目的:探究多磺酸黏多糖乳膏对增生性瘢痕形成的抑制作用及机制。方法:在新西兰白兔（16只）双耳建立直径6 mm的圆形全层创面，构建兔耳增生性瘢痕模型，每只兔耳3个瘢痕创面，左耳瘢痕作为多磺酸黏多糖乳膏实验组，右耳瘢痕为基质对照组，分别外涂多磺酸黏多糖乳膏和基质乳膏，1只兔耳用药量约0.4 g，2次/d，连续6周。分别在用药开始第0天（手术14 d）、14天（手术后28 d）和42天（手术后56 d）取瘢痕组织进行HE染色、Masson染色和免疫组化实验，评估组织病理评分，检测瘢痕厚度、胶原纤维密度和Ⅰ、Ⅲ型胶原蛋白表达及Ⅰ/Ⅲ型胶原蛋白比值。采用 t检验和单因素方差分析比较两组各指标差异。 结果:HE染色结果显示，与给药前相比，给药42 d对照组存在大量细胞外基质沉积、炎症细胞浸润和局部充血等，而实验组未见明显改变。给药0、14、42 d，对照组兔耳瘢痕组织病理结构评分明显升高，分别为4.16 ± 1.61、6.50 ± 1.46、6.53 ± 1.34（ F = 13.69， P = 0.001），而实验组无明显变化（4.65 ± 1.52、5.13 ± 1.83、5.38 ± 1.60； F = 0.78， P > 0.05）。Masson染色结果显示，给药42 d对照组胶原纤维含量极高，被染成深蓝色，而实验组胶原纤维含量有所下降；随着给药时间的增加，与给药前相比，对照组瘢痕组织厚度明显增加（ F = 5.64， P = 0.007），而实验组无明显变化（ F = 1.48， P > 0.05）。免疫组化结果显示，与给药0 d相比，实验组和对照组各时点Ⅲ型胶原蛋白表达均无明显改变（ F = 0.22、0.92，均 P > 0.05），但对照组Ⅰ型胶原蛋白表达和Ⅰ/Ⅲ型胶原蛋白比例明显上升（ F = 7.47， P < 0.001； F = 4.70， P = 0.005）；给药42 d，与对照组相比，实验组Ⅰ型胶原蛋白表达和Ⅰ/Ⅲ型胶原蛋白比值明显下降（ t = 3.04， P = 0.007； t = 2.35， P = 0.030） 。 结论:多磺酸黏多糖乳膏局部应用可有效降低瘢痕厚度和抑制胶原纤维增生以及Ⅰ型胶原蛋白表达，预防和抑制瘢痕增生。

目的:探讨术后非人类白细胞抗原(HLA)抗体与肾移植体液性排斥反应(HR)的相关性。方法:回顾性分析上海交通大学医学院附属仁济医院2019年9月至2021年1月检测了非HLA抗体水平的40例肾移植受者资料，选取活检证实发生HR，并且发生HR时供者特异性HLA抗体阴性或者弱阳的受者入组HR组(11例)，选取术后2周至检测非HLA抗体时移植肾功能稳定的受者入组稳定组(29例)。采用Luminex单抗原微珠法检测HLA抗体、MHCⅠ类链相关基因A(MICA)抗体、32种非HLA抗体的水平，采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血管紧张素Ⅱ1型受体(AT1R)抗体水平。分析两组受者非HLA抗体阳性率和阳性非HLA抗体数量的差异。结果:24例受者具有阳性非HLA抗体，剩余16例受者的非HLA抗体全为阴性。HR组分别有3例受者的肌动蛋白(ACTIN)抗体、Ⅲ型胶原蛋白(Collagen Ⅲ)抗体、谷胱甘肽硫转移酶θ1(GSTT1)抗体和γ干扰素(IFN-γ)抗体阳性，而稳定受者的这4种非HLA抗体都是阴性，两组比较，差异有统计学意义( P＝0.017)。4例HR受者的Collagen Ⅱ抗体阳性，而仅1例稳定受者的Collagen Ⅱ抗体阳性，HR受者的Collagen Ⅱ抗体阳性率高于稳定受者( P＝0.023)。HR受者的平均阳性非HLA抗体数为2.36个，而稳定受者为0.90个，两组之间的差异有统计学意义( P＝0.008)。 结论:高水平非HLA抗体增加肾移植HR的发生风险。

