目的:评估以全身放射治疗（TBI）+兔抗人胸腺细胞免疫球蛋白（rATG）为基础预处理方案的单倍体造血干细胞移植（haplo-HSCT）治疗化疗耐药进展期外周T细胞淋巴瘤（PTCL）的疗效与安全性。方法:纳入2019年9月至2022年12月在上海力泉医院和上海闸新中西医结合医院血液科接受TBI+rATG为基础预处理方案haplo-HSCT的11例化疗耐药进展期PTCL患者，对其临床资料进行回顾性分析。结果:①11例患者中男6例，女5例，中位年龄40（22~58）岁；外周T细胞淋巴瘤（非特指型）6例，血管免疫母细胞性T细胞淋巴瘤3例，蕈样真菌病（大细胞转化）1例，T大颗粒淋巴细胞白血病1例；Lugano分期均为Ⅲ、Ⅳ期；8例患者有B症状；移植前中位化疗线程数为4（2~10）线，移植前疾病状态均为疾病进展（PD）。诊断至移植的中位时间为17（6~36）个月。②预处理方案：TBI总量10 Gy；rATG 2.5 mg·kg -1·d -1、-5 d~-2 d；依托泊苷15 mg·kg -1·d -1，-5 d、-4 d，环磷酰胺50 mg·kg -1·d -1，-3 d、-2 d。原发病中枢神经系统侵犯的患者，将依托泊苷和环磷酰胺替换为塞替派（5 mg·kg -1·d -1，-5 d、-4 d）并加用阿糖胞苷（2.0 g/m 2每日2次，-3 d、-2 d）。③所有患者均成功植入，中位中性粒细胞植入时间为14.5（11~16）d，中位血小板植入时间为13（8~18）d。1例患者发生Ⅰ~Ⅱ度急性移植物抗宿主病（GVHD），1例患者发生Ⅲ/Ⅳ度急性GVHD，8例存活患者中4例发生慢性GVHD。④移植后有9例患者获得完全缓解（CR）。⑤所有患者预处理后发生造血抑制，3例出现腹泻，4例发生黏膜炎，3例转氨酶/胆红素升高，7例发生感染，经过治疗均得到缓解。⑥移植后1年非复发死亡率（NRM）为（22.5±14.0）%，累积复发率（CIR）为（20.2±12.7）%，总生存（OS）率为（72.7±13.4）%，无病生存（DFS）率为（63.6±14.5）%。 结论:TBI+rATG为基础预处理haplo-HSCT是化疗耐药进展期PTCL有效且安全的治疗方法。

目的:分析2018年天津市儿童医院患儿GⅡ型诺如病毒（NoV）感染的分子流行病学特征。方法:单中心研究。2018年1至12月就诊于天津市儿童医院疑似病毒感染引起急性胃肠炎患儿粪便标本2 185份，采用实时荧光逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）检测NoV，对阳性标本的衣壳蛋白VP1（VP1）区进行基因扩增并测序，分析基因型并运用MEGA5.05作系统进化树分析。结果:2 185份粪便标本中检出NoV阳性标本610份，阳性率为27.9%（610/2 185），全部为GⅡ型，共发现7个基因型，以GⅡ.3型和GⅡ.4型为主，分别占46.2%（151/327）和40.1%（131/327），GⅡ.2型占4.6%（15/327），其他亚型占9.1%（30/327）。不同年龄组间NoV检出率差异有统计学意义（χ 2=17.050， P=0.002），其中阳性标本中以≤3岁年龄组检出率最高，占阳性标本总数的89.2%，不同月份NoV检出率差异有统计学意义（χ 2=225.153， P<0.001），其中11、12月为高发月份。GⅡ.3型和GⅡ.4型NoV感染的患儿在伴随粒细胞减少症方面，两种亚型差异有统计学意义（χ 2=11.270， P=0.001），在伴随呼吸道症状方面，两种亚型差异有统计学意义（χ 2=7.257， P=0.007）。 结论:2018年天津地区儿童NoV感染主要以GⅡ.3型和GⅡ.4型为主，基因型呈现多样性，提示本地区在今后应继续加强监测和预防儿童的NoV感染。

