Background::Differential diagnosis of active tuberculosis (ATB) and latent tuberculosis infection (LTBI) has been a challenge for clinicians in high TB burden countries. The purpose of this study was to improve the accuracy of differential diagnosis of ATB and LTBI by using fluorescent immunospot (FluoroSpot) assay to detect specific Th1 cell immune responses. The novel mycobacterium tuberculosis (MTB) latency-associated antigens Rv1733c and synthetic long peptides derived from Rv1733c (Rv1733c SLP) were used based on virulence factors early secreting antigen target-6 (ESAT-6) and culture filtrate protein-10 (CFP-10). Methods::Fifty-seven ATB cases, including 20 pathogen-confirmed ATB and 37 clinically diagnosed ATB, and 36 LTBI cases, were enrolled between January and December 2017. FluoroSpot assay was used to detect the interferon γ (IFN-γ) and interleukin 2 (IL-2) secreted by the specific T cells after being stimulated with MTB virulence factors ESAT-6 and CFP-10, MTB latency-associated antigens Rv1733c and Rv1733c SLP. The receiver operating characteristic (ROC) curve was used to define the best cutoff value of latency-associated antigens in the use of differentiating ATB and LTBI. The sensitivity, specificity, predictive value, and likelihood ratio of ESAT-6 and CFP-10-FluoroSpot combined with latency-associated antigen in the differential diagnosis of ATB and LTBI were also calculated.Results::Following the stimulation with Rv1733c and Rv1733c SLP, the frequency of single IL-2-secreting T cells stimulated by Rv1733c SLP had the largest area under the ROC curve, which was 0.766. With a cutoff value of 1 (spot-forming cells [SFCs]/2.5 × 10 5 peripheral blood mononuclear cells) for frequency, the sensitivity and specificity of distinguishing ATB from LTBI were 72.2% and 73.7%, respectively. ESAT-6 and CFP-10-FluoroSpot detected the frequency and proportion of single IFN-γ-secreting T cells; the sensitivity and specificity of distinguishing ATB from LTBI were 82.5% and 66.7%, respectively. Combined with the frequency of single IL-2-secreting T cells stimulated by Rv1733c SLP on the basis of ESAT-6 and CFP-10-FluoroSpot, the sensitivity and specificity increased to 84.2% and 83.3%, respectively. Conclusion::Rv1733c SLP, combined with ESAT-6 and CFP-10, might be used as a candidate antigen for T cell-based tuberculosis diagnostic tests to differentiate ATB from LTBI.

目的:评估6种结核分枝杆菌检测方法对不典型肾结核的早期诊断价值，为临床诊断提供参考。方法:收集河北省胸科医院泌尿外科2015年10月至2020年12月诊治的不典型肾结核患者46例(结核组)、非结核肾病患者53例(对照组)，分别采用结核感染T细胞斑点试验(T-SPOT.TB)、结核菌素试验(PPD试验)、涂片抗酸杆菌染色镜检(AFB镜检法)、BACTEC MGIT960液体培养(简称液体培养法)、结核分枝杆菌脱氧核糖核酸实时荧光定量PCR(TB-DNA FQ-PCR)、利福平耐药实时荧光定量核酸扩增技术（GeneXpert MTB/RIF），以结核菌培养及病理结果为金标准，比较不同检测方法在不典型肾结核临床诊断中的价值。结果:T-SPOT.TB灵敏度(95.65%)高于PPD试验(73.91%)，差异有统计学意义(McNemar检验： P=0.002)；GeneXpert MTB/RIF的灵敏度为84.78%，高于AFB镜检法(4.35%)、液体培养法(28.26%)和TB-DNA FQ-PCR(58.70%)，差异有统计学意义(McNemar检验： P均<0.001)，GeneXpert MTB/RIF与三者的特异性无统计学差异(McNemar检验： P=1.000、0.500和0.250)。 结论:T-SPOT.TB与GeneXpert MTB/RIF在不典型肾结核的筛查和病原学诊断中有较高的灵敏度和应用价值，推荐应用。

