目的:探讨hsa_circ_0001776与miR-1265在肺鳞状细胞癌（鳞癌）中的作用及机制。方法:收集2020—2022年于唐山市人民医院治疗的肺鳞癌患者血浆和健康人血浆。肺鳞癌组织芯片和癌旁正常组织芯片于2022年购自上海芯超生物科技有限公司。采用实时定量聚合酶链式反应检测hsa_circ_0001776在肺鳞癌血浆、组织及细胞中的表达情况，荧光原位杂交验证hsa_circ_0001776在肺鳞癌细胞NCI-H1703中的定位。体外培养肺鳞癌细胞NCI-H1703、NCI-H226，分为circ-NC组、过表达hsa_circ_0001776组、miR-NC组、miR-1265 mimic组、过表达hsa_circ_0001776+miR-NC组和过表达hsa_circ_0001776+miR-1265 mimic组，采用细胞计数试剂盒8法、细胞克隆形成实验、Transwell实验和划痕实验以及流式细胞术分别检测过表达hsa_circ_0001776、过表达miR-1265以及过表达hsa_circ_0001776和miR-1265 mimic的挽救实验对肺鳞癌细胞NCI-H1703和NCI-H226的增殖、克隆、侵袭、迁移和凋亡的影响。通过circular RNA Interactome网站预测hsa_circ_0001776下游的miR-1265，双荧光素酶报告基因实验确定hsa_circ_0001776、miR-1265之间的相互作用，裸鼠皮下成瘤实验检测稳定过表达hsa_circ_0001776的NCI-H1703细胞对移植瘤生长的影响。结果:荧光原位杂交结果显示，肺鳞癌组织中hsa_circ_0001776的荧光强度低于癌旁组织，肺鳞癌组织中miR-1265荧光强度高于癌旁组织（均 P＜0.05）。肺鳞癌患者血浆中hsa_circ_0001776的表达水平低于健康人血浆，miR-1265表达水平高于健康人血浆（均 P＜0.05）。肺鳞癌细胞NCI-H1703、NCI-H226和SK-MES-1中hsa_circ_0001776的表达水平均低于支气管上皮细胞BEAS-2B（均 P＜0.05），miR-1265在NCI-H1703、NCI-H226中的相对表达水平高于人支气管上皮细胞BEAS-2B（均 P＜0.05）。hsa_circ_0001776低表达与肺鳞癌患者的年龄、淋巴结转移、临床分期以及肿瘤分期有关（均 P＜0.05）。荧光原位杂交结果显示，hsa_circ_0001776主要在细胞质中表达。双荧光素酶报告实验结果表明，miR-1265与hsa_circ_0001776存在互补结合位点。过表达hsa_circ_0001776组NCI-H1703、NCI-H226细胞吸光度值均低于circ-NC组（均 P＜0.05）。过表达hsa_circ_0001776组细胞克隆数为（52±3）个、（53±4）个，迁移细胞数为（476±17）个、（113±7）个，侵袭细胞数为（100±2）个、（184±2）个，细胞迁移率为（25.00±4.36）%、（36.02±5.55）%，均低于circ-NC组［分别为（104±4）个和（106±2）个，（783±29）个和（517±16）个，（657±45）个和（473±9）个，（48.95±8.69）%和（48.70±1.57）%，均 P＜0.05］。过表达hsa_circ_0001776组细胞凋亡率分别为（24.77±2.30）%和（19.67±1.16）%，均高于circ-NC组［分别为（11.83±1.15）%和（9.50±0.66）%，均 P＜0.05］。miR-1265 mimic组NCI-H1703、NCI-H226细胞吸光度值均高于miR-NC组（均 P＜0.05）。miR-1265 mimic组细胞克隆数为（56±13）个和（51±8）个，迁移细胞数为（556±13）个、（405±6）个，侵袭细胞数为（486±6）个、（359±7）个，细胞迁移率为（68.56±5.51）%、（81.74±8.04）%，均高于miR-NC组［分别为（31±4）个和（21±8）个，（154±19）个和（186±5）个，（227±6）个和（176±7）个，（25.83±4.26）%和（53.12±4.14）%，均 P＜0.05］。