T细胞免疫球蛋白黏蛋白域分子(T cell immunoglobulin domain and mucin domain protein，TIM)-4是只表达于抗原提呈细胞(antigen-presenting cell，APC)表面TIM基因家族的成员之一。TIM-4作为TIM-1天然配体，这两者相互作用可调节T细胞的活化与增殖。TIM-4的另一配体为磷脂酰丝氨酸(phosphatidylserine，PS)，TIM-4与PS结合起促进巨噬细胞对凋亡细胞的吞噬作用。大量研究表明，TIM-4异常表达与病毒感染免疫应答调节、抗病毒免疫反应、慢性病毒感染疾病及恶性肿瘤等密切相关。文章就TIM-4在病毒相关疾病感染中的表达及机制作用进行综述。

目的:探讨微波消融(MWA)对肺癌抗肿瘤的影响与作用机制。方法:将1×10 6肺癌细胞系3LL皮下注射到6～8周的雄性C57BL/6J小鼠背部两侧，当肿瘤最大径长到7 mm时，随机分为对照组和MWA组，对一侧肿瘤进行MWA处理，每隔1 d监测对侧肿瘤生长。在MWA后的第8天，运用流式细胞术对肿瘤微环境(TME)中免疫细胞群体比例及功能进行分析。在MWA后的1 d腹腔注射程序性死亡受体1(PD-1)或者细胞毒性T淋巴细胞相关蛋白4(CTLA-4)抑制剂(200 μg/只)，每隔1 d监测对侧肿瘤生长。采用独立样本 t检验比较两组间差异。使用双向方差分析来比较肿瘤生长曲线。 结果:与对照组比较，MWA有效抑制小鼠对侧肿瘤生长，差异有统计学意义(780.70±239.90比1 794.00±195.20， t＝3.275， P<0.01)。MWA组小鼠对侧TME中CD3 ＋T细胞(79.02±3.61比62.22±3.59， t＝3.300， P<0.05)、CD4 ＋T细胞(33.26±1.73比25.80±1.68， t＝2.686， P<0.05)和CD8 ＋T细胞(26.26±1.01比21.64±1.40， t＝3.096， P<0.05)比例显著高于对照组。MWA组小鼠肿瘤浸润Ly6G ＋MDSC细胞群体比例(33.00±3.25比44.86±1.46， t＝3.327， P<0.05)显著低于对照组。对CD4 ＋T细胞的功能以及增殖分析表明，MWA组小鼠γ-干扰素(IFN-γ) ＋CD4 ＋T细胞(20.39±1.84比3.05±0.47， t＝7.827， P<0.01)、TNF-α ＋CD4 ＋T细胞(17.25±2.64比5.61±1.11， t＝3.571， P<0.05)和细胞核增殖抗原(Ki-67) ＋CD4 ＋T细胞(90.68±0.81比81.55±1.37， t＝6.108， P<0.01)比例显著高于对照组。此外，MWA组小鼠IFN-γ ＋CD8 ＋T细胞(37.46±5.09比6.84±1.52， t＝4.973， P<0.01)和Ki-67 ＋IFN-γ ＋CD8 ＋T细胞(35.75±4.62比6.55±1.48， t＝5.204， P<0.01)比例显著高于对照组。对T细胞表面免疫检查点分子表达分析表明，MWA组小鼠T细胞免疫球蛋白及黏蛋白结构域分子3(TIM-3) ＋CD8 ＋T细胞(25.97±2.30比15.57±2.33， t＝3.142， P<0.05)和PD-1 ＋TIM-3 ＋CD8 ＋T细胞(22.58±2.32比12.77±2.81， t＝2.617， P<0.05)比例显著高于对照组。与MWA单独治疗组比较，将MWA与PD-1(514.50±106.40比883.60±144.80， t＝1.911， P<0.05)或CTLA-4(534.40±82.06比961.90±131.00， t＝2.941， P<0.05)抑制剂联用显著抑制小鼠对侧肿瘤生长。 结论:MWA能够有效抑制肺癌肿瘤生长，将MWA联合PD-1抑制剂或者CTLA-4抑制剂产生更强抗肿瘤效果。