目的:探讨儿童重症监护病房(PICU)重症结核病(TB)患儿的临床特点和宏基因组二代测序(mNGS)在诊断中的可行性。方法:回顾性分析2018年1月至2020年12月安徽省儿童医院PICU收治的3例重症TB患儿的临床资料和mNGS检测结果，并在中国知网、万方、维普和PubMed数据库中检索应用mNGS诊断的儿童TB，检索时间均为建库至2021年3月，复习相关文献。结果:1．在3例患儿中，男2例，女1例。3例均有发热。1例患有X-连锁重症联合免疫缺陷病(X-SCID)。3例患儿抗酸染色、结核菌素纯蛋白衍生物(PPD)皮肤试验和结核感染T细胞斑点试验(T-SPOT.TB)均阴性，经mNGS早期诊断。2例转专科抗结核治疗好转出院。2.共检索到3篇文献，报道7例TB患儿。1例X-SCID男婴患卡介苗相关噬血细胞综合征，6例结核性脑膜炎，均采用mNGS早期检出结核分枝杆菌复合群协助诊断。结论:mNGS在儿童重症TB，尤其是免疫抑制患儿的快速病原诊断方面具有一定应用前景，有助于优化早期诊断和抢先治疗，以改善预后。

目的:探讨合并2型糖尿病(T2DM)对胸腔积液腺苷脱氨酶(ADA)与结核感染T细胞斑点试验(T-SPOT.TB)早期诊断结核性胸膜炎(TPE)效能的影响。方法:选取2019年1月至2021年1月武汉市肺科医院收治的130例TPE患者，根据是否合并T2DM分为TPE合并T2DM组(TPE合并T2DM组，34例)和TPE未合并T2DM组(TPE组，96例)。比较两组患者的临床特征、血糖水平和胸腔积液ADA水平及T-SPOT.TB阳性检出率、斑点数，logistic回归分析合并T2DM的TPE患者肺结核病原学检出的影响因素，受试者工作特征(ROC)曲线分析胸腔积液ADA和T-SPOT.TB对合并T2DM的TPE的诊断价值。结果:TPE合并T2DM组与TPE组年龄、BMI、吸烟史、饮酒史、既往结核史、治疗情况、空腹血糖(FBG)、餐后血糖(PBG)、糖化血红蛋白(HbA 1c)、胸腔积液ADA水平和T-SPOT.TB斑点数、T-SPOT.TB阳性比例比较差异有统计学意义(均 P<0.05)。Logistic回归分析结果显示，年龄、吸烟史、饮酒史和HbA 1c均为影响合并T2DM的TPE患者肺结核病原学检出的独立影响因素(均 P<0.05)。ROC曲线分析结果显示，胸腔积液ADA和T-SPOT.TB斑点数、T-SPOT.TB阳性率诊断合并T2DM的TPE患者的曲线下面积(AUC)分别为0.807、0.892和0.812，其中T-SPOT.TB斑点数的灵敏度为91.2%( P<0.05)。 结论:合并T2DM可导致TPE患者胸腔积液ADA水平升高和T-SPOT.TB阳性率下降，胸腔积液ADA和T-SPOT.TB对合并T2DM的TPE患者仍具有较高的预测效能。

目的:了解上海市结核病密切接触者中结核潜伏感染(latent tuberculosis infection, LTBI)者的结核病发病风险及其时间特征。方法:采用前瞻性观察性研究方法，以2009至2010年上海市7个区户籍人口中确诊肺结核患者的密切接触者为研究对象，采用结核感染T淋巴细胞斑点试验(T-cell spot test of tuberculosis infection，T-SPOT.TB)判断结核分枝杆菌感染情况以识别LTBI，同时采用问卷调查的方法收集研究对象的基本信息和结核病密切接触史。通过结核病登记报告系统识别LTBI者在检测后连续9年内的发病情况，计算其结核病发病率和发病密度。采用 χ2检验对不同性别和年龄分组的发病率进行分层分析。 结果:2009年至2010年，共纳入376例确诊肺结核患者的982名密切接触者，其中287名密切接触者经T-SPOT.TB检测为LTBI。接受基线调查时感染者中位年龄为54岁，36.6%(105/287)的LTBI者为男性。截至2019年12月287名LTBI者中共发现5例新发结核病患者，2年累积发病率为0.35%，5年累积发病率为1.05%，9年累积发病率为1.74%(95%可信区间0.57%～4.02%)，中位发病时间为3.67年；研究期间共观察了2 666.75人年，结核病发病密度为1.875/1 000人年。不同年龄( χ2＝0.600， P>0.05)和性别( χ2<0.001， P>0.05)的LTBI者的结核病9年累积发病率差异均无统计意义。 结论:结核病患者密切接触者中的LTBI者的结核病发病集中在接触后前5年左右。