目的:探讨ⅩⅦ型胶原蛋白(COL17)对雄激素性脱发(AGA)模型小鼠毛发生长的作用及机制。方法:将48只C57BL/6J小鼠建立AGA模型(脱去小鼠背部毛发并外涂二氢睾酮溶液)，采用随机数表法分为6组，每组8只。阴性对照组，脱毛区注射生理盐水(单点注射0.05 ml，共5个点)；阳性对照组，脱毛区外用5%米诺地尔酊，1 ml/d；COL17低、中、高浓度组，在脱毛区分别注射0.5、1.0、2.0 mg/ml的COL17(单点注射0.05 ml，共5个点)；Ⅲ型胶原蛋白(COL3)、COL17(COL3＋COL17)联合高浓度组，在脱毛区注射2.0 mg/ml的COL3和COL17(单点注射0.05 ml，共5个点)。共给药21 d，期间观察记录各组小鼠毛发生长情况；21 d后，取小鼠脱毛区皮肤及皮下组织制作病理切片行HE染色，观察毛囊数量及形态变化；取小鼠脱毛区新鲜皮肤组织行总RNA测序分析，对差异共表达基因进行基因本体论(GO)功能注释、京都基因与基因组百科全书(KEGG)通路分析和基因集富集分析(GSEA)。结果:给药21 d后，与阴性对照组相比，阳性对照组、COL17高浓度组、COL3＋COL17联合高浓度组小鼠背部脱毛面积明显缩小，HE染色显示其毛囊数量也明显增多。Pearson相关性分析、主成分分析及各组间聚类热图显示，COL17高浓度组与阳性对照组基因相关性较高( R2＝0.95， P＝0.024)，基因表达较为接近，2组有3 882个差异基因(1 705个上调，2 177个下调)，而COL3＋COL17联合高浓度组与阳性对照组基因相关性最高( R2＝0.96， P＝0.001)，基因表达最接近，2组有1 289个差异基因(385个上调，904个下调)；KEGG分析显示，与阴性对照组相比，阳性对照组、COL17高浓度组及COL3＋COL17联合高浓度组小鼠均上调了与毛发生长相关的Wnt信号通路、细胞黏附分子及hedgehog信号通路；GO富集分析提示COL17高浓度组及COL3＋COL17联合高浓度组中皮肤发育、毛发周期循环相关基因上调；GSEA富集分析发现，COL17高浓度组成纤维细胞增殖、白介素1分泌相关基因表达上调，而COL3＋COL17联合高浓度组成纤维细胞迁移、凋亡细胞清除及加速活性氧的代谢相关基因表达上调。 结论:局部注射2.0 mg/ml的COL17对AGA模型小鼠毛发生长具有一定促进作用，且联合注射2.0 mg/ml的COL3后效果更显著，激活Wnt信号通路可能是COL17促毛发生长的主要机制之一。

目的:探讨热休克蛋白47（HSP47）对链脲佐菌素（STZ）诱导的糖尿病心肌病的影响及具体机制。方法:采用8~10周龄C57BL/6雄性小鼠，随机分为对照组、HSP47过表达对照组、糖尿病组、HSP47过表达糖尿病组，每组12只。通过STZ腹腔注射的方法建立1型糖尿病心肌病小鼠模型，造模成功8周后应用小鼠尾静脉注射的方式过表达HSP47基因，6周后每组取出小鼠心脏6只用于病理和分子生物学分析。应用苏木精-伊红（HE）染色和天狼星红（PSR）染色分别检测心肌细胞横截面积和心肌组织纤维化程度；应用CD31和Ⅰ型胶原蛋白免疫荧光染色检测纤维化程度；采用免疫印迹法测定纤维化相关蛋白的表达水平。结果:与对照组比较，糖尿病组小鼠心肌HSP47表达水平上调（2.014±0.264比1.004±0.064， P<0.001）。糖尿病组小鼠心肌细胞横截面积较对照组增加[（235.3±20.7）μm 2比（172.8±13.6）μm 2， P<0.001]，HSP47过表达糖尿病组的心肌细胞横截面积进一步增加[（302.2±41.0）μm 2比（235.3±20.7）μm 2， P=0.009]。同时，小鼠心肌肥厚标志物心房钠尿肽（ANP）、脑钠肽（BNP）、肌球蛋白重链β（β-MHC）mRNA表达水平进一步上调（均 P<0.001）。与对照组比较，糖尿病组小鼠心肌胶原纤维含量增加[（7.333±1.127）%比（4.837±0.775）%， P=0.002]，HSP47过表达糖尿病组的心肌纤维含量进一步增加[（9.175±1.008）%比（7.333±1.127）%， P=0.025]，同时纤维化指标Ⅰ型胶原蛋白、Ⅲ型胶原蛋白、结缔组织生长因子（CTGF）和转化生长因子β（TGFβ）的mRNA水平进一步上调（均 P<0.001）。Western印迹结果显示，与糖尿病组相比，HSP47过表达糖尿病组Smad3的磷酸化水平上调，同时α-平滑肌肌动蛋白（α-SMA）和TGFβ的蛋白水平增加（ P<0.001）。 结论:HSP47可通过激活TGFβ/Smad3信号通路恶化STZ诱导的糖尿病心肌纤维化。

