严重烫伤后肠道缺血缺氧会引起肠上皮屏障受损，发生肠道细菌移位（EBT），从而导致严重的并发症，如SIRS、脓毒症和MOF的发生。囊性纤维化穿膜传导调节蛋白（CFTR）可因肠上皮细胞缺氧而表达下调，进而影响紧密连接蛋白的正常结构与功能，而紧密连接蛋白正是维持肠道屏障的关键结构。陆军军医大学（第三军医大学）第一附属医院全军烧伤研究所陈婧老师团队联合上海交通大学第九人民医院整复外科章一新教授团队近期在《Burns & Trauma》发文《Molecular mechanism mediating enteric bacterial translocation after severe burn: the role of cystic fibrosis transmembrane conductance regulator》，使用人Caco-2细胞系建立体外缺氧损伤模型，并建立C57小鼠严重烫伤模型，研究严重烫伤对小鼠肠黏膜屏障、CFTR和紧密连接蛋白表达的影响，同时选取DF 508小鼠（F508del CFTR基因突变小鼠）为体内模型，进一步证明CFTR在维持小鼠正常肠道屏障功能中的作用。研究结果显示，在缺氧条件下，人Caco-2细胞中CFTR的表达显著降低；胞外信号调节激酶（ERK）和核因子κB信号被激活；炎症因子（TNF-α、IL-1β和IL-8）分泌增加；带状闭合蛋白1（ZO-1）、闭合蛋白和E-钙黏合素的表达下调；跨上皮电阻值降低；并导致ZO-1在细胞膜上分布不连续，排列不规则。同样地，敲除CFTR导致了相似的改变，且敲除CFTR引起的炎症因子的上调和紧密连接蛋白（ZO-1和闭合蛋白）的下调，可以通过抑制特定的ERK或核因子κB而逆转。与此同时，在严重烫伤小鼠的肠道中观察到大量的促炎症介质分泌和EBT，进一步支持了体外实验结果。与野生型小鼠相比，DF 508小鼠回肠中的TNF-α、IL-1β和IL-8浓度升高。此外，维生素D3被证明可以保护肠道上皮屏障免受缺氧损伤，机制可能与其上调CFTR表达，从而抑制ERK通路激活，减少促炎性细胞因子释放有关。此项研究结果表明，严重烫伤后，肠上皮细胞通过CFTR/ERK/促炎性细胞因子途径调节细胞间紧密连接蛋白的表达，进而调节肠道菌群移位，维生素D3可对严重烫伤后的肠黏膜屏障起到保护作用。

目的:探讨不同年龄组人脂肪干细胞(ADSC)形态学、衰老特征、分化潜能、表面标志物表达、增殖能力差异，ADSC对成纤维细胞(Fb)增殖、迁移的影响。方法:2020年1—12月，取解放军联勤保障部队第九四〇医院烧伤整形科27例美容就医者的脂肪组织，年龄0~59岁。按供体年龄分为0~9岁组(4例)、10~19岁组(4例)、20~29岁组(5例)、30~39岁组(5例)、40~49岁组(5例)、50~59岁组(4例)6个组。获取各组ADSC传代培养，观察各组形态学特征，CCK-8法检测各组ADSC增殖能力，体外成脂、成骨诱导检测各组ADSC分化潜能，流式细胞仪检测各组ADSC表面标志物表达水平，qPCR检测各组(HGF)、(PPAR-γ)、Ⅲ型胶原酶、(DbX2)表达水平。收集同期1名健康对照者皮肤组织，获取Fb并传代培养至第二代，制备不同年龄组ADSC条件培养基(ADSC-CM)，通过CCK-8法检测各组ADSC-CM培养Fb的增殖能力，细胞划痕法检测Fb的迁移能力。用SPSS 21.0软件进行数据分析。结果:6个年龄组细胞均呈典型梭形，低龄组细胞可见细胞核小，细胞形态均匀相似；>20岁组细胞细胞核较大，形态不均匀。ADSC细胞增殖能力随年龄增长逐渐降低。ADSC成脂、成骨分化能力随年龄增加逐渐下降。各组ADSC间充质干细胞阳性表面标志物表达率均>93%。PPAR-γ、HGF、Ⅲ型胶原酶表达水平均随年龄增长而下降；DbX2表达水平随年龄增长而呈上升趋势。各组SA-β-GAL染色阳性细胞数随年龄增长而上升。各组ADSC-CM均可促进Fb增殖，但各组间差异无统计学意义( P>0.05)；随着年龄增加，ADSC-CM促进Fb迁移能力逐渐下降。 结论:人ADSC增殖能力、多向分化能力、分泌多种促进Fb增殖和迁移的细胞因子能力随着年龄增长出现下降趋势，但ADSC成脂分化能力从40岁后才出现明显下降，各年龄组ADSC都可促进Fb增殖和迁移。

