目的:探讨miR-125a-5p靶向调控清道夫受体B1( Scarb1)基因对缺氧/复氧大鼠心肌细胞损伤的影响及作用机制。 方法:将体外培养的H9c2大鼠心肌细胞随机分为空白对照组、缺氧/复氧组、转染对照组和miR-125a-5p转染组。检测各组miR-125a-5p的表达量、心肌细胞的活力、凋亡率、ATP含量以及Scarb1、Cyt C、Bax、Bcl-2及NF-κB信号通路相关蛋白的表达情况。利用Targetscan软件预测miR-125a-5p的靶基因，用双荧光素酶报告基因实验验证miR-125a-5p和 Scarb1的靶向关系。 结果:与空白对照组相比，缺氧/复氧组心肌细胞miR-125a-5p、Bax、Cyt C的表达和凋亡率明显升高( P<0.05)，细胞活力、Scarb1、Bcl-2的表达及ATP含量明显降低( P<0.05)。与转染对照组相比，miR-125a-5p转染组的情况与上述变化相反。双荧光素酶报告基因实验证实 Scarb1为miR-125a-5p的靶基因。缺氧/复氧能够促进心肌细胞中NF-κB p65、c-Myc和Cyclin D1蛋白的表达，而下调miR-125a-5p的表达则能够抑制上述蛋白的表达。 结论:缺氧/复氧能够诱导心肌细胞中miR-125a-5p的表达，抑制miR-125a-5p则能够通过上调 Scarb1的表达对缺氧/复氧心肌细胞起保护作用，其机制可能与抑制NF-κB信号通路的活化有关。

目的:探究血清微小核糖核酸-125(microRNA-125，miR-125)联合RSAD2 mRNA表达水平检测在预测弥漫性大B细胞淋巴瘤患者预后中的价值。方法:选取2016年4月至2019年4月苏州大学附属第一医院收治的弥漫性大B细胞淋巴瘤92例进行前瞻性研究，采用荧光PCR法分别检测血清miR-125相对表达量和外周血RSAD2mRNA相对表达量，并根据3年随访结局分为死亡组(70例)和生存组(19例)。分析弥漫性大B细胞淋巴瘤预后的影响因素，评估血清miR-125、外周血RSAD2 mRNA相对表达水平对弥漫性大B细胞淋巴瘤预后的预测效能。结果:92例弥漫性大B细胞淋巴瘤中失访3例，随访率96.74%；死亡19例，死亡率为21.35%；生存70例，生存率为78.65%。死亡组血清miR-125、外周血RSAD2 mRNA相对表达量均显著高于生存组，差异有统计学意义[(3.05±0.470比(1.14±0.29)，(7.59±1.12)比(1.81±0.32)， t值分别为22.02、38.28， P值均<0.05)。Logistic分析显示，病理分期Ⅲ~Ⅳ期( OR＝3.63，95% CI：1.24~10.62)、免疫组化ABC型( OR＝3.88，95% CI：1.33~11.34)、血清miR-125( OR＝3.05，95% CI：1.20~10.25)及外周血RSAD2 mRNA相对表达水平升高( OR＝3.69，95% CI：1.26~10.80)均是弥漫性大B细胞淋巴瘤预后死亡的危险因素( P<0.05)。受试者工作特性曲线(receiver operating characteristic curve，ROC)分析显示，血清miR-125、外周血RSAD2 mRNA相对表达水平单一及联合预测弥漫性大B细胞淋巴瘤预后死亡的曲线下面积(area under the curve，AUC)分别为0.71(95% CI：0.60~0.82)、0.72(95% CI：0.61~0.84)和0.77(95% CI：0.64~0.90)。 结论:血清miR-125、外周血RSAD2 mRNA相对表达水平预测弥漫性大B细胞淋巴瘤患者的预后效能良好。

