患者，男，44岁，因"双眼视力下降5~6 d"于2021年4月27日在天津医科大学眼科医院就诊。既往无眼部疾病史，否认糖尿病、高血压以及外伤史、吸烟史。浅表性胃炎病史3~4年；饮酒史3~4年。近2个月饮350~400 g白酒/d（根据患者提供饮用白酒的信息计算196~224 g乙醇/d，甲醇含量在国家卫生标准范围内），停酒后手抖。眼部检查：裸眼视力（UCVA）：右眼0.01，左眼0.02；最佳矫正视力（BCVA）：右眼0.02，左眼0.1；眼压：右眼16.2 mmHg（1 mmHg=0.133 kPa），左眼17.5 mmHg。双眼结膜、角膜、前房、晶状体未见异常；瞳孔直径：右眼3.5 mm，左眼3.5 mm，直接、间接对光反射正常。双眼眼底视盘界清色可，视网膜血管走行自然，黄斑未见异常。超广角眼底照相显示：双眼视网膜平伏，未见异常。眼底自发荧光示：双眼黄斑区小片低自发荧光（见图1）。光学相干断层扫描（OCT）示：双眼鼻侧视网膜神经纤维层（Retinal nerve fiber layer, RNFL）略薄，双眼颞下RNFL略增厚（见图2）。光学相干断层扫描血管成像（Optical coherence tomography angiography, OCTA）示：视网膜浅层及深层血流密度未见异常。视觉诱发电位（Visual evoked potential, VEP）示：双眼P100潜伏期延长，振幅正常（见图3）。血常规、生化、电解质检查示：红细胞3.60×10 12/L，血红蛋白浓度129 g/L，平均红细胞血红蛋白含量35.8 pg，平均红细胞血红蛋白浓度358 g/L；谷丙转氨酶235 U/L，谷草转氨酶295 U/L，r-谷氨酰转肽酶217 U/L，总胆红素33.00 μmol/L，直接胆红素14.80 μmol/L；血钾3.43 mmol/L。免疫常规示：梅毒、HIV、乙肝、丙肝抗体均为阴性。头颅MRI（外院）示：脑实质MRI平扫未见异常，右侧中下鼻甲肥大。诊断：双眼急性乙醇中毒性视神经病变。嘱患者戒酒，予以营养神经改善微循环治疗：口服甲钴胺片0.5 mg/次，每日3次，维生素B1片10 mg/次，每日3次，氯化钾缓释片0.1 mg/次，每日2次，银杏叶提取物片40 mg/次，每日3次；双眼点七叶洋地黄双苷滴眼液每日4次，溴酚酸钠滴眼液每日2次。患者遵医嘱用药20 d后复查视力，BCVA：右眼0.8，左眼0.9。眼底视盘界清色可，黄斑中心凹光反射可见。嘱继续戒酒，改善营养治疗，半年后复查。

丙氨酰-谷氨酰胺双肽是肠外营养的重要组分，进入体内可分解为丙氨酸和谷氨酰胺，具有维护肠屏障、改善免疫、促进蛋白质合成、调控炎性介质的产生和释放等功能。大量临床证据显示，其有较好的有效性和安全性，合理应用可减少术后并发症、缩短住院时间、节省医疗费用。临床实践中发现，丙氨酰-谷氨酰胺双肽在适用人群、使用剂量等多方面国内外尚存在不同意见。中华医学会肠外肠内营养学分会组织国内相关学科专家，遵循最新指南和共识编写国际标准，形成该专家共识，以期达到“规范应用、患者收益”的目标。