人T细胞免疫球蛋白与黏蛋白结构域(T cell immunoglobulin and mucin domain，Tim)-1是T细胞免疫球蛋白黏蛋白结构域相关分子家族的重要成员，与天然配体Tim-4协同表现出强烈的免疫共刺激作用。协同刺激分子主要存在于抗原递呈细胞表面，能与淋巴细胞表面的协同刺激分子受体结合，产生协同刺激信号进而调节免疫细胞的活化。Tim-1能提供免疫细胞所需的活化第二信号，还能提供下调细胞免疫应答的负性第二信号，维持免疫细胞的抑制状态，促进肿瘤免疫逃逸的发生。同时在肿瘤细胞中的过度表达与肿瘤进展密切相关，在靶向治疗和免疫治疗中有潜在临床价值。现就Tim-1介导的免疫应答及其在肿瘤微环境中的作用机制进行综述。

目的:探讨RMT1-10体外诱导耐受性树突状细胞(Tol-DCs)对小鼠高危角膜移植排斥反应的抑制作用及其机制。方法:选取SPF级雄性BALB/c小鼠100只和C57BL/6小鼠50只，获取C57BL/6小鼠骨髓来源的未成熟树突状细胞(imDCs)，按照诱导干预不同分为imDCs组(不干预)、成熟树突状细胞(mDCs)组(加入脂多糖)、RMT1-10组(加入RMT1-10和脂多糖)和IgG同型对照组(加入IgG同型抗体和脂多糖)，培养7 d后采用流式细胞术检测各组DCs表型CD11c、CD80、CD86、主要组织相容性复合物(MHC)-Ⅱ、T细胞免疫球蛋白和黏蛋白结构域分子(Tim)-4和CD103表达水平；采用酶联免疫吸附法测定细胞培养液上清液中白细胞介素10(IL-10)和转化生长因子β(TGF-β)质量浓度。建立混合淋巴细胞培养体系，采用细胞计数试剂盒8法检测各组DCs刺激CD4 + T细胞增生的刺激指数(SI)。以角膜基质缝线法诱导BALB/c小鼠角膜新生血管，以4个象限新生血管均匀长入角膜中周区的小鼠作为受体。将80只受体小鼠采用随机数字表法随机分为imDCs组、mDCs组、RMT1-10组和IgG同型对照组，每组20只，各组分别于尾静脉注射相应DCs(1×10 6个/100 μl)。注射后7 d，以C57BL/6小鼠为供体行穿透角膜移植术。术后1个月，每日裂隙灯显微镜下观察受体小鼠角膜植片排斥体征，包括角膜混浊、水肿及新生血管。术后21 d，每组抽取5只受体小鼠，耳廓皮下注射20 μl(1×10 6个细胞)正常C57BL/6小鼠脾脏细胞，24 h后测量耳廓肿胀度评价迟发型超敏反应(DTH)。 结果:RMT1-10组DCs中CD80、CD86、MHC-Ⅱ和Tim-4阳性细胞占CD11c阳性细胞百分比均明显低于mDCs组，差异均有统计学意义(均 P<0.001)；RMT1-10组Tim-4阳性细胞百分比明显低于imDCs组，CD103阳性细胞百分比明显高于其他3个组，差异均有统计学意义(均 P<0.001)。RMT1-10组细胞培养上清液中IL-10和TGF-β质量浓度明显高于其他组，差异均有统计学意义(均 P<0.001)。各组DCs对CD4 + T细胞增生的SI总体比较，差异均有统计学意义( F分组＝1 833.00， P<0.001； F比例＝230.40， P<0.001)。在每一细胞比例内，imDCs组SI均明显低于mDCs组，RMT1-10组SI均明显低于imDCs组，差异均有统计学意义(均 P<0.05)。各组角膜植片生存曲线总体差异有统计学意义( χ2＝77.69， P<0.001)，其中RMT1-10组角膜植片存活数量明显多于imDCs组，imDCs组角膜植片存活数量明显多于mDCs组，差异均有统计学意义( χ2＝9.74、31.02，均 P<0.01)。阳性对照组、mDCs组、IgG同型对照组、imDCs组、RMT1-10组和阴性对照组小鼠耳廓肿胀度分别为(503.6±17.2)、(475.7±17.6)、(456.2±18.8)、(225.2±39.4)、(118.1±12.6)和(106.4±7.4)μm，总体比较差异有统计学意义( F＝377.10， P<0.001)，其中mDCs组小鼠耳廓肿胀度略低于阳性对照组，imDCs组小鼠耳廓肿胀度明显低于IgG同型对照组，明显高于RMT1-10组，差异均有统计学意义(均 P<0.05)。 结论:RMT1-10可抑制小鼠高危角膜移植排斥反应，其作用机制可能为体外诱导imDCs转化为Tol-DCs并上调TGF-β和IL-10表达，经过继转移后促进受体抗原特异性免疫耐受，进而间接延长角膜植片存活时间。

