目的 了解临床分离的纹带棒状杆菌对抗菌药物的敏感性及其感染或定植患者的临床特征.方法 收集福建医科大学附属泉州第一医院2020年7月—2022年9月临床分离纹带棒状杆菌72株,采用肉汤微量稀释法检测细菌对18种抗菌药物的敏感性.PCR扩增检测喹诺酮类耐药决定区相关基因gyrA并进行测序以分析氨基酸突变位点,PCR扩增核糖体甲基化酶基因ermX和氨基糖苷修饰酶基因aphA1并进行测序分析.病史资料分析纹带棒状杆菌感染或定植患者的临床特征.结果 药敏试验结果显示,所有菌株对万古霉素、利奈唑胺和达托霉素均100％敏感,对头孢曲松、环丙沙星及莫西沙星均100％耐药,对青霉素(87.5％)、头孢吡肟(95.8％)、美罗培南(95.8％)、甲氧苄啶-磺胺甲唑(90.3％)、红霉素(98.6％)和克林霉素(98.6％)的耐药率较高,对庆大霉素(25.0％)、四环素(30.6％)和利福平(23.6％)耐药率较低.PCR及DNA测序结果显示,3株纹带棒状杆菌发生gyrA基因单点突变(Ser87Val),67株发生双突变(Ser87Phe、Asp91Ala或Ser87Tyr、Asp91Ala),2株发生三位点突变(Ser87Phe、Ala88Pro和Asp91Ala),其中三位点突变是本研究首次发现的突变模式.所有的纹带棒状杆菌均检出ermX基因,aphA1基因检出率为43.1％.病史资料结果显示,72株纹带棒状杆菌主要分离自ICU(占65.2％),标本来源以下呼吸道标本为主(占91.6％),患者平均年龄(68.0±15.3)岁,感染和定植患者比例分别占72.2％(52/72)和27.8％(20/72),两组患者在住院时长≥28 d、合并脑出血、意识障碍及病情恶化方面差异具有统计学意义(P＜0.05).结论 该院临床分离的纹带棒状杆菌均为多重耐药菌,感染患者预后相对较差.

目的:探讨食管癌根治术后病原菌分布情况及发生肺部感染的影响因素。方法:采用回顾性病例对照研究方法。收集2021年1月至2022年12月长治医学院附属和平医院收治的555例行食管癌根治术患者的临床资料；男344例，女211例；年龄为（64±8）岁。观察指标：（1）术后发生肺部感染及病原菌分布情况。（2）术后发生肺部感染影响因素分析。正态分布的计量资料以 x±s表示，组间比较采用 t检验。计数资料以绝对数或百分比表示，组间比较采用 χ2检验，等级资料比较采用非参数检验。单因素分析根据资料类型采用对应的统计学检验方法。多因素分析采用Logistic逐步回归模型前进法。 结果:（1）术后发生肺部感染及病原菌分布情况。555例患者中，91例术后发生肺部感染，发生率为16.40%（91/555）。91例术后发生肺部感染的患者中，共分离培养细菌59株，其中革兰氏阴性菌53株，革兰氏阳性菌 3株，真菌3株，包括多重耐药菌20株。53株革兰氏阴性菌中，鲍曼不动杆菌18株（12株多重耐药），肺炎克雷伯菌18株（3株多重耐药），铜绿假单胞菌6株（2株多重耐药），大肠埃希菌、阴沟肠杆菌、流感嗜血杆菌各2株（2株大肠埃希菌和1株阴沟肠杆菌多重耐药），粘质沙雷菌、克氏柠檬酸杆菌、纹状棒杆菌、奇异变形菌、产酸克雷伯菌各1株。3株革兰氏阳性菌中，金黄色葡萄球菌2株，肺炎链球菌1株。3株真菌均为白色假丝酵母菌。18株鲍曼不动杆菌中，对亚胺培南、头孢曲松、头孢他啶、头孢哌酮或舒巴坦、环丙沙星、阿米卡星、左氧氟沙星的耐药情况分别为12、12、11、9、8、6、5株；18株肺炎克雷伯菌的上述指标分别为0、1、1、1、2、0、2株。（2）术后发生肺部感染影响因素分析。多因素分析结果显示：肿瘤病理学分期为Ⅱ期和Ⅲ期、术前住院时间≥6 d、手术时间≥240 min、手术方式为开胸手术、围手术期抗菌药物使用种类≥3种、术后抗菌药物使用时间≥5 d是患者术后发生肺部感染的独立危险因素（ P<0.05）。 结论:食管癌根治术后肺部感染病原菌主要为鲍曼不动杆菌和肺炎克雷伯菌。肿瘤病理学分期为Ⅱ期和Ⅲ期、术前住院时间≥6 d、手术时间≥240 min、手术方式为开胸手术、围手术期抗菌药物使用种类≥3种、术后抗菌药物使用时间≥5 d是患者术后发生肺部感染的独立危险因素。

