目的:探讨1例Joubert综合征(JS)胎儿的临床表型及遗传学病因。方法:选取2021年2月26日于苏州市立医院就诊的1例孕妇作为研究对象。应用全外显子组测序技术对孕妇夫妇及引产胎儿进行基因变异筛查，对疑似致病性变异进行Sanger测序验证，通过胎儿父亲的cDNA分析和姐姐的RNA转录组测序结果进一步探讨变异的致病机制。结果:全外显子组测序发现引产胎儿携带 TCTN1基因c.624G>A和c.96dupA(p.Glu33Argfs*49)复合杂合变异，该2个变异既往均未见报道。Sanger测序验证2个变异分别遗传自胎儿的父亲与母亲，胎儿的姐姐也携带父源c.624G>A杂合变异。胎儿父亲的cDNA分析和姐姐的RNA转录组测序均未检出包含c.624G>A的转录本。根据美国医学遗传学与基因组学学会(ACMG)相关指南，2个变异均评级为可能致病性(PVS1＋PM2_Supporting)。 结论:TCTN1基因c.624G>A和c.96dupA(p.Glu33Argfs*49)复合杂合变异可能是上述JS胎儿的遗传学病因，进一步丰富了 TCTN1基因的变异谱。

目的 明确一家系中两例临床表现为Joubert综合征的异常胎儿的遗传学病因.方法 应用全外显子组测序技术分析两例胎儿的DNA,用Sanger测序对胎儿及其父母进行突变位点的验证,并通过cDNA分析两个突变位点的致病机制.结果 测序显示两例胎儿均携带TCTN1的两个新突变,分别位于第2内含子的c.342-8A>G和第12内含子的c.1494+1G>A.cDNA分析显示两个突变均影响mRNA的正常剪接,从而导致产生截短的蛋白.结论 明确TCTN1基因的两个新突变为该家系的发病原因,上述新突变的发现进一步丰富了TCTN1的突变谱.

目的 对6个临床诊断为Meckel-Gruber综合征(Meckel-Gruber Syndrome,MKS)的家系进行分子遗传学分析,为这些家庭再生育方式提供指导.方法 收集先证者临床表型;应用二代测序技术对6个MKS家系进行纤毛病相关基因包检测,致病位点行Sanger测序进行验证;根据基因检测结果 为上述家庭提供遗传咨询.结果6个家系MKS胎儿绝大多数存在多囊肾、脑膜脑膨出、多指/趾表型;基因检测结果提示家系1的MKS胎儿携带TMEM67纯合突变(c.1645C>T,p.R549C),家系2为TMEM67复合杂合突变(c.1975C>T,p.Arg659X;c.2898_2900del,p.Gln968del),家系3为CC2D2A复合杂合突变(c.347delA,p.E116fs;c.4463_4466del,p.S1488fs),家系4为CC2D2A的复合杂合子(c.1326delC,p.Q443Rfs?15;c.3055C>T,p.R1019),家系5为TCTN2复合杂合突变(c.343G>T,p.E115X;c.1540C>T,p.Q514X),家系6未找到致病基因;遗传咨询后家系1进入PGD流程,家系3、5要求自然受孕,均已分娩健康婴儿.结论 利用二代测序技术,结合典型的临床表型诊断,可高效准确的对MKS进行诊断;本研究结果明确了5例MKS家系胎儿的诊断,丰富了MKS相关基因的突变谱,为下一步遗传咨询及胚胎植入前遗传学诊断、产前诊断提供基础.

目的 观察乳腺癌细胞Tectonic家族成员1(Tectonic family member 1,TCTN1)表达变化,探讨下调其表达对T47D细胞增殖及细胞周期的影响.方法 取对数生长期MCF-7、MDA-MB-231、T47D细胞及正常乳腺MCF-10A细胞,采用实时荧光定量PCR法检测TCTN1 mRNA相对表达量,筛选出TCTN1 mRNA相对表达量最高的T47D细胞进行后续试验.取对数生长期T47D细胞,分为转染组(转染siRNA-TCTN1)、阴性对照组(转染siRNA-NC)和空白对照组(不作处理).转染48 h,采用实时荧光定量PCR法检测3组TCTN1 mRNA相对表达量,采用Western blot法检测TCTN1蛋白相对表达量,采用流式细胞术检测细胞周期;转染后培养0、24、48、72、96 h,采用CCK-8法检测细胞增殖率.结果 MCF-7、MDA-MB-231、T47D 细胞 TCTN1 mRNA 相对表达量(3.120±0.893、2.839±1.102、5.932±0.938)均高于 MCF-10A 细胞(1.023±0.182)(P＜0.05),T47D 细胞 TCTN1 mRNA 相对表达量高于 MCF-7、MDA-MB-231 细胞(P＜0.05).转染 48 h,转染组 TCTN1 mRNA 及蛋白相对表达量(0.539±0.021、0.050±0.003)、G0/G,期细胞比率[(46.06±1.30)％]均低于阴性对照组[0.932±0.102、0.379±0.052、(54.67±1.13)％]和空白对照组[1.021±0.091、0.457±0.017、(53.77±1.91)％](P＜0.05),G2/M 期细胞比率[(22.49±1.45)％]高于阴性对照组[(14.60±2.44)％]和空白对照组[(14.99±2.16)％](P＜0.05),阴性对照组与空白对照组比较差异均无统计学意义(P＞0.05).转染后培养0、24 h,3组细胞增殖率比较差异均无统计学意义(P＞0.05);转染后培养48、72、96 h,转染组细胞增殖率[(53.0±8.2)％、(78.0±10.2)％、(123.0±11.2)％]低于阴性对照组[(83.0±13.5)％、(129.0±13.9)％、(172.5±28.3)％]和空白对照组[(92.0±14.7)％、(139.2±19.3)％、(192.3±29.2)％](P＜0.05),阴性对照组与空白对照组比较差异无统计学意义(P＞0.05).结论 MCF-7、MDA-MB-231、T47D细胞TCTN1 mRNA表达上调;下调TCTN1表达可抑制T47D细胞增殖,使细胞G2/M期阻滞.

