目的:研究3个最佳酸水解条件对茯苓佐剂多糖PCP-Ⅱ进行水解,以期获得3个不同相对分子质量的多糖片段产物[重均分子量(Mw)接近1.0 ×104,5.0 × 103和2.5 × 103],并进行理化性质测定.方法:首先进行不同三氟乙酸(TFA)浓度、不同水解温度和不同水解时间的单因素考察.采用L9(34)正交设计进行三因素和三水平的实验和综合分析,最终确定3个最合适的酸水解条件.采用Sephadex凝胶柱色谱对水解产物进行分离和纯化,获得3个相对分子质量均一多糖片段(PCP-Ⅱ-hy-1,PCP-Ⅱ-hy-2和PCP-Ⅱ-hy-3);采用薄层色谱法分析水解产物中的单糖组成变化.采用高效凝胶渗透色谱法得到多糖相对分子质量及相对分子质量分布.采用1-苯基-3-甲基-5-吡唑啉酮(PMP)衍生和毛细管电泳法测定3个多糖片段的单糖组成.结果:3 种酸水解条件(0.25 mol·L-1 TFA,80 ℃,2 h,0.25 mol·L-1 TFA,80℃,3 h 和 0.25 mol·L-1 TFA,80℃,6h)可用于3种目标水解产物的制备;多糖片段PCP-Ⅱ-hy-1的Mw为9.51 × 103,单糖组成摩尔比为岩藻糖∶甘露糖∶半乳糖=1.00∶1.54∶9.05;PCP-Ⅱ-hy-2的Mw为6.39 × 103,单糖组成摩尔比为岩藻糖∶甘露糖∶半乳糖=1.00∶2.04∶14.36;PCP-Ⅱ-hy-3的Mw为1.80×103,单糖组成摩尔比为岩藻糖∶甘露糖∶半乳糖=1.00∶4.55∶27.59.结论:3种酸水解条件适合目标多糖片段的产生.3个多糖水解片段随着相对分子质量的减少甘露糖和半乳糖比例逐渐增大,特别是PCP-Ⅱ-hy-3主要由半乳糖组成,推测PCP-Ⅱ骨架结构可能是半乳聚糖.

文章对酒石酸唑吡坦(1)的合成工艺进行了改进与优化.以乙醛酸(4)为起始原料与乙酸酐反应得到2,2-二乙酰氧基乙酸(5),5经氯化亚砜氯代生成2,2-二乙酰氧基乙酰氯(6),然后6与二甲胺反应制得N,N-二甲基-2,2-二乙酰氧基乙酰胺(7),7经吡啶对甲苯磺酸盐水解得关键侧链中间体N,N-二甲基-2-氧代乙酰胺(8).以对甲基苯乙酮(2)为另一起始物料,经溴素溴代后与2-氨基-5-甲基吡啶经"一锅法"合成6-甲基-2-(4-甲基苯基)咪唑[1,2-a]吡啶(3),然后3与8亲核加成制得a-羟基唑吡坦(9),9经三甲基氯硅烷/碘化钠体系一步还原生成唑吡坦(10),最后10与L-(+)-酒石酸成盐制得1,纯度＞99.89％,总收率52.4％(以2计).改进后的工艺稳定、操作简便、生产成本低,适合工业化生产.

目的 建立人参多糖成分的高效液相色谱(HPLC)指纹图谱,并用于其多糖成分的质量控制.方法 采用快速溶剂萃取法(ASE)提取人参多糖,经三氟乙酸水解和1-苯基-3-甲基-5-吡唑啉酮(PMP)柱前衍生化后,HPLC测定人参多糖的单糖组成.并采用《中药色谱指纹图谱相似度评价系统》建立11批人参多糖中单糖的HPLC指纹图谱并分析其相似度,通过与对照品图谱比对进行共有峰指认.结果 建立了11批人参多糖的指纹图谱,共匹配5个共有峰;人参多糖中单糖组成以葡萄糖为主,其次为半乳糖醛酸、半乳糖、阿拉伯糖和鼠李糖等;含量分别为3.373,1.236,0.558,0.549,0.148 mg/g.通过聚类分析,11批人参多糖共聚为三大类.结论 相似度评价表明,11批人参多糖指纹图谱的相似度较高,均大于0.90,表明人参多糖的质量稳定.方法学考察结果表明,建立的HPLC指纹图谱分析方法重现性好,结果可靠,可用于人参中多糖成分的质量标准评价.

