目的:观察不同三磷酸腺苷结合盒转运体B1(ATP-binding cassette subfamily B member 1，ABCB1) G2677T基因型急性脑梗死患者应用阿托伐他汀的降脂疗效，为急性脑梗死患者个体化应用阿托伐他汀提供临床研究证据。方法:自2021年3—12月连续纳入许昌市中心医院神经内科收治的急性脑梗死患者131例，采用荧光染色原位杂交技术检测患者ABCB1 G2677T(rs2032582)基因多态性，并根据检测结果将患者分为GG、GT和TT共3组。3组患者均给予阿托伐他汀(20 mg/d)降脂治疗，记录治疗前及治疗2个月后3组患者血清高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)水平并分析其变化，记录3组患者药物不良反应发生情况。以血清LDL-C水平<1.8 mmol/L为降脂治疗有效，二元Logistic回归分析探索阿托伐他汀降脂疗效的影响因素。统计软件为SPSS 25.0。结果:GG、GT和TT 3组分别有50例(38.17%)、49例(37.40%)和32例(24.43%)患者。治疗后GG、GT、TT 3组患者血清TC水平分别为(3.47±0.70) mmol/L、(3.59±1.09) mmol/L和(3.48±1.02) mmol/L，低于治疗前的(4.27±0.99) mmol/L、(4.02±0.98) mmol/L和(4.03±1.31) mmol/L，均差异有统计学意义( t＝7.652，3.092，5.593，均 P<0.01)。治疗后GG、GT、TT 3组患者血清LDL-C水平分别为(1.89±0.53) mmol/L、(2.07±0.92) mmol/L和(1.96±0.79) mmol/L，低于治疗前的(2.87±0.92) mmol/L、(2.56±0.89)mmol/L和(2.55±1.11) mmol/L，均差异有统计学意义( t＝9.896，4.055，5.980，均 P<0.001)。治疗前后GG组血清LDL-C水平差值为(－0.97±0.69)mmol/L，GT组和TT组分别为(－0.50±0.86)mmol/L和(－0.59±0.56)mmol/L，3组治疗前后血清LDL-C水平差值之间差异有统计学意义( F＝5.614， P＝0.005)。3组患者治疗前后TC、TG、HDL-C差值差异无统计学意义( F＝2.783，0.490，1.677，均 P>0.05)。二元Logistic回归分析显示，ABCB1 G2677T基因类型和熬夜是阿托伐他汀降脂治疗的独立影响因素，其中ABCB1 G2677T基因GT型患者降脂有效的概率为GG型患者的27.9%( OR＝0.279，95% CI：0.110~0.709， P＝0.007)，TT型患者降脂有效的概率是GG型患者的33.8%( OR＝0.338，95% CI：0.121~0.943， P＝0.038)；有熬夜习惯的患者降脂有效的概率为不熬夜患者的26.4%( OR＝0.264，95% CI：0.118~0.591， P＝0.001)。3组药物不良反应总发生率差异无统计学意义( χ2＝0.868， P＝0.648)。 结论:ABCB1 G2677T基因GG型急性脑梗死患者应用阿托伐他汀降脂疗效优于GT型和TT型。

