目的 基于磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)/蛋白激酶B(AKT)/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)通路关键因子探讨白芍总苷对化学性肝损伤肝阴虚证大鼠的保护作用及机制.方法 将40只雄性SD大鼠按照体质量随机区组分为空白组、模型组、一贯煎组、白芍总苷组,每组10只.除空白组外,其余各组大鼠连续6周腹腔注射20％四氯化碳橄榄油溶液,并灌胃甲状腺片(30 mg/kg)以制备化学性肝损伤肝阴虚证病证结合大鼠模型.造模期间,空白组、模型组大鼠每天灌胃蒸馏水,一贯煎组及白芍总苷组大鼠分别灌胃一贯煎水煎液(635 mg/kg)及白芍总苷混悬液(50 mg/kg),连续6周.给药期间每2周检测大鼠体质量、肛温;给药结束后观察大鼠24 h摄食量和摄水量、舌面湿度;采用酶联免疫吸附测定法检测血清环磷酸腺苷(cAMP)、环磷酸鸟苷(cGMP)、白细胞介素-1(IL-1)、白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-10(IL-10)、白细胞介素-1受体拮抗剂(IL-1Ra)含量,并计算cAMP/cGMP;采用比色法检测血清谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、γ-谷氨酰转肽酶(γ-GT)、碱性磷酸酶(ALP)、总胆红素(TBIL)、总胆汁酸(TBA)含量;采用Masson染色法观察肝脏纤维化程度,并计算胶原面积百分比;采用实时荧光PCR法和蛋白质印迹法检测大鼠肝脏PI3K、AKT和mTOR mRNA及蛋白表达水平.结果 与空白组比较,模型组大鼠第2、4、6周体质量降低,第2、4、6周肛温升高,24 h摄食量增加;cAMP升高、cGMP下降、cAMP/cGMP升高,IL-1、IL-6、TNF-α含量均升高,IL-10、IL-1Ra含量均降低,ALT、AST、γ-GT、ALP、TBIL、TBA水平均升高,肝脏胶原面积百分比增加,PI3K、AKT和mTOR mRNA及蛋白磷酸化表达升高(均P<0.05).与模型组比较,白芍总苷组大鼠第2、4、6周肛温下降,24 h摄食量和饮水量减少,舌面湿度升高;一贯煎组和白芍总苷组大鼠cAMP降低、cGMP升高、cAMP/cGMP下降,IL-1、IL-6、TNF-α均下降,IL-10升高,肝脏胶原面积百分比降低;白芍总苷组大鼠ALT、AST、γ-GT、ALP、TBIL均下降,PI3K、AKT和mTOR mRNA及蛋白磷酸化表达降低(均P<0.05).结论 白芍总苷对化学性肝损伤肝阴虚证大鼠具有较好的保护作用,可能是通过抑制PI3K/AKT/mTOR通路的激活,减少促炎细胞因子分泌,增加抗炎细胞因子释放,从而发挥白芍调节阴阳平衡的作用.

目的 筛选经典名方一贯煎的最优提取工艺,为其制剂研究提供实验依据.方法 对HPLC法测定的甜菜碱、地黄苷D、对香豆酸、阿魏酸、毛蕊花糖苷、洋川芎内酯Ⅰ进行化学计量学分析;以筛选出的关键成分含量、出膏率及指纹图谱相似度为评价指标,采用改进AHP-熵权法确定各个指标的组合权重系数,以基准样品关联度评价样品与基准样品的质量一致性,在单因素试验的基础上,采用响应面法优选一贯煎的提取工艺参数.结果Box-Behnken设计建立的数学模型具有统计学意义,一贯煎最佳提取工艺参数为加12倍量水,提取时间80 min,提取2次.此条件下设计空间的综合评分为0.963.结论 采用改进AHP-熵权-基准样品关联度法优选一贯煎提取工艺参数,所拟合的模型显著,与基准样品质量基本一致,为进一步研究经典名方一贯煎复方制剂究提供了参考.

