目的:探讨Kazal 5型丝氨酸蛋白酶抑制剂（serine protease inhibitor of Kazal type 5, SPINK5）基因突变致新生儿Netherton综合征（Netherton syndrome, NS）的临床特征及分子遗传学特点。 方法:回顾性分析2018年11月上海交通大学附属儿童医院收治的1例新生儿NS病例的临床资料，采用高通量测序及Sanger测序对其 SPINK5基因进行分析。在万方数据库、中国知网和PubMed数据库中检索2月龄以内确诊且有 SPINK5基因分析结果的NS病例。结合本例患儿和文献报道的病例，总结新生儿NS的临床特点、基因突变情况、治疗及随访情况。采用描述性统计分析。 结果:本例患儿生后陆续出现全身皮肤弥漫性红斑及脱屑、毛发稀疏、反复感染等表现，实验室检查发现血IgE升高（111 IU/ml），光学显微镜下毛发呈"竹节发"。 SPINK5基因分析发现患儿存在c.2468dup（p.Lys824Glufs*4）和c.377_378del（p.Tys126*）复合杂合突变，家系分析发现患儿的2个突变分别遗传自其父亲和母亲，确诊为 SPINK5基因突变致NS。经抗感染、注射丙种球蛋白、皮肤护理等综合治疗后皮疹好转，但反复感染，后放弃治疗自动出院，生后2月龄死于感染。共检索到NS病例报道11例，合并本例共12例NS新生儿。总结12例患儿最常见临床表现发现，有早期皮肤弥漫性红斑及脱屑12例、感染8例、毛发干结7例、高钠血