miR-1265 mimic组细胞凋亡率分别为（11.83±2.55）%、（17.50±1.05）%，均低于miR-NC组［分别为（32.67±4.44）%、（39.90±2.88）%，均 P＜0.05］。过表达hsa_circ_0001776+miR-1265 mimic组中NCI-H1703、NCI-H226吸光度值均高于过表达hsa_circ_0001776+miR-NC组（均 P＜0.05）。过表达hsa_circ_0001776+miR-1265 mimic组细胞克隆数为（128±15）个和（133±8）个，迁移细胞数为（623±10）个和（310±7）个，侵袭细胞数为（643±16）个和（420±7）个，细胞迁移率为（66.39±4.46）%和（68.60±3.53）%，均高于过表达hsa_circ_0001776+miR-NC组［分别为（86±7）个和（80±16）个，（380±11）个和（115±5）个，（152±7）个和（94±4）个，（31.41±5.91）%和（30.94±0.67）%，均 P＜0.05］。过表达hsa_circ_0001776+miR-1265 mimic组细胞凋亡率分别为（19.27±0.15）%和（11.53±0.75）%，均低于过表达hsa_circ_0001776+miR-NC组［分别为（27.77±1.29）%和（18.43±0.71）%，均 P＜0.05］。裸鼠皮下成瘤实验结果显示，过表达hsa_circ_0001776组肿瘤的体积低于circ-NC组（ P＜0.05）。 结论:肺鳞癌中hsa_circ_0001776呈低表达，hsa_circ_0001776通过靶向miR-1265可抑制肺鳞癌的发展。

目的:探讨血清miR-210、miR-423水平联合氨基末端脑利钠肽前体(NT-proBNP)诊断维持性血液透析(MHD)患者心血管事件发生的价值。方法:选取2016年1月至2019年12月海口市骨科与糖尿病医院收治的152例MHD患者，根据在随访6个月期间是否发生心血管事件将患者分为心血管事件组(60例)和无心血管事件组(92例)。采用实时定量PCR法检测两组血清miR-210、miR-423水平，采用酶联免疫吸附法测定NT-proBNP水平。应用多因素logistic回归分析MHD患者发生心血管事件的危险因素。采用受试者工作特征(ROC)曲线分析血清miR-210、miR-423及NT-proBNP水平诊断MHD患者心血管事件发生的价值。结果:心血管事件组的血清miR-210、miR-423及NT-proBNP水平均明显高于无心血管事件组(均 P<0.001)。多因素logistic回归分析显示，血清miR-210( OR＝2.318，95% CI：1.698~5.112)、miR-423( OR＝1.850，95% CI：1.294~3.486)及NT-proBNP( OR＝2.627，95% CI：1.815~6.102)水平升高是MHD患者发生心血管事件的危险因素(均 P<0.05)。ROC曲线分析显示，miR-210、miR-423联合NT-proBNP诊断MHD患者心血管事件发生的曲线下面积(0.938，95% CI：0.879~0.993)最大，高于三项指标的单项诊断(均 P<0.05)，其灵敏度和特异度分别为97.0%和84.6%。 结论:发生心血管事件患者的血清miR-210、miR-423及NT-proBNP水平明显升高，是MHD患者发生心血管事件的危险因素，三项联合检测有助于诊断心血管事件的发生。

目的:探讨稀土氧化钕（Nd 2O 3）致小鼠肺纤维化过程中miR-29a对转化生长因子-β1（TGF-β1）/Smad同源物3（Smad3）通路的调控作用。 方法:于2021年3月，选择SPF级C57/BL6J雄性小鼠72只，随机分为对照组、Nd 2O 3组、Nd 2O 3+miR-29a干预剂（agomir）组、Nd 2O 3+NC agomir组，每组18只。Nd 2O 3组、Nd 2O 3+miR-29a agomir组、Nd 2O 3+NC agomir组采用非暴露式气管滴注法染毒，染尘浓度为250 mg/ml，染尘体积为0.1 ml，对照组给予同体积生理盐水。