目的 探究血清微小RNA-128-3p(miR-128-3p)和微小RNA-624-5p(miR-624-5p)水平与青少年首发抑郁患者病情严重程度的关系分析.方法 选取我院2022年1月～2023年1月收治的102例青少年首发抑郁患者为研究对象(抑郁发作组),依据汉密尔顿抑郁量表将青少年首发抑郁患者分为轻度组(n=44)、中度组(n=33)和重度组(n=25).另选取102例来我院进行体检的健康青少年为对照组,采用实时荧光定量PCR法对所有受试者血清miR-128-3p、miR-624-5p水平进行测定.比较各组间的基本资料及血清miR-128-3p、miR-624-5p水平;Spearman相关性分析青少年首发抑郁患者血清miR-128-3p、miR-624-5p水平与病情程度之间的关系;Logistic回归分析青少年首发抑郁的影响因素.结果 两组在性别、年龄及受教育年限上差异无统计学意义(P＞0.05);在性格特征、血清miR-128-3p、miR-624-5p水平有显著性差异,且抑郁发作组患者血清miR-128-3p、miR-624-5p水平显著高于对照组(P＜0.05);Spearman相关性分析结果显示,血清miR-128-3p、miR-624-5p水平与青少年首发抑郁患者病情程度均呈显著正相关(r1=0.632,r2=0.697,P＜0.05);Logistic回归分析结果显示,血清miR-128-3p、miR-624-5p是影响青少年首发抑郁的危险因素(P＜0.05).结论 青少年首发抑郁患者血清miR-128-3p、miR-624-5p显著升高,且与患者病情程度呈显著正相关,通过检测上述两种因子可有效评估患者病情程度.

MicroRNA是一类20-24 nt核苷酸长度的参与基因转录后水平调控的非编码小分子RNA.利用高通量测序技术获得鳜(Siniperca chuatsi)孵化后第3天、第17天和第28天全鱼miRNA转录组,共鉴定出1 084个miRNAs,其中432个已知、624个保守、28个新发现.第17天时鉴定出的miRNA个数最多,为926个.在3个发育时期都表达的有628个miRNAs,只在各时期中特异表达的分别有71、104和70个miRNAs.一些与鳜发育相关的miRNAs在上述3个时期呈现持续上调或下调的表达特点.进一步的实验表明,miR-199-5p和miR-203可能与鳜生长发育相关,相应的靶基因分别是WnT和MyoD.

目的 探讨血清 miR-140-3p 在孤独症谱系障碍( ASD ) 儿童中表达及其与白细胞介素-4(IL-4)、白细胞介素-8(IL-8)及白细胞介素-17A( IL-17A)的相关性,为该病的诊治提供依据.方法 选取2015年1月至2018年6月海南省安宁医院收治的ASD儿童172例作为病例组,另选择80例体检健康者作为对照组.采用ASD行为评定量表和儿童孤独症评定量表将172例ASD儿童分为轻-中度组(n=116)和重度组(n=56).采用实时荧光定量聚合酶链反应( RT-PCR)和酶联免疫吸附法(ELISA)检测各组血清miR-140-3p、IL-4、IL-8及IL-17A水平变化.应用ROC曲线分析miR-140-3p、IL-4、 IL-8 及 IL-17A 对 ASD 的诊断价值,采用 Pearson 相关分析 ASD 儿童血清miR-140-3p与IL-4、IL-21及IL-17A的相关性.结果 病例组血清 miR-140-3p( 0. 86 ± 0. 17,0. 15 ± 0. 03)、IL-4[(48. 65±13. 82) pg/ml,( 31. 42± 7. 50) pg/ml]、IL-8[(7. 14± 2. 05) pg/ml,( 2. 30± 0. 74) pg/ml]及IL-17A[(112. 35±51. 64) pg/ml,(58. 20±26. 40) pg/ml]水平均明显高于对照组(P<0. 05).重度组血清miR-140-3p[(1. 08±0. 24),(0. 71±0. 12)]、IL-4[(53. 28±16. 30) pg/ml,(43. 70±13. 52) pg/ml]、IL-8[(9. 42±2. 85) pg/ml,( 5. 63± 1. 48) pg/ml]及IL-17A[( 138. 40± 65. 72) pg/ml,( 96. 74± 40. 83)pg/ml]水平均明显高于轻-中度组(P<0. 05).血清miR-140-3p诊断ASD的AUC( 95%CI)为0. 827(0. 773~0. 886)明显高于 IL-4[ 0. 719( 0. 651~0. 764) pg/ml]、IL-21[ 0. 683( 0. 625~0. 743) pg/ml]及IL-17A[0. 745(0. 683~0. 817)pg/ml],其最佳截值取0. 75时,敏感度和特异度为84. 8%和78. 2%.相关分析显示,ASD儿童血清miR-140-3p与IL-4、IL-8及IL-17A均呈正相关( r=0. 681、r=0. 624、r=0. 775,均P<0. 01).结论 血清miR-140-3p水平在ASD儿童中明显升高,且与IL-4、IL-8及IL-17A水平相关,是诊断ASD的潜在生物标志物.