目的 探讨 miR-137 通过靶向髓系白血病 1 蛋白(MCL1)和谷氨酰胺转运蛋白溶质载体家族 A1 成员(SLC1A)5 调节肺癌细胞铁死亡的机制.方法 非小细胞肺癌(NSCLC)细胞系A549 从美国典型培养物保藏中心获得.培养基均补充有 10%胎牛血清(FBS),在 37℃的含 5%CO2 的潮湿空气中孵育.培养细胞以进行miR-137 载体转染,直至细胞融合度达到 70%～80%.将培养细胞分为对照组、miR-137 转染组和miR-137 沉默组.通过实时定量聚合酶链反应(RT-qPCR)分析细胞MCL1 和SLC1A5、谷胱甘肽过氧化物酶(GPX)4 mRNA表达.通过双重荧光素酶报告基因测定miR-137 与MCL1 和SLC1A的靶向作用.通过铁测定试剂盒测量每个细胞系中的Fe2+浓度.通过线粒体超氧化物(MitoSOX)指示剂测量了细胞中MitoSOX的产生.通过相应试剂盒检测活性氧(ROS)、还原型谷胱甘肽(GSH)和丙二醛(MDA)水平.通过流式细胞仪检测细胞凋亡.通过Transwell法测定miR-137 对细胞迁移、侵袭的影响.结果 miR-137 沉默组较miR-137 转染组和对照组MCL1、GPX4 和SLC1A5 mRNA表达显著升高(P<0.05),miR-137 转染组较对照组MCL1、SLC1A5 和GPX4 mRNA表达显著降低(P<0.05).与对照组相比,miR-137 转染组显著降低了用Wt-SLC1A5 和Wt-MCL1 载体共转染的NSCLC细胞中的荧光素酶活性(P<0.05),而Mut-SLC1A5 和Mut-MCL1 模拟共转染荧光素酶活性酶无显著变化(P>0.05).miR-137 沉默组较miR-137转染组和对照组Fe2+浓度、MitoSOX浓度显著降低,线粒体相对膜电位显著升高(P<0.05),miR-137 转染组较对照组Fe2+浓度、MitoSOX浓度显著升高,线粒体相对膜电位显著降低(P<0.05).miR-137 沉默组较miR-137 转染组和对照组ROS和MDA浓度显著降低,GSH浓度显著升高(P<0.05),miR-137 转染组较对照组ROS和MDA浓度显著升高,GSH浓度显著降低(P<0.05).24、48 和 72 h时,miR-137 转染组较miR-137 沉默组和对照组细胞凋亡率显著升高(P<0.05),72 h时miR-137 沉默组较对照组细胞凋亡率显著降低(P<0.05).miR-137 沉默组较 miR-137 转染组和对照组细胞迁移、侵袭数量显著增多(P<0.05),miR-137 转染组较对照组细胞迁移、侵袭数量显著减少(P<0.05).结论 miR-137 可以靶向调控SLC1A5 和MCL1,诱导肺癌细胞铁死亡,从而促进细胞凋亡.

目的 利用蛋白质组学方法,对比经姜黄素处理和未经姜黄素处理的人结肠癌耐药细胞HCT-8/VCR之间差异表达的蛋白,分析与姜黄素逆转结肠癌耐药相关的蛋白.方法 取结肠癌耐药细胞HCT-8/VCR,分为观察组和对照组,观察组加入终浓度为25μmol/L的姜黄素作用于人结肠癌耐药细胞HCT-8/VCR 24 h,对照组加入等体积生理盐水.以固相pH梯度等电聚焦为第一向,垂直平板十二烷基磺酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳为第二向(2-DE),分离两组细胞总蛋白;通过凝胶银染显色,扫描仪GS-800采集凝胶图像,图像分析软件PDQuest8.0分析电泳图谱,寻找有意义的差异蛋白点,运用MALDI-TOF-MS系统对选取的蛋白点筛选出差异蛋白并进行质谱鉴定.结果 获得了背景清晰、分辨率高、重复性好的HCT-8/VCR细胞2-DE图谱.鉴定出可能与结肠癌多药耐药密切相关的10种蛋白,其中在对照组高表达的有7种,分别是谷胱甘肽S转移酶P1(GSTP1)、重组人FK506结合蛋白4(FKBP4)、X线修复交叉互补基因5(XRCC5)、肿瘤蛋白翻译调节因子1(TPT1)、热休克蛋白8(HSPA8)、超氧化物歧化酶1(SOD1)、前列腺特异性膜抗原剪接变体(PSMA5);在观察组中高表达的有3种,分别是肽基脯氨酰顺反异构酶(PPIB)、鸟氨酸转氨酶(OAT)、核内不均一核糖核蛋白H1(HNRNPH1).结论 姜黄素干预HCT-8/VCR后出现10种差异性表达的蛋白,蛋白功能涉及信号传导、肿瘤细胞的分裂、多药耐药以及抗氧化、凋亡和糖酵解等,可能与姜黄素逆转HCT-8/VCR细胞对化疗药物的耐药性有关.