目的:探究同时伴有低密度脂蛋白受体衔接蛋白1（LDLRAP1）及胆固醇转运蛋白三磷酸腺苷结合盒转运体G8（ABCG8）基因异常的家族性高胆固醇血症（FH）一家系的临床及分子生物学特征。方法:2020年9月于上海交通大学医学院附属瑞金医院收治1例FH患者，采集该家系成员外周静脉血样本，检测血清总胆固醇（TC）、甘油三酯（TG）、低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）和高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）；用高效液相色谱法检测血清豆固醇和谷固醇含量。二代基因测序检测先证者及家系成员基因变异情况。采用Pymol软件对基因变异位点进行致病性分析，并使用Uniprot Modelling软件行蛋白结构建模。结果:先证者表现为贫血合并多部位黄色瘤、早发急性冠状动脉综合征。冠状动脉造影示冠状动脉三支严重病变；腹部超声示脾肿大；血涂片示异型红细胞、大血小板散在可见；血清TC、LDL-C、豆固醇和谷固醇浓度均升高［分别为8.54 mmol/L（正常值2.3~5.7 mmol/L）、4.84 mmol/L（正常值1.3~4.3 mmol/L）、44 μmol/L（正常值1.0~10 μmol/L）、28 μmol/L（正常值1.0~15 μmol/L）］。基因测序示：LDLRAP1：NM_015627.2：exon 4 c.415 C>T（p.Q139X），该纯合突变形成的蛋白截断体丢失多个稳定蛋白结构区域，不具备正常功能。同时，先证者发现ABCG8基因变异：exon13 c.1895T>C（p.V632A），exon8 c.1199C>A（p.T400K）。2例家系成员HDL-C增高（Ⅱ5：2.33 mmol/L，Ⅱ6：2.96 mmol/L）；3例带ABCG8基因变异的成员豆固醇（Ⅱ8：23 μmol/L，Ⅱ7：24 μmol/L，Ⅰ2：18 μmol/L）、谷固醇（Ⅱ8：41 μmol/L，Ⅱ7：33 μmol/L，Ⅰ2：45 μmol/L）轻度增高。结论:同时伴有LDLRAP1及ABCG8基因异常的FH患者，可出现植物固醇浓度异常，其临床表现更加复杂，应综合考虑家族史及LDL-C、植物固醇水平及基因检测结果。

目的:对1个Stargardt病家系进行临床特征与遗传学分析，并探讨三磷酸腺苷结合盒家族亚科A成员4（ABCA4）基因突变在Stargardt病中的致病性。方法:先证者因视力下降于2021年5月就诊于济南市第二人民医院，对先证者及家系成员进行详细的眼科检查，根据Stargardt病临床诊断标准评估确诊先证者为Stargardt病。提取先证者及家系其他成员基因组DNA，对先证者DNA进行全外显子测序寻找致病的突变基因。通过PolyPhen-2、SIFT、MutationTaster等网站分析突变位点危害性，利用Sanger测序验证并确认致病突变，进行同源物种保守性分析及三维蛋白结构功能预测以分析其致病性。结果:眼科检查表明先证者双眼视力下降、黄斑萎缩并伴有“牛眼征”，其他家系成员均正常。通过先证者的全外显子测序分析和家系成员及正常对照的Sanger测序验证，ABCA4基因的复合杂合突变（c.215G>A和c.6563T>C）与该家系患者表型共分离。SIFT、PolyPhen-2和MutationTaster网站预测这2个突变均有害，保守性分析和三维蛋白结构模型预测表明该突变导致蛋白的结构发生改变，影响蛋白质功能。结论:ABCA4基因的复合杂合突变（c.215G>A和c.6563T>C）为该Stargardt病家系携带的致病突变。