目的 运用生物信息学方法对间变性甲状腺癌(anaplastic thyroid carcinoma,ATC)的转录组数据进行分析,寻找相关生物标志物及潜在机制.方法 通过IMAGEO分析平台对Gene Expression Omnibus(GEO)的转录组基因芯片数据集GSE85457、GSE65144 和GSE29265 综合筛选区别ATC与正常甲状腺组织的关键靶点,并对关键靶点进行基因本体论(Gene Ontology,GO)富集分析及Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes(KEGG)分析.运用Cytoscape的CytoHubba插件筛选出前 10 位的核心靶基因.运用Kaplan-Meier法探究ATC核心靶基因对患者总生存期的影响,探究ATC预后相关靶基因与常见分子亚型相关性.基于CIBERSORT算法分析其与免疫细胞浸润丰度和免疫检查点基因的关系.结果 共筛选出ATC差异表达基因 1891 个,其中包含 832 个上调基因,1059 个下调基因(均P<0.05).富集分析显示,差异表达基因主要作用于细胞周期过程、DNA复制、肿瘤信号转导、活性氧相关化学致癌、细胞凋亡、黏蛋白型O聚糖生物合成和甲状腺激素合成等通路.基于Cytoscape的CytoHubba插件Maximal Clique Centrality(MCC)算法筛选出 10 个核心靶基因.经Cox比例风险模型及Kaplan-Meier法在癌症基因组图谱(The Cancer Genome Atlas,TCGA)外部ATC队列验证后发现,核心靶基因中周期蛋白依赖性激酶 1(cyclin-dependent kinase 1,CDK1)和细胞周期蛋白 B1(cyclin B1,CCNB1)的高表达与患者总生存期的不良预后相关(均P<0.05).CDK1 表达量在B-Raf原癌基因丝/苏氨酸蛋白激酶(B-Raf proto-oncogene,serine/threonine kinase,BRAF)野生型及突变型患者中存在差异,具有正相关性(r=0.67,P<0.01);CDK1 与CCNB1 的表达量均与端粒酶反转录酶(telomerase reverse transcriptase,TERT)的表达呈正相关性(均r>0.7,均P<0.01).经CIBERSORT算法发现,CDK1 表达量与浆细胞、CD4+T细胞、T辅助细胞、巨噬细胞M1 和嗜酸性粒细胞浸润水平均呈正相关(均r>0.3,均P<0.05),与单核细胞、巨噬细胞M2 和肥大细胞抑制等免疫细胞浸润丰度均呈负相关(均r>0.2,均P<0.01);CCNB1 表达量与T辅助细胞、巨噬细胞M1 和肥大细胞激活等免疫细胞浸润丰度均呈正相关(均r>0.4,均P<0.05).CDK1 与免疫检查点细胞程序性死亡蛋白1 配体 2(programmed cell death 1 ligand 2,PD-L2)、T细胞免疫球蛋白和ITIM结构域蛋白(T cell immunoreceptor with Ig and ITIM domains,TIGIT)、T细胞免疫球蛋白和黏蛋白结构域蛋白 3(T cell immunoglobulin and mucin domain-containing protein 3,TIM3)、T-细胞可诱导共刺激分子(inducible T-cell costimulator,ICOS)、吲哚胺 2,3-双加氧酶 1(indoleamine 2,3-dioxygenase 1,IDO1)、细胞程序性死亡受体 1(programmed cell death protein 1,PD-1)、细胞毒性T淋巴细胞相关蛋白 4(cytotoxic T-lymphocyte-associated protein 4,CTLA4)、淋巴细胞活化基因 3(lymphocyte-activation gene 3,LAG3)和CD27 的表达量均呈正相关(均r>0.5,均P<0.05),CCNB1 则与免疫检查点IDO1 的表达量呈正相关(r>0.6,P<0.05).结论 CDK1 和CCNB1的高表达水平与ATC患者预后呈负相关,其表达水平影响患者预后可能通过调节肿瘤免疫微环境实现.CDK1 具有更强的免疫原性,为ATC诊断与预后的潜在生物标志物.