染尘后，每3天Nd 2O 3+miR-29a agomir组小鼠尾静脉注射0.1 ml（5 nmol）miR-29a agomir，Nd 2O 3+NC agomir组小鼠尾静脉注射0.1 ml NC agomir。染尘后第7、14、28天每组各处死6只小鼠，取小鼠肺组织，HE染色观察小鼠肺组织病理状况；ELISA法检测TGF-β1、结缔组织生长因子（CTGF）含量；qRT-PCR检测TGF-β1 mRNA的表达量；免疫荧光法检测小鼠肺组织中Smad3的表达量，利用TargetScan7、miRDB等网站工具预测miR-29a靶基因。计量资料满足正态分布时用 ± s表示，组间比较用两独立样本 t检验，两两比较方差齐时用 LSD法检验。 结果:HE染色显示，Nd 2O 3组小鼠肺组织初期出现明显的炎症细胞浸润、肺泡结构紊乱，28 d时，小鼠肺组织胶原纤维增多且肺组织呈纤维化蜂窝状变，Nd 2O 3+miR-29a agomir组小鼠肺组织纤维化程度明显减轻；与Nd 2O 3+NC agomir组比较，Nd 2O 3+miR-29a agomir组小鼠肺组织中TGF-β1、CTGF的含量较低，小鼠肺组织中TGF-β1 mRNA的相对表达量较低，细胞核中Smad3表达水平较低，差异均有统计学意义（ P<0.05）。miR-29a相关下游靶基因有152个，其中FBN1、MAP2K6、KPNB1、COL1A2、SNIP1、LAMC1、SP1可能与TGF-β1/Smad3通路的调控有关。 结论:miR-29a可能通过调节TGF-β1/Smad3信号通路影响稀土Nd 2O 3暴露所致的小鼠肺纤维化，过表达miR-29a可能抑制TGF-β1/Smad3信号通路而减轻小鼠肺纤维化程度。

目的:探讨miR-152-5p及miR-210-5p在儿童IgA肾病(IgAN)中的表达及其临床价值。方法:选取2018年1月至2022年6月由本院收治的109例IgAN患儿(IgAN组)、100例非IgA肾病的肾炎患儿(非IgAN组)和60例体检正常者(对照组)作为研究对象。其中IgAN患儿根据牛津分型评分(MEST)分为MEST≥3分组(41例)和MEST<3分组(68例)，并根据尿蛋白量分为尿蛋白≥1.0 g/24 h组(56例)和尿蛋白<1.0 g/24 h组(53例)。比较各组的miR-152-5p、miR-210-5p、IgA/C3及半乳糖缺乏型IgA1分子(Gd-IgA1)水平。绘制受试者工作特征(ROC)曲线分析miR-152-5p、miR-210-5p、IgA/C3及Gd-IgA1诊断IgAN的价值。采用Pearson相关分析miR-152-5p、miR-210-5p表达水平与IgA/C3及Gd-IgA1的相关性。结果:IgAN组的miR-152-5p、miR-210-5p、IgA/C3及Gd-IgA1水平均明显高于非IgAN组和对照组(均 P<0.001)；MEST≥3分组的miR-152-5p、miR-210-5p、IgA/C3及Gd-IgA1水平均明显高于MEST<3分组(均 P<0.001)；尿蛋白≥1.0 g/24 h组的miR-152-5p、miR-210-5p、IgA/C3及Gd-IgA1水平均明显高于尿蛋白<1.0 g/24 h组(均 P<0.001)。ROC曲线分析结果显示，miR-152-5p、miR-210-5p、IgA/C3及Gd-IgA1四项联合诊断IgAN的曲线下面积高达0.951(95% CI：0.889~0.994)，其灵敏度为97.4%，特异度为85.2%。Pearson相关分析显示，IgAN患儿的血清miR-152-5p、miR-210-5p表达水平与IgA/C3及Gd-IgA1均呈正相关( r＝0.796、0.875、0.745、0.817，均 P<0.001)。 结论:miR-152-5p及miR-210-5p在IgAN患儿中呈高表达，与肾脏损伤进展有关，其联合IgA/C3及Gd-IgA1检测对儿童IgAN诊断具有很高的应用价值。