miRNA是一种性质稳定的小分子RNA，在动物、植物内大量表达，可通过与目的mRNA的3’非翻译区碱基互补配对结合，在转录后水平调控靶基因的表达。某些miRNA的表达失调及其后续的异常生物学调控，与老年性黄斑变性（AMD）发生发展中的炎症反应、氧化应激损伤、吞噬功能障碍以及异常血管生成方面有着密切联系。鉴于miR-155、miR-125b及miR-34a的失调似乎对AMD的发生起到了更加重要的作用，这些miRNA或有望成为AMD的诊断标记物及治疗新靶点。

目的:探讨miR-125b对宫颈癌细胞放射敏感性的影响及其可能的下游机制研究。方法:实时荧光定量聚合酶链反应(quantitative real-time PCR，RT-qPCR)检测宫颈癌组织和细胞中miR-125b和Foxp3的表达量。HeLa细胞进行梯度剂量X射线(0、2、4、6 Gy)照射后，RT-qPCR检测HeLa细胞中miR-125b和Foxp3的表达量。下调miR-125b表达，经6 Gy X射线照射，MTT试验检测HeLa细胞增殖能力，Western blot检测Bax和Bcl-2蛋白表达量。通过Targetscan和双荧光素报告基因实验检测miR-125b与Foxp3的靶向关系。下调Foxp3表达，经6 Gy X射线照射，MTT试验检测HeLa细胞增殖能力，Western blot检测Bax和Bcl-2蛋白表达量。检测miR-125b通过Foxp3对HeLa细胞放射敏感性的影响。下调Foxp3后通过ELISA检测细胞上清液中IL-10和TGF-β的含量。结果:宫颈癌组织和细胞中miR-125b的表达量显著降低，Foxp3表达量显著升高，miR-125b的表达量随着X射线放射剂量增加而升高，Foxp3表达量随着X射线放射剂量增加而降低。6 Gy X射线照射HeLa细胞后，下调miR-125b提高细胞增殖能力，使Bax表达量明显降低，Bcl-2表达量明显升高。miR-125b靶向Foxp3且负调控Foxp3表达。6 Gy X射线照射细胞后，下调Foxp3可显著降低HeLa细胞增殖能力，使Bax表达量明显升高，Bcl-2表达量明显降低。过表达miR-125b能够通过Foxp3增强HeLa细胞的放射敏感性。6 Gy X射线照射细胞后，下调Foxp3降低了细胞中IL-10和TGF-β的表达。结论:上调miR-125b通过靶向和负调控Foxp3，从而增强宫颈癌细胞的放射敏感性，且作用机制可能与下调Foxp3使细胞中IL-10和TGF-β的表达减少有关。

目的:探讨蛇菰多糖对人肺鳞癌NCI-H520细胞增殖和迁移的影响及作用机制。方法:本研究为实验研究。运用不同浓度蛇菰多糖(0、25、50、75、100、125 mg/L)处理肺鳞癌NCI-H520细胞26 h，CCK-8法分析不同浓度的蛇菰多糖对NCI-H520细胞活力的影响。取对数生长期的NCI-H520细胞分为对照组和蛇菰多糖组(125 mg/L)，克隆形成实验、划痕实验分别比较2组NCI-H520细胞增殖和迁移能力，通过蛋白质印迹法比较2组NCI-H520细胞增殖相关蛋白(CDK4、Cyclin D3、Cyclin D2)和迁移相关蛋白(Fibronectin、α-SMA)表达。定量反转录PCR(qRT-PCR)比较2组RP11-1212A22.4、miR-146a-5p的表达。运用TCGA数据库评估RP11-1212A22.4在肺鳞癌组织中的表达。LncRNASNP软件预测RP11-1212A22.4和miR-146a-5p之间的结合位点。采用Pearson法分析TCGA数据库肺鳞癌组织中miR-146a-5p与RP11-1212A22.4表达的相关性。将NCI-H520细胞分为4组：共转染miR-NC和WT-RP11-1212A22.4组、共转染miR-146a-5p和WT-RP11-1212A22.4组、共转染miR-NC和MUT-RP11-1212A22.4组、共转染miR-146a-5p和MUT-RP11-1212A22.4组。