程序性细胞死亡受体-1（PD-1）、T细胞免疫球蛋白和黏蛋白结构域-3（TIM-3）、细胞毒性T淋巴细胞相关抗原-4（CTLA-4）、具有免疫球蛋白（Ig）和免疫受体酪氨酸抑制基序（ITIM）结构域的T细胞免疫受体（TIGIT）、穿孔素、颗粒酶B的表达水平。TOX表达水平与不同抑制性受体的相关性采用Pearson相关性分析。 结果:AA患者外周血CD8 +T细胞TOX、PD-1、TIM-3、CTLA-4、TIGIT、穿孔素、颗粒酶B的表达水平分别为47.33%（41.47%，56.61%）、（30.61±12.37）%、（39.94±10.84）%、（6.21±3.40）%、（51.45±20.21）%、（71.32±22.46）%、（52.39±23.99）%，均高于健康对照组的27.32%（21.64%，46.96%）、（21.29±10.01）%、（21.11±3.00）%、（1.31±0.34）%、（30.80±13.40）%、（46.72±22.53）%、（21.75±16.43）%（均 P<0.05）。CD8 +T细胞TOX的表达水平与PD-1、TIM-3、CTLA-4、TIGIT、穿孔素、颗粒酶B的表达水平均呈正相关（ r=0.49、0.65、0.70、0.54、0.58、0.48，均 P<0.05）。 结论:AA患者外周血CD8 +T细胞TOX与不同抑制性受体的表达水平均高于健康对照组，且TOX表达水平与不同抑制性受体表达水平均呈正相关。

新型免疫检查点靶标如淋巴细胞激活基因-3、T细胞免疫球蛋白黏蛋白-3、T细胞免疫球蛋白和ITIM结构域、T细胞活化的V结构域免疫球蛋白、B7同系物3、B和T淋巴细胞弱化子在肿瘤治疗中具有重要作用，阻断它们可延缓肿瘤生长、增强免疫细胞抗肿瘤作用、提高宿主存活率，虽然这些新型免疫检查点处于研究的早期阶段，但随着科技的不断发展，其在肿瘤免疫治疗中将发挥越来越重要的作用。

CD155（PVR/Necl-5）是一种细胞黏附分子，在肿瘤进展中发挥重要作用。CD155通过调节肿瘤相关信号通路，影响细胞增殖、迁移侵袭及黏附；或与免疫细胞上的DNAX辅助分子-1、T细胞免疫球蛋白和ITIM结构域和CD96相互作用，影响T细胞及自然杀伤细胞功能。在多种类型肿瘤细胞上均检测到CD155表达上调，且与患者预后不良密切相关，可作为预测肿瘤患者生存的生物标志物。CD155及其相应受体有望成为免疫疗法的新型靶点，在肿瘤治疗领域具有极大潜力。本文将从CD155基本结构、生物学功能及其与肿瘤诊断、预后和免疫治疗等方面对CD155研究进展作一综述。

小细胞肺癌（SCLC）是一种高度侵袭性疾病，生长迅速并容易出现转移。患者通常对初始化疗有反应，但SCLC极易复发进展，导致长期结局不佳。免疫治疗的出现改变了SCLC的治疗模式。目前部分免疫检查点抑制剂已被批准用于广泛期SCLC的治疗，各类临床试验正在积极开展，显示出可观的临床获益。针对新型免疫检查点如抗T细胞免疫球蛋白和免疫受体酪氨酸抑制基序（ITIM）结构域蛋白抗体的研究也在探索中，部分免疫联合抗血管生成药物或放疗的临床试验已显示出较好的疗效及安全性，为SCLC的治疗提供了新的思路，但联合治疗的具体模式还需要更多研究进行探索，且免疫治疗仍存在治疗耐药等问题。本文综述了免疫检查点抑制剂治疗局限期及广泛期SCLC的研究进展，同时探索免疫治疗联合其他治疗方式的疗效及不良反应，并从寻找分子生物标志物筛选获益人群和克服免疫治疗耐药等方面分析了SCLC免疫治疗的挑战。

近年来，免疫检查点抑制剂在肺癌的治疗中是一个里程碑式的突破。免疫检查点种类较多，包括程序性死亡蛋白-1(PD-1)、程序性死亡蛋白配体-1(PD-L1)、细胞毒性T淋巴细胞抗原4(CTLA-4)、杀伤细胞免疫球蛋白样受体(KIR)、T细胞免疫球蛋白和ITIM结构域蛋白(TIGIT)、细胞免疫球蛋白和黏蛋白3(TIM-3)等，与免疫治疗的疗效及耐药密切相关。PD-1/PD-L1抑制剂已被中国国家药品监督管理局及美国食品药品监督管理局批准用于肺癌的一线治疗，可延长患者的总生存期及无进展生存期。CTLA-4抑制剂或TIGIT抑制剂联合PD-1/PD-L1抑制剂的双免疫治疗亦取得良好疗效，但可能发生更严重的不良事件。KIR及TIM-3靶点与免疫治疗的耐药性密切相关。