目的:探讨间充质干细胞(MSC)在非小细胞肺癌(NSCLC)抵抗表皮生长因子受体抑制剂(EGFR-TKI)耐药过程中的作用及其机制。方法:HCC827及PC-9肺腺癌细胞与MSC共培养后给予吉非替尼处理，检测肺癌细胞凋亡变化；应用荧光定量聚合酶链反应(qPCR)检测共培养刺激后MSC细胞表达生长因子及细胞因子的情况；收集培养癌旁和远端正常肺组织来源MSC并行微小核糖核酸(miRNA)表达谱检测，并采用miRNA模拟物及抑制剂进行功能验证；此外，行聚合酶链反应微阵列分析(PCR Array)检测进一步探讨MSC调控NSCLC细胞抵抗吉非替尼的机制。两组数值间比较应用非配对 t检验。 结果:肺癌来源MSC的miR-26a表达组低于正常肺组织来源MSC的miR-26a表达组(53.3%， t＝4.626， P<0.01)，而肺癌来源MSC的miR-146a表达组高于正常肺组织来源MSC的miR-146a表达组(1.83倍， t＝4.895， P<0.01)。应用Transwell体系共培养肺癌细胞和MSC 48 h后发现，肺癌细胞(HCC827细胞)来源的miR-26a表达组明显低于MSC来源的miR-26a表达组(45.7%， t＝1.866， P<0.05)；且肺癌细胞(PC-9细胞)来源的miR-26a表达组也明显低于MSC来源的miR-26a表达组(62.0%， t＝1.728， P<0.05)，同时肺癌细胞(HCC827细胞)来源的肝细胞生长因子(HGF)表达组明显高于MSC来源的HGF表达组(3.88倍， t＝2.014， P<0.05);且肺癌细胞(PC-9细胞)来源的HGF表达组也明显高于MSC来源的HGF表达组(5.29倍， t＝2.197， P<0.05)。此外，MSC培养液可促进HCC827细胞可高表达转运蛋白和药物代谢基因三磷酸腺苷结合盒转运蛋白G2(ABCG2)(4.23倍)和细胞色素P450酶2C9(CYP2C9)(2.18倍)。 结论:肺癌来源的MSC通过异常表达miR-26a和miR-146a调控促肿瘤细胞因子增强NSCLC细胞对EGFR-TKI的抗药性。

目的 探究十二味疏肝利胆颗粒(Twelve-Flavor Shugan Lidan Granule,TSLG)降低胆固醇累积预防结石生成的分子机制.方法 基于药理学数据分析获取TSLG的活性成分与靶点;从Genebass数据库获取与胆囊结石疾病相关的基因,通过Cytoscape软件构建TSLG调控网络并进行核心基因鉴定;采用GO与KEGG通路富集分析对TSLG调控网络中的核心基因及肝组织转录组差异基因进行生物功能与通路注释;利用分子对接方法模拟关键生物标志物与TSLG核心成分的对接模式.采用油酸构建胆固醇累积的细胞模型,应用Western blot法、免疫荧光法检测磷酸化腺苷酸活化蛋白激酶(phosphorylated AMP-activated protein kinase,p-AMPK)、肝脏X受体α(liver X receptorsα,LXRα)、ATP结合盒转运蛋白(ATP-binding cassette sub-family G member,ABCG)5、ABCG8、胆固醇调节元件结合蛋白2(sterol regulatory element-binding protein 2,SREBP2)、磷酸化蛋白激酶B(phosphoryla-ted protein kinase B,p-AKT)、磷酸化叉头盒蛋白O1 a(phosphorylated forkhead box O1 a,p-FOXO1 A)的表达水平;Seahorse细胞能量代谢仪检测细胞线粒体耗氧率和细胞外酸化率;RT-qPCR检测三羧酸循环(tricarboxylic acid cycle,TAC)关键酶的mRNA表达水平.结果 网络药理学分析获得了41个TSLG调控疾病的相关靶点.分子生物学实验结果表明,TSLG抑制p-AMPK、LXRα、ABCG5、ABCG8、SREBP2的表达,增强p-AKT、p-FOXO1 A的表达,TSLG抑制糖酵解并增强氧化磷酸化,TSLG抑制TAC循环酶活性,改善肝脏糖脂代谢,从而预防胆固醇结石的生成.结论 TSLG中主要成分可能通过靶向AMPK、AKT及Hippo信号通路调节肝脏代谢,以达到降低胆固醇累积、预防结石生成的作用.

