目的:建立尿中1-甲氧基-2-丙醇（1-methoxy-2-propanol，1M2P）的顶空固相微萃取-气相色谱测定方法。方法:采用碳分子筛/聚二甲基硅氧烷（CAR/PDMS）涂层固相微萃取头对尿样进行顶空萃取；单因素轮换法对萃取温度、盐析量、萃取时间进行优化；以DB-5（30 m×0.32 mm×0.25 μm）毛细管柱为分离柱，氢火焰离子化检测器（FID）检测，外标法定量。结果:尿中1M2P浓度在0.50~10.0 mg/L线性关系良好，相关系数为0.999 3，方法检出限为0.14 mg/L，定量下限为0.45 mg/L，回收率为85.8%~104.7%，日内精密度为3.25%~6.65%，日间精密度为0.81%~3.96%。结论:该方法灵敏度高，操作简便，适用于职业暴露1M2P人群尿中1M2P的测定。

目的:对昭通彝良天麻的化学成分及其降糖活性进行研究.方法:采用正相硅胶、RP-C18及Sephadex LH-20葡聚糖凝胶柱层析等方法对昭通彝良天麻的丙酮提取物进行化学成分分离纯化,并运用现代波谱技术鉴定其结构.采用L6骨骼肌肌管细胞进行化合物降糖活性研究及对α-葡萄糖苷酶抑制剂的活性测试.结果:从昭通彝良天麻的丙酮提取物中分离纯化得到29个化合物,分别鉴定为:β-谷甾醇(1)、赛比诺啶-A(2)、邻苯二甲酸二戊酯(3)、天麻素(4)、对羟基苯甲醛(5)、4,4'-二羟基二苯基甲烷(6)、对羟基苯甲醇(7)、β-谷甾醇棕榈酸酯(8)、4,4'-二羟基二苄基醚(9)、4-羟苄基甲醚(10)、月桂酸乙酯(11)、三亚油酸甘油酯(12)、ethyl(2E,5S)-5-benzyloxy-2-tetradecenoate(13)、正十六烷(14)、n-tetratriacont-20,23-dienoic acid(15)、L-柠檬酸-1-甲酯(16)、邻苯二甲酸二异辛酯(17)、腺苷(18)、丁香酸(19)、棕榈酸(20)、α-D-呋喃果糖(21)、5-羟甲基糠醛(22)、豆甾醇(23)、n-hexacos-5,8,11-trienoic acid(24)、异芒果苷(25)、胡萝卜苷(26)、β-谷甾醇-3-O-丁 基(27)、methyl-11-methyl-10-pentadecenoate(28)、巴利森苷E(29).结论:其中,化合物3、8、11～13、15、17、21、24、27、28为首次从该植物中分离得到.化合物1、3～8、10～13、17、18、21表现出促进L6肌管细胞降糖活性,化合物11～15、20表现出对α-葡萄糖苷酶的抑制活性.

[背景]丙二醇单甲醚(PGME)是一种被广泛使用的有机溶剂,在工作场所中以两种异构体的形式存在,会引起职业人员眼部和上呼吸道刺激等不良影响.但是,我国尚缺乏同时检测PGME两种异构体的标准检测方法.[目的]建立工作场所空气中PGME的两种同分异构体[1-甲氧基-2-丙醇(α-PGME)、2-甲氧基-1-丙醇(β-PGME)]的溶剂解吸-气相色谱法.[方法]用溶剂解吸型活性炭管采集工作场所空气中α-PGME、β-PGME,使用二氯甲烷/甲醇(85∶15)的解吸液解吸后,经具有游离脂肪酸固定相(FFAP)的熔融二氧化硅毛细管色谱柱分离,带氢焰离子化检测器(FID)检测,以峰面积定量,建立工作场所空气中α-PGME、β-PGME的溶剂解吸-气相色谱法,得到标准曲线、检出限、定量下限等指标,以相对标准偏差(RSD)考察精密度,采用测定样品溶液加标回收率来评估本标准方法的准确度.进行解吸效率、采样效率、吸附容量试验,使用加标活性炭管保存试验评价样品稳定性,并进行干扰实验.将所建立的方法应用到现场空气样品检测中.[结果]本法使用二氯甲烷/甲醇(85∶15)作为样品解吸溶液,α-PGME和β-PGME的定量检测范围分别为 0.95～923.0 μg·mL-1 和 0.97～912.0 μg·mL-1,相关系数均为 0.9999,方法检出限分别为 0.28 μg·mL-1 和 0.29 μg·mL-1,方法定量下限分别为 0.95 μg·mL-1 和 0.97 μg·mL-1.在采样体积为1.5 L,解吸液体积为1.0 mL的条件下,最低检出质量浓度(简称浓度)均为0.19 mg·m-3,最低定量浓度分别为 0.63 mg·m-3 和 0.65 mg·m-3.本法α-PGME和β-PGME的批内精密度分别为 2.8%～4.9%和 2.8%～5.1%,批间精密度分别为 4.2%～5.7%和 4.5%～5.9%,加标回收率分别为98.8%～100.3%和 96.4%～102.9%,解吸效率分别为 92.7%～97.3%和 92.2%～98.1%,本法平均采样效率均为 100%,样品在室温(25～30℃)下至少可保存 7 d,在 4℃下至少可保存 15 d.活性炭采样管对α-PGME和β-PGME的吸附容量分别大于 13.9 mg和 2.7 mg(100 mg活性炭吸附剂).工作场所可能共存成分不干扰α-PGME和β-PGME的测定.使用本法测定某汽车制造公司喷涂空间空气,α-PGME和β-PGME的短时间接触浓度为18.69 mg·m-3 和2.19 mg·m-3,时间加权平均浓度为6.03 mg·m-3 和1.08 mg·m-3.[结论]本方法准确度高,精密度好,适用于工作场所空气中PGME的两种同分异构体的现场监测.