目的 探究一贯煎多糖(YGJP-W)的基本结构特征以及其改善四氯化碳(CC14)诱导小鼠肝纤维化的活性,分析YGJP-W抗肝纤维化活性与其调节肠道菌群结构变化关系.方法 采用水提醇沉和弱阴离子交换色谱制备一贯煎多糖组分YGJP-W,依次采用苯酚-硫酸法、间羟基联苯法、BCA蛋白定量分析试剂盒、高效凝胶渗透色谱法(high performance gel permeation chromatography,HPGPC)、FT-IR、离子色谱仪及扫描电镜法(scanning electron microscope,SEM)对一贯煎多糖的总糖含量、糖醛酸含量、蛋白含量、相对分子质量分布、官能团、单糖组成及形貌特征进行表征,采用CCl4诱导的小鼠模型,检测YGJP-W(50、100 mg/kg)干预3周后的小鼠血清谷丙转氨酶、谷草转氨酶及肝组织羟脯氨酸水平,并通过HE染色和天狼猩红染色观察肝脏组织学变化,评价YGJP-W改善肝纤维化活性;采用16SrDNA测序技术评价YGJP-W对小鼠肠道菌群的影响;采用抗生素联合YGJP-W干预,评价YGJP-W是否通过调节肠道菌群发挥药效作用.结果YGJP-W总得率为11.60％,总糖质量分数为92.48％,至少由相对分子质量为1.74×105和5.6×103的2种多糖组成,单糖组成包含半乳糖、葡萄糖、甘露糖和果糖,其物质的量比为1.0∶2.8∶1.4∶1.6.YGJP-W干预3周后,能够显著改善CC14引起的肝功能异常、肝组织病理损伤、胶原沉积和纤维化.YGJP-W在改善肝纤维化的同时能够引起小鼠肠道菌群结构变化,在门水平上,YGJP-W显著性降低拟杆菌门丰度[(57.4±14.6)％vs(79.3±8.1)％,P＜0.01],增加变形菌门[(10.4±4.7)％vs(2.1±1.9)％,P＜0.01]和放线菌门[(3.7±2.4％)％vs(0.3±0.1)％,P＜0.01)]丰度,在属水平上,YGJP-W增加狄氏副拟杆菌属Parabacteroides、埃希氏菌-志贺氏菌属Escherichia-Shigella、活泼瘤胃球菌属Ruminococcus_gnavus_group、萨特氏菌属Sutterella、毛螺菌属NK4A136组Lachnospiraceae_NK4A136_group和梭杆菌属Fusobacterium共6个菌属的丰度(LDA score＞3,P＜0.01),降低拟普雷沃氏菌属Alloprevotella),肠鼠杆菌属Muribaculum,普雷沃氏菌属UCG-001 Prevotellaceae_UCG-001和另枝杆菌Alistipes共4个菌属的丰度(LDA score＞3,P＜0.01).抗生素联合YJGP-W干预,YJGP-W抗肝纤维化的活性显著减弱.结论 多糖类成分YJGP-W是一贯煎抗肝纤维化的重要物质基础,YJGP-W发挥抗肝纤维化的作用可能与其调控肠道菌群相关.

代谢相关脂肪性肝病已成为我国第一大慢性肝病,其发生机制尚未完全明确.盛国光教授审证求因,从"土壅木郁,痰瘀互结"角度分期论治代谢相关脂肪性肝病,归纳其各阶段核心病机,针对病机遣方用药.该病早期以土壅木郁、痰瘀互结为主,治宜运脾开郁、化痰活血,常用四术汤合二陈汤加减;中期以痰瘀化热为主,治宜清肝泻火、化痰活血,常用小柴胡汤合二陈汤加减;晚期以脏腑虚损为主,治宜滋肝健脾、补肾固本,兼化痰活血,常用一贯煎合六君子汤加减,临床常效如桴鼓.