目的:探讨高浓度尿酸盐对肠道细胞HT-29尿酸转运功能的影响，明确高浓度尿酸盐干预下三磷酸腺苷结合盒转运蛋白G2（ABCG2）表达及功能的改变并探讨可能的机制。方法:实验组分别使用2.5、5.0、7.5、10.0、15.0、20.0?mg/dl浓度梯度的尿酸对HT-29细胞进行干预，对照组使用0?mg/dl干预，通过细胞计数试剂盒（CCK8法）检测细胞活性，流式细胞术检测ABCG2转运功能，Western blot法和实时荧光定量聚合酶链反应（RT-qPCR）分别检测β-catenin/ABCG2蛋白及mRNA表达水平，免疫共沉淀（Co-IP）检测ABCG2与β-catenin的结合水平，激光共聚焦显微镜观察细胞ABCG2及β-catenin的蛋白定位。结果:与对照组相比，2.5、5.0?mg/dl浓度尿酸处理24 h后，HT-29细胞的增殖活性无明显改变，而10.0、15.0、20.0?mg/dl浓度尿酸处理24 h后，细胞活性受损较为显著，细胞活性分别下降至（80.67±1.59）%、（77.85±2.41）%、（69.49±1.45）%，差异有统计学意义（均P<0.05）。与对照组比较，低浓度尿酸（2.5、5.0?ml/dl）干预下，β-catenin/ABCG2在蛋白水平和mRNA水平表达差异均无统计学意义（均P>0.05），高浓度尿酸（7.5、10.0、15.0、20.0?mg/dl）干预下β-catenin/ABCG2在蛋白水平和mRNA水平表达均显著下降（均P<0.05）。选择对照（0?mg/dl）和高浓度（15.0?mg/dl）尿酸进行进一步相关实验，研究发现高浓度尿酸显著下调了HT-29细胞的转运功能（P<0.05）。免疫共沉淀证实ABCG2和β-catenin蛋白间存在相互结合作用，与对照组相比，高浓度尿酸干预组中ABCG2和β-catenin蛋白结合呈下降趋势但无统计学意义（均P>0.05）。激光共聚焦显微镜下观察显示，与对照组相比，高浓度尿酸组中ABCG2与β-catenin共定位减少，且定位于胞膜的ABCG2数量减少（P<0.05）。结论:高浓度尿酸盐可下调肠道细胞β-catenin/ABCG2的表达及功能，进而影响细胞的转运功能，且高浓度尿酸作用下破坏了β-catenin/ABCG2的共定位。

目的 本研究旨在建立一种实时荧光定量 PCR 方法,用于检测猕猴三磷酸腺苷结合盒转运蛋白 G2(adenosine triphosphate-binding cassette transporter protein G2,ABCG2)mRNA的基因转录水平.方法 使用NCBI上GenBank数据库猕猴(Macaca mulatta)的 ABCG2 核苷酸序列号 NM_001032919.1 及内参 GAPDH 核苷酸序列号NM_001195426.1,借助 Primer premier 5.0 软件设计 PCR 引物.提取猕猴新鲜肾组织的总 RNA,并反转录合成cDNA.接着,利用 PCR引物进行实时荧光定量 PCR扩增,并根据反应体系中荧光的变化情况定量分析 ABCG2 的mRNA相对表达水平.结果 PCR 产物测序结果显示,扩增的 ABCG2 和 GAPDH 核苷酸序列与 NCBI 上猕猴的序列同源性分别为 90.91%和 91.14%.ABCG2 和 GAPDH的扩增效率均达到 80%～120%,实时荧光定量 PCR标准曲线的熔解曲线为单峰,R2 接近 1.结论 本研究建立的检测猕猴 ABCG2 mRNA 实时荧光定量检测方法,为研究高尿酸血症的发病机制以及新药开发奠定基础.