目的 探讨Joubert综合征(JS)的临床表现及遗传学病因.方法 分析1例48岁男性Joubert综合征的临床表现、影像资料和全外基因测序(WES).结果 男性患者,48岁,智力发育低下,全外显子测序示SUFU(NM_001178133∶exonl∶c.A169G∶p.I57V)、TCTN2(NM_024809∶exon10∶c.C1150T∶p.H384Y)双基因杂合错义突变.头颅磁共振成像(MRI)提示"磨牙征"(MTS),第四脑室蝙蝠翼征,蚓部发育不全.结论 通过临床资料及测序结果确诊了 1 例 48 岁男性 JS 患者,并发现了 SUFU(NM_001178133∶exonl∶c.A169G∶p.I57V)与 TCTN2(NM_024809∶exon10∶c.C1150T∶p.H384Y)双基因错义突变,给遗传咨询及产前基因诊断提供了参考依据.

背景:脊髓损伤后神经元细胞凋亡是造成脊髓永久性损伤的一个主要原因,探索防止脊髓损伤后神经元凋亡的方法意义重大.现有的动物实验研究表明,非编码RNA能够对脊髓损伤后神经元细胞凋亡进行调控,这或许可以给临床脊髓损伤后神经元保护性治疗提供一定参考.目的:对非编码RNA调控脊髓损伤后神经元凋亡作用和机制进行综述,为脊髓损伤的保护性治疗提供新的靶点.方法:以"microRNA,miR,lncRNA,circRNA,noncoding RNA,RNA,SCI,spinal cord injury,spinal cord,apoptosis"为检索词在PubMed数据库中进行检索,制定纳排标准,通过阅读文题、摘要和全文进行筛选,最终纳入87篇相关文献.结果 与结论:①神经元细胞凋亡为继发性脊髓损伤中极其重要的病理生理改变,是神经元死亡、脊髓功能障碍的重要致病机制之一.②动物实验研究发现,在脊髓损伤后的脊髓组织中,与神经元细胞凋亡相关的miRNA、长链非编码RNA(lncRNA)与环状RNA(circRNA)可出现差异性表达,一些促进神经元凋亡的miRNA,lncRNA与circRNA过表达,而另一部分抑制神经元凋亡的miRNA、lncRNA与circRNA表达下调.③调控特定miRNA的相应表达,主要通过靶向下调凋亡基因Bax、抑制TLR4/核转录因子κB信号通路、激活PI3K/Akt信号通路等方式可抑制脊髓损伤后神经元细胞过度凋亡.④调控lncRNA和circRNA的表达,主要通过靶向负调控的方式使得特定miRNA出现沉默或过表达,从而发挥其抗神经元细胞凋亡的作用.⑤在miRNA中,miR-125b对Smurf1/KLF2/ATF2轴及JAK1/STAT1信号通路等均可产生调节,而miR-21-5p对程序性细胞死亡因子4(PDCD4)和PI3K/AKT信号通路等可产生调节,具有多途径抗凋亡的作用.⑥在lncRNA和circRNA中,lncRNA-PTENP1,lncRNA-TCTN2和circRNA-HIPK3均对于多种miRNA具有靶向调节作用,这些非编码RNA也许可以成为脊髓损伤后神经元保护性治疗的新靶点.⑦目前对于非编码RNA调控脊髓损伤后神经元细胞凋亡还仅停留在动物及细胞研究层面,未来需要继续探索更加具有靶向作用的非编码RNA药物载体,联合生物组织工程以及其他新兴技术,争取早日向临床转化过渡.