目的:探究林下不同栽培模式的三叶青生长和光合特性的差异规律.方法:设置一年生三叶青林下地栽和袋栽2种模式,测定不同栽培模式下三叶青藤叶生长性状和光合特性的相关指标.结果:林下袋栽三叶青的主要农艺性状要优于林下地栽.袋栽模式下三叶青主茎长是地栽的3.04倍,林下袋栽的节数是地栽的2.09倍;林下袋栽模式下叶片的SPAD值和含氮量均显著高于地栽模式;2种模式下的光合指标之间变化趋势不尽相同,袋栽模式下叶片净光合速率、瞬时水分利用率、光合有效辐和叶面温度等指标均显著高于地栽模式;各个指标相关性分析表明三叶青的净光合速率与叶面温度呈显著正相关;光合有效辐射与SPAD值、叶片氮含量呈极显著正相关,与叶面温度呈显著正相关,而与主茎长和节数呈显著负相关.结论:林下袋栽模式下三叶青的生长和光合性能显著优于林下地栽,可为三叶青人工种植模式提供参考.

目的:建立三叶青藤叶中总黄酮、荭草苷及异荭草苷的提取分离和含量测定方法.方法:分别选取不同浓度的乙醇、丙二醇和丁二醇作为溶剂对三叶青藤叶中的有效成分进行提取,分别筛选出对总黄酮、荭草苷及异荭草苷提取率最高的溶剂,并采用高效液相色谱法(HPLC)进行探究.结果:选取荭草苷提取分离溶剂为30%丙二醇,异荭草苷的提取分离溶剂为40%乙醇.荭草苷的线性关系方程为Y = 1.052 4X-0.508 6,在0.4～4 μg/mL范围内的峰面积与进样浓度线性关系良好(R2 = 0.999 7).采用30%丙二醇提取三叶青藤叶中荭草苷的平均含量为3.58 μg/g.异荭草苷的线性关系方程为Y = 1.665 0X-0.826 4,在0.4～4 μg/mL范围内的峰面积与进样浓度线性关系良好(R2 = 0.999 6).采用40%乙醇提取三叶青藤叶中异荭草苷的平均含量为1.47 μg/g.结论:建立了三叶青藤叶总黄酮、荭草苷及异荭草苷的提取分离和含量测定方法.建立的高效液相色谱法方法简便、准确,重复性好,可应用于三叶青中这几种成分的含量测定.

目的 研究三叶青藤Illigera rhodantha Hance.正丁醇部位的化学成分.方法 三叶青藤乙醇提取液的正丁醇部位采用Sephadex LH-20、MCI、ODS C18进行分离纯化,根据理化性质及波谱数据鉴定所得化合物的结构.结果 从中分离到8个化合物,分别鉴定为赤式-紫丁香酰甘油(1)、黑风藤苷A(2)、黑风藤苷(3)、阿江榄仁树葡糖苷Ⅱ(4)、β-谷甾醇(5)、没食子酸(6)、没食子酸甲酯(7)、没食子酸乙酯(8).结论 化合物1～8为首次从该植物中分离得到,化合物1～4和6～8为首次从青藤属植物中分离得到.