目的 在建立肝阴虚证病证结合实验模型的基础上,研究白芍多糖对大鼠化学性肝损伤肝阴虚证证候表征及内分泌/能量代谢的影响.方法 SPF级雄性SD大鼠,体质量(200±20)g,适应性喂养一周后,根据体质量随机区组法分为空白组、模型组、一贯煎组、白芍多糖组.除空白组外,其余各组大鼠腹腔注射浓度 20%四氯化碳(carbon tetrachloride,CCl4)橄榄油溶液,联合甲状腺片30 mg/kg同时灌胃给药,连续6 周.6 周后观察大鼠体质量、易激惹程度、毛发光泽度、小便颜色、大便颜色及质地等并进行评分,测量体质量、肛温、舌面干湿度、摄食量、摄水量,测定血清环磷酸腺苷(cyclic adenosine monophosphate,cAMP)、环磷酸鸟苷(cyclic guanosine monophosphate,cGMP)含量,计算cAMP/cGMP比值.测定血清谷丙转氨酶(alanine aminotransferase,ALT)、谷草转氨酶(aliquot aminotransferase,AST)、γ-谷氨酰转肽酶(γ-glutamyl transpeptidase,γ-GT)、碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)、总胆红素(total bilirubin,TBIL)、总胆汁酸(total bile acid,TBA)的含量变化并取肝脏进行苏木精—伊红染色病理切片检查;测定血清睾酮(testosterone,T)、雌二醇(estradiol,E2)、皮质类固醇(crticosteroid,COR)水平,测定肝脏Na+-K+-ATP酶、Ca2+-Mg2+-ATP酶活性.结果 与模型组相比,白芍多糖组大鼠大便评分升高(P<0.01),其余体征评分均显著下降(P<0.01);白芍多糖组体质量均有所上升,但差异无统计学意义(P>0.05);实验第 2、4 周,白芍多糖组肛温下降(P<0.01);白芍多糖组舌面干湿度上升(P<0.01),24 小时摄食量、饮水量无统计学差异(P>0.05);白芍多糖组血清cAMP降低,cGMP升高,cAMP/cGMP下降(P<0.01),ALT、AST、γ-GT、ALP、TBIL均下降(P<0.01),TBA含量降低但无统计意义(P>0.05);病理染色显示肝组织结构中度异常,视野内部分肝细胞轻度脂肪变性,胞质内可见大量小空泡,部分肝细胞气球样变性,肝实质内少量炎症细胞浸润,且未见明显炎症细胞浸润,肝脏组织病理状态有所恢复.白芍多糖组血清 E2 水平降低,COR水平升高(P<0.05,P<0.01),T 水平升高但差异无统计意义(P>0.05);白芍多糖组肝脏Na+-K+-ATP酶、Ca2+-Mg2+-ATP酶活性均降低(P<0.01).结论 白芍多糖能有效保护肝阴虚型化学性肝损伤,调节环核苷酸、内分泌紊乱和能量代谢亢进,这可能是白芍发挥保护肝损伤肝阴虚证的作用机制之一,从一定程度上揭示了白芍养肝阴的科学内涵.

原发性干燥综合征是一种较为常见的自身免疫性疾病.朱维平教授认为肾精亏虚为本病发病基础,少阴伏邪为核心病机,外邪引动是诱发因素,据此提出"透邪救阴"的核心治法.临证运用青蒿-鳖甲药对为主以清透少阴伏邪,并滋阴清热,再根据患者的不同症状、体征,灵活运用养阴润肺、益气生津、疏利肾气、养血舒郁、活血化瘀等治法,临床疗效显著.附验案1则以佐证.

总结徐景藩教授运用脾阴理论治疗消化系统疾病的经验.认为脾为阴土,其性濡静,脾阴脾气,互为因果.临证以脾阴理论为指导,治疗消化系统疾病时谨守病机,病证结合,以"甘"字立法,体用结合.提出治疗溃疡性结肠炎宜甘淡甘平,常用慎柔养真汤;治疗慢性萎缩性胃炎宜甘淡凉润,甘以入脾,淡以利阴,药如扁豆、山药、莲子、石斛、白芍之属,凉润养胃体而滋胃用,药如麦冬、知母、沙参、芦根、竹茹之属,或用参苓白术散;治疗功能性便秘宜甘凉滋润,常用药如火麻仁、桃仁、郁李仁、杏仁、当归、白芍之属;治疗肝硬化腹水宜甘寒淡渗,常用一贯煎、参麦地黄汤等.同时强调注意阴无骤补,不可急功.