人体皮肤上定植的微生物借助天然和获得性免疫系统的复杂信息交换与宿主保持共生关系，即微生态平衡，是健康皮肤所必需的。在皮肤上已鉴定出有四个主要的细菌门：放线菌门、厚壁菌门、变形菌门和拟杆菌门。最常见的三个菌属是棒状杆菌属、丙酸杆菌属和葡萄球菌属。

目的:探讨感染性结石患者术前尿细菌培养的致病菌菌谱及应用抗菌药物预防结石复发的经验。方法:回顾性分析2017年1月至2021年7月郑州大学第二附属医院收治的79例感染性结石患者的病例资料，男29例(36.7%)，女50例(63.3%)。年龄17~75岁，中位年龄49.0(40，55)岁。15例(19.0%)合并高血压病，13例(16.5%)合并糖尿病，3例(3.8%)合并心脑血管疾病。51例(64.6%)诊断为铸型感染性结石。所有患者均行手术清石，术后复查泌尿系CT未见结石残留定义为完全清石，术后继续口服药物抗感染和预防结石复发。根据患者出院后依从情况分为高依从性组和低依从性组。患者出院后能够定期返院复查尿常规和尿细菌培养，遵医嘱规范应用抗菌药物治疗，服用尿素酶抑制剂治疗≥6个月定义为高依从性。尿素酶抑制剂用法：醋羟胺酸胶囊，初始剂量250 mg，2次/日，连用3~4周；若患者可耐受，将剂量增加至3次/日；若出现不良反应，减量至1~2次/日。未规律服用敏感抗菌药物和/或醋羟胺酸减量后仍因震颤、心悸、头痛、贫血、胃肠道不适等不良反应，无法坚持用药者为低依从性组。比较两组随访3、6、12个月时结石复发情况。结果:本组79例，56例(70.9%)术后完全清石。33例(41.8%)术前尿细菌培养阳性，最常见的致病菌为奇异变形杆菌17例(21.5%)，其次为大肠埃希菌8例(10.1%)、肺炎克雷伯菌3例(3.8%)。奇异变形杆菌阳性17例中超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)阳性6例，对氨苄西林、头孢唑啉、复方新诺明耐药比例为6/6例，对阿米卡星、头孢西丁、替卡西林/棒酸耐药比例为1/6例，对亚胺培南、多黏菌素、氨曲南均不耐药(0/6例)；ESBLs阴性11例，对氨苄西林耐药比例为10/11例，对头孢唑啉、左氧氟沙星、环丙沙星、复方新诺明耐药比例为8/11例，对头孢西丁、头孢克罗、呋喃妥因、阿米卡星、米诺环素耐药比例为1/11例，对亚胺培南、替卡西林/棒酸、氨曲南均不耐药(0/11例)。ESBLs阳性菌株对78.6%的药物(头孢克罗、头孢唑啉、头孢他啶、呋喃妥因、诺氟沙星、左氧氟沙星、环丙沙星、头孢西丁、阿莫西林/棒酸、替卡西林/棒酸、氨苄西林、头孢曲松、头孢噻肟、头孢呋辛、头孢吡肟、庆大霉素、复方新诺明、妥布霉素、阿米卡星、四环素、氯霉素、米诺环素)耐药率低于ESBLs阳性菌株。大肠埃希菌阳性8例中，ESBLs阳性7例，对氨苄西林、头孢唑啉、头孢噻肟、头孢呋辛、头孢吡肟耐药比例为7/7例，对头孢西丁和米诺环素耐药比例为1/7例，对亚胺培南、呋喃妥因、阿米卡星均不耐药(0/7例)；ESBLs阴性1例，除对氨苄西林耐药外，对其他抗菌药物均敏感。高依从性组和低依从性组出院后3、6、12个月的结石复发率分别为9.1%(4/44)和31.4%(11/35)( P＝0.012)、13.6%(6/44)和60.0%(21/35)( P<0.05)、36.4%(16/44)和71.4%(25/35)( P＝0.002)，差异均有统计学意义。 结论:感染性结石患者尿细菌培养最常见的致病菌为奇异变形杆菌、大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌。ESBLs阳性菌株对抗菌药物的耐药率显著高于ESBL阴性菌株。β-内酰胺酶抑制剂、头孢西丁、阿米卡星、亚胺培南等抗菌药物的耐药率较低。规范应用敏感抗菌药物和尿素酶抑制剂联合治疗可显著降低患者的结石复发率。

