由于神经保护药的临床研究均以失败告终，因此卒中治疗专业委员会建议利用非人灵长类动物开展卒中临床前研究。非人灵长类动物是基础实验与临床研究之间的桥梁，所取得的实验结果极具参考价值。但是，非人灵长类动物卒中模型的神经功能缺损和行为学评价方法多种多样，评分方法也是各有侧重点，测评时容易产生分歧，或量表本身存在不足导致评分不准确，直接影响实验结果和后续研究的开展。文章对非人灵长类动物卒中模型的神经功能缺损和行为学评价方法进行了总结。

黄斑区是形成空间视力和色觉的关键解剖结构，黄斑疾病严重威胁患者的视觉功能及生活质量。非人灵长类动物（NHP）是唯一拥有类似人类黄斑结构的哺乳动物，因此在研究黄斑疾病方面具有重要价值。目前，多种方法包括自发性、基因编辑、药物诱导、光诱导及机械性损伤等，可用于筛选和构建NHP模型，用于研究眼皮肤白化病、全色盲、视网膜色素变性、老年性黄斑变性及一些罕见的眼部综合征。在构建NHP模型时，应充分考虑其他动物模型，以实现模型之间的互补研究。此外，应充分发挥NHP的资源优势，创建具有可控遗传背景的灵长类品系，有助于早日实现可持续利用的目标。

近年来，戊型肝炎逐渐被认为是被低估的全球疾病负担。感染导致相关损伤或死亡较严重的人群包括孕妇、有基础肝病的患者和老年人。疫苗是预防戊型肝炎病毒（HEV）感染的最有效手段。由于缺乏高效的HEV细胞培养系统使得开发灭活或减毒疫苗不可行，因此研究者们对重组疫苗进行深入研究。HEV中和位点几乎完全位于病毒粒子的开放式阅读框2所编码的衣壳蛋白（pORF2）中。基于pORF2的许多候选疫苗显示出保护灵长类动物的潜力，其中两种在成人中耐受性良好，对预防戊型肝炎高度有效。全球首个戊型肝炎疫苗239（HEV Hecolin ?疫苗）于2012年在中国获批上市。

视皮层是大脑视觉信息的处理整合中心，灵长类动物的视皮层存在背侧和腹侧流2条相对独立而又相互联系的平行视觉信息通路。笔者总结了视皮层背侧通路（即where+how通路）、腹侧通路（即what通路）的发现、定位、功能以及二者的联系，并从视觉通路临床应用角度系统梳理了视觉皮层背侧、腹侧平行通路的研究进展。目前2条通路结构和功能相关性研究资料较少，对视皮层视觉通路的视觉信息分拣处理、相互作用及通路信息传递过程编码和神经整合处理机制尚缺乏深入研究。此外，关于2条通路的临床研究缺乏系统性和完整性，且研究结果分歧较大，今后需改进研究方法，加强深入研究视觉疾病视通路损害的结构和功能。本文通过对视皮层背侧通路、腹侧通路做—综述，以期为视觉信息的传递、加工和相关临床眼病防治研究提供理论基础。

卵巢功能不全（premature ovarian insufficiency，POI）是指女性在40岁前卵巢功能衰退的临床综合征，以月经紊乱（如停经或月经稀发）伴有高促性腺激素和低雌激素为特征。虽已知的POI病因有卵巢手术、化疗、放疗以及染色体异常或环境因素，但其发病机制尚未完全明确。目前POI动物模型种类较多主要包含两大类即啮齿类POI模型以及非啮齿类POI模型，啮齿类POI模型中小鼠POI模型种类最多，制备方法完善，最常用于POI的相关研究；大鼠的POI模型相较于小鼠POI模型使用频率低，但对于POI的研究来说仍具有不可代替的价值。非啮齿类POI模型（兔、猪和非人灵长类等）卵巢形态及各阶段卵母细胞观察较容易，其中非人灵长类POI模型与人类最为相似，但由于实验成本高及饲养条件严格，目前对于非啮齿类POI模型研究仍然较少，需进一步深入研究从而建立完整的模型制备体系。本文拟对POI的动物模型进行综述，为POI分子机制研究及新型诊疗措施提供参考。