双荧光素酶报告基因实验验证4组RP11-1212A22.4和miR-146a-5p的靶向结合。结果:不同浓度的蛇菰多糖对NCI-H520细胞增殖抑制率差异有统计学意义( F＝63.41， P<0.001)。与0 mg/L剂量相比，蛇菰多糖25、50、75、100、125 mg/L剂量作用下的肺鳞癌NCI-H520细胞增殖抑制率均上升(均 P<0.01)。与对照组相比，蛇菰多糖组NCI-H520细胞克隆形成能力[(106.80±14.42)个比(39.66±8.69)个； t＝3.99， P＝0.007]和迁移能力[(43.16%±3.38%)比(12.26%±3.55%)； t＝6.31， P＝0.001]被抑制。与对照组相比，蛇菰多糖组NCI-H520细胞中增殖相关蛋白(CDK4、Cyclin D3、Cyclin D2)和迁移相关蛋白(Fibronectin、α-SMA)表达均下降(均 P<0.01)。与对照组相比，蛇菰多糖组NCI-H520细胞中RP11-1212A22.4的表达升高[(1.06±0.36)比(7.08±0.29)； t＝12.96， P<0.001]。TCGA数据库分析显示，肺鳞癌组织中RP11-1212A22.4表达低于癌旁组织[(5.61±0.81)比(7.21±0.74)； t＝23.12， P＝0.001]。LncRNASNP预测显示，RP11-1212A22.4基因序列与miR-146a-5p存在特异的结合区域，评分最高为0.99。与共转染miR-NC和WT-RP11-1212A22.4组相比，共转染miR-146a-5p和WT-RP11-1212A22.4组的NCI-H520细胞荧光活性降低[(0.99±0.12)比(0.26±0.06)； t＝5.56， P＝0.001]；共转染miR-NC和MUT-RP11-1212A22.4组与共转染miR-146a-5p和MUT-RP11-1212A22.4组荧光活性差异无统计学意义[(0.97±0.05)比(1.00±0.07)； t＝0.26， P＝0.804]。miR-146a-5p与RP11-1212A22.4的表达呈负相关( r＝－0.82， P<0.01)。与对照组相比，蛇菰多糖组miR-146a-5p的表达降低[(5.42±0.77)比(1.01±0.36)； t＝5.20， P＝0.002]。 结论:蛇菰多糖具有抑制肺鳞癌NCI-H520细胞增殖和迁移的作用，其分子机制可能与蛇菰多糖调控RP11-1212A22.4/miR-146a-5p通路有关。

目的:探讨微小RNA 125b(miR-125b)对年龄相关性白内障晶状体上皮细胞(LECs)抗氧化应激能力的影响及其可能的作用机制。方法:收集2018年7月至2019年3月于河南省立眼科医院接受白内障超声乳化手术的年龄相关性白内障患者24例24眼的晶状体前囊膜组织标本24份，同期纳入河南省立眼科医院眼库的20例20眼供体正常前囊膜组织20份，分别采用逆转录PCR和Western blot法检测并比较不同标本LECs中miR-125b和核因子E2相关因子2(Nrf2)的表达量；将人LECs细胞系HLEB-3细胞分为对照组和氧化应激模型组，采用不同浓度的H 2O 2(100、200、400 μmol/L)共培养细胞建立氧化应激细胞模型，对照组采用不含H 2O 2的培养基。细胞培养24 h后采用DCFH-DA荧光探针测定不同浓度H 2O 2处理组细胞内源性活性氧簇(ROS)含量，ELISA法检测总抗氧化能力(T-AOC)、超氧化物歧化酶(SOD)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性及丙二醛(MDA)浓度；分别采用逆转录PCR和Western blot法检测各组细胞中miR-125b和Nrf2的表达水平。