目的 观察丙氨酰谷氨酰胺注射液对患者营养代谢、免疫功能及临床结局的影响.方法 本文采用随机 (1:1:1) 、平行对照试验, 将需要肠外补充营养的外科重症患者 (≥18岁) 按丙氨酰谷氨酰胺注射液剂量分为高剂量组、低剂量组和对照组进行疗效研究.结果 第7日 (D7) 丙氨酰谷氨酰胺注射液高、低剂量组前白蛋白及转铁蛋白水平明显优于对照组 (P <0.05), 差异有统计学意义;治疗组感染性并发症、ICU住院时间及呼吸机使用时间均低于对照组 (P <0.05), 差异有统计学意义;与低剂量组比较, 高剂量组差异无统计学意义 (P> 0.05) ;与对照组比较, 高剂量组死亡率低于对照组, 差异有统计学意义 (P <0.05) ;低剂量组死亡率低于对照组, 但差异无统计学意义 (P> 0.05) ;3组间非感染性并发症差别无统计学意义 (P> 0.05) .结论 肠外营养中添加丙氨酰谷氨酰胺注射液有助于降低外科重症患者感染性并发症和ICU住院时间, 添加高剂量丙氨酰谷氨酰胺双肽制剂可能有助于降低患者的死亡率;有助于增加外科重症患者支链氨基酸含量, 改善蛋白质代谢, 提高血浆蛋白水平, 添加高剂量可能效果更佳;有助于降低外科重症患者炎症反应, 提高机体细胞免疫水平.

目的:考察双氢青蒿素(DHA)对人肝癌细胞Huh7、BEL-7402中氨基酸类代谢产物的影响,为阐明DHA参与肝癌细胞代谢的调控机制提供理论基础.方法:采用CCK-8法,测定不同浓度DHA(12.5、25、50、100μmol/L)作用24、48、72 h后对两种细胞活性的影响.将两种细胞分别分为对照组和给药组(DHA,25μmol/L),加入不含药或含药培养基后培养24 h,均平行操作3份.对各组细胞样品进行衍生化处理后,采用气相色谱联用质谱(GC-MS)法检测细胞中氨基酸代谢物含量变化,结合SIMCA-P软件分析和化合物谱库的比对,筛选出两种细胞中的差异代谢物;采用Metaboanalyst 4.0软件对差异代谢物进行通路富集分析.结果:与对照组比较,给药组Huh7细胞或BEL-7402细胞中谷氨酰胺、谷胱甘肽、苯丙氨酸、富马酸、牛磺酸等含量均呈下降趋势.上述两种细胞中分别筛选获得28、29个差异代谢物,两者的共同差异代谢物有10个,包括谷氨酰胺、谷胱甘肽、牛磺酸、富马酸、苯丙氨酸等;两者的差异代谢物分别富集到8、6条通路上,其共同富集通路为氨基酸-tRNA生物合成、天冬氨酸-丙氨酸-谷氨酸代谢、氮代谢、苯丙氨酸代谢、戊糖磷酸途径.结论:DHA能明显降低Huh7细胞和BEL-7402细胞的活性,并能显著降低细胞中谷氨酰胺、谷氨酸、谷胱甘肽、苯丙氨酸等的含量;其可能通过影响天冬氨酸-丙氨酸-谷氨酸代谢通路等机制来调控两种细胞的生长.