目的:对2018年青海省一例流感样病例中分离得到的柯萨奇病毒B组5型(coxsackievirus B5, CV-B5)分离株QH/CVB5/2018进行全基因组测序及遗传特性分析。方法:采用二代高通量测序对QH/CVB5/2 018分离株进行全基因组序列测定，利用SPAdes、DNAStar 7.1、MEGA 6.0、Simplot 3.5.1以及RDP4软件对病毒进行全基因组序列拼接以及遗传进化、基因重组和氨基酸突变分析。结果:QH/CVB5/2018全基因组核苷酸序列长度为7 369 bp，编码含2 185个氨基酸残基的多聚蛋白。基于基因组的序列同源性和系统进化分析，显示QH/CVB5/2018与417/JS/CHN/2013同源性最高，核苷酸序列一致性为96.9%(氨基酸序列同源性为99.5%)；基于VP1序列的系统进化分析显示QH/CVB5/2018处于CVB5-C基因型；重组分析显示QH/CVB5/2018可能为CHN_SH/CVB5/2008和CHN_YN-CVB3/2009的重组株，重组发生在6 114～7 199 bp；氨基酸突变位点分析显示，相比于其他CVB5毒株，139S、864S、1086R、1693C、1814D和1819N为QH/CVB5/2018特异突变位点。结论:QH/CVB5/2018分离株属于柯萨奇病毒B组5型的C组基因型，可能为重组株。

目的:了解北京市肠道门诊散发腹泻病例中札如病毒的基因型别及特征。方法:收集2019年北京市肠道门诊散发腹泻病例的粪便样本，应用实时荧光RT-PCR对样本进行札如病毒核酸检测，对阳性样本应用不同种RT-PCR方法进行札如病毒衣壳蛋白VP1区和聚合酶RdRp区部分基因片段扩增，对扩增阳性产物进行测序，应用BioEdit 7.0.9.0软件对序列进行比对，应用Mega 6.06软件构建进化树进行分析。结果:札如病毒总检出率为2.89%（44/1 522），<5岁病例的检出率为3.34%（18/539），≥5岁病例的检出率为2.64%（26/983）。衣壳蛋白VP1区基因测序成功23株，包括8个基因型（GⅠ.2型6株、GⅠ.1型和GⅡ.3型各5株，GⅠ.3型和GⅡ.5型各2株，GⅠ.5型、GⅡ.1型和GⅣ.1型各1株）；≥5岁病例占16株，GⅠ.2型构成比最高（37.50%，6/16），<5岁病例占7株，GⅠ.1型和GⅡ.3型构成比最高（均为42.86%，3/7）；每个基因型内部相似性为95.5%~100.0%，与不同年份、不同国家的人源或污水源的51株参考株相似性为92.2%~100.0%。聚合酶RdRp区测序成功25株8个基因型（9株GⅡ.P3型，4株GⅠ.P3型，GⅠ.P1型、GⅠ.P2型和GⅡ.P1型各为3株，GⅠ.P5型、GⅡ.P5型和GⅣ.P1型各为1株）；≥5岁病例占15株，GⅡ.P3型构成比最高（40.00%，6/15），<5岁病例占10株，GⅠ.P1型、GⅡ.P1型和GⅡ.P3型构成比最高（均为30.00%，3/10）；每个基因型内部相似性为94.0%~100.0%，与不同年份、不同国家的人源或污水源的39株参考株相似性为90.2%~99.1%。结论:札如病毒是北京市散发腹泻病例的病原之一，主要基因组为GⅠ和GⅡ，基因型多样且分散；≥5岁和<5岁人群腹泻病例主要基因型不同。