目的 观察T细胞免疫球蛋白及黏蛋白结构域的分子-3(TIM-3)和白细胞介素(IL)-7在冠心病患者中的表达变化,以及IL-7对T细胞表面TIM-3的调控作用,为阐明炎症应答在冠心病发病中的机制提供实验依据.方法 82例冠心病患者[包括:稳定性心绞痛(SA)22例、不稳定性心绞痛(UA)39例、急性心肌梗死(AMI)21例]和20例健康志愿者入组本研究.利用流式细胞术检测T细胞表面TIM-3的水平,利用酶联免疫吸附试验检测血清IL-7的水平.应用重组人IL-7刺激外周血单个核细胞后观察T细胞表面TIM-3的变化,并应用Western blot法检测IL-7信号通路中STAT-5磷酸化和SOCS3的水平.结果 T细胞表面TIM-3表达的平均荧光强度(mean fluoresent intensity,MFI)在SA(118.7±16.50)、UA(246.8±70.62)和AMI(332.7±55.92)中均较健康志愿者(40.60±9.76)显著升高(P＜0.001).CD4+T细胞表面TIM-3的比例在SA(1.32％±0.51％)、UA(2.35％±1.66％)和AMI (5.72％±1.79％)中均较健康志愿者(0.76％±0.24％)显著升高(P＜0.05),CD8+T细胞表面TIM-3的比例在SA (0.98％±0.35％)中与健康志愿者(0.77％±0.26％)无明显变化,而在UA(1.23％±0.39％)和AMI(1.64％±0.55％)中显著升高(P＜0.05).血清IL-7的水平在SA (47.11 pg/ml±33.90 pg/ml)和UA(43.76 pg/ml±25.20 pg/ml)中与健康志愿者(35.17 pg/ml±13.30 pg/ml)未见明显升高,而在AMI(66.64 pg/ml ±26.38 pg/ml)中显著升高(P=0.004 5).重组人IL-7刺激可显著提升AMI患者CD4+和CD8+T细胞表面TIM-3的表达,而仅升高健康志愿者CD8+T细胞TIM-3的表达.同时,IL-7刺激可促进外周血单个核细胞中STAT-5的磷酸化和SOCS3的表达.结论 IL-7可升高TIM-3的表达,在冠心病中可能发挥抑制炎症应答的作用,预防疾病的进展恶化.

目的 研究T细胞免疫球蛋白和黏蛋白域分子4(Tim-4)在非小细胞肺癌(NSCLC)中的临床意义.方法 收集49例新确诊的未经治疗的NSCLC患者临床资料,并收集10名对照者资料.采用酶联免疫吸附试验检测NSCLC组和对照组的外周血Tim-4水平,根据结果进行相关分析,并分析外周血Tim-4水平对患者预后的影响.结果 NSCLC患者血清Tim-4水平高于对照组(t=4.606,P＜0.05),腺癌患者血清Tim-4水平高于鳞癌患者(t=-3.301,P＜0.05).血清Tim-4水平作为NSCLC生物标志物的受试者工作特征曲线下面积为0.811,敏感度为59.2％o,特异度为90％,95％CI:0.680～0.943,P＜0.05.血清Tim-4水平高的NSCLC患者生存率低,血清Tim-4水平低的NSCLC患者生存率高.血清Tim-4水平是影响NSCLC患者生存的危险因素(95％ CI:2.116～8.673,P＜0.001).结论 外周血Tim-4水平是NSCLC患者潜在的肿瘤标志物,且血清Tim-4水平是NSCLC患者生存的危险因素,提示高水平的血清Tim-4与患者的预后不良有关.