目的:探究人与非人灵长类动物（恒河猴）的下颌骨骨膜中是否存在有别于传统间充质干细胞的干细胞群体及其在膜内成骨过程中的特性，并提供区别于其他解剖区域骨膜干细胞（PSC）的下颌骨PSC的稳定分离、培养、扩增的标准化流程。方法:分别从上海交通大学医学院附属第九人民医院的18~24岁行第三磨牙拔除术3例患者翻瓣去骨过程中的骨块表面和3只6岁龄恒河猴下颌骨的磨牙区颊侧获取骨膜，使用Illumina平台Novaseq 6000测序仪进行单细胞测序，并通过同源基因匹配进行跨物种单细胞转录组测序的结果比较。使用37 ℃和低温两种消化方式从原代组织中分离PSC，经流式细胞术分析鉴定其表面标志物（CD200、CD31、CD45和CD90）并通过免疫荧光鉴定组织蛋白酶K（CTSK）与CD200的共定位情况。评估体外扩增至第3代的不同物种PSCs的细胞增殖能力和三系分化能力。比较PSC和骨髓间充质干细胞（BMSC）在成骨方面的特性异同。结果:单细胞测序结果提示直系同源基因匹配降维后获得了18个聚类的细胞群，基于各细胞标志物数据库对各聚类进行细胞注释。低温消化方案可以稳定地从人、恒河猴下颌骨骨膜中分离出PSC，细胞呈成纤维细胞状。细胞计数法结果显示人与恒河猴的PSC增殖能力差异无统计学意义，流式细胞术分析鉴定结果显示，从骨膜分离的细胞表面抗原表达CD200 +、CD31 -、CD45 -和 CD90 -，免疫荧光提示CTSK与CD200共定位于此细胞中。茜素红染色、油红O染色和阿尔辛蓝染色结果显示，人和恒河猴的PSC均具备成骨、成脂、成软骨的分化能力。与BMSC的成骨能力相比，PSC增殖能力略优，分化过程中，PSC在早期有良好的成骨表现。 结论:本研究成功稳定分离并鉴定出人和非人灵长类动物（恒河猴）的正常下颌骨PSC，为探索下颌骨膜内成骨的机制、建立理想的非人灵长类动物模型以及下颌骨缺损修复新型策略提供了细胞学基础。

The ovary is indispensable for female reproduction,and its age-dependent functional decline is the primary cause of infertility.However,the molecular basis of ovarian aging in higher vertebrates remains poorly understood.Herein,we apply spatiotemporal transcriptomics to benchmark architecture organization as well as cellular and molecular deter-minants in young primate ovaries and compare these to aged primate ovaries.From a global view,somatic cells within the non-follicle region undergo more pronounced transcriptional fluctuation relative to those in the follicle region,likely constituting a hostile microenvironment that facilitates ovarian aging.Further,we uncovered that inflammation,the senescent-associated secretory phenotype,senescence,and fibrosis are the likely primary contributors to ovarian aging(PCOA).Of note,we identified spatial co-localization between a PCOA-featured spot and an unappreciated MT2(Metallothionein 2)highly expressing spot(MT2high)characterized by high levels of inflammation,potentially serving as an aging hotspot in the primate ovary.Moreover,with advanced age,a subpopulation of MT2high accumulates,likely disseminating and amplifying the senescent signal outward.Our study establishes the first primate spatiotemporal transcriptomic atlas,advancing our understanding of mechanistic determinants underpinning primate ovarian aging and unraveling potential biomarkers and therapeutic targets for aging and age-associated human ovarian disorders.