目的:表达和纯化人A组G1P[8]轮状病毒VP7蛋白(G1 VP7)；制备VP7多克隆抗体并进行抗体功能鉴定。方法:利用杆状病毒系统表达G1 VP7蛋白，通过亲和层析法进行蛋白纯化。将纯化后的G1 VP7蛋白免疫新西兰大白兔制备兔多抗血清，纯化得到G1 VP7兔多抗。通过免疫印迹(Western blot, WB)、酶联免疫吸附(ELISA)和免疫荧光试验进行多抗功能验证。结果:利用杆状病毒表达系统获得人A组G1P[8]轮状病毒可溶VP7蛋白，并且G1 VP7蛋白主要以三聚体形式存在；制备得到G1 VP7多抗，ELISA结果显示VP7多抗具有较高的效价；WB和ELISA实验表明VP7多抗能够识别多个G型轮状病毒的VP7；免疫荧光试验结果进一步显示G1 VP7多抗可以结合不同A组轮状病毒，包括Wa株(基因型G1P[8])、DS-1(基因型G2P[4])、SA11(基因型G3P[2])、人G9P[8]株。此外，双夹心ELISA初步结果显示包被VP7多抗可以检测到轮状病毒临床样本。结论:本研究成功得到可溶G1 VP7蛋白并制备VP7多抗；G1 VP7多抗可以结合多种G型轮状病毒，为不同G型轮状病毒检测方法的建立奠定基础。

目的:通过外源性引入IL-6载体，实现在循环中长期高表达IL-6，构建一种慢性系统性炎症的动物模型。方法:构建重组鼠IL-6编码腺相关病毒(IL-6-encoding adeno-associated virus, AAV-IL-6)。24周龄雄性C57BL/6J小鼠随机分为AAV-IL-6组、空白载体对照组、空白对照组，每组各7只，分别在干预开始0、8、16周尾静脉注射100 μl 0.5×10 10 vp/ml的AAV-IL-6、空白载体AAV或相同体积的生理盐水。ELISA检测小鼠血清IL-6水平。观察小鼠一般情况、血常规、血生化、C反应蛋白(C-reactive protein，CRP)。在24周干预结束后处死小鼠，取心肌、肝脏、脾脏、股四头肌、膝关节、股骨中段做HE染色。 结果:在干预后4、8、16及24周，AAV-IL-6组小鼠血清IL-6水平为(75.41~169.28) pg/ml，而两对照组均低于检测下限(7.8 pg/ml)。干预后24周，AAV-IL-6组小鼠体重明显低于两对照组；AAV-IL-6组小鼠中性粒细胞计数和CRP水平均高于两对照组，而白蛋白、肌酐、甘油三酯和胆固醇水平低于两对照组，上述指标在对照组之间差异无统计学意义；AAV-IL-6组及空白载体对照组小鼠淋巴细胞均高于空白对照组；3组小鼠肝、肾功能在干预结束后均正常。组织病理显示，AAV-IL-6组小鼠肝脏中央静脉区及心肌肌纤维间隙、骨骼肌肌纤维间隙灶性淋巴细胞浸润，脾脏弥漫性多核巨细胞浸润；骨骼肌肌纤维萎缩；骺板结构紊乱和软骨增生区变小，骨小梁变薄、稀疏；骨皮质变薄、类骨质减少，两对照组小鼠无相应的组织病理改变表现。结论:通过重复尾静脉注射AAV-IL-6能够实现小鼠长期循环高表达IL-6，初步检测该小鼠具有慢性系统性炎症表型，为相关研究提供了一种安全、有效且相对简单可及的动物模型。