目的:研究干眼患者与非干眼患者眼表微生物菌群的差异。方法:纳入2020年6—11月于西安交通大学第一附属医院确诊的干眼患者42例42眼作为干眼组，纳入同期在眼科门诊查体的非干眼患者37例37眼作为非干眼组，采集结膜囊拭子并测序。纳入符合标准单眼，若双眼符合纳入标准，则右眼入组。采用Miseq PE301+8+301平台进行细菌16S rRNA基因V3-V4区双端测序，对微生物菌群进行可操作分类种属(OTUs)聚类，分析和比较2个组间微生物菌群Alpha和Beta多样性，并进行物种注释分析以及微生物标志物分析。结果:共获得18 586个OTUs，干眼组与非干眼组共有OTUs为3 674个。Alpha多样性分析结果显示，2个组间observed species指数、Chao指数、Ace指数、Shannon指数和Simpson指数比较差异均无统计学意义(均 P>0.05)，表明2个组间菌群丰富度无明显差异。而主成因(PCoA)分析显示2个组间菌群构成差异有统计学意义( R2＝0.039， F＝3.100， P＝0.022)。2个组眼表优势菌群构成相似，在门水平以变形菌、放线菌、厚壁菌、拟杆菌、蓝藻菌等为主，在属水平以嗜糖假单胞菌、棒状杆菌、丙酸杆菌、假单胞菌、草螺菌等为主。LEfSe分析显示干眼组优势菌属的标志菌为泰氏菌属、栖水菌属、芬戈尔德菌，非干眼组为柄杆菌属、弯钩菌属。 结论:干眼组和非干眼组眼表微生物菌群构成存在差异。

目的:探究变应性鼻炎（AR）及非变应性鼻炎（nAR）患者的鼻腔菌群特征及差异菌的致病作用。方法:选取2022年2—7月于哈尔滨医科大学附属第二医院鼻科门诊就诊的AR患者35例、nAR患者35例为试验组，选取同期体检的健康人群20名为对照组，合计男性39例，女性51例，年龄8~55岁。利用16SrDNA高通量测序分析3组受试者鼻腔菌群相对丰度特征，使用R软件进行Alpha多样性指数分析，利用LEfSe、Metastats、 t检验进行组间差异分析，同时利用R软件分析菌群的作用及与环境因子的关系。 结果:3组样本的菌群构成存在显著差异，AR组内金黄色葡萄球菌（ P=0.032）、丙曲棒状杆菌（ P=0.032）的相对丰度显著高于nAR组，鼠李乳杆菌、昆可乳杆菌、产碱菌（ P值分别为0.016、0.005、0.001）的相对丰度显著低于nAR组，nAR组内嗜黏蛋白阿克曼菌的相对丰度高于对照组（ P=0.009）。环境因子相关性分析显示昆可乳杆菌与IgE呈负相关关系（ P=0.044），鼠李乳杆菌与年龄呈正相关关系（ P=0.019）。分别构建5个属的AR、nAR随机森林预测模型，AR组肺炎链球菌-FF10、黄体假单胞菌、副氏假单胞菌、熊不动杆菌和固氮杆菌模型的曲线下面积（AUC）为100%（95%CI：100%~100%），nAR组副氏假单胞菌、固氮杆菌、巴拉蒂梭菌、土瑞酸杆菌和黄链球菌模型的AUC为98.4%（95%CI：94.9%~100%）。 结论:AR、nAR患者与健康受试者鼻腔菌群相对丰度显著不同，菌群丰度的改变与AR及nAR的发生具有显著关系。菌群的联合检测具有诊断AR及nAR患者的潜力。

目的:评价青蒿油(artemisia naphta oil,AN)对痤疮丙酸杆菌(P.acnes)诱导的小鼠痤疮模型的疗效及皮肤微生态的影响.方法:将48只小鼠分为正常组、模型组、Base组、不同浓度AN干预组(0.5％、1.0％、1.5％、3.0％、5.0％AN组),每组6只.P.acnes注射耳朵皮内构建痤疮模型,小鼠右耳出现红肿后,Base组涂抹Base水对照干预,其余给予不同浓度的AN干预,每次涂抹1 mL,每天1次,17天后观察小鼠耳部厚度,HE染色观察皮肤病理,16S rRNA测序分析皮肤微生态变化,Western blot检测IL-6、IL-1β和TNF-α含量和TLR2、TLR4、P65、p-P65蛋白表达.结果:模型组小鼠耳部出现红肿、表皮层增厚、真皮层炎症细胞浸润,耳部菌群丰度和多样性降低,其中葡萄球菌、粘质沙门氏菌菌群丰度显著增加,双歧杆菌属、棒状杆菌属、Atopostipes菌群丰度显著下调;IL-6、IL-1β、TNF-α含量和TLR2、TLR4、p-P65/P65蛋白表达显著上升.Base组小鼠TLR2、TLR4、p-P65蛋白表达水平无明显改变.不同浓度AN处理后的小鼠耳部红肿、病理损伤减轻,耳部菌群丰度和多样性改善,葡萄球菌、粘质沙门氏菌显著下调,双歧杆菌属、棒状杆菌属、Atopostipes菌群丰度显著上调,且IL-6、IL-1β、TNF-α含量和TLR2、TLR4、p-P65/P65蛋白表达显著下降.结论:AN可降低促炎因子分泌,减轻皮肤炎症反应,增加皮肤有益菌的丰度,抑制病原菌生长,恢复皮肤微生态平衡,有效改善痤疮炎症样皮损变化.