为探讨还原型谷胱甘肽(GSH)参与低温(10℃/6℃)胁迫下一氧化氮(NO)对黄瓜幼苗叶片光合及荧光作用的调节作用,该研究以‘津研4号’黄瓜幼苗为试材,于四叶一心时置光周期14 h/10 h、昼夜温度25℃/20℃光照培养箱内,叶面预处理分别为:双蒸水(对照)、GSH合成酶抑制剂(BSO,丁硫氨酸亚砜胺)、NADPH合成酶抑制剂(6-AN,6-氨基烟酰胺),8h后再喷施NO供体亚硝基铁氰化钠(SNP),于第1次喷施药剂24 h后昼夜温度降至10℃/6℃,低温胁迫24 h后测定叶片细胞膜透性、气体交换参数、叶绿素荧光等各项指标.结果 显示:(1)与CK相比,SNP处理显著提高了黄瓜幼苗叶片相对含水量、叶绿素含量、净光合速率(Pn)、蒸腾速率(Tr)、气孔导度(G)、最大光化学量子产量(Fv/Fm)、实际光化学效率(ΦPSⅡ)、非光化学猝灭系数(NPQ)、光化学猝灭系数(qP)、表观光合电子传递系数(ETR)及NO含量,显著降低叶片胞间CO2浓度(G)、电解质渗漏率、丙二醛(MDA)含量、非调节性能量耗散量子产量YNo.(2)SNP处理可保持较高的荧光产额,使快速叶绿素荧光诱导曲线JIP相逐渐升高,而BSO+SNP、6-AN+SNP处理显著降低了SNP的作用效果;SNP处理黄瓜幼苗叶片PSⅡ最大光化学效率(φPo)、PSⅡ反应中心吸收光能用于电子传递的量子产额(φEo)、捕获激子将电子传递到电子传递链QA-下游其他电子受体的概率(φo)、与PSⅡ反应中心受体侧性能有关的荧光参数包括氧气释放复合体(OEC)活性状态(Fo-K)、QA被还原能力(FK-J)、QB(含快还原PQ库)被还原能力(FJ-I)和慢还原PQ库被还原能力(FI-P)以及单位受光面积有活性反应中心数量(RC/CS)等均显著高于CK,而与反应中心关闭有关的荧光参数QA被还原最大速率(Mo)和J相相对可变荧光(VJ)均显著低于CK.(3)BSO+SNP、6-AN+SNP处理也削弱了SNP的这些作用效果.研究表明,在低温胁迫条件下,内源GSH参与了外源NO增强黄瓜幼苗叶片相对含水量、缓解膜脂过氧化、稳定PSⅡ和促进PSⅡ反应中心电子传递链供受体侧的电子传递能力,从而提高黄瓜幼苗耐冷性.

目的 探讨儿童药物性肝损伤(drug-induced liver injury,DILI)临床特点、致病药物以及药物治疗情况,为提高临床合理用药水平提供参考.方法 对2015年1月至2019年5月我院收治的70例药物性肝损伤病例进行回顾性分析.结果 70例儿童DILI,男:女为2.04:1,1月～1岁患儿最多.40％患儿表现为无症状,有临床症状者多表现无特异性,以发热、乏力、纳差为主.临床分型以肝细胞损伤型最多(52.86％),胆汁淤积型次之(28.57％),混合型最少(18.57％).70例中,解热镇痛药引起者21例占30.00％,抗菌药物引起者13例,占24.29％,抗病毒药物12例,占17.14％.联苯双酯、还原型谷胱甘肽、复方二氯醋酸二异丙胺作为治疗用药在临床上使用较多.儿童DILI治疗用药分析显示,二联及以上用药者共66例,占94.29％.存在联苯双酯用法用量错误、复方甘草酸苷粉针及多烯磷脂酰胆碱注射液溶剂不合理、门冬氨酸钾镁药物浓度不当等用药不合理现象.结论 解热镇痛药、抗菌物、抗病毒药物存在较强肝毒性;在儿童DILI治疗中,临床医师宜控制联合用药品种、按说明书用法用量给药,选用适当溶剂及溶剂用量.