用含有miR-125b拟似物、miR-125b对照和miR-125b抑制物序列的质粒分别转染HLEB-3细胞24 h，采用DCFH-DA荧光探针法测定并比较不同转染组细胞中ROS含量，ELISA法检测T-AOC、SOD和GSH-Px活性及MDA浓度；采用双荧光素酶报告法验证miR-125b与Nrf2的靶向关系；采用Western blot法检测各转染组细胞内Nrf2蛋白表达水平；采用免疫荧光双染色法检测不同转染组细胞中Nrf2和Keap1的表达和定位。 结果:正常晶状体前囊膜组织中miR-125b和Nrf2的相对表达量分别为0.21±0.03和0.27±0.06，少于白内障前囊膜组织中的0.89±0.05和0.84±0.12，差异均有统计学意义( t＝15.355， P<0.05； t＝18.647， P<0.05)。各浓度H 2O 2处理组细胞中miR-125b和Nrf2相对表达量均明显高于对照组，miR-125b和Nrf2相对表达量随着H 2O 2浓度的增加而升高，差异均有统计学意义(均 P<0.05)；与对照组比较，各浓度H 2O 2处理组细胞内T-AOC、SOD和GSH-Px活性均明显降低，ROS含量和MDA浓度均明显升高，差异均有统计学意义(均 P<0.05)；与miR-125b对照组比较，miR-125b拟似物组细胞中T-AOC、SOD和GSH-Px活性均明显升高，ROS含量和MDA浓度均明显降低，差异均有统计学意义(均 P<0.05)；miR-125b抑制物组细胞中T-AOC、SOD和GSH-Px活性均明显低于miR-125b对照组，ROS含量和MDA浓度均明显高于miR-125b对照组，差异均有统计学意义(均 P<0.05)。双荧光素酶报告结果提示H 2O 2刺激后细胞中Nrf2发生不同程度的核转移，miR-125b拟似物组细胞质中Nrf2荧光最强，核转移也最显著，细胞质中Keap1的表达微弱；miR-125b抑制物组细胞质中Nrf2荧光强度最弱，核转移少，细胞质中Keap1荧光表达增强。 结论:miR-125b能增强年龄相关性白内障LECs的抗氧化应激能力，其机制可能与miR-125b靶向刺激Nrf2表达上调，进而调控Keap1/Nrf2信号通路活性有关。

目的:探讨非小细胞肺癌（NSCLC）脑转移患者血清外泌体中miRNA-21（miR-21）、miRNA-330（miR-330）的表达水平及二者与患者预后的关系。方法:前瞻性队列研究。前瞻性选择2021年3月至2022年9月就诊于山东第一医科大学附属人民医院的125例NSCLC患者，经CT、头部增强磁共振成像或手术病理检查判断是否脑转移。将NSCLC患者按照是否合并脑转移分为转移组（58例）和未转移组（67例），选择同期收治的50例肺部良性疾病患者及同期体检的50名体检健康者分别为良性组和健康对照组。收集所有研究对象血清样本（其中患者为治疗前样本），提取外泌体，采用实时荧光定量聚合酶链反应法测定外泌体中miR-21、miR-330转录水平相对表达量；采用电化学发光免疫法测定血清肿瘤标志物[神经元特异性烯醇化酶（NSE）、癌胚抗原（CEA）、鳞状细胞癌抗原（SCCA）]水平。比较4组血清外泌体中miR-21、miR-330及血清肿瘤标志物水平，采用Pearson法分析NSCLC脑转移患者治疗前血清外泌体miR-21、miR-330间相关性及二者与血清肿瘤标志物间的相关性。以CT、头部增强磁共振成像或手术病理确定的脑转移为金标准，绘制依据治疗前血清外泌体中miR-21、miR-330水平单独及二者联合判断NSCLC患者脑转移发生的受试者工作特征（ROC）曲线。根据NSCLC患者随访期间是否因肿瘤病死，将NSCLC患者分为预后不良组和预后良好组，对比两组临床特征及治疗前血清外泌体中miR-21、miR-330水平。采用多因素logistic回归分析NSCLC患者因肿瘤病死的独立影响因素。