目的:探讨circ_0000285/miR-127/VAMP2轴对卵巢癌（ovarian cancer，OC）细胞增殖、侵袭的影响。方法:采用qRT-PCR对OC患者癌组织和癌旁组织中的circ_0000285、miR-127和VAMP2的表达进行检测，对circ_0000285和miR-127及circ_0000285和VAMP2的相关性进行分析。双荧光素酶报告实验（dual luciferase reporter assay）验证miR-127和circ_0000285/VAMP2之间的靶向关系。MTT和Transwell法分别检测细胞增殖活力和侵袭情况。结果:相对癌旁组织，OC组织样本中miR-127表达水平明显下降，circ_0000285和VAMP2表达增强，miR-127与circ_0000285和VAMP2表达均呈负相关（ r=-0.534 8, P<0.000 1； r=-0.376 6, P<0.000 1）。相对于si-NC组在24 h、48 h和72 h的增殖活力（0.47±0.03）（0.79±0.05）（1.16±0.09）和侵袭（100.00±12.33），敲除circ_0000285能抑制OC细胞增殖（0.28±0.02）（0.51±0.04）（0.78±0.06）和侵袭（49.22±5.08）（均 P<0.05）。过表达miR-127同样能抑制OC细胞增殖、侵袭，但该作用能被circ_0000285部分挽救。circ_0000285对OC进展的促进可能是通过miR-127/VAMP2轴实现的。 结论:circRNA circ_0000285能调控miR-127/VAMP2轴参与OC的进展，下调circRNA circ_0000285表达可抑制OC细胞增殖和侵袭能力，circ_0000285有望在OC疾病的靶向治疗中发挥作用。

目的 探讨木香烃内酯对胃癌细胞恶性表型的影响及可能机制.方法 体外培养胃癌细胞HGC-27,采用不同剂量(2.5、10、40 μmo·l L-1)木香烃内酯干预HGC-27细胞 24 h,或转染circ_0000285小干扰RNA至HGC-27细胞后培养24 h.采用40 μmo·l L-1木香烃内酯干预转染circ_0000285过表达载体的HGC-27细胞24 h.CCK-8法和克隆形成实验检测细胞增殖,流式细胞仪检测细胞凋亡,划痕实验和Transwell检测细胞迁移和侵袭,Western blotting检测细胞中Bcl-2、Bax、E-cadherin和N-cadherin蛋白表达,RT-qPCR检测circ_0000285和miR-409-3p表达,双荧光素酶报告基因实验验证circ_0000285和miR-409-3p的调控关系.结果 木香烃内酯可降低HGC-27细胞的OD值、集落形成数、迁移距离、侵袭数,以及Bcl-2、N-cadherin蛋白表达水平,提高细胞凋亡率及Bax、E-cadherin蛋白表达水平,并呈剂量依赖性.木香烃内酯可抑制HGC-27细胞中circ_0000285的表达,促进miR-409-3p表达.干扰circ_0000285表达可降低HGC-27细胞的增殖、迁移能力,并促进细胞凋亡.circ_0000285可靶向结合并负调控miR-409-3p.过表达circ_0000285可逆转木香烃内酯对HGC-27细胞恶性表型的影响.结论 木香烃内酯可能通过调控circ_0000285/miR-409-3p轴抑制胃癌细胞的恶性生物学行为.

目的:探究咪达唑仑对宫颈癌CaSki细胞增殖和凋亡的影响及可能机制.方法:用不同剂量(0、15、30、60 μg/mL)咪达唑仑干预CaSki细胞,CCK-8法、流式细胞术分别测定细胞增殖活性和凋亡,蛋白质印迹法测定Ki-67、pro-caspase3、cleaved-caspase3蛋白表达,RT-qPCR法测定circ_0000285表达.通过转染circ_0000285小干扰RNA或过表达载体构建干扰circ_0000285表达或过表达circ_0000285的CaSki细胞,再用0或60 μg/mL咪达唑仑干预,上述相同方法测定细胞增殖活性、凋亡及相关蛋白(Ki-67、pro-caspase3、cleaved-caspase3)表达.结果:CaSki细胞经咪达唑仑干预后,增殖活性、Ki-67、pro-caspase3蛋白表达量降低,细胞凋亡率、cleaved-caspase3蛋白表达量升高,且细胞中circ_0000285表达量降低.干扰circ_0000285表达后,CaSki细胞增殖活性、Ki-67、pro-caspase3蛋白表达量降低,细胞凋亡率、cleaved-caspase3蛋白表达量升高.过表达circ_0000285逆转咪达唑仑对CaSki细胞增殖、凋亡的影响.结论:咪达唑仑可能通过下调circ_0000285抑制宫颈癌CaSki细胞增殖,并促进细胞凋亡.