目的:制备肿瘤微环境响应释放的靶向二硫化钼纳米载药体系,并评价其载药量和释药性能.方法:以水热法合成的MoS2纳米片为基底,利用MoS2纳米片上的S空缺位点连接硫辛酸聚乙二醇羧酸,然后通过酰胺反应连接精氨酸-甘氨酸-天冬氨酸(RGD)靶向分子,再连接上交联剂3-(2-吡啶二硫代)丙酸N-琥珀酰亚胺酯(SPDP),得到药物载体MoS2-PEG-RGD-SPDP(MPRS),MPRS进一步与巯基化的阿霉素(DOX)反应,形成MPRS-DOX纳米载药体系.通过透射电子显微镜(TEM),X-射线光电子能谱仪(XPS)以及纳米粒度电位仪对合成的材料进行表征;利用紫外可见分光光度计测试MPRS的载药性能,采用荧光分光光度计考察MPRS-DOX的释药性能.结果:成功合成MPRS-DOX纳米载药体系,其粒径大小在200nm左右,Zeta电位为+28.2 mV;其载药效率为86.8％,载药量为53.5％.体外释药实验表明,在10mM谷胱甘肽(GSH)和pH=5.5的条件下DOX释放量最多.结论:成功制备了粒径合适的MPRS-DOX纳米载药体系,MPRS-DOX具有GSH和pH双重响应性,可实现预期的模拟肿瘤微环境内控制释放药物.这种GSH和pH双重响应的纳米载药体系为新一代刺激响应型纳米载药系统的构建提供了新的思路.

目的 探讨丙氨酰谷氨酰胺对急性ST段抬高型心肌梗死(STEMI)患者经皮冠状动脉介入治疗(PCI)术后心功能的影响及可能机制分析.方法 纳入2015年10月至2018年10月于中部战区空军医院心内科行急诊PCI的STEMI患者60例为研究对象,按随机数字表法分为对照组(n=30)和观察组(n=30).对照组患者采用STEMI常规治疗药物,观察组在对照组的基础上于术前及术后按0.5 g/kg体重静滴注射用丙氨酰谷氨酰胺,1/d,持续14 d.两组患者于术前、术后7 d、术后14 d抽血运用全自动生化分析仪检测N末端B型脑钠肽前体(NT-proBNP)水平;双抗体夹心ELISA法检测血清热休克蛋白70(HSP70)浓度;采用比色法测血清中丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)含量.HD15型彩色多普勒超声诊断仪检查左心室射血分数(LVEF)及二尖瓣舒张早期血流峰值(E)/二尖瓣舒张晚期血流峰值(A)变化.分析比较两组患者术前、术后7 d、术后14d NT-proBNP水平、HSP70浓度、SOD、MDA含量、LVEF、E/A比值变化情况.结果 术前,两组患者LVEF、E/A、血浆NT-proBNP、血清HSP70、SOD、MDA比较,差异均无统计学意义(P>0.05).与术前相比,两组患者PCI术后7 d、14 d LVEF、E/A升高,而血浆NT-proBNP下降,差异均有统计学意义(P<0.05);与术前相比,对照组PCI术后7 d、14 d,血清HSP70浓度较术前下降,差异有统计学意义(P<0.05),观察组血清HSP70浓度较术前升高,差异有统计学意义(P<0.05);与术前相比,两组患者PCI术后7 d、14 d血清SOD含量较术前均升高,差异有统计学意义(P<0.01),而血清MDA含量下降,差异有统计学意义(P<0.05).与对照组相比,观察组PCI术后7 d、14 d LVEF、E/A升高,而血浆NT-proBNP降低,差异均有统计学意义(P<0.05);与对照组相比,观察组PCI术后7 d、14 d血清HSP70、SOD浓度升高,而血清MDA含量下降,差异均有统计学意义(P<0.05).相关性分析结果表明:血清HSP70、SOD浓度与LVEF、E/A呈正相关(P<0.01),与血浆NT-proBNP呈负相关(P<0.01);血清MDA浓度与LVEF、E/A呈负相关(P<0.01),与血浆NT-proBNP呈正相关(P<0.01).结论 丙氨酰谷氨酰胺能够减轻STEMI患者PCI术后心肌缺血再灌注损伤,改善心功能.其机制可能与诱导HSP70表达、降低MDA,升高SOD,增强心肌细胞的抗氧化能力,减轻自由基的损伤有关.