目的:研究抗纤维化四肽N-乙酰基-丝氨酰-天冬氨酰-赖氨酰-脯氨酸（Ac-SDKP）对矽肺大鼠纤维化肺组织中磷酸化热休克蛋白27（P-HSP27）及锌指家族核转录因子1（SNAI1）表达的调控，以探讨Ac-SDKP抗矽肺纤维化作用。方法:于2014年12月，采用一次性支气管灌注二氧化硅（SiO 2）粉尘的方法制备大鼠矽肺动物模型，选取80只SPF级健康成年Wistar大鼠，根据随机数字表法将大鼠分为8组，每组10只。模型对照4周组（饲养4周）、模型对照8周组（饲养8周）：支气管灌注生理盐水1.0 ml/只；矽肺模型4周组（饲养4周）、矽肺模型8周组（饲养8周）：支气管灌注50 mg/ml的SiO 2混悬液1.0 ml/只；单独Ac-SDKP给药4周组（饲养4周）、单独Ac-SDKP给药8周组（饲养8周）：Ac-SDKP 800 μg·kg -1·d -1腹腔泵给药；Ac-SDKP预防治疗组：Ac-SDKP 800 μg·kg -1·d -1给药48 h后，支气管灌注SiO 2混悬液1.0 ml/只，饲养8周；Ac-SDKP抗纤维化治疗组：支气管灌注SiO 2混悬液1.0 ml/只4周后，给予Ac-SDKP 800 μg·kg -1·d -1治疗4周。蛋白免疫印迹（Western blotting）检测各组P-HSP27、SNAI1、α-平滑肌肌动蛋白（α-SMA），以及Ⅰ型和Ⅲ型胶原蛋白的表达，免疫组织化学技术检测P-HSP27和SNAI1的表达，激光共聚焦显微镜检测P-HSP27和α-SMA共定位表达。 结果:与模型对照组比较，矽肺模型组大鼠矽肺纤维化区域P-HSP27、SNAI1、α-SMA、Ⅰ型和Ⅲ型胶原蛋白表达增强，差异均有统计学意义（ P<0.05）。给予Ac-SDKP干预后，与矽肺模型8周组比较，Ac-SDKP预防和抗纤维化治疗组大鼠P-HSP27、SNAI1、α-SMAⅠ型和Ⅲ型胶原蛋白表达明显降低，差异均有统计学意义（ P<0.05）。而单独Ac-SDKP给药组与模型对照组P-HSP27、SNAI1、α-SMA、Ⅰ型和Ⅲ型胶原蛋白表达无明显变化，差异均无统计学意义（ P>0.05）。激光共聚焦结果显示，矽肺模型组大鼠肺组织表达P-HSP27和α-SMA的阳性细胞多于模型对照组；与矽肺模型组比较，Ac-SDKP预防和抗纤维化治疗组表达P-HSP27和α-SMA的阳性细胞减少；与模型对照8周组比较，矽肺模型8周组结节中有部分P-HSP27和α-SMA表达的双阳性细胞。 结论:Ac-SDKP可能通过调节P-HSP27/SNAI1通路发挥抗矽肺纤维化的作用。