目的:探讨采用HPLC-MSn法快速识别黄连多糖中的单糖组成.方法:黄连药材经过提取、分离、除蛋白、除色素,最终得到黄连多糖,用2 mol/L的三氟乙酸水解黄连多糖,以1-苯基-3-甲基-5-吡唑啉酮(PMP)作单糖衍生化试剂,利用HPLC-MSn识别黄连中单糖的组成,并解析其衍生物的裂解规律.结果:通过分析,得到的黄连多糖中含有甘露糖、核糖、鼠李糖、半乳糖醛酸、葡萄糖、半乳糖、阿拉伯糖/木糖、岩藻糖,其中核糖、岩藻糖为首次在黄连多糖中报道的单糖.结论:HPLC-MSn法对中药多糖组分中的单糖成分进行分析具有重要的指导意义.

目的:探讨灵芝提取物中多糖质量控制方法的建立.方法:3批灵芝提取物通过水提醇沉后,得到灵芝粗多糖.采用三氟乙酸进行全水解,以1-苯基-3-甲基-5-吡唑啉酮 (PMP) 衍生化后,采用HPLC法于250 nm波长处检测单糖组成及含量.采用Shodex HQ 806+804+803凝胶渗透色谱柱串联,示差折光检测器-多角度激光散射 (RI-MALLS) 联用技术测定灵芝多糖重均相对分子质量 (Mw).结果:3批灵芝提取物多糖主要由葡萄糖、半乳糖、甘露糖及葡萄糖醛酸组成,其中葡萄糖含量最高.MALLS测定结果显示,灵芝多糖主要呈现出2个峰,3批次样品峰1的Mw分别为1.2×106、4.6×106、4.1×106,峰2的Mw分别为3.2×104、4.6×104、4.0×104.结论:本文对灵芝提取物中多糖的单糖组成及Mw进行初步研究,为建立灵芝提取物中多糖的质量控制方法提供技术参考.

目的:应用柱前衍生HPLC法建立藏药蔓菁中葡萄糖含量测定及其单糖特征图谱分析方法.方法:采用三氟乙酸 (TFA) 水解蔓菁药材, 水解产物经衍生化试剂1-苯基-3-甲基-5-吡唑啉酮 (PMP) 柱前衍生, HPLC法测定蔓菁药材中葡萄糖含量和特征图谱分析.结果:13批蔓菁药材中葡萄糖的含量为10.32％～21.43％;特征图谱6个共有峰稳定重现.结论:所建立方法简便、快速, 重现性及稳定性良好, 可用于蔓菁药材中葡萄糖的含量测定和特征图谱分析, 为规范蔓菁药材的使用和全面控制蔓菁质量提供了科学依据.

目的:基于代谢组学技术研究不同蒸制次数的熟地黄中糖类成分的变化规律.方法:收集采用传统方法加工的第1蒸至第9蒸熟地黄样品,分别对其水提液进行1-苯基-3-甲基-5-吡唑啉酮衍生及LC-MS测定.采用SIMCA-P 13.0软件进行主成分分析(PCA)和正交偏最小二乘法-判别分析(OPLS-DA),得到差异标记物,通过多级质谱离子碎片及对照品比较对差异标记物进行鉴定.结果:经OPLS-DA共鉴定了6种糖类化合物,分别为甘露三糖、蜜二糖、甘露糖、葡萄糖、半乳糖和阿拉伯糖;其中甘露三糖和蜜二糖逐渐降低,在第9蒸熟地黄中相对峰面积最低,分别为0.60和0.52;阿拉伯糖逐渐升高,在第9蒸熟地黄中相对峰面积达到4.74;甘露糖先升高后降低,其相对峰面积在第5蒸熟地黄中最高,达3.33;而葡萄糖和半乳糖基本上处于稳定状态.PCA结果显示第1蒸至第9蒸熟地黄沿着PC1轴逐渐改变,糖类代谢物发生着显著变化.结论:不同蒸制次数的熟地黄样品中糖类成分差异较大,可为九蒸九晒熟地黄的质量评价提供实验依据.