研究千里香的化学成分.采用硅胶、ODS、SephadexLH-20、制备液相等多种色谱分离技术进行分离纯化,通过波谱数据分析进行结构鉴定.从千里香70％乙醇提取物中分离得到26个化合物,分别鉴定为千里香脂素(1)、8-去甲基川陈皮素(2)、ficusal(3)、lariciresinol-4'-monomethy ether(4)、(±)-5'-methoxy-4'-O-methyllariciresinol(5)dio-spyrosin(6)、(-)-9'-O-E-feruloyl-lyoniresinol(7)、7-O-methylphellodenol-B(8)、欧芹烯酮酚甲醚(9)、3,4'-二羟基-3',5'-二甲氧基苯丙酮(10)、4'-羟基-5,7-二甲氧基二氢黄酮(11)、5-羟基-6,7,3',4'-四甲氧基二氢黄酮(12)、4'-羟基-5,7,3'-三甲氧基二氢黄酮(13)、5,7,3',4',5'-五甲氧基二氢黄酮(14)、2',4-二羟基-3',4',6'-三甲氧基查尔酮(15)、2',3-二羟基-4,4',6'-三甲氧基查尔酮(16)、楝叶吴萸素B(17)、2'-羟基-3,4,5,4',6'-五甲氧基查尔酮(18)、2'-羟基-3,4,4',6'-四甲氧基查尔酮(19)、5,8-二羟基-6,7,3',4'-四甲氧基黄酮(20)、3'-羟基-5,6,7,8,4',5'-六甲氧基黄酮(21)、5,3',5'-三羟基-7,4'-二甲氧基黄酮(22)、5,7,3'-三羟基-8,4'-二甲氧基黄酮(23)、3'-羟基-5,6,7,4'-四甲氧基黄酮(24)、5,7,3',4',5'-五甲氧基黄酮(25)、5-羟基-6,7,8,3',4'-五甲氧基黄酮(26),其中化合物1、2为新化合物,化合物3～8、10～13、15、16、20～24为首次从九里香属植物中分离得到,化合物17为首次从千里香中分离得到.

目的 在舌鳞癌细胞Tca8113中,探索与细胞增殖密切相关的诱导型一氧化氮合酶(NOS-2)的表达调控机制.方法 采用RNAi技术沉默Tca8113细胞中NOS-2、蛋白激酶C(PKC)-α、PKC-β和PKC-δ的基因;Griess Reagent法检测NOS-2基因沉默后一氧化氮(NO)生成量;CCK8法测定细胞增殖活性;实时定量荧光聚合酶链反应(q-PCR)技术检测各种方法处理后NOS-2、PKC-α、PKC-β和PKC-δ的基因表达;Western blotting技术测定丙二醇甲醚醋酸酯(PMA)作用细胞后的细胞外调节蛋白激酶(ERK)1/2磷酸化程度.结果 利用NOS-2的siRNA处理后, Tca8113细胞的增殖能力明显降低(P<0.01);PKC的活性与NOS-2的基因表达成负相关(P<0.05);PKC亚型PKC-α、PKC-β和PKC-δ共同参与NOS-2的基因调控(P<0.01);丝裂原活化蛋白激酶激酶(MEK)/ERK通路负调控NOS-2的基因表达(P<0.05);PKC通过MEK/ERK通路负调控NOS-2的基因表达(P<0.05).结论 在Tca8113细胞中, PKC通过MEK/ERK通路负调控与细胞增殖相关的NOS-2的基因表达.