背景 慢性阻塞性肺疾病(COPD)是重大慢性疾病,气道重塑是其重要病理机制.补肺益肾方对COPD疗效较好,其有效成分组成的补肺益肾组分方Ⅲ(ECC-BYF Ⅲ)与之疗效相当,可显著改善COPD模型大鼠气道重塑,但其组分配伍规律尚待揭示.目的 基于COPD大鼠模型评价ECC-BYF Ⅲ及其组分配伍对COPD气道重塑的干预作用.方法 将ECC-BYF Ⅲ组分分成补气、补肾、化痰、活血 4 类,按数学排列组合的方法将其分成不同的组分配伍组.2018 年 5-9 月进行动物实验.将 216 只SD大鼠随机分为正常、模型、ECC-BYF Ⅲ、不同组分配伍及氨茶碱组,共 18 组,每组 12 只.第 1～8 周,采用香烟烟雾暴露联合反复细菌感染的方法制备COPD稳定期大鼠模型(正常组除外);第 9～16 周,给予相应的药物干预.苏木素-伊红(HE)染色技术观察气道壁及气道平滑肌变化;酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血清中基质金属蛋白酶 12(MMP-12)、碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)及支气管肺泡灌洗液(BALF)中胶原蛋白(COL)-1、COL-3、MMP-12 等气道重塑相关指标水平.Region(R)值综合评价各组分配伍对COPD大鼠气道重塑的干预作用.结果 与模型组比较,ECC-BYF Ⅲ及其组分配伍、氨茶碱组大鼠气道壁厚度均降低,ECC-BYF Ⅲ组、补气化痰组、扶正化痰组、扶正活血组、补气祛邪组、氨茶碱组大鼠平均气道平滑肌细胞数减少(P<0.05).与模型组比较,ECC-BYF Ⅲ组、补肾组、补气化痰组、补气活血组、补肾化痰组、补肾活血组血清bFGF水平降低,ECC-BYF Ⅲ组、扶正组血清MMP-12 水平降低,ECC-BYF Ⅲ及其组分配伍、氨茶碱组BALF MMP-12、BALF COL-1 水平均降低,ECC-BYF Ⅲ组、补肾组、化痰组、活血组、扶正组、补气化痰组、补气活血组、补肾活血组、扶正化痰组、补气祛邪组、补肾祛邪组及氨茶碱组BALF COL-3 水平均降低(P<0.05).对COPD大鼠气道壁厚度、气道平滑肌增生情况、血清及BALF中所有气道重塑相关指标进行R值综合评价结果显示,除化痰、祛邪组分配伍外,ECC-BYF Ⅲ及其余组分配伍和氨茶碱组均可改善COPD大鼠气道重塑(P<0.05),以补气祛邪、扶正化痰、补气活血组分配伍改善COPD大鼠气道重塑效果较好.结论 ECC-BYF Ⅲ及其组分配伍可不同程度干预COPD大鼠气道重塑,其中以补气祛邪、扶正化痰、补气活血(均含补气类组分:人参皂苷Rh1 和黄芪甲苷)组分配伍效果较为显著.

目的:回顾分析滚针联合重组人酸性成纤维细胞生长因子(Recombinant human acidic fibroblast growth factor,rh-aFGF)及Ⅲ型胶原蛋白导入治疗毛孔粗大的临床疗效.方法:回顾性分析2020年11月-2022年2月于笔者医院接受滚针联合rh-aFGF及Ⅲ型胶原蛋白导入治疗毛孔粗大的125例就医者临床资料.根据皮损特点将就医者分为堵塞型(n=95)、松弛型(n=13)、混合型(n=17),再根据就医者接受治疗次数将各型就医者分为单次组和多次组.分析不同毛孔分型各组就医者治疗前后的毛孔可见度评分、临床疗效,并回访统计就医者舒适度及满意度.结果:治疗后各类型毛孔可见度评分均较治疗下降,且堵塞型及混合型显著低于治疗前(P＜0.05).与治疗前相比,堵塞型单次组与多次组治疗后毛孔可见度评分均显著降低(P＜0.01).松弛型、混合型多次组治疗后毛孔可见度评分均显著低于治疗前(P＜0.01).治疗总有效率为72.80％,不同毛孔类型间疗效比较差异无统计学意义(P＞0.05).就医者总满意度为68.00％,治疗舒适度为99.20％.多次治疗可提高就医者满意度.结论:滚针联合rhaFGF及Ⅲ型胶原蛋白导入治疗堵塞型毛孔粗大单次即可见显著疗效,松弛型、混合型多次治疗后疗效较好.整体治疗舒适度较好,适合临床推广.