目的 改进抗真菌药艾沙康唑的合成工艺.方法 R-乳酸甲酯与吗啉发生氨解反应后用3,4-二氢吡喃保护得到(R)-1-(4-吗啉基)-2-羟基-1-丙酮,再与2,5-二氟苯基溴化镁经格氏反应得到(R)-1-(2,5-二氟苯基)-2-[(2-四氢吡喃基)氧基]-1-丙酮,然后与三甲基碘化亚砜、三氮唑反应后脱THP保护基,并成甲磺酸盐得到高纯度的(2R,3R)-2-(2,5-二氟苯基)-1-(1,2,4-三唑基)-2,3-丁二醇甲磺酸盐;然后进一步分子内关环后与三甲基氰硅烷反应得到(2S,3R)-3-(2,5-二氟苯基)-3-羟基-2-甲基-4-(1,2,4-三唑基)丁腈,最后经水解、硫代,再与4-溴乙酰基苄腈环合即得艾沙康唑.结果与结论 工艺优化后目标化合物的总收率为12.5％(以R-乳酸甲酯计),纯度为100％(HPLC面积归一化法),ee值也达到100％,改进后的工艺反应条件温和、后处理简便,有利于工业化生产.

目的:为了指明海洋植物红树次生代谢产物研究方向,丰富来源于桐花树的化合物类型,深入研究了桐花树(Aegiceras cornicnlatnm)的可再生部位胚轴的化学成分.方法:采用多种常压柱层析(正相硅胶、凝胶sephadex LH-20)和高效液相色谱法进行分离纯化桐花树胚轴中化合物,运用现代波谱学方法进行结构解析.结果:从桐花树的可再生部位胚轴中共分离得到14个化合物,分别鉴定为:4-烯丙基-2,6-二甲氧基苯基-葡萄糖苷(1)、3,4-二咖啡奎尼酸(2)、3,4,5-三咖啡奎尼酸(3)、3',4',5,7-四羟基黄酮-3-O-3-D-葡萄糖苷(4)、3,5,7-三羟基-2-(4'-羟苯基)-4-酮(5)、2-(3',4'-二羟苯基)-5,7-二羟基-4-酮(6)、5,7-二羟基-异苯唑呋喃-7-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(7)、5,7-二羟基-2-(4'-羟苯基)-4-酮(8)、2-(3',4'-二羟苯基)-3,5,7-三羟基-4-酮(9)、3,5,8-三羟基-2-(3',4',5'-三苯羟基)-4-酮(10)、2-(2',3'-二羟苯基)-3,5,8-三羟基-4-酮(11)、3,5-二羟基-4-甲基-2-(3',4',5'-三羟基-6'-(羟甲基)-四氢-2H-吡喃-2-基)-苯甲酸(12)、豆甾醇3-O-β-D-葡萄糖苷(13)、4-(4'-羟基-3'-甲氧基苯基)-2-丁酮(14).结论:除化合物9外,其他化合物均为首次在桐花树中分离鉴定得到,研究丰富了桐花树化合物类型,提高了桐花树化合物的数量,为红树次生代谢产物研究指明了新的方向,为桐花树可再生部位胚轴的应用奠定了坚实基础.

目的 研究凤丹内生真菌Fusarium oxysporum的次生代谢产物.方法 运用多种色谱法对菌株F.oxysporum发酵液的醋酸乙酯萃取部位进行分离纯化,采用波谱分析对化合物的结构进行鉴定.结果 从菌株F.oxysporum发酵液的醋酸乙酯萃取部位中共分离得到23个化合物,分别鉴定为(2S)-脯氨酸(1)、(22E,24R)-7,22-二烯-3β,5α,6β-麦角三醇(2)、环-(S-脯氨酸-S-亮氨酸)(3)、环-(L-丙氨酸-L-脯氨酸)(4)、环-(缬氨酸-脯氨酸)(5)、环-(R-脯氨酸-S-苯丙氨酸)(6)、环-(D-顺-4-羟脯氨酸-L-苯丙氨酸)(7)、环-(L-反-4-羟基脯氨酸-L-苯丙氨酸)(8)、环-(谷氨酸-酪氨酸)(9)、环-(L-4-反-羟基脯氨酸-L-亮氨酸)(10)、环-(L-色氨酸-L-脯氨酸)(11)、环-(L-亮氨酸-甘氨酸)(12)、N-(3-(1H-吲哚-3-基)丙基)乙酰胺(13)、吲哚-3-乙酸(14)、2-哌啶酮(15)、2-吡咯烷酮(16)、胸腺嘧啶(17)、(5S)-5-((4-羟基苯基)甲基)-2,4-咪唑烷二酮(18)、(3S,6S)-3-(2-丁基)-6-(1-羟乙基)-2,5-哌嗪二酮(19)、环-(丙氨酸-亮氨酸)(20)、环-(S-脯氨酸-S-苯丙氨酸)(21)、环-(酪氨酸-脯氨酸)(22)、环-(L-苯丙氨酸-L-酪氨酸)(23).结论 除化合物2、6、14外,其余化合物均为首次从该菌株发酵液中分离得到.