目的:研究黄柏酮的分子特性，筛选并鉴定黄柏酮抗脓毒症的潜在靶点。方法:通过中药系统药理学数据库分析平台（TCMSP）分析黄柏酮的药理参数和分子特性；通过化合物靶标预测平台工具SwissTargetPrediction服务器和化学成分靶向蛋白服务器（DRAR-CPI），以Z'值<-0.5筛选黄柏酮抗脓毒症的潜在靶点；通过人类孟德尔遗传在线（OMIM）数据库、毒性与基因比较数据库（CTD）和药物靶标数据库（TTD）中已报道的蛋白信息与脓毒症相关疾病靶标进行匹配，筛选黄柏酮抗脓毒症的靶点；进一步通过分子对接软件鉴定黄柏酮抗脓毒症的潜在靶点。结果:黄柏酮口服生物利用度（OB）为81.58%，药物相似度（DL）为0.57，表明其口服吸收较好，具有很好的成药性。通过SwissTargetPrediction和DRAR-CPI服务器共筛选到242个黄柏酮抗脓毒症的潜在靶点，其中有13个靶点与脓毒症直接相关。经分子对接软件鉴定，组织蛋白酶G（CTSG）、胱天蛋白酶1（CASP1）、S100钙结合蛋白A9（S100A9）、蛋白C（凝血因子Ⅴa和Ⅷa抑制因子，PROC）、丝裂素活化蛋白激酶1（MAPK1）、葡萄糖-6-磷酸脱氢酶（G6PD）、白细胞介素-10（IL-10）、巨噬细胞移动抑制因子（MIF）、C5a受体1（C5AR1）、胱天蛋白酶3（CASP3）、CXC趋化因子受体2（CXCR2）、凝血酶受体（F2R）和烟酰胺磷酸核糖转移酶（NAMPT）为黄柏酮抗脓毒症的潜在靶点，自由结合能分别为-32.55、1.26、-30.00、300.08、-31.88、-30.29、-21.38、-30.79、16?777.84、-21.80、6?443.36、-20.38、-23.47 kJ/mol。结论:黄柏酮通过调控PROC和F2R抑制凝血并改善炎症反应；调节MIF、S100A9、G6PD和IL-10起到免疫应答作用；调节CTSG、CASP1、MAPK1、C5AR1和CASP3起到保护脓毒症损伤器官的作用；调控CXCR2减少中性粒细胞向炎症部位过度迁移，减轻组织损伤；调控NAMPT改善细胞能量状态，减少氧化应激从而保护细胞不受损害，并通过减轻脓毒症的症状和炎症反应来发挥其抗脓毒症的作用。

目的:观察瑞舒伐他汀对骨髓间充质干细胞(MSCs)增殖、成骨分化以及磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)/蛋白激酶B(Akt)信号表达的影响。方法:分离培养MSCs，加入1×10 －11、1×10 －9、1×10 －7 mol/L瑞舒伐他汀为实验组，加入二甲基亚砜(DMSO)为对照组，以噻唑蓝(MTT)测定细胞增殖。成骨诱导培养3、7、14、21 d，依次进行碱性磷酸酶(ALP)定量、茜素红染色及定量、实时定量聚合酶链反应(Real-time PCR)和蛋白质印迹法(Western blot)等检测。两组间比较采用 t检验，两组以上比较采用方差分析。 结果:在24、48 h，只有1×10 －7 mol/L组MSCs增殖显著增加(24 h：3.57±0.24比3.14±0.14， t＝－3.851， P<0.05；48 h：4.19±0.18比3.44±0.11， t＝－6.780， P<0.05)，差异有统计学意义，直到72 h时，1×10 －9 mol/L组MSCs增殖也显著增加(5.42±0.13比4.47±0.16， t＝－8.700， P<0.05)，差异有统计学意义。在成骨诱导培养3 d，1×10 －7 mol/L组可显著增强骨形成蛋白2(BMP2)、Runt相关转录因子2(Runx2)、骨桥蛋白(OPN)、Ⅰ型胶原(ColⅠ)4种基因表达(BMP2：2.1±0.2比1.0±0.2， t＝－6.736， P<0.05；Runx2：5.2±0.6比1.0±0.1， t＝－11.959， P<0.05；OPN：1.8±0.4比1.0±0.2， t＝－3.098， P<0.05；ColⅠ：1.9±0.3比1.0±0.3， t＝－3.674， P<0.05)，差异有统计学意义；同时，1×10 －7 mol/L瑞舒伐他汀可使磷酸化的磷脂酰肌醇3-激酶(p-PI3K)和蛋白激酶B(p-Akt)高表达。诱导培养至14 d和21 d，1×10 －9、1×10 －7 mol/L两组ALP均显著增高(14 d：12.07±1.67、18.32±2.26比3.43±0.36， F＝7.200， P<0.05；21 d：10.74±1.27、14.71±3.18比5.76±0.63， F＝6.489， P<0.05)，差异有统计学意义。茜素红定量与染色相似，在同期1×10 －9 mol/L和1×10 －7 mol/L茜素红定量也高于对照组(14 d：5.6±0.8、6.2±1.2比1.0±0.2， F＝5.600， P<0.05；21 d：5.8±1.1、7.1±1.8比2.4±0.3， F＝5.956， P<0.05)，差异有统计学意义。 结论:瑞舒伐他汀促进MSCs增殖及成骨分化，其促骨形成可能与PI3K/Akt信号激活有关。