目的:观察沙库巴曲/缬沙坦(LCZ696)对柯萨奇病毒B3(CVB3)诱导的病毒性心肌炎(VMC)小鼠中病毒复制及心肌细胞凋亡的作用，并探究其具体机制。方法:40只BALB/c小鼠随机分成4组( n＝10)：Sham组、Sham+LCZ696组、VMC组和VMC+LCZ696组。向BALB/c小鼠腹腔注射10 6 TCID 50/ml浓度CVB3 0.1 ml建立VMC模型，Sham组注射等量生理盐水，病毒注射当天被定义为第0天。每天60 mg/kg沙库巴曲/缬沙坦进行灌胃治疗，连续7 d。统计小鼠生存率；小动物超声检测小鼠心功能；ELISA法检测肌酸激酶MB同工酶(CK-MB)水平；Western blot检测小鼠心脏促炎因子(IL-6、TNF-α)，凋亡相关蛋白(caspase-3、cleaved-caspase-3、Bax、Bcl-2)，CVB3病毒表面蛋白(VP-1)及相关通路蛋白(p-PI3K/PI3K、p-AKT/AKT)水平；PCR检测小鼠心脏中CVB3 mRNA水平；HE染色检测小鼠心脏炎性细胞浸润水平；TUNEL检测小鼠心脏组织中细胞凋亡水平。 结果:与Sham组相比，VMC组生存率下降，心功能指标(LVEDd、LVEDs、LVEF)减退( P<0.05)。VMC组小鼠血清CK-MB及心脏中IL-6、TNF-α、cleaved-caspase-3/caspase-3、Bax/Bcl-2、VP-1、CVB3 mRNA显著上升( P<0.05)，同时AKT表达增多，而其磷酸化水平下降( P<0.05)，细胞凋亡增多。LCZ696逆转了以上变化，表现为生存率上升，心功能改善( P<0.05)，心脏炎症、凋亡与复制水平下调( P<0.05)，p-AKT的水平上升( P<0.05)。沙库巴曲/缬沙坦对正常小鼠生存率、心功能、心肌损伤、心脏炎症、凋亡、病毒复制水平以及PI3K/AKT通路相关蛋白均无明显影响。 结论:沙库巴曲/缬沙坦可通过调控PI3K/AKT通路，显著抑制VMC小鼠的心肌细胞凋亡水平，并降低CVB3在小鼠心脏中的病毒复制水平，抑制心肌炎症，从而改善小鼠心功能及生存率。

目的:拯救肠道病毒A组71型(enterovirus group A type 71, EV-A71)VP1蛋白突变型毒株(Val147→Ala)，探究该位点对病毒毒力的影响。方法:以SDLY107构建的质粒pMD19-T-EGFP-107为模板，利用定点突变和反向遗传学技术构建重组质粒pMD19-T-EGFP-107(VP1-1)，重组质粒转染至BSR-T7/5细胞，转染产物在RD细胞中连续传代3次，成功拯救突变型毒株SDLY-EGFP-107(VP1-1)，qRT-PCR检测病毒复制力，细胞增殖(CCK-8)和乳酸脱氢酶(LDH)实验检测病毒致细胞损伤力。结果:重叠融合PCR扩增得到目的片段，大小约3.4 kb；重组质粒经双酶切鉴定，测序验证突变成功。重组质粒转染BSR-T7/5细胞24 h观察到明显荧光，所收培养物上清接种至RD细胞24 h观察到明显荧光。qRT-PCR检测到突变型毒株SDLY-EGFP-107(VP1-1)在RD细胞中的复制能力弱于强毒株SDLY107( t＝9.58， P<0.001)。CCK-8、LDH实验检测到突变型毒株SDLY-EGFP-107(VP1-1)在RD细胞( t＝106.60， P<0.001； t＝39.88， P<0.001)、SH-SY5Y细胞( t＝18.72， P<0.001； t＝19.09， P<0.001)中的致细胞损伤力均明显弱于强毒株SDLY107。 结论:成功拯救突变型毒株SDLY-EGFP-107(VP1-1)，证实VP1蛋白第147位氨基酸位点突变可降低病毒的复制力及其致细胞损伤力，为进一步研究VP1蛋白在EV-A71致病机制中的作用提供基础。