[目的]探讨基于"理-法-方-药-术"体系分期论治带状疱疹(herpes zoster,HZ)的经验.[方法]通过文献学习、理论分析及临床经验总结,根据西医分期理论,探讨HZ在疹前期、疱疹期、疹后期、后遗症期的病因病机、治则治法、组方遣药和外治措施,并举验案佐证.[结果]疹前期:此期以"风毒"为主,治以疏风泻热解毒,选用菊花茶调散、银翘散、升降散等加减,治疗以浅刺为主.疱疹期:此期以肝经湿热为主,治以清肝解毒、通络止痛,方用龙胆泻肝汤加减,治疗以火针配合拔罐加围刺、电针夹脊穴为主.疹后期:此期血瘀正亦虚,治以祛瘀止痛为主,辅以益气活血,可选用补阳还五汤或补中益气汤合金铃子散和(或)瓜蒌甘草红花汤等加减,治疗以刺络拔罐放血结合围刺、电针夹脊穴为主.后遗症期:此期阴虚血涩,治以养阴柔肝通络止痛,可选一贯煎加减,治疗以针刺加艾灸为主.所举医案为临床HZ典型病例,初诊时辨证为疱疹期-肝经湿热证,处方以龙胆泻肝汤加减,并予以火针联合拔罐,浅刺围刺加电针夹脊穴;二诊时辨证为疹后期-气虚血瘀证,处方以补阳还五汤化裁,并采用梅花针、拔罐,围刺、电针夹脊穴,疗效显著.回归临床,以案示理,表明临床运用"理-法-方-药-术"体系分期诊治HZ便捷效佳.[结论]基于"理-法-方-药-术"体系分期辨治HZ,采取相应的内外兼治方案,疗效显著,值得推广.

目的 观察一贯煎加味治疗肾虚肝郁证围绝经期综合征的临床疗效,以及对患者下丘脑-垂体-卵巢轴功能的影响.方法 将80 例肾虚肝郁证围绝经期综合征患者按照随机数字表法分为2 组,对照组40 例(剔除及脱落4例,实际完成36 例)予西医常规治疗,治疗组40 例(剔除及脱落2 例,实际完成 38 例)在对照组基础上联合一贯煎加味治疗.2 组均治疗30 天为1 个疗程,治疗3 个疗程后统计疗效,比较2 组治疗前后中医症状评分(包括烘热汗出、情志异常、月经紊乱且经色紫暗、腰膝酸软、失眠多梦及大便时干时溏)、单胺类神经递质[包括多巴胺(DA)及去甲肾上腺素(NE)]及性激素指标[包括雌二醇(E2)、卵泡刺激素(FSH)及黄体生成激素(LH)]水平变化情况.结果 治疗组总有效率94.74%(36/38),对照组总有效率77.78%(28/36),治疗组疗效优于对照组(P<0.05).与本组治疗前比较,2 组治疗后中医症状烘热汗出、情志异常、月经紊乱且经色紫暗、腰膝酸软、失眠多梦、大便时干时溏评分及总分均降低(P<0.05),且治疗组治疗后中医症状烘热汗出、情志异常、月经紊乱且经色紫暗、腰膝酸软、失眠多梦评分及总分均低于对照组(P<0.05).与本组治疗前比较,2 组治疗后神经递质DA及NE水平均升高(P<0.05),且治疗组治疗后DA及NE水平均高于对照组(P<0.05).与本组治疗前比较,2 组治疗后E2 水平均升高(P<0.05),FSH及LH水平均降低(P<0.05),且治疗组治疗后E2 水平高于对照组(P<0.05),FSH及LH水平低于对照组(P<0.05).结论 一贯煎加味治疗肾虚肝郁证围绝经期综合征疗效确切,可以有效改善患者中医症状,其作用机制可能是通过调节单胺类神经递质及性激素水平,矫正下丘脑-垂体-卵巢轴功能有关,从而达到提高治疗效果的目的.

目的 探讨一贯煎及其加味对辐射损伤小鼠的防护作用及其机制.方法 以6 MV X直线加速器一次性全身照射小鼠造成辐射损伤,观察一贯煎及其加味对小鼠外周血象、外周血超氧化物歧化酶和谷胱甘肽过氧化物酶活性水平及免疫功能(胸腺、脾指数)、骨髓细胞计数、血浆与骨髓环磷酸腺苷水平等指标的变化,推测其对小鼠造血功能、免疫功能的影响及其可能机制.结果 成功制备辐射损伤小鼠模型.一贯煎原方及其加味能升高辐射损伤小鼠外周血中白细胞计数、血小板计数、血红蛋白及骨髓细胞计数(P<0.05),提高胸腺、脾指数(P<0.05),升高骨髓环磷酸腺苷水平和谷胱甘肽过氧化物酶活性(P<0.05),各指标在原方组与加味组比较差异均无统计学意义(P>0.05).结论 一贯煎原方及其加味对小鼠辐射损伤有较好防护作用,能在一定程度上促进辐射损伤小鼠造血与免疫功能恢复,抗自由基损伤可能是其作用机制之一.