目的:本研究旨在探讨绝经后女性骨质疏松症（osteoporosis，OP）中分泌型卷曲相关蛋白2（secreted frizzled-related protein-2，SFRP2）基因DNA甲基化对转录和蛋白表达的影响，及miR-152-3p对SFRP2基因甲基化水平调控的分子机制。方法:选择2017年9月至2020年9月于衡水市人民医院骨科就诊的绝经后OP患者作为研究对象，并纳入同期在本院进行体检的200例自然绝经健康女性作为对照组。定量检测OP患者和对照组的SFRP2基因甲基化水平；采用定量实时聚合酶联反应检测SFRP2基因mRNA和miRNA-148a的相对表达量；使用酶联免疫吸附测定法检测SFRP2和DNA甲基转移酶1（DNA methyltransferase，DNMT1）的蛋白表达水平；使用miRNA-152-3p模拟物（mimic）、抑制物（inhibitor）及其阴性对照（mimic NC和inhibitor NC）处理SD大鼠成骨细胞，检测DNMT1表达水平和SFRP2基因甲基化水平。结果:OP组的SFRP2基因甲基化水平为（3.87±0.76）%，显著低于对照组（6.36±1.44）%（ t=4.632， P<0.001）；OP组的SFRP2基因mRNA表达量为3.35±0.79，显著高于对照组（2.28±0.52）（ t=4.858， P<0.001）；OP组的SFRP2基因蛋白表达水平为（4.15±0.62）pg/ml，显著高于对照组（2.83±0.51）pg/ml（ t=4.858， P<0.001）；OP组的miRNA-152-3p相对表达量为（3.14±0.76），显著高于对照组（1.63±0.51）（ t=5.318， P<0.001）；SD大鼠成骨细胞转染miR-152-3p后，mimic组的DNMT1表达水平和SFRP2基因甲基化水平显著降低，inhibitor组的DNMT1表达水平和SFRP2基因甲基化水平显著升高（ P<0.001）。 结论:miR-152-3p可通过DNMT1调控SFRP2基因甲基化水平并参与OP的发生发展。

目的:探讨miR-152对雪旺细胞(Schwann cells，SCs)迁移作用的影响。方法:构建大鼠坐骨神经损伤模型，分别于损伤后1、4、7、14 d采用qRT-PCR检测miR-152和CAND1基因在损伤神经中的表达情况；Western blot和qRT-PCR检测miR-152和CAND1在SCs中的表达；Transwell法测定SCs迁移能力；以荧光素酶报告基因和RNA免疫沉淀法(RNA binding protein immunoprecipitation，RIP)证实miR-152与CAND1的相关性。结果:损伤神经近端和远端神经组织中miR-152水平显著升高，miR-152的过度表达促进了SCs迁移，而miR-152抑制剂转染的SCs则明显抑制了细胞迁移。结果提示CAND1是miR-152的靶基因，此外miR-152对CAND1的表达具有负调控作用，CAND1表达上调阻断了miR-152介导的促进SCs迁移作用。结论:周围神经损伤后，miR-152可以通过抑制CAND1的表达促进SCs迁移作用。

目的:探讨AP患者血清miR-148a-3p和miR-551b-5p的表达水平及其临床价值。方法:选取2017年1月至2020年9月间儋州市人民医院收治的152例AP患者的临床资料，根据病情严重程度将患者分为MAP组(70例)、MSAP组(40例)和SAP组(42例)，SAP组又根据患者预后情况分成生存组(25例)和死亡组(17例)。另选取50例体检健康者作为对照组。于患者发病当天采集空腹静脉血，采用实时定量PCR法检测各组血清miR-148a-3p和miR-551b-5p表达水平。绘制受试者工作特征曲线(ROC)，计算曲线下面积(AUC)，分析血清miR-148a-3p和miR-551b-5p表达水平对SAP预后判断的价值。采用Pearson法分析SAP患者血清miR-148a-3p与miR-551b-5p表达水平的相关性。结果:AP组患者血清miR-148a-3p和miR-551b-5p表达水平均明显高于对照组(3.18±1.27比0.96±0.28，1.94±0.85比0.51±0.12， P值均<0.001)。SAP组血清miR-148a-3p及miR-551b-5p表达水平均明显高于MSAP组、MAP组(4.36±1.70比2.84±1.10、2.50±0.92，2.80±1.04比1.68±0.53、1.42±0.45， P值均<0.001)。死亡组血清miR-148a-3p及miR-551b-5p表达水平均明显高于生存组(5.30±1.95比3.47±1.40，3.62±1.37比2.08±0.91， P值均<0.001)。