目的:探讨血清糖类抗原125(CA125)水平、结核T细胞斑点试验(T-spot·TB)联合胸腔镜病理学Xpert技术诊断结核性胸膜炎的价值。方法:选取2020年1月至2022年1月在喀什地区第一人民医院就诊的胸腔积液患者165例，其中结核性胸膜炎患者76例，非结核性胸膜炎89例(恶性原因51例，肺炎原因38例)，比较各患者临床资料、血清CA125等差异，分析CA125、T-spot·TB联合Xpert诊断结核性胸膜炎的价值。结果:结核性胸膜炎患者血清癌胚抗原(CEA)和CA19-9水平分别为(1.53±0.45)ng/ml和(114.19±34.44)U/ml，明显低于恶性胸腔积液患者(均 P<0.05)，而与肺炎旁性胸腔积液患者比较差异无统计学意义(均 P>0.05)。结核性胸膜炎患者血清CA125水平为(65.50±14.43)U/ml，明显低于恶性胸腔积液患者( P<0.05)，而明显高于肺炎旁性胸腔积液患者( P<0.05)。CEA、CA19-9鉴别结核性胸膜炎和肺炎旁性胸腔积液的受试者工作特征(ROC)曲线下面积分别为0.470和0.601(均 P>0.05)。CA125鉴别结核性胸膜炎和恶性胸腔积液的ROC曲线下面积为0.742( P<0.05)。CA125鉴别结核性胸膜炎和肺炎旁性胸腔积液的ROC曲线下面积为0.764( P<0.05)。血清CA125、T-spot·TB联合Xpert诊断结核性胸膜炎的ROC曲线下面积为0.916，明显高于其他诊断组合( P<0.05)。 结论:血清CA125、T-spot·TB联合Xpert在结核性胸膜炎中有较高的诊断价值，值得临床使用。

目的:观察涂阴肺结核患者外周血单核细胞和淋巴细胞的表达特点，探讨其与结核分枝杆菌感染T细胞斑点试验(T-SPOT.TB)联合检测在涂阴肺结核诊断与鉴别诊断中的临床价值，为其早期诊断提供新指标。方法:以2018年1月1日至2018年12月31日在首都医科大学附属北京胸科医院住院的134例涂阴肺结核患者、56例肺癌患者和95例肺炎患者作为研究对象，收集并回顾性分析3组患者外周血单核细胞、淋巴细胞、单核细胞与淋巴细胞(ML)比值、T-SPOT.TB及相关临床资料。选择在3组患者间差异有统计学意义的指标，采用敏感度、特异度、误诊率、漏诊率和诊断正确率，评估其单独或联合T-SPOT.TB在涂阴肺结核与肺癌、肺炎诊断与鉴别诊断中的临床价值。结果:(1)涂阴肺结核组单核细胞百分比[(8.96±2.46)%]、ML绝对值比值(0.36±0.19)均高于肺癌组[分别为(7.06±1.34)%、0.30±0.13]和肺炎组[分别为(8.17±2.13)%、0.31±0.18]，而其白细胞总数[(5.86±1.75)×10 9/L]低于肺癌组[(6.88±1.76)×10 9/L]，淋巴细胞绝对值[(1.57±0.54)×10 9/L]低于肺炎组[(1.87±0.67)×10 9/L]，差异均有统计学意义( P值均<0.05)。(2)就涂阴肺结核与肺癌鉴别诊断而言，单核细胞百分比的特异度(87.50%)较高，误诊率(12.50%)较低，优于ML绝对值比值(分别为17.86%、82.14%)和T-SPOT.TB(67.86%、32.14%)。ML绝对值比值的敏感度(88.81%)与T-SPOT.TB(87.31%)相接近。就涂阴肺结核与肺炎鉴别诊断而言，ML绝对值比值的敏感度(88.81%)高于单核细胞百分比(66.42%)，与T-SPOT.TB(87.31%)相接近，但其特异度(28.42%)低于T-SPOT.TB(63.16%)和单核细胞百分比(56.84%)。(3)单核细胞百分比和ML绝对值比值分别联合T-SPOT.TB(并联)辅助诊断涂阴肺结核的的敏感度分别为97.01%和99.25%，漏诊率分别为2.99%和0.75%。在涂阴肺结核与肺癌的鉴别诊断中，单核细胞百分比联合T-SPOT.TB(串联)的特异度为94.64%，误诊率为5.36%。在涂阴肺结核和肺炎鉴别诊断中，单核细胞百分比联合T-SPOT.TB(串联)和ML绝对值比值联合T-SPOT.TB(串联)的特异度分别为82.11%和70.53%，误诊率分别为17.89%和29.47%。 结论:单核细胞百分比和ML绝对值比值与T-SPOT.TB联合检测分别在涂阴肺结核与肺癌、肺炎的鉴别诊断中具有潜在的临床价值，且其测定简便易行、价格低廉，可以作为涂阴肺结核辅助诊断指标，根据临床需要选择。