目的:探讨褪黑素（melatonin，MEL）对氟暴露子代大鼠学习记忆能力的影响及肠道菌群在其中的作用。方法:选取12只8周龄SD大鼠（雌鼠8只、雄鼠4只），体质量为180 ~ 220 g，采用随机数字表法分为对照组1和染氟组1，每组6只（雌∶雄= 2 ∶ 1），分别自由饮用纯净水和含100 mg/L氟化钠的纯净水。2个月后雌雄大鼠合笼饲养，将子代大鼠出生后（postnatal day，PND）第1天记为PND0。于PND21，采用成组设计将染氟组1子代大鼠分为染氟组（F组， n = 6）和染氟+ MEL组（FM组， n = 6），并继续饮水氟暴露；对照组1子代大鼠分为对照组（C组， n = 6）和MEL组（ n = 6）。FM和MEL组给予20 mg/kg MEL灌胃，C和F组给予相同剂量生理盐水灌胃。于PND60，采用新事物识别实验和水迷宫实验观察子代大鼠学习记忆能力，蛋白质印迹法（Western blot，WB）检测子代大鼠海马组织脑源性神经营养因子（brain derived neurotrophic factor，BDNF）蛋白表达水平；并采用16S rDNA测序技术检测粪便样本中肠道菌群结构和组成变化情况。 结果:新事物识别实验结果显示，4组子代大鼠鉴别指数（discrimination index，DI）比较，差异有统计学意义（ F = 3.95， P = 0.024），C、FM组DI均高于F组（均 P < 0.05）。水迷宫实验结果显示，与C组比较，F组子代大鼠穿越平台次数较少，首次到达平台时间较长（均 P < 0.05）；与F组比较，FM组子代大鼠穿越平台次数较多，首次到达平台时间较短（均 P < 0.05）。WB结果显示，与C组（1.00 ± 0.07）比较，F组BDNF蛋白表达水平（0.68 ± 0.26）较低（ P < 0.05）；与F组比较，FM组BDNF蛋白表达水平（0.99 ± 0.14）较高（ P < 0.05）。Anosim相似性分析显示，4组子代大鼠肠道菌群结构和组成存在显著差异（ R = 0.395 062， P = 0.002）。肠道菌群物种分布特征结果显示，门水平上，与C组比较，F组拟杆菌门相对丰度从14.26%升至37.00%，厚壁菌门相对丰度从68.78%降至45.95%；与F组比较，FM组厚壁菌门相对丰度从45.95%升至65.26%，拟杆菌门相对丰度从37.00%降至23.00%。属水平上，与C组比较，F组乳杆菌属、杜氏菌属、HT002、UCG-005的相对丰度均较低，未分类的 Muribaculaceae属相对丰度较高；与F组比较，FM组乳杆菌属、杜氏菌属、HT002、UCG-005的相对丰度均较高，未分类的 Muribaculaceae属相对丰度较低。线性判别分析结果显示，候选单胞生糖菌属、毛螺菌属显著富集于C组，未分类的 Muribaculaceae属、 Muribaculum属显著富集于F组，异根瘤菌-新根瘤菌-副根瘤菌-根瘤菌属显著富集于FM组。 结论:MEL可以改善氟暴露所致的子代大鼠学习记忆能力损伤，可能与改变肠道菌群结构和组成有关。