ROC曲线分析显示，miR-148a-3p与miR-551b-5联合判断SAP预后的AUC值明显高于miR-148a-3p、miR-551b-5p单项指标[0.943(95% CI0.886～0.997)比0.860(95% CI0.797～0.924)、0.822(95% CI0.765～0.880)]，其灵敏度为98.3%，特异度为84.6%。相关分析显示，SAP患者血清miR-148a-3p与miR-551b-5p表达水平呈正相关( r＝0.835， P<0.001)。 结论:AP患者血清miR-148a-3p及miR-551b-5p表达水平明显升高，两者联合检测对判断SAP患者预后具有较好的价值。

目的:旨在探讨小核仁RNA宿主基因4（SNHG4）在胃癌组织中的表达、预后价值及可能作用机制。方法:运用UALCAN数据库分析SNHG4在胃癌中的表达情况；Kaplan-Meier Plotter数据库分析SNHG4与胃癌预后的关系；StarBase、Targetscan、microT-CDS数据库及Cytoscape软件构建SNHG4-miRNA-mRNA调控网络；DAVID数据库对SNHG4相关miRNA的靶基因进行生物学功能及通路分析。结果:SNHG4在胃癌组织中的表达明显高于正常组织（ P=8.882E-16）。生存分析发现SNHG4高表达的胃癌患者总体生存时间少于低表达组（ P=8.900E-05）。通过RNA调控网络的构建，发现在胃癌中hsa-let-7a-5p（ P=1.02E-03）、hsa-miR-152-3p（ P=4.51E-06）、hsa-miR-204-5p（ P=6.68E-04）和hsa-miR-363-3p（ P=8.06E-03）可作为SNHG4的结合位点。SNHG4作用于这4种miRNA进一步调控250个靶基因。对靶基因的GO注释及KEGG富集分析，发现这些靶基因在蛋白质磷酸化的调节、转录负调控、RNA聚合酶II启动子的转录等生物过程中发挥作用，且通过阻断或激活Wnt等信号通路参与胃癌的发生及发展。 结论:SNHG4可作为胃癌潜在的诊断性肿瘤标志物，判断胃癌预后情况，通过构建SNHG4-miRNA-mRNA调控网络，从分子水平研究胃癌的发病机制，为实验研究及临床研究提供明确方向。

目的:探讨巯基聚乙二醇（polyethylene glycol-thiol，PEG-SH）修饰的GNPs/miR-29纳米微粒诱导神经干细胞增殖、分化的作用。方法:采用氧化还原法制备PEG-SH修饰的GNPs/miR-29纳米微粒，检测紫外吸收光谱、粒径分布及Zeta电位。选取15只成年雄性SD大鼠，以改良Allen法构建脊髓损伤模型；在脊髓损伤区域分别植入人工合成的miR-29和PEG-SH GNPs/miR-29纳米微粒，采用凝胶电泳法分析miR-29表达的稳定性。取SPF级SD乳鼠10只，分离培养神经干细胞，使用Nestin、GFAP及NSE抗体鉴定细胞。以CCK-8法检测人工合成的miR-29、PEG-SH GNPs及PEG-SH GNPs/miR-29纳米微粒对神经干细胞活性、增殖的影响。将人工合成的miR-29、PEG-SH GNPs及PEG-SH GNPs/miR-29纳米微粒与神经干细胞共培养1周，观察神经元突起的密度、长度及数量。结果:PEG-SH修饰的纳米金呈棕红色；透射电镜下为均匀分布的球形；紫外吸收光谱呈现单峰波，在523 nm附近出现吸收峰值；Zeta电位随PEG-SH含量增加而逐渐增大，峰值为（22.5±5.2） mV；粒径随PEG-SH含量增加早期迅速达峰值后下降维持至稳定水平。脊髓损伤区域植入miR-29及PEG-SH GNPs/miR-29纳米微粒0~6 h，人工合成的miR-29组可见清晰的表达条带，但12~24 h表达条带迅速消失；PEG-SH GNPs/miR-29微粒组，始终能观察到清晰的表达条带。接种细胞第1、3、5、7天，miR-29组OD值分别为0.34±0.17、0.78±0.31、1.28±0.68、1.64±0.38，与DMEM组相比差异无统计学意义；GNPs组、PEG-SH GNPs组以及PEG-SH GNPs/miR-29组的OD值与DMEM组相比差异均无统计学意义。