目的:为他汀类药物的个体化治疗提供参考.方法:查阅国内外药物转运体基因多态性与不同种类他汀类药物调脂效果及不良反应的相关文献,就两者的相关性进行归纳和总结.结果与结论:药物转运体同一编码基因突变对不同种类他汀类药物调脂效果及不良反应的影响程度各不相同.其中,有机阴离子转运多肽1B1 (SLCO1B1)521T＞C多态性与他汀类药物调脂效果的相关性研究尚未取得一致性结论;但与其他他汀类药物相比,SLCO1B1 521T＞C多态性与辛伐他汀致肌肉毒性的相关性更强.腺苷三磷酸结合盒亚家族B成员1 (ABCB1) 1236C＞T、2677G＞T/A和3435C＞T多态性与他汀类药物调脂效果及不良反应是否相关仍存有争议,而腺苷三磷酸结合盒亚家族C成员2 (ABCC2)基因多态性与他汀类药物调脂作用及不良反应的相关性研究则较少,均有待进一步研究证实.腺苷三磷酸结合盒亚家族G成员2 (ABCG2)421C＞A多态性可能与舒瑞伐他汀降低低密度脂蛋白胆固醇的作用有关,而其多态性与不良反应的相关性研究则较少.临床在制订个体化治疗方案时,除关注遗传因素外,还应综合考虑患者的性别、年龄、病史等非遗传因素,以确保治疗的有效性与安全性.

目的 观察食管鳞状细胞癌(ESCC)组织中三磷酸腺苷结合盒转运蛋白G2(ABCG2)及p16表达变化,并探讨其临床意义.方法 选取136例份ESCC组织及37例份正常食管黏膜组织(距癌组织＞5 cm),用免疫组化SP染色法检测两种组织中ABCG2及p16蛋白表达,用qRT-PCR法检测两种组织中ABCG2与p16 mRNA表达.分析ABCG2及p16蛋白阳性表达与患者临床病理参数的关系,用Spearman等级相关分析ABCG2、p16表达的相关性.结果 与正常食管黏膜组织比较,ESCC组织中ABCG2蛋白阳性表达率高(P＜0.05)、p16蛋白阳性表达率低(P＜0.05).与正常食管黏膜组织比较,ESCC组织中ABCG2 mRNA相对表达量高(P＜0.05)、p16 mRNA相对表达量低(P＜0.05).ABCG2及p16蛋白阳性表达与食管鳞癌肿瘤浸润深度、TNM分期及淋巴结转移有关(P均＜0.05),与患者性别、年龄及肿瘤组织学分级无关(P均＞0.05).ESCC组织中ABCG2与p16蛋白表达呈负相关(r=-0.438,P＜0.05).结论 ABCG2在ESCC组织中呈高表达,p16呈低表达;二者可能协同作用参与ESCC的发生发展.

目的 探讨靶向宫颈癌HeLa细胞内三磷酸腺苷结合盒转运体( ABC) G2基因的siRNA对HeLa细胞的化疗增敏作用.方法 构建靶向ABCG2的RNA干扰重组慢病毒Ad-ABCG2-siRNA,感染宫颈癌耐药细胞耐丝裂霉素细胞HeLa/MMC后,筛选稳定表达细胞建立稳定表达细胞系.采用qRT-PCR、Western印迹分别从mRNA和蛋白水平检测细胞内ABCG2基因的表达,验证ABCG2的表达被成功下调,然后用MTT法测定HeLa/MMC细胞对化疗药物敏感性的变化;采用流式细胞分析仪检测细胞凋亡情况.结果 成功构建靶向ABCG2的RNA干扰重组慢病毒Ad-ABCG2-siRNA,转染HeLa/MMC细胞后,经qRT-PCR、Western印迹检测,ABCG2的表达被成功下调;MTT法测定显示,经不同浓度的丝裂霉素处理后,ABCG2表达下调的HeLa/MMC细胞组(实验组)细胞抑制率明显高于未经干扰的HeLa/MMC细胞组(对照组),差异具有统计学意义(P<0. 05),药物敏感性提高3. 42倍.流式细胞术分析结果显示,实验组HeLa/MMC细胞的总凋亡率〔(35. 6±1. 1)%〕明显高于对照组〔(15. 3±2. 3)%〕,差异有统计学意义(P<0. 05).结论 下调ABCG2的表达对宫颈癌细胞具有化疗增敏作用,可促进耐药细胞HeLa/MMC的凋亡.