目的 探讨微小RNA-138(miR-138)对zeste同源增强子2( EZH2)的靶向调控作用及甲状腺癌细胞8505C侵袭迁移的影响.方法 miR_pathway在线分析miR-138在甲状腺癌组织中的表达及调控的生物学过程;脂质体法向8505C细胞转染miR-138模拟物(过表达组)或阴性对照序列(NC组)并设未转染的细胞为对照组,采用实时定量PCR( QPCR)检测miR-138水平,活细胞计数CCK-8试剂盒检测增殖情况,划痕实验和Transwell小室实验分别检测划痕愈合率和穿膜细胞数, QPCR检测EZH2、基质金属蛋白酶-9( MMP-9)、Janus激酶1(JAK1)和信号转导和转录激活因子3( STAT3)的mRNA水平, Western blotting检测EZH2、MMP-9、JAK1、磷酸化JAK1(p-JAK1)、STAT3、磷酸化STAT3( p-STAT3)和MMP-9的蛋白水平;双荧光素酶报告基因实验验证miR-138对EZH2的靶向调控作用.结果 miR_pathway在线分析发现miR-138在甲状腺癌中调控多个生物学过程,且在甲状腺癌组织中的表达低于正常组织(P＜0. 05).过表达组的miR-138水平为12. 657±2. 263,高于对照组的1. 025±0. 087和NC组的1. 109±0. 097(P＜0. 05);与对照组和NC组相比,过表达组转染24、48 h的细胞增殖活力降低(P＜0. 05).过表达组的划痕愈合率和穿膜细胞数目分别为( 22. 571± 2. 168)%和(152. 3± 16. 5)个,低于对照组的(59. 424± 3. 624)%和(287. 4±17. 5)个及NC组的(61. 280±4. 035)%和(278. 5±16. 3)个( P＜0. 05);miR-138模拟物对EZH2野生型3’端非翻译区的荧光素酶活性有抑制作用( P＜0. 05),但对突变型无影响(P＞0. 05).与其余两组相比,过表达组的 MMP-9、EZH2、p-JAK1和p-STAT3水平降低(P＜0. 05),而JAK1和STAT3水平的差异无统计学意义( P＞0. 05).对照组和NC组上述指标的差异无统计学意义(P＞0. 05).结论 miR-138在甲状腺癌组织中低表达,且该miRNA在甲状腺癌中发挥抑制增殖和侵袭迁移的抑癌作用,可能与靶向调控EZH2和JAK1／STAT3／MMP-9通路有关,有作为甲状腺癌治疗候选靶点的潜能.

目的:探讨环状RNA(circular RNA,circRNA)-整合素α1(integrin alpha 1,ITGA1)(circ-ITGA1)对三阴性乳腺癌(triple-negative breast cancer,TNBC)细胞系进展转移功能的影响.方法:利用高通量测序技术筛选亲本MDA-MB-231细胞和高转移能MDA-MB-231-M细胞中差异表达的circRNAs,并采用实时荧光定量PCR法检测circ-ITGA1在乳腺癌细胞系中的表达情况.通过体外实验验证circ-ITGA1的环状特性,并采用脂质体法将特异性针对circ-ITGA1的siRNA及过表达载体转入TNBC细胞,建立circ-ITGA1沉默和过表达的细胞,并采用MTT法、克隆形成实验和EdU实验检测细胞增殖能力的变化,Transwell小室实验、划痕愈合实验检测迁移、侵袭速率的改变.最后利用相关数据库预测circ-ITGA1可能的靶基因及分子机制.结果:对乳腺癌高转移能细胞亚系(MDA-MB-231-M)及其亲本细胞系(MDA-MB-231)进行circRNA高通量测序,筛选出差异表达的circRNAs.其中,circ-ITGA1在TNBC细胞系中高表达并与恶性程度呈正相关(P均<0.01).利用Sanger测序技术在MDA-MB-231和MDA-MB-468细胞中检测到了circ-ITGA1独有的接头序列,并且circ-ITGA1具有抵抗RNA酶降解、半衰期延长、无poly(A)尾等circRNA相关的环状特性(P均<0.01).在细胞系中干扰circ-ITGA1可以显著抑制MTT增殖能力(P均<0.01)、克隆形成能力(P均<0.01)及细胞增殖活性(P均<0.01).同时,干扰circ-ITGA1可以抑制细胞的迁移、侵袭及划痕修复能力(P均<0.01).进一步实验表明过表达circ-ITGA1可以显著促进细胞的增殖、侵袭、迁移及划痕修复能力(P均<0.01).为了进一步研究circ-ITGA1发挥功能的相关机制,利用相关数据库预测到miR-624-5p可能与circ-ITGA1结合,并且miR-624-5p与患者的预后呈负相关(P均<0.05).随后利用Mioncocirc及miRNet数据库进行预测,发现LMBR1L可能是circ-ITGA1及miR-624-5p发挥功能的靶点,且LMBR1L与circ-ITGA1的表达呈正相关(r=0.319,P=0.016)并与miR-624-5p呈负相关(r=-0.313,P<0.01),同时LMBR1L的表达与乳腺癌患者的预后呈负相关(P均<0.05),表明circ-ITGA1可能通过影响miR-624-5p/LMBR1L信号轴发挥相应功能.结论:circ-ITGA1/miR-624-5p/LMBR1L信号轴可以促进TNBC细胞的进展和转移,这为进一步理解TNBC进展转移的分子机制提供了理论依据.