T细胞免疫球蛋白和免疫受体抑制性基序(immunoreceptor tyrosine-based inhibitory motif，ITIM)结构域(T cell immunoglobulin and ITIM domain, TIGIT)是脊髓灰质炎病毒受体家族中的一种抑制性受体，高表达于自然杀伤细胞、调节性T细胞和滤泡辅助T细胞，通过与CD226分子竞争性结合CD155及CD112发挥其抑制作用。最新研究显示，TIGIT高表达与移植物抗宿主病(graft-versus-host disease, GVHD)的低发生率密切相关，因此进一步研究TIGIT分子发挥抑制作用的具体机制，对GVHD的免疫治疗具有重大意义。文章介绍了TIGIT分子的结构及抑制功能，并对TIGIT分子在GVHD中作用的最新研究进展进行综述，旨在为TIGIT在GVHD中的应用提供一定的理论依据。

T细胞免疫球蛋白和免疫受体酪氨酸抑制性基序结构域[T-cell immunoglobulin and immuno-receptor tyrosine-based inhibitory motif(ITIM)domain,TIGIT]是一种在免疫细胞表面表达的穿膜糖蛋白.TIGIT在膀胱癌中表达上调,会对膀胱癌的发生发展及不良预后产生重要影响,阻断TIGIT信号的免疫治疗有望改善膀胱癌患者的预后.随着研究的深入,TIGIT很有可能成为膀胱癌诊断和治疗的靶点.现对TIGIT的结构、免疫调节功能及其在膀胱癌治疗中的应用进行综述.

目的 检测类风湿性关节炎(RA)患者外周血CD56+T细胞的比例变化以及含免疫球蛋白和免疫受体酪氨酸抑制基序结构域的T细胞免疫受体(TIGIT)在CD56+T细胞表面的表达,探讨TIGIT在RA中对CD56+T细胞功能的影响.方法 选取50例RA患者及20例健康人,采用流式细胞术检测外周血CD56+T细胞的比例,并且分析CD56+T细胞比例与疾病临床指标的相关性;流式细胞术检测RA患者外周血CD56+T细胞表达TIGIT的水平;密度梯度离心法分离外周血单个核细胞并进行培养;流式细胞术检测RA患者外周血表达γ干扰素(IFN-γ)、白细胞介素17A(IL-17A)的CD56+T细胞的比例;探究IFN-γ和IL-17A在TIGIT-CD56+T细胞与TIGIT+CD56+T细胞之间的表达差异;ELISA检测RA患者血清IL-17A的水平.结果 与健康对照组相比,RA患者外周血CD56+T细胞的比例降低,表达IL-17A的CD56+T细胞的比例显著降低;RA患者血清中IL-17A的水平升高.RA患者的CD56+T细胞高表达TIGIT分子,IFN-γ主要来源于TIGIT-CD56+T细胞;表达IL-17A的TIGIT-CD56+T细胞与TIGIT+CD56+T细胞的比例无明显差异.结论 TIGIT的异常表达影响CD56+T细胞分泌因子的功能,进而参与RA疾病进程.并且IFN-γ主要来源于TIGIT-CD56+T细胞,TIGIT可能不影响CD56+T细胞的IL-17A分泌水平.

程序性死亡蛋白-1和程序性死亡蛋白配体-1(programmed death-1/programmed death-ligand 1,PD-1/PD-L1)作为一种抑制T细胞活化的调节性免疫检查点分子,在肿瘤的免疫治疗发挥着重要的作用.近年来,越来越多的靶向治疗药物得到研发,但是单一免疫检查点阻断剂并不能很好的抑制肿瘤的发生,肿瘤逃逸现象时有发生,而靶向药物的联合治疗可作为抑制肿瘤发生发展的重要手段之一.属于 1型脊髓灰质炎病毒受体的抑制性受体 T 细胞免疫球蛋白和免疫受体酪氨酸抑制基序(immunorecept-or tyrosine-based inhibition motif,ITIM)结构域(T cell immunoglobulin and ITIM domain,TIGIT)是近年靶向药物治疗研究的热点,其与PD-1/PD-L1的联合治疗可减少肿瘤逃逸,更有效地抑制肿瘤的发生.因此,本文就TIGIT和PD-1/PD-L1双重阻断途径在肿瘤免疫治疗中的研究进展进行归纳总结,旨在肿瘤免疫治疗提供一定的理论依据.