目的:探讨circ 0000285对宫颈癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响及其潜在分子机制.方法:收集宫颈癌患者的肿瘤组织和癌旁正常组织,qRT-PCR法检测组织中circ_0000285的表达.体外培养宫颈癌细胞OVCAR-3,采用瞬时转染干扰细胞中circ_0000285、miR-637和信号传导与转录激活因子3(STAT3)基因表达,qRT-PCR和Western blot实验检测细胞中circ_0000285、miR-637和STAT3基因表达,CCK8实验检测细胞增殖活性,Transwell小室实验检测细胞迁移和侵袭能力.双荧光素酶实验验证circ 0000285、miR-637和STAT3之间的靶向关系.结果:circ 0000285在宫颈癌组织和细胞中呈高表达,敲减circ_0000285抑制宫颈癌细胞的增殖、迁移和侵袭.circ_0000285靶向负调控miR-637表达,抑制miR-637能够逆转敲减circ_0000285对宫颈癌细胞增殖、迁移和侵袭的抑制作用.miR-637靶向负调控STAT3基因表达,过表达miR-637抑制宫颈癌细胞的增殖、迁移和侵袭,而共同过表达STAT3能够逆转miR-637的作用.结论:敲减circ_0000285通过靶向调控miR-637/STAT3轴表达,抑制宫颈癌细胞的增殖、迁移和侵袭.

目的 探讨环状RNA 0000285(circ_0000285)对缺氧/复氧诱导的心肌细胞氧化应激损伤的影响,并分析其机制是否与调控miR-625表达有关.方法 体外培养大鼠心肌细胞H9C2构建缺氧/复氧(H/R)细胞损伤模型.将H9C2细胞随机分为对照(Con)组、H/R组、H/R+si-NC组、H/R+si-circ_0000285组、H/R+miR-NC组、H/R+miR-625组、H/R+si-circ_0000285+anti-miR-NC组、H/R+si-circ_0000285+anti-miR-625组.实时定量PCR检测circ_0000285和miR-625表达量.流式细胞术检测H9C2细胞凋亡.免疫印迹法分析B细胞淋巴瘤-2蛋白(Bcl-2)和Bcl相关x蛋白(Bax)蛋白表达量.试剂盒检测丙二醛(MDA)含量以及超氧化物歧化酶(SOD)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性.双荧光素酶实验确定circ_0000285对miR-625的靶向作用.结果 H/R处理显著减低H9C2细胞中miR-625、Bcl-2表达量以及SOD和GSH-Px活性(P<0.05),增加circ_0000285和Bax表达量、MDA含量和细胞凋亡凋亡率(P<0.05).抑制circ_0000285表达或过表达miR-625显著增加H/R处理H9C2细胞中Bcl-2表达量以及SOD和GSH-Px活性(P<0.05),降低Bax表达量、MDA含量和细胞凋亡凋亡率(P<0.05).circ_0000285与miR-625直接结合,且circ_0000285负性调控miR-625表达(P<0.05).抑制miR-625表达可逆转抑制circ_0000285对H/R处理H9C2细胞氧化损伤和凋亡的保护作用(P<0.05).结论 干扰circ_0000285通过负调控miR-625表达能够减弱H/R诱导的心肌细胞凋亡和氧化应激损伤.