目的 将贴壁培养的Vero细胞驯化成悬浮培养细胞,并对其生物学特性进行研究.方法 采用无血清培养和"摇床适应法"对细胞进行培养优化,对其进行成瘤性、短串联重复序列(short tandem repeat,STR)分析、透射电子显微镜形态,以及对流感病毒敏感性检测.结果 成功建立悬浮细胞系Vero-S,Vero-S细胞生长期在 24～72 h,平台期在 108～144 h之间,衰退期在 144 h以后,细胞 PDT为 36 h,细胞密度在14.01～14.88×108 个/L之间,细胞平均圆度在 0.73～0.75 之间,细胞直径在 12.12～14.44 μm之间.Vero-S细胞在裸鼠皮下形成肿瘤,而悬浮培养前的Vero细胞不具有成瘤性;STR显示为猴源细胞系;电镜下细胞结构完整;Vero-S细胞对流感病毒感染不敏感.结论 悬浮细胞系Vero-S细胞的生长经历与贴壁细胞类似的生长期、平台期、衰退期,且细胞大小均一,建立的悬浮培养基能够支持Vero-S细胞高密度生长.STR结果表明悬浮Vero细胞具有完全的遗传稳定性,透射电镜下与贴壁Vero细胞无明显区别.为细胞悬浮驯化培养技术提供参考价值,并可用于细胞致肿瘤的机理研究.

目的·研究恒河猴(Rhesus)、狨猴(Marmoset)、倭狐猴(Mouse Lemur)这3种代表性灵长类动物的癌-睾丸抗原(cancer-testis antigen,CTA)家族成员之一的肉瘤抗原l(sarcoma antigen 1,SAGE1)的进化,及其与整合体复合物(integrator complex,INT)亚基INTS3之间的相互作用的保守性.方法·首先在HEK293T细胞中利用免疫共沉淀(co-immunoprecipitation,Co-IP)的方法验证3种灵长类动物的SAGE1和INTS3相互作用.随后在互作蛋白截短的片段上分别添加His-SUM O和GST标签,并在大肠埃希菌中进行表达,经过系列纯化步骤得到目标蛋白.通过表面等离子体共振(surface plasmon resonance,SPR)实验测定目标蛋白之间的结合强弱,借助广角激光散射凝胶排阻层析(size exclusion chromatography with multi-angle light scattering,SEC-MALS)技术检测复合物的结合比例,并利用分子对接技术预测SAGE1和INTS3截短体的结合模型.分析人类INTS3和SAGE1互作界面,挑选在灵长类中也相对保守的关键互作氨基酸位点,将其突变后再次使用Co-IP分析INTS3和SAGE1的结合情况.结果·通过Co-IP方法,确定3种灵长类动物中INTS3和SAGE1全长蛋白之间存在相互作用.截短体蛋白经过外源诱导表达和多步纯化,获得高纯度蛋白样品;经过SPR对其进行结合和解离检测分析,得到了它们的解离常数在微摩尔级别;并且SEC-MALS结果显示INTS3与SAGE1的结合比例为2∶1.使用分子对接预测SAGE1和INTS3截短体结合模型,发现该复合物具有典型的"蝴蝶型结构",由INTS3二聚体组成"蝴蝶身体",由SAGE1组成"蝴蝶头部",结合界面中疏水相互作用构成了主要的互作模式.分析突变后的SAGE1与INTS3全长蛋白相互作用,它们之间的结合明显减弱.结论·恒河猴、狨猴、倭狐猴中INTS3与SAGE1存在相互作用,并且相互作用具有高度的保守性.

Non-human primates(NHPs)are increasingly used in preclinical trials to test the safety and efficacy of biotech-nology therapies.Nonetheless,given the ethical issues and costs associated with this model,it would be highly advantageous to use NHP cellular models in clinical studies.However,developing and maintaining the na?ve state of primate pluripotent stem cells(PSCs)remains difficult as does in vivo detection of PSCs,thus limiting biotech-nology application in the cynomolgus monkey.Here,we report a chemically defined,xeno-free culture system for culturing and deriving monkey PSCs in vitro.The cells display global gene expression and genome-wide hypometh-ylation patterns distinct from monkey-primed cells.We also found expression of signaling pathways components that may increase the potential for chimera formation.Crucially for biomedical applications,we were also able to integrate bioluminescent reporter genes into monkey PSCs and track them in chimeric embryos in vivo and in vitro.The engineered cells retained embryonic and extra-embryonic developmental potential.Meanwhile,we generated a chimeric monkey carrying bioluminescent cells,which were able to track chimeric cells for more than 2 years in living animals.Our study could have broad utility in primate stem cell engineering and in utilizing chimeric monkey models for clinical studies.