目的 检测RA患者外周血淋巴细胞表面T细胞免疫球蛋白及黏蛋白域分子-3(TIM3)以及血浆中可溶性半乳糖凝集素9(Galetcin9)的表达,探讨其临床意义.方法 流式细胞术检测39例RA患者、20例OA患者和25名健康志愿者外周血CD4+T、CD8+T细胞和NK细胞表面TIM3表达;ELISA法检测血浆可溶性Galetcin9的表达,分析其临床意义.采用Levene方差齐性检验,正态分布数据组间比较采用t检验和Pearson相关分析,非正态分布数据组间采用Mann-Whitney U检验和Spearman相关分析.结果 与健康志愿者相比,RA患者外周血CD4+T细胞表面TIM3表达升高[(14.7±3.2)％和(5.1±0.8)％,t=2.339,P=0.022 7],而与疾病对照组差异无统计学意义[(14.7±3.2)％和(5.8±0.4)％,t=1.928,P=0.058 9],其上TIM3表达与血清中RF的含量和对应DAS28评分有明显相关性(r=0.325 8,P=0.043 0;r=0.407 5,P=0.010 0).CD8+T细胞表面TIM3的表达均高于疾病对照组和健康对照组[(21.1±3.4)％和(8.3±1.5)％,t=2.531,P=0.014 2;(21.1±3.4)％和(10.7±1.0)％,t=2.314,P=0.024 0],且与血清中RF的含量和对应DAS28评分有明显相关性(r=0.451 5,P=0.003 9;r=0.524 1,P=0.000 6).CD56+ NK细胞上TIM3的表达与OA疾病对照组和健康对照组差异均无统计学意义[(56.4±3.4)％和(50.6±3.8)％,t=1.047,P=0.299 8;(56.4±3.4)％和(56.1±3.4)％,t=0.048,P=0.961 9],且与血清中RF的含量和对应DAS28评分无明显相关性.RA患者血浆中可溶性Galectin9的表达浓度高于疾病对照组[(4.24±0.22) ng/ml)和(3.15±0.18) ng/ml,t=3.187,P=0.002 4]和健康对照组[(4.24±0.22) ng/ml和(2.55±0.14) ng/ml,t=5.567,P＜0.01],且与RF含量和对应DAS28评分具有相关性(r=0.479 2,P=0.002 0;r=0.353 0,P=0.027 5),与CRP无相关性(r=0.176 3,P=0.283 1).结论 RA患者外周血淋巴细胞表面TIM3和血浆可溶性Galetcin9异常高表达,且与RA的病情活动度密切相关,提示TIM3/Galetcin9信号通路可能在RA发病中起重要作用.

目的 了解脓毒症患者经连续性肾脏替代治疗(CRRT)后外周血 CD8+T淋巴细胞数量变化以及对免疫功能的影响.方法 收集2015 年 10月—2016年8月入住某院急诊科的脓毒症住院患者的一般资料,并采集经单次CRRT前后脓毒症患者外周血,分别检测总 CD8+T细胞的数量、分泌干扰素-γ(IFN-γ)的 CD8+T细胞数、CD8+T细胞产生抑制性分子水平、共刺激性分子水平以及分泌 IFN-γ、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平.结果 共有37例脓毒症住院患者,所有患者均为革兰阴性(G－)菌感染,感染的细菌种类为肺炎克雷伯菌(22株)、鲍曼不动杆菌(1 1 株)、阴沟肠杆菌(3 株).脓毒症患者经CRRT后体温、心率、白细胞计数、尿素氮、血肌酐水平较治疗前下降(均P＜0.05).经CRRT后脓毒症患者总CD8+T细胞数量较治疗前无明显变化(P＞0.05),但分泌 IFN-γ的CD8+T细胞的数量较治疗前升高(P＜0.05).同时,经CRRT后CD8+T细胞产生抑制性分子细胞毒T淋巴细胞相关抗原4(CTLA-4)、程序性死亡受体 1(PD-1)、含T细胞免疫球蛋白及黏蛋白结构域的分子3(TIM-3)的水平均较治疗前降低(均 P＜0.05 ),而产生共刺激分子 CD28、分泌 IFN-γ的水平较治疗前升高(均 P＜0.05 ).结论 CRRT不但有效改善脓毒症患者的生命体征和肾功能,还可增强CD8+T细胞免疫功能.

目的 探讨T细胞免疫球蛋白及黏蛋白结构域分子-3(T cell immunoglobulin and mucin-domain containing molecule-3,Tim-3)对巨噬细胞葡萄糖转运体1(glucose transporter 1,GLUT1)的表达及其对细胞功能的影响,并初步探索其影响机制.方法 使用Tim-3 siRNA敲低Raw264.7细胞系观察GLUT1蛋白的表达,随后使用不同浓度Tim-3融合蛋白、Tim-3激动抗体,阻断和激活小鼠源巨噬细胞系Raw264.7,在基因和蛋白水平观察GLUT1、甘油醛-3-磷酸脱氢酶(glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase,GAPDH)、Tim-3以及肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)4项指标的变化.结果 Tim-3敲低的Raw264.7细胞系GLUT1蛋白表达水平明显升高;激活、抑制巨噬细胞Tim-3信号能分别抑制和促进GLUT1、TNF-α的基因和蛋白表达以及GAPDH基因表达,但Tim-3的基因和蛋白水平以及GAPDH蛋白水平并无显著变化.结论 Tim-3负调控巨噬细胞GLUT1表达,进一步影响TNF-α分泌,参与TNF-α转录后调控的GAPDH可能参与其中的调节机制.