目的 探讨一种新型单克隆抗体(FAB)雷珠单抗(Ranibizumab)抑制裸鼠皮下结缔组织血管瘤的疗效及其机制,研究药物使用的最佳配方.方法 血管瘤细胞注射法建立动物实验模型,分别使用无药物治疗、注射0.25、0.50、0.75 mg/cm3浓度的雷珠单抗、1 mg/cm3的平阳霉素、0.75 mg/cm3雷珠单抗+ 10 ng/cm3的类胰岛素生长因子(IGF-1)、0.75 mg/cm3雷珠单抗+30 ng/cm3的丙二醇甲醚醋酸酯(PMA),分为A(基础对照)、B、C、D、E(药物对照)、F(雷珠单抗+IGF-1)、G(雷珠单抗+PMA)组.运用组织细胞学和分子生物学检测手段,验证疗效及机制.结果 各药物治疗2周后,血管瘤体积均有减小[A组:(171.76 ±52.46) mm3,B组:(70.85±8.73)mm3,C组:(69.84±16.33) mm3,D组:(41.83 ±18.65) mm3,E组:(61.52±8.12) mm3,F组:(103.41±19.33) mm3和G组:(101.19 ±57.51) mm3,P=0.001].不同药物治疗组裸鼠血管瘤组织中CD34和Ki-67的蛋白表达明显下降.除了雷珠单抗合用IGF-1治疗组外,其余组各组裸鼠肺组织受到不同程度的损伤,但各雷珠单抗治疗组对于肺组织的损伤要轻于平阳霉素.雷珠单抗明确抑制裸鼠肿瘤组织中血管内皮生长因子A (VEGF-A)的蛋白表达,导致组织细胞凋亡.在接受雷珠单抗治疗的同时,采用IGF-1干预下,能维持胞内磷脂酰肌醇激酶/蛋白激酶B(PI3K/Akt)信号通路,保护肺组织细胞.结论 雷珠单抗通过抑制肿瘤组织中VEGF-A的蛋白表达,抑制PI3 K/Akt等信号通路,导致血管瘤组织细胞的凋亡,而合用IGF-1能抑制雷珠单抗对肺组织的损伤.

目的 研究拟草果Amomum paratsao-ko的化学成分.方法 采用硅胶柱色谱、凝胶柱色谱、重结晶、高效制备液相色谱法等现代分离方法和技术对其化学成分进行分离纯化,并根据理化性质和波谱数据进行结构鉴定.结果 分离得到14个化合物,经鉴定分别为2(E)-2-癸烯-1,10-二乙酸酯(1)、2(E)-2-癸烯-1,10-二醇(2)、β-谷甾醇(3)、3,5-二羟基-7,4'-二甲氧基黄酮(4)、鼠李柠檬素(5)、山柰酚(6)、鼠李素(7)、山柰酚-3,7,4'-O-三甲醚(8)、商陆素(9)、槲皮素(10)、熊竹素(11)、阿魏酸辛酯(12)、E-癸基-3-(4-羟基-3-甲氧苯基)-丙烯酸酯(13)、反式对羟基桂皮酸(14).结论 化合物1为新化合物,命名为拟草果酯,化合物2～14均为首次从该植物中分离得到.