目的:评价核受体辅激活因子4 (NCOA4)介导的铁自噬在小鼠肠缺血再灌注损伤中的作用及其与铁死亡的关系。方法:SPF级健康雄性C57BL/6小鼠30只，8~10周龄，体重21~25 g，采用随机数字表法分为5组( n＝6)：假手术组(Sham组)、肠缺血再灌注组(I/R组)、肠缺血再灌注＋NCOA4沉默组(I/R＋NCOA4 shRNA组)、肠缺血再灌注＋自噬抑制剂3-甲基腺嘌呤组(I/R＋3-MA)和肠缺血再灌注＋NCOA4沉默＋自噬激活剂雷帕霉素组(I/R＋NCOA4 shRNA＋RAPA组)。采用夹闭肠系膜上动脉45 min再灌注的方法制备小鼠肠缺血再灌注损伤模型。于造模前2周，I/R＋NCOA4 shRNA组和I/R＋NCOA4 shRNA＋RAPA组尾静脉注射AAV-NCOA4-shRNA 1×10 11 vp，Sham组、I/R组和I/R＋3-MA组注射AAV shCtrl(腺病毒对照) 1×10 11 vp。于造模前7 d I/R＋NCOA4 sh-RNA＋RAPA组腹腔注射雷帕霉素4 mg/kg，1次/d；于造模前1 h I/R＋3-MA组腹腔注射3-甲基腺嘌呤10 mg/kg。于再灌注2 h时，处死取肠组织，行Chiu评分，采用比色法检测MDA、谷胱甘肽(GSH)和Fe 2＋含量，ELISA法检测TNF-α和IL-1β含量，Western blot法检测NCOA4、微管相关蛋白1轻链3(LC3)、长链脂酰辅酶A合成酶4(ACSL4)、铁蛋白重链1(FTH1)和谷胱甘肽过氧化物酶4(GPX4)表达水平，计算LC3Ⅱ/LC3Ⅰ比值。 结果:与Sham组比较，I/R组肠组织Chiu评分、MDA、Fe 2＋、TNF-α和IL-1β含量升高，GSH含量降低，NCOA4和ACSL4表达上调，LC3Ⅱ/LC3Ⅰ比值升高，GPX4和FTH1表达下调( P<0.05)；与I/R组比较，I/R＋NCOA4 shRNA组和I/R＋3-MA组肠组织Chiu评分、MDA、Fe 2＋、TNF-α和IL-1β含量降低，GSH含量升高，I/R＋NCOA4 shRNA组肠组织NCOA4和ACSL4表达下调，GPX4和FTH1表达上调( P<0.05)，I/R＋3-MA组ACSL4表达下调，LC3Ⅱ/LC3Ⅰ比值降低，GPX4和FTH1表达上调( P<0.05)；I/R＋NCOA4 shRNA组与I/R＋NCOA4 shRNA＋RAPA组上述指标比较差异无统计学意义( P>0.05)。 结论:NCOA4介导的铁自噬可促进铁死亡，参与小鼠肠缺血再灌注损伤的病理生理机制。

目的:分析江苏省3个城市疱疹性咽峡炎（HA）流行病学与病原学特征，为江苏省HA的精准防控提供参考依据。方法:选择无锡市、苏州市和盐城市的3家监测哨点医院，2018年5月至2022年12月定期从医院住院管理系统分年龄段收集HA的就诊和住院病例的相关信息。采用RT-PCR方法进行肠道病毒核酸检测，并对主要流行株的衣壳蛋白VP1编码基因序列进行测序分析、基因亚型的鉴别和系统进化分析。结果:无锡市、苏州市和盐城市的HA就诊病例数为57 709例，是同期报告的手足口病例数的1.76倍（57 709/32 831）；HA住院占比为1.35%（781/57 709），住院占比逐年呈上升趋势（ χ2=62.79， P<0.001）。HA流行高峰为5-7月。发病年龄主要为12~59月龄组儿童（67.07%，38 708/57 709），以36~59月龄组居多（34.40%，19 852/57 709）。HA阳性率为33.82%（644/1 904）；以肠道病毒A组为主（54.04%，348/644）；其中柯萨奇病毒（CV）A6占比最高（52.59%，183/348），CVA16和CVA4分别占24.71%（86/348）和15.23%（53/348）。10株CVA4 HA流行株均属于C2基因亚型，6株CVA6 HA流行株均属于D3a基因亚型；并与我国部分地区（福建省、广州市、江西省、云南省、天津市等）毒株的遗传距离和亲缘关系较为接近。 结论:HA疾病负担较重，12~59月龄组是HA发病的重点人群，流行高峰为5-7月。HA病原多样化，以肠道病毒A组为主。HA流行株具有较低的型内分化，未发现新的进化分支。建议将HA纳入手足口病监测工作或法定传染病。