结果:125例NSCLC患者中，男性68例（54.4%），女性57例（45.6%）；年龄（63±5）岁，范围：49~82岁；腺癌89例（71.2%），鳞状细胞癌36例（28.8%）。健康对照组、良性组、未转移组、转移组血清外泌体中miR-21转录水平相对表达量依次升高，miR-330转录水平相对表达量依次下降，血清NSE、CEA、SCCA蛋白浓度依次升高，两两组间比较，差异均有统计学意义（均 P<0.001）。Pearson相关性分析显示，NSCLC脑转移患者治疗前血清外泌体中miR-21与血清NSE、CEA、SCCA水平呈正相关性（ r值分别为0.641、0.785、0.612， P值分别为0.015、0.011、0.019），治疗前血清外泌体中miR-330与血清NSE、CEA、SCCA水平呈负相关性（ r值分别为-0.612、-0.689、-0.587， P值分别为0.016、0.021、0.013），治疗前血清外泌体中miR-21与miR-330呈负相关性（ r=-0.529， P=0.023）。ROC曲线分析显示，治疗前血清外泌体中miR-21、miR-330单独及二者联合判断NSCLC患者脑转移发生的曲线下面积分别为0.861（95% CI：0.792~0.931）、0.894（95% CI：0.840~0.947）、0.906（95% CI：0.849~0.963），差异均有统计学意义（均 P<0.001）；miR-21相对表达量最佳临界值为1.625，相应的灵敏度、特异度分别为77.4%、71.5%，miR-330相对表达量最佳临界值为0.611，相应的灵敏度、特异度分别为81.1%、74.9%，二者联合时达最佳临界值时的灵敏度和特异度分别为84.5%、73.8%。NSCLC患者中位随访19个月（95% CI：17~21个月），随访期间因肿瘤病死23例（18.4%）。预后不良组中年龄≥60岁、临床分期Ⅲ~Ⅳ期、脑转移患者的比例及治疗前血清外泌体中miR-21相对表达量均高于预后良好组，治疗前血清外泌体中miR-330相对表达量低于预后良好组，差异均有统计学意义（均 P<0.05）。多因素logistic回归分析显示，年龄高（≥60岁比<60岁， OR=3.750，95% CI：1.191~11.806， P=0.024）、临床分期晚（Ⅲ~Ⅳ期比Ⅰ~Ⅱ期， OR=4.667，95% CI：1.303~16.716， P=0.018）、脑转移（转移比未转移， OR=2.573，95% CI：1.008~6.611， P=0.049）、治疗前血清外泌体中miR-21相对表达量升高（ OR=2.585，95% CI：1.198~6.152， P=0.008）是NSCLC患者因肿瘤病死的独立危险因素，治疗前血清外泌体中miR-330相对表达量升高是因肿瘤病死的独立保护因素（ OR=0.821，95% CI：0.715~0.954， P<0.001）。 结论:NSCLC脑转移患者治疗前血清外泌体中miR-21水平高，miR-330水平低，二者间呈负相关，且二者与NSCLC脑转移患者血清多种肿瘤标志物及NSCLC患者预后密切相关；二者联合可能预测NSCLC脑转移发生情况。

目的:探讨微RNA（miR）-125a抑制角质形成细胞增殖的相关机制。方法:用白细胞介素（IL）-23干预处理人永生化角质形成细胞（HaCaT）24 h后，分为miR-125a组和miR-NC组，分别转染miR-125a过表达质粒和过表达对照质粒。采用细胞计数试剂盒（CCK8）法检测两组转染后0、24、48、72 h HaCaT细胞增殖能力，采用实时荧光定量PCR检测转染后24 h两组miR-125a及IL-23受体（IL-23R）mRNA的表达，采用Western印迹法测定两组转染后48 h IL-23R、Janus激酶2（JAK2）、蛋白激酶B（AKT）和磷酸化AKT（p-AKT）的表达。