PEG-SH GNPs/miR-29纳米微粒组神经元突起的密度为（56.38±3.65） μm 2、长度为（78.25±3.72） μm、数量为（356±34.52）个/1 000倍视野，均大于miR-29组[分别为（12.53±3.26） μm 2、（11.35±3.36） μm、（158±32.85）个/1 000倍视野]、PEG-SH GNPs组[分别为（14.12±3.45） μm 2、（12.56±3.57） μm、（160±32.52）个/1 000倍视野]和生理盐水组[分别为（10.25±3.52） μm 2、（9.35±3.28） μm、（152±32.28）个/1 000倍视野]，但与胎牛血清组[分别为（56.48±3.56） μm 2、（76.85±3.65） μm、（350±35.26）个/1 000倍视野]比较差异无统计学意义。 结论:PEG-SH修饰的GNPs/miR-29纳米微粒具备良好的生物学性能，可诱导神经干细胞增殖、分化，对miR-29有一定程度的保护效应。

Systemic sclerosis (SSc) is characterized by immune dysfunction, vasculopathy, chronic fibrosis of skin and internal organs with complex etiology. With the rapid development and the application in biomedicine of epigenetics, accumulating evidence has shown that epigenetics plays an important role in the pathogenesis of SSc. Environmental factors via epigenetics are needed to trigger and maintain for the disease in the subjects with genetic predisposition to SSc. The role of epigenetics in the pathogenesis of SSc includes hypermethylation of the promoter region of nitric oxide synthase and bone morphogenetic protein receptors II, up-regulation of histone deacetylases 4 and 5 expression, and down-regulation of miR-193b and miR-152 in endothelial cells inducing vascular dysfunction; DNA hypermethylation and hypoacetylation of histone H3 and H4 in Friend leukemia virus integration 1 and Kruppel-like factor 5 genes, and the abnormal expression of miR-29, miR-129-5p and miR-135b in fibroblasts causing excessive fibrosis; DNA hypomethylation in the promoter regions of CD11a and CD70 genes in CD4+T cells resulting in immune dysfunction. Studies on the role of epigenetics in SSc are of great significance for better understanding the pathogenic machanism of SSc, which is helpful to find new molecular targets for treating SSc, and consequently, improve the prognosis of SSc.