目的:了解青海高原成人大骨节病（KBD）患者血清血管内皮生长因子（VEGF）改变情况，为科学防治KBD提供依据。方法:2017年7 - 9月，采用成组设计，在青海省海南藏族自治州兴海、贵德县KBD病区，根据《大骨节病诊断》，选取20岁以上成人KBD患者及健康人群分别作为KBD组和病区内对照组；同时在生产和生活方式相似的循化县选取20岁以上健康人群作为病区外对照组。采集3组人群空腹肘静脉血，使用酶联免疫吸附试验（ELISA）法检测目标人群血清VEGF水平。结果:共调查272人，其中KBD组104人，病区内对照组95人，病区外对照组73人，组间年龄、性别比例比较差异无统计学意义（ F = 2.236， P > 0.05；χ 2 = 3.135， P > 0.05）。KBD组患者血清VEGF中位数为504.23 pg/ml，病区内对照组为328.65 pg/ml，病区外对照组为309.20 pg/ml，组间比较差异有统计学意义（ Z = 150.472， P < 0.01），其中KBD组高于病区内、外对照组（ P均< 0.05），而病区内、外对照组间比较差异无统计学意义（ P > 0.05）。 结论:青海高原成人大骨节病患者血清VEGF含量增高。

目的:探讨益生菌制剂对大鼠回肠造口术后肠道功能恢复和造口周围刺激性皮炎的影响。方法:取周龄相似(10～13周)体重相近(340～370 g)的无特定病原体(SPF)级雄性SD大鼠18只采用随机数字表法将其平均分为嗜酸乳杆菌组、布拉式酵母菌组和对照组，每组6只，行回肠造口术。分别予嗜酸乳杆菌、布拉式酵母菌及常规饮食不同干预。于第10天评估血清前白蛋白(PA)和白蛋白(ALB)、小肠推进率、造口周围刺激性皮炎(DET)和粪便布里斯托(Bristol)评分、肿瘤坏死因子-α，并比较3组间菌群差异。计量资料组间比较采用单因素方差分析，而进一步两两比较采用LSD分析。结果:术后第10天布拉氏酵母菌组和嗜酸乳杆菌组体重、PA、ALB均高于对照组[(287.67±20.00) g比(263.67±18.25) g比(231.00±19.56) g、(194.27±6.76) mg/L比(186.00±9.23) mg/L比(166.09±3.77) mg/L、(20.14±2.06) g/L比(19.81±1.91) g/L比(15.67±1.17) g/L]，差异均有统计学意义( F＝13.051、26.013、11.987， P<0.01)；小肠推进率、DET、Bristol评分和肿瘤坏死因子-α水平均低于对照组[(36.16±7.93)%比(42.18±3.73)%比(46.08±5.38)%、(4.50±1.05)比(5.00±1.10)比(7.33±0.82)、(4.45±0.19)比(4.60±0.19)比(5.52±0.26)、(58.28±20.85) ng/L比(51.00±18.10) ng/L比(99.44±41.90) ng/L]，差异均有统计学意义( F＝4.248、13.876、43.382、4.883， P<0.05)。线性判别分析效应量(LefSe)分析显示，益生菌组的梭菌属-产气荚膜梭菌的含量明显低于对照组(线性判别分析值＝3， P<0.05)，差异有统计学意义。 结论:益生菌制剂有助于促进回肠造口术后肠道功能恢复，维持肠道菌群稳态，减少并发症发生。

目的:分析红花素的分子特性，筛选并鉴定红花素抗脓毒症的潜在靶点。方法:通过中药系统药理学分析平台（TCMSP）分析红花素的药理参数和分子特性。采用SwissTargetprediction服务器（提供化合物靶点预测的网站）和通过化学蛋白质相互作用分析来预测化学成分靶向蛋白的服务器（DRAR-CPI）筛选红花素抗脓毒症的潜在靶点，并与人类孟德尔遗传病数据库（OMIM）、毒性与基因比较数据库（CTD）和药物靶点数据库（TTD）中已发布的抗脓毒症相关疾病靶点进行匹配，筛选出红花素的抗脓毒症靶点，进一步通过分子对接服务器鉴定红花素抗脓毒症的潜在靶点。结果:红花素的口服生物利用度为41.15%，药物相似度为0.24，可旋转键数为1，表明红花素口服吸收较好，具有良好的成药性。通过SwissTargetprediction和DRAR-CPI服务器共筛选到115个潜在靶点；从OMIM、CTD和TTD 3个数据库中共获得149个疾病靶点；将两个服务器筛选出的115个红花素靶向蛋白与疾病靶向蛋白进行匹配，发现既是分子靶点又是疾病靶点的蛋白有10个，分别为凝血因子Ⅸ（F9）、腺苷A1受体（ADORA1）、一氧化氮合酶2（NOS2）、丝裂素活化蛋白激酶1（MAPK1）、组织蛋白酶G（CTSG）、中性粒细胞弹性蛋白酶（ELANE）、蛋白C（PROC）、脂钙蛋白2（LCN2）、葡萄糖-6-磷酸脱氢酶（G6PD）和前列腺素内过氧化物酶２（PTGS2）。经分子对接服务器鉴定显示，红花素具有与上述10个靶向蛋白结合的能力，为红花素抗脓毒症的潜在靶点；红花素可通过与靶向蛋白的关键氨基酸残基发生交互作用，从而发挥相应的药效。结论:红花素能够通过调节CTSG、ELANE和LCN2抑制脓毒症组织和器官损伤，通过调控ADORA1、PTGS2、NOS2和MAPK1减轻炎症，通过调控PROC和F9抑制凝血并减轻脓毒症炎症反应，通过调节G6PD改善氧化应激而减少脓毒症的发生，最终预防和治疗脓毒症。