采用双荧光素酶报告实验验证miR-125a和IL-23R间的靶向关系。两组间均数比较采用 t检验，HaCaT细胞增殖能力随时间的变化采用重复测量方差分析法评估。 结果:质粒转染后，miR-125a组miR-125a相对表达水平（6.377 ± 0.745）高于miR-NC组（0.700 ± 0.222），差异有统计学意义（ t=7.305， P=0.002）。转染后0、24、48 h，miR-125a组与miR-NC组细胞增殖能力差异无统计学意义（ t值分别为0.663、0.623、1.930，均 P > 0.05）；转染后72 h，miR-125a组细胞增殖能力显著低于miR-NC组（ t=4.407， P < 0.05）。MiR-125a组IL-23R mRNA表达水平显著低于miR-NC组（ t=3.082， P < 0.05）。与miR-NC组相比，miR-125a组IL-23R、JAK2和p-AKT蛋白表达量均降低，差异有统计学意义（ t值分别为11.715、6.996、12.424， P值分别< 0.001、=0.002、< 0.001）。双荧光素酶报告实验显示，miR-125a可靶向结合IL-23R。 结论:MiR-125a可能通过负性靶向调控IL-23R/JAK2/AKT信号通路抑制角质形成细胞的增殖。

微小RNA-125b(miR-125b)近年来被证明与多种肿瘤疾病关系密切，如肺癌、消化系统肿瘤、血液系统肿瘤等。miR-125b在肿瘤疾病的发生发展中起关键性作用，检测miR-125b的表达量可以评估各种肿瘤疾病治疗方式的疗效，并能辅助诊断肿瘤。探索miR-125b在肿瘤疾病中的机制对肿瘤治疗具有重大意义。

目的:探讨间充质干细胞来源外泌体(MSC-EVs)对类风湿关节炎(RA)成纤维样滑膜细胞MH7A的生物学作用及其机制。方法:将MH7A细胞系分为对照组和外泌体组。对MSC的培养上清液采用差速离心法收集MSC-EVs，对照组采用常规方法进行培养，外泌体组则将MH7A细胞与MSC-EVs共同孵育24 h，2组细胞达到收样条件后通过免疫荧光实验、Transwell实验、酶联免疫吸附实验(ELISA)及实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)等实验观察MSC-EVs对MH7A细胞株生物学行为的影响及其分子机制，各观察指标采用独立样本 t检验进行统计学分析。 结果:粒径分析检测及透射电镜结果表明，通过差速离心法成功提取了MSC-EVs，随后免疫荧光证实MSC-EVs能被MH7A细胞株所摄取。细胞增殖结果表明，MSC-EVs组细胞核增殖抗原(Ki-67)荧光灰度值(4.01±1.01)明显低于对照组(11.67±1.53)，差异有统计学意义( t＝－7.273， P<0.01)。Transwell结果显示，MSC-EVs组侵袭能力(70.00±5.29)显著低于对照组(110.67±6.11)，差异有统计学意义( t＝－8.714， P<0.01)。ELISA结果表明，MSC-EVs组的炎性因子低于对照组，差异有统计学意义[肿瘤坏死因子-α(TNF-α)： t＝－5.345， P<0.01；白细胞介素(IL)-1β： t＝－3.742， P<0.05；IL-6： t＝－7.579， P<0.01；IL-8： t＝－6.390， P<0.01]。qRT-PCR结果表明，MSC-EVs组MH7A细胞内微小RNA(miR)-125b-5p的表达水平(14.83±2.48)高于对照组(1.01±0.15)，差异有统计学意义( t＝－8.714， P<0.01)。 结论:MSC-EVs能通过上调miR-125b-5p的表达进而抑制MH7A细胞的增殖、侵袭和炎症。