[目的]谷氨酸棒杆菌是一种重要的工业微生物,挖掘可调控性元件可有效拓展谷氨酸棒杆菌研究和应用的广度和深度.[方法]在谷氨酸棒杆菌组成型强启动子PH10 上嵌入阻遏蛋白CymR结合的操纵序列CuO,构建了 4-异丙基苯甲酸(Cumate)为诱导剂的启动子PH10-CuO.[结果]绿色荧光蛋白作为报告基因的实验结果显示,无诱导剂时,谷氨酸棒杆菌工程菌相对荧光强度较低;以 25 μg/mL 4-异丙基苯甲酸诱导 12 h时,谷氨酸棒杆菌工程菌荧光强度达 62 000,证明PH10-CuO具有很好的严谨性和诱导表达强度.构建了以启动子PH10-CuO调控recET和Cas12a表达的谷氨酸棒杆菌基因编辑质粒,实现谷氨酸棒杆菌染色体上靶标基因的精准编辑和外源基因插入.[结论]诱导型启动子PH10-CuO具有表达强度高且渗漏表达低的特点,可用于谷氨酸棒杆菌中被其调控基因的时序性表达.

对2023年8月8日海南医学院第一附属医院收治的1例慢性肝病患者感染创伤弧菌(Vibrio vulnificus)的诊疗经过进行回顾性分析.患者男,34岁,渔民,患有慢性乙型病毒性肝炎.8月3日捕鱼时腿部擦伤,当天夜里出现发热、双下肢持续性胀痛,左下肢为甚,发病第4天至当地医院就诊检查后采用抗生素治疗,并于8月8日转诊至海南医学院第一附属医院.接诊时患者血压低,下肢皮温高,末梢血运较差,可见多处结痂,并出现感染性休克征象.入院12h行左小腿脓肿切开引流术+创面负压吸引术并送检左下肢感染组织,病原体培养提示创伤弧菌感染,病理结果提示坏死性筋膜炎,予美罗培南联合万古霉素抗感染、维持血压、维持水电解质平衡等对症支持治疗,富马酸丙酚替诺福韦片抗病毒治疗及多烯磷脂酰胆碱胶囊保肝治疗,根据药敏结果予左氧氟沙星+头孢他啶抗感染,并依据创面情况行清创治疗.入院后17 d,患者感染基本控制,但肝功能酶仍高于正常水平,创面仍有渗血及渗液,患者及家属要求出院,出院后伤口愈合不佳,于2023年9月11日再次入院,予抗病毒及保肝治疗.第5天分泌物病原体培养结果为纹带棒状杆菌(Corynebacterium striatum)合并斯氏普鲁威登菌(Providencia stuartii)感染,并报告纹带棒状杆菌为多重耐药菌,换用敏感抗生素治疗及对症支持治疗.第2次入院后16 d,患者一般情况可,但肝功能酶指标仍高于正常,予办理出院.患者出院4个月后对其进行电话随访,自述第2次出院后遵医嘱积极抗病毒治疗及戒酒,创面恢复尚可.该患者有典型暴露史及临床表现,符合创伤弧菌导致的脓毒性休克及坏死性筋膜炎特征,临床中应根据其病理学特点、临床特征对创伤弧菌感染进行早期诊断、处理,改善患者预后.

L-缬氨酸作为一种支链氨基酸,广泛应用于医药和饲料等领域.本研究借助多种代谢工程策略相结合的方法,构建了生产 L-缬氨酸的微生物细胞工厂,实现了 L-缬氨酸的高效生产.首先,通过增强糖酵解途径、减弱副产物代谢途径相结合的方式,强化了L-缬氨酸合成前体丙酮酸的供给;其次,针对L-缬氨酸合成路径关键酶—乙酰羟酸合酶进行定点突变,提高了菌株的抗反馈抑制能力,并利用启动子工程策略,优化了路径关键酶的基因表达水平;最后,利用辅因子工程策略,改变了乙酰羟酸还原异构酶和支链氨基酸转氨酶的辅因子偏好性,由偏好NADPH转变为偏好NADH,从而提高了 L-缬氨酸的合成能力.在 5 L 发酵罐中,最优谷氨酸棒杆菌工程菌株Corynebacterium glutamicum K020 的L-缬氨酸产量、得率和生产强度分别达到了 110 g/L、0.51 g/g和 2.29 g/(L?h).