目的 建立血塞通片溶出度检验方法,测定血塞通片中三七皂苷R1、人参皂苷Rg1、人参皂苷Re、人参皂苷Rb1和人参皂苷Rd的整合溶出度.方法 以小杯法进行溶出度实验,采用高效液相色谱法(HPLC)测定5种指标成分的溶出量,采用质量分数权重系数法进行溶出度整合.绘制溶出曲线,采用f2相似因子法比较各成分溶出曲线与整合溶出曲线的相似性,对整合溶出数据进行模型拟合,计算溶出参数T50、Td和T85.结果 以水为溶出介质,转速50 r/min,60 min取样.5种指标成分溶出曲线与整合溶出度溶出曲线的f2相似因子分别为64.5,61.6,79.8,60.0和68.2.溶出数据拟合模型以Weibull模型最优,溶出参数T50、Td和T85分别为12.29 min、18.09 min和56.09 min.结论 建立的溶出度检查方法准确、可行,采用质量分数权重系数法整合溶出度能较好地表征血塞通片的体外溶出行为,可为血塞通片的质量一致性评价研究及质量控制提供技术借鉴.

目的 建立18个品种苦荞麦Fagopyrum tataricum指纹图谱,并以芦丁为内标物,采用一测多评法(quantitative analysis of multi-components by single-marker,QAMS)同时检测苦荞麦中葫芦巴碱、表儿茶素、山柰酚-3-O-芸香糖苷、槲皮素、山柰酚和大黄素含量,以期对不同产地苦荞麦进行质量控制.方法 采用超高效液相-三重四级杆液质联用技术(UPLC-QQQ-MS/MS),首次以一级全扫(Full-MS)和多反应监测(multiple reaction monitoring,MRM)2种采集模式相结合的方式建立UPLC-QQQ-MS/MS指纹图谱共有模式,采用夹角余弦法进行相似度评价.以ThermoFisher AccucoreTMC18色谱柱(100mm×3.0mm,2.6μm);流动相为乙腈-0.1％甲酸水溶液,体积流量0.3 mL/min,柱温30 ℃,梯度洗脱.以芦丁作为内标物,建立苦荞中其他6种指标成分的相对校正因子(fs/x),从而计算各待测成分的量,并将QAMS计算值与外标法(external standard method,ESM)实测值进行比较,以验证QAMS的准确性和方法适宜性.运用聚类分析、主成分分析、加权分析等化学计量学分析手段建立苦荞麦综合质量优劣评价方法.结果 建立了苦荞麦的UPLC-QQQ-MS/MS指纹图谱,在Full-MS扫描模式下标定了 15个共有峰,各品种间相似度在0.399～0.973;同时以MRM扫描模式结合对照品对其中芦丁等7种指标成分进行了峰指认.以芦丁为内标物,与葫芦巴碱、表儿茶素、山柰酚-3-O-芸香糖苷、槲皮素、山柰酚和大黄素6种有效成分的建立的fs/x重现性良好,分别为0.283、1.338、0.654、1.162、8.509、0.709.且采用QAMS测定的18个品种苦荞麦中7种指标成分含量与ESM的实测值之间无显著性差异(P＞0.05).化学计量学分析结果表明,芦丁、山柰酚-3-O-芸香糖苷和山柰酚是影响苦荞麦质量的主要潜在标志物,质量排序相对靠前的苦荞麦产区主要集中在海拔高、光照强、昼夜温差大的中国西南地区,而指纹图谱相似度差异较明显的荞杂2号、综甜2号和通荞1号排在后3位.结论 所建立的指纹图谱结合QAMS简便可行,结果准确,化学计量学分析方法全面客观,可为苦荞麦品质评价和质量控制提供参考和依据.