目的:建立三叶青藤叶配方颗粒的质量标准,并同时测定其中5种有效成分的含量.方法:采用薄层色谱法(TLC)对三叶青藤叶配方颗粒中绿原酸、异荭草苷、异荭草苷-2′-O-鼠李糖苷进行定性鉴别.采用紫外分光光度法测定3批样品中总黄酮(以异荭草苷计)含量,并对其粒度、水分、溶化性及装量差异进行检查.以异荭草苷为内参物计算其余成分的相对校正因子,采用一测多评法测定样品中新绿原酸、绿原酸、荭草苷、异荭草苷、异荭草苷-2′-O-鼠李糖苷的含量,并与外标法测定结果进行比较.结果:绿原酸、异荭草苷、异荭草苷-2′-O-鼠李糖苷TLC图斑点清晰,分离度好,阴性对照无干扰.样品中异荭草苷检测质量浓度的线性范围为7.73～61.82μg/mL(r=0.9999);精密度、稳定性、重复性试验的RSD均小于2％;加样回收率为93.75％～97.85％(RSD=1.41％,n=6).3批样品不能通过一号筛且能通过五号筛的平均百分率分别为1.51％、1.55％、1.29％(n=3),含水量分别为4.63％、5.18％、4.03％(n=3);颗粒均在5 min内溶化;装量差异为4.8％～5.0％,均符合2015年版《中国药典》(四部)颗粒剂的相关规定.一测多评法测定5种成分质量浓度的线性范围分别为2.325～93μg/mL(r=0.9999)、5.125～205μg/mL(r=0.9999)、1.150～46μg/mL(r=0.9993)、2.625～105μg/mL(r=0.9999)、4.725～189μg/mL(r=0.9999);精密度、稳定性、重复性试验的RSD均小于3％;加样回收率分别为99.78％～106.13％(RSD=2.33％,n=6)、95.07％～103.32％(RSD=2.72％,n=6)、97.17％～105.43％(RSD=2.98％,n=6)、95.52％～101.33％(RSD=2.46％,n=6)、99.42％～105.56％(RSD=2.34％,n=6).异荭草苷相对于新绿原酸、绿原酸、荭草苷、异荭草苷-2′-O-鼠李糖苷的相对校正因子分别为0.731、0.805、0.821、0.590;一测多评法测得5种成分的含量分别为0.828～1.123、2.379～3.118、0.281～0.880、1.039～1.393、2.121～3.209 mg/g,外标法测得的含量分别为0.803～1.099、2.345～3.085、0.269～0.872、1.039～1.393、2.113～3.201 mg/g;两种方法测定结果比较,差异均无统计学意义(P>0.05).结论:所建质量标准简便、快速,可用于三叶青藤叶配方颗粒的质量控制;所建一测多评法准确、高效,可用于同时测定三叶青藤叶配方颗粒中5种有效成分的含量.

目的:研究不同光照强度对三叶青的生物量、叶绿素含量及总黄酮含量的影响,筛选三叶青最佳光照条件.方法:选用"闽选1号"三叶青扦插苗移植于大棚中,用黑色遮阳网遮阴后光照强度分别为自然光照的5％～10％、20％～30％、30％～45％,每隔45 d进行测定和取材,共8次;叶绿素计测定叶绿素相对含量,以芦丁为对照,在波长500 nm测定三叶青藤茎、叶及块根的总黄酮含量.结果:随着光照强度的增强,三叶青地上部生物量与叶绿素的含量逐渐降低,而地下部生物量与块根中总黄酮含量逐渐上升,表明荫蔽环境有利于三叶青地上部的生长,而适度增加光照强度有利于三叶青块根的发育及总黄酮的累积.结论:透光度20％～30％的条件较适合三叶青的生长发育和黄酮类成分的累积.