目的:探讨胸水结核感染T细胞斑点试验（T-SPOT.TB）联合腺苷脱氨酶（ADA）在结核性胸膜炎中的诊断价值。方法:收集2018年1月至2019年12月浦江县人民医院及浙江大学第一附属医院住院治疗的108例胸腔积液患者，其中结核性胸腔积液（结核组）72例，非结核性胸腔积液（非结核组）36例，所有患者行外周血T-SPOT.TB、胸水T-SPOT.TB、胸水ADA、胸水常规、生化指标检测，评估平行或联合诊断价值。结果:结核组胸水ADA水平为（54.7±27.4）U/L，显著高于非结核组的（11.6±8.3）U/L，差异有统计学意义（ t=9.21， P< 0.05）。胸水T-SPOT.TB、外周血T-SPOT.TB、ADA单项检测对结核性胸膜炎诊断灵敏度分别是97.2%、93.0%、86.1%，特异性分别为91.7%、80.6%、63.9%；胸水T-SPOT.TB、血T-SPOT.TB、ADA平行联合诊断灵敏度更高，达98.6%；三种方法联合检测特异性高达94.0%，胸水T-SPOT.TB联合ADA检测诊断结核性胸特异性94.0%。 结论:胸水T-SPOT.TB试验对结核性胸膜炎诊断价值高，联合ADA检测可提高结核性胸膜炎的诊断率。

目的:探讨应用结核分枝杆菌RNA恒温扩增实时荧光检测（SAT-TB）以及SAT-TB联合结核T细胞斑点试验（T-SPOT.TB）对痰涂片阴性肺结核的诊断价值。方法:对2016年12月至2017年12月在四川大学华西医院就诊的101例疑似肺结核患者进行结核分枝杆菌快速培养（MGIT960）、T-SPOT.TB以及SAT-TB检测，分析应用SAT-TB技术以及SAT-TB联合T-SPOT.TB对检测痰涂片阴性肺结核的诊断价值。结果:101例疑似肺结核患者中84例临床确诊为肺结核，17例为非肺结核。SAT-TB和T-SPOT.TB检测的灵敏度分别为63.10%和68.42%，特异性分别为94.12%和63.64%，AUC值分别为0.79和0.66。SAT-TB和T-SPOT.TB联合检测的阳性预测值为100%。结论:SAT-TB对于痰涂片阴性肺结核的诊断价值较高，联合T-SPOT.TB检测时能有效减少肺结核的漏诊。

目的:评价利福平耐药实时荧光定量核酸扩增技术（GeneXpert）联合结核感染T淋巴细胞酶联免疫斑点试验（T-SPOT.TB）诊断结核性脑膜炎（TBM）的价值。方法:回顾性分析2017年3月至2019年12月沈阳市胸科医院70例TBM患者（TBM组）和30例非TBM患者（非TBM组）的临床资料。患者均行GeneXpert和T-SPOT.TB检测。以脑脊液MGIT960液体培养结果作为金标准，评估GeneXpert和T-SPOT.TB诊断TBM的情况。结果:TBM组GeneXpert、T-SPOT.TB、两种方法并联及两种方法串联的阳性率均明显高于非TBM组[27.14%（19/70）比0、72.86% （51/70）比46.67%（14/30）、78.57%（55/70）比46.67%（14/30）和21.43%（15/70）比0]，差异有统计学意义（ P<0.01或<0.05）。两种方法并联诊断TBM的灵敏度最高为78.57%，准确度达71.00%；而两种方法串联诊断TBM的特异度为100.00%，误诊率为0。 结论:GeneXpert和T-SPOT.TB两种方法并联诊断TBM的灵敏度最高，两种方法串联及GeneXpert单独检测的特异度均高达100.00%，两种方法串联可降低TBM的误诊率，并联可降低漏诊率。