目的 分析Ⅺ型胶原蛋白α1 链(COL11A1)表达情况与乳腺癌患者病情程度、新辅助化疗效果及预后的关系.方法 选取135 例Ⅱ/Ⅲ期乳腺癌患者作为研究对象,所有患者均接受新辅助化疗.取患者新辅助化疗前的肿瘤组织标本,采用免疫组化法检测COL11A1、雌激素受体(ER)、孕激素受体、人类表皮生长因子受体2(HER2)、增殖细胞核抗原Ki-67 的表达情况.分析COL11A1 表达情况与患者分子分型、临床病理特征及预后的关系.结果 COL11A1 阳性患者的ER表达阳性率、HER2 表达阳性率、Ki-67 表达阳性率、TNM Ⅲ期比例、肿瘤直径>5cm比例及腋窝淋巴结转移率均高于COL11A1 阴性患者(均P<0.05).COL11A1 阳性患者的新辅助化疗总有效率、病理完全缓解率、总体无复发生存率均低于COL11A1 阴性患者(均P<0.05).结论 COL11A1 的表达情况与乳腺癌患者的病情程度、新辅助化疗效果及预后有关,COL11A1 阳性患者的病情更重,新辅助化疗效果和预后更差.COL11A1 有望成为乳腺癌患者新辅助化疗效果及预后的预测指标.

目的 检测鸡Ⅱ型胶原蛋白诱导性关节炎(collagen-induced arthritis,CIA)小鼠中滤泡辅助性T(Tfh)细胞及其细胞因子表达水平,探讨Tfh细胞与类风湿性关节炎之间的关系. 方法 利用鸡Ⅱ型胶原蛋白造模小鼠制备人类类风湿关节炎动物模型CIA小鼠,造模后进行病情观察并利用关节炎指数(AI)进行评分,正常野生型(wide type,WT)小鼠按照CIA小鼠相同方法和时间注入等量生理盐水为对照组,流式检测CIA小鼠和对照组小鼠脾脏和淋巴结中Tflh细胞数量和比例差异,实时荧光定量PCR检测两组小鼠脾脏细胞中Bcl-6和IL-21 mRNA水平,ELISA比较血浆中细胞因子IL-21表达差异. 结果 ①流式细胞术结果显示:CIA小鼠脾脏中CXCR5+ ICOS+ Tfh细胞占CD4+T细胞比例明显高于WT小鼠(2.684±0.116 8 vs1.928±0.1624,P＜0.05);CIA小鼠淋巴结中CXCR5+ ICOS+ Tfh细胞占CD4+T细胞比例明显高于WT小鼠(1.960±0.169 5 vs 1.211±0.093 9,P＜0.05).②实时荧光定量PCR检测结果提示:CIA小鼠脾脏中Bcl-6 mRNA表达高于WT小鼠(1.000±0.050 69 vs 0.600±0.050 54,P＜0.05);CIA小鼠脾脏中IL-21 mRNA表达高于WT小鼠(1.000±0.06075 vs 0.530±0.05054,P ＜0.05).③ELISA结果显示:CIA小鼠血浆中IL-21水平明显高于WT小鼠(104.3±3.541 vs 60.2±10.170,P＜0.05).结论 CIA小鼠外周免疫器官中Tfh细胞比例及其相关免疫分子表达明显升高,血浆中Tfh细胞分泌的特异性细胞因子IL-21显著升高,Tfh细胞与RA的发生和病情进展有密切关系.

目的 探查一个Ⅳ型埃勒斯-当洛斯综合征(EDS Ⅳ)家庭Ⅲ型胶原蛋白基因α1(COL3A1)的致病突变.方法 采集患者及其妻儿的外周血,并提取脱氧核糖核酸(DNA),通过Sanger测序法获取患者COL3A1基因变异,将结果与200名正常人的测序结果进行对比,并在单核苷酸多态性数据库(dbSNP)、千人基因组计划(TGP)数据库、炎黄(YH)数据库、外显子测序计划(ESP)数据库中进行检索,排除其为单核苷酸多肽性(SNPs).利用突变筛查软件(SIFT)、突变评价软件(MutationTaster)以及2代多态性表型预测软件(PolyPhen-2)对变异进行预测,最后将变异在人类基因突变数据库(HGMD)、Pubmed、万方、中国知网(CN-KI)以及谷歌学术中搜索,查看其是否已被报道.结果 发现COL3A1基因变异c.3256G>C(p.G1086R)在正常人的测序结果中不存在,并且在上述各数据库中均无相关记录,谷歌学术中亦无文献报道.三大预测软件预测结果均为有害.结论 COL3A1基因上的变异c.3256G>C为一个新发现的致病突变.