目的:研究建立同时测定大鼠血浆中三叶青藤叶配方颗粒5个效应组分的UPLC-MS定量分析方法,比较配方颗粒与汤剂在大鼠体内的药动学特性及生物等效性.方法:运用超高效液相色谱-质谱联用分析(UPLC-MS/MS)法,建立同时测定三叶青藤叶配方颗粒5个主要效应组分新绿原酸、绿原酸、荭草苷、异荭草苷、异荭草苷-2'-O-鼠李糖苷大鼠血浆血药浓度的定量分析方法,比较大鼠分别口服给药三叶青藤叶配方颗粒与汤剂后的血药浓度、口服生物利用度和主要药动学参数,及其药动学特性,评价其生物等效性.结果:5个主要效应组分的药动学参数分别为Cmax新绿原酸:配方颗粒(39.08 ± 0.85)ng·mL-1、汤剂(37.68 ± 0.46)ng· mL-1,绿原酸:配方颗粒(67.13±0.59)ng·mL-1、汤剂(65.65±1.02)ng· mL-1,荭草苷:配方颗粒(51.92±0.27)ng·mL-1、汤剂(51.90±0.26)ng·mL-1,异荭草苷:配方颗粒(12.89±0.05)ng · mL-1、汤剂(12.67±0.12)ng·mL-1,异荭草苷-2'-O-鼠李糖苷:配方颗粒(119.45±0.81)ng·mL-1、汤剂(117.70±0.53)ng·mL-1;AUC(0-∞)新绿原酸:配方颗粒(523.95±5.47)ng· h· L-1、汤剂(492.82±89.41)ng · h · L-1,绿原酸:配方颗粒(400.19±57.48)ng·h · L-1、汤剂(390.83±6.56)ng·h·L-1,荭草苷:配方颗粒(553.67±9.175)ng · h·L-1、汤剂(591.72±482)ng·h·L-1,异荭草苷:配方颗粒(564.50±23.24)ng·h· L-1、汤剂(493.08±33.67)ng· h·L-1,异荭草苷-2'-O-鼠李糖苷:配方颗粒(665.78±10.41)ng·h·L-1、汤剂(651.06 ±2.14)ng· h· L-1.方差分析结果表明,配方颗粒与汤剂比较,5个效应组分的药动学参数Cmax及AUC(0-∞)均无显著性差异,双单侧检验法在90％的置信度下检验,配方颗粒与汤剂具有生物等效性.结论:三叶青藤叶配方颗粒与饮片汤剂的药代动力学特性表征无显著性差异,两剂型具有生物等效性,为三叶青藤叶配方颗粒替代饮片汤剂提供了临床应用实验基础.

目的 对三叶青藤提取物经皮给药抗炎镇痛的作用进行研究.方法 采取二甲苯致小鼠耳肿胀、弗氏完全佐剂诱导大鼠佐剂性关节炎来研究三叶青藤提取物不同剂量组经皮给药的抗炎效果;采取小鼠扭体反应,热板致痛法,尾巴压痛法和大鼠光热甩尾法观察三叶青藤提取物各剂量组的镇痛作用.结果 三叶青藤提取物经皮给药在二甲苯引起的小鼠耳廓肿胀和大鼠佐剂性关节炎中显现出有抗炎作用,并且能明显减轻小鼠醋酸和热板致痛、大鼠鼠尾光热和压痛作用.结论 三叶青藤提取物经皮给药具有明显的抗炎镇痛效果.

目的 基于特征图谱探究三叶青藤叶配方颗粒与饮片汤剂间的相关性和等量性,评价二者的抗炎药理等效性.方法 建立三叶青藤叶饮片汤剂、中间体及配方颗粒的HPLC特征图谱共有模式;基于特征图谱与主要效应组分含量,建立等效比数学模型,计算迁移率,综合分析比较配方颗粒与饮片汤剂间的共有特征组分群的相似性及其含量的等量关联性.采用大鼠棉球肉芽肿增生炎症模型的抗炎抑制作用的药效实验,考察三叶青藤叶配方颗粒与饮片汤剂的等同药效相关性.结果 基于HPLC特征图谱共有模式,辨识归属特征共有峰10个,汤剂与配方颗粒的相似度＞0.900;由饮片煎煮对照汤剂各组分平均迁移率仅14.97％～23.89％,由饮片经优化工艺制得配方颗粒各组分平均迁移率为54.61％～92.30％.3批次配方颗粒与饮片平均等量等效比为3.72,以平均值的80％计,配方颗粒与饮片的等效比是2.98倍,提示1 g三叶青藤叶配方颗粒相当于饮片3 g.与模型组相比,配方颗粒与饮片汤剂均能显著减少大鼠肉芽肿的质量(P＜0.05),对大鼠棉球肉芽肿炎症组织增生的抑制率,低、高剂量组的配方颗粒分别为15.70％,37.27％,饮片汤剂分别为14.59％,35.73％,二者均具有抗炎作用且呈剂量依赖性,二者对肉芽肿炎症抑制率在统计学上无显著性差异,提示配方颗粒与饮片汤剂(1:3)之间具有等同的药效相关性.结论 三叶青藤叶配方颗粒与饮片汤剂的共有药效组分群相似,配方颗粒与饮片的量效关联性为1∶3,以此量效比例用药,二者具有等同的药效相关性.