目的:探讨环状RNA 0000285(circ_0000285)是否靶向miR-127-5p调控阿尔茨海默病(AD)细胞模型损伤.方法:采用β淀粉样蛋白25-35多肽片段(Aβ25-35)诱导神经细胞瘤细胞SK-N-SH建立AD体外细胞模型.采用实时定量PCR(RT-qPCR)测定circ_0000285和miR-127-5p表达水平.试剂盒测定丙二醛(MDA)含量以及超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性.流式细胞术分析细胞凋亡,Western blot检测B细胞淋巴瘤(Bcl-2)和Bcl相关x蛋白(Bax)蛋白表达水平.采用上述方法测定干扰circ_0000285表达或过表达miR-127-5p对AD模型细胞凋亡、损伤的影响.双荧光素酶报告实验和RT-qPCR用于验证circ_0000285对miR-127-5p的靶向调控作用.结果:Aβ25-35处理显著上调circ_0000285表达及Bax蛋白水平,下调miR-127-5p及Bcl-2蛋白表达水平,增加MDA含量,降低SOD和GSH-Px活性,并提高细胞凋亡率.干扰circ_0000285表达或过表达miR-127-5p可显著下调Bax蛋白水平,上调Bcl-2蛋白表达水平,降低MDA含量,增加SOD和GSH-Px活性,并降低细胞凋亡率.circ_0000285靶向负调控miR-127-5p表达.抑制miR-127-5p表达显著减弱了干扰circ_0000285表达对模型细胞凋亡、损伤的影响.结论:干扰circ_0000285表达可通过靶向miR-127-5p减弱Aβ25-35诱导的SK-N-SH细胞损伤.因此,circ_0000285/miR-127-5p途径可能是AD的潜在治疗靶点.

目的 探讨circ_0000285对过氧化氢(H2O2)诱导的心肌细胞氧化损伤的影响及其可能作用机制.方法 H2O2诱导大鼠心肌细胞H9C2建立细胞氧化损伤模型,si-NC、si-circ_0000285、si-circ_0000285与anti-miR-NC、si-circ_0000285与anti-miR-625分别转染至H9C2细胞后加入200μmol/L H2O2处理;用实时定量聚合酶链反应(quantitative real time polymerase chain reaction,qRT-PCR)法检测circ_0000285、miR-625的表达量;用试剂盒检测丙二醛(malondialedhyde,MDA)、一氧化氮(nitric oxide,NO)的浓度与超氧化物歧化酶(superoxide dis-mutase,SOD)的活性;用MTT实验检测细胞增殖能力;用流式细胞术检测细胞凋亡率;双荧光素酶报告实验检测circ_0000285与miR-625的靶向关系;Western blot法检测活化半胱氨酸蛋白酶3(cleaved cysteinyl aspartate-specific protease-3,cleaved caspase-3)、微管相关蛋白轻链3II(microtubule-associated protein l light chain 3Ⅱ,LC3-Ⅱ)、微管相关蛋白轻链3Ⅰ(microtubule-associated protein l light chain 3Ⅰ,LC3-Ⅰ)蛋白表达量并计算LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ比值.结果 H2O2诱导的H9C2细胞中circ_0000285的表达量升高(1.00±0.04 vs.2.24±0.12),而miR-625的表达量降低(1.00±0.05 vs.0.37±0.05);转染si-circ_0000285可降低H2O2诱导的H9C2细胞中MDA[(44.59±2.74)μmol/L vs.(25.87±2.83)μmol/L]、NO[(88.91±4.15)μmol/L vs.(50.01±4.42)μmol/L]的浓度和LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ比值(1.67±0.26 vs.1.07±0.12)(P<0.05),并可降低细胞凋亡率(28.26％±4.20％vs.15.42％±0.80％)和cleaved caspase-3蛋白浓度(P<0.05),而细胞存活率(47.62％±5.48％vs.90.21％±3.67％)、SOD的活性[(11.32±1.39)U/mL vs.(37.44±2.43)U/mL]升高(P<0.05);circ_0000285可靶向调控miR-625的表达;共转染si-circ_0000285与anti-miR-625后H2O2诱导的H9C2细胞中MDA[(25.78±2.33)μmol/L vs.(36.83±2.29)μmol/L]、NO[(50.46±3.15)μmol/L vs.(70.72±2.12)μmol/L]的浓度和LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ比值(1.07±0.11 vs.1.49±0.27)升高(P<0.05),细胞凋亡率(15.35％±0.52％vs.19.76％±0.74％)和cleaved caspase-3蛋白浓度升高(P<0.05),而细胞存活率(90.24％±4.01％vs.57.12％±4.07％)和SOD的活性[(37.93±2.59)U/mL vs.(22.45±1.88)U/mL]降低(P<0.05).结论 干扰circ_0000285表达可通过上调miR-625的表达而促进心肌细胞增殖并可抑制细胞氧化应激反应、凋亡及自噬从而减轻H2O2诱导的心肌细胞氧化损伤.