目的:基于白及提取物具有广泛的生物活性,本研究对白及95％乙醇提取物乙酸乙酯部位的化学成分进行研究,为白及的质量控制和开发利用提供一定的理论依据.方法:采用反复硅胶LH-20羟丙基葡聚糖(Sephadex LH-20)凝胶、制备薄层色谱、制备高效液相色谱等多种方法对白及的乙酸乙酯部位进行分离纯化,应用TLC,HPLC跟踪监测,分离得到纯度较高的单体化合物.根据理化性质及质谱(MS),1H-NMR和”C-NMR等波谱数据鉴定化合物结构.结果:从白及的乙酸乙酯萃取部位分离得到12个化合物,分别鉴定为大黄素甲醚(1),红灰青素(2),8-C-对羟基苄基山柰酚(3),N-苯甲酰-L-苯丙氨酸-N-苯甲酰-L-苯丙氨酸酯(4),松脂醇(5),(E)-4'''-羟基苯乙基3-(4′-羟基苯基)丙烯酸酯(6),对甲氧基二氢肉桂酸(7),对羟基苯甲醛(8),对羟基苯甲酸(9),香草酸(10),邻苯二甲酸二丁酯(11),棕榈酸乙酯(12).化合物类型包括蒽醌类(1和2),黄酮类(3),氨基酸衍生物(4),木脂素(5),苯丙素(6和7),以及其他小分子芳香族化合物(8～11)和脂肪族(12).结论:化合物2,3,4,6,7,11和12均为首次从白及植物中分离得到.

目的 通过对比分析结核病患者与健康个体外周血中恒定自然杀伤T细胞(invariant nature killer T cells,iNKT)的比例、表型以及功能,认识iNKT细胞在结核病患者体内的功能状态,为探讨基于iNKT细胞的干预措施在结核病防治中的应用奠定基础.方法 收集武汉市新洲区人民医院收治的21例结核病患者及14例健康体检者外周血,分离外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cell,PBMC).对PBMC进行细胞表面染色,用流式细胞仪分别测定iNKT细胞的比例和表面分子CD69、CD62L、CD122以及CD161的表达;用丙二醇甲醚醋酸酯/离子霉素(phorbol-12-myristate-13-acetate/Ionomycin,PMA/ION)刺激PBMC,通过胞内细胞因子染色,测定iNKT细胞潜在的合成分泌IFN-γ和IL-4的能力;并用α-半乳糖神经酰胺(α-Galactosylceramide,α-GalCer)刺激培养1周,测定结核病患者iNKT细胞的反应性及扩增效率.结果 相对于健康个体,结核病患者外周血中的iNKT细胞百分比明显降低;结核病患者iNKT细胞的CD69表达水平显著高于健康个体,而其CD62L、CD122及CD161的表达量与健康个体无明显差异;结核病患者和健康个体的iNKT细胞在PMA/ION刺激后分泌IFN-γ和IL-4的能力无明显差异;然而结核病患者的iNKT细胞对α-GalCer的反应能力明显减弱,表现为被α-GalCer刺激后的扩增能力低于健康个体.结论 结核病患者体内iNKT细胞的数量与功能异常,提示恢复iNKT细胞数量与功能是促进iNKT细胞抗结核效应的关键因素.

目的:研究贵州苗药吉祥草(Reineckia camea)中的化学成分,以期能为吉祥草药理活性的阐明以及吉祥草药材的进一步开发利用提供科学依据.方法:取吉祥草全草药材20 kg,用80％乙醇加热回流提取3次,提取时间分别为2,2,1h,将3次提取液合并,滤过,减压浓缩成浸膏.浸膏加适量的蒸馏水溶解后,依次用石油醚、乙酸乙酯、水饱和的正丁醇多次萃取,各部分萃取液经减压浓缩,干燥,得石油醚部位浸膏28 g,乙酸乙酯部位浸膏305 g,正丁醇部位浸膏812 g.对乙酸乙酯和正丁醇部位浸膏,利用硅胶柱,大孔树脂,小孔树脂(MCI)柱,0DS中压柱,LH-20型羟丙基葡聚糖凝胶(Sephadex LH-20)及Pre-HPLC等分离手段进行分离纯化,并通过理化性质,HR-ESI-MS,核磁波谱及文献数据进行结构鉴定.结果:从吉祥草的乙酸乙酯和正丁醇部位分离得到13个化合物,分别为2α,3β-dihydroxy-5α-pregn-16-en-20-one(1),(25R)-26-hydroxycholesterol(2),薯蓣皂苷元(3),β-谷甾醇(4),β-胡萝卜苷(5),异鼠李素-3-O-β-D-芸香糖苷(6),杜鹃素(7),木犀草素(8),1,2,8-trihdroxy-5,6-dimethoxyxanthone(9),獐牙菜苦苷(10),二(2-乙基己基)邻苯二甲酸酯(11),交链孢酚单甲醚(12),N-反式阿魏酸酪酰胺(13).结论:化合物1,2,6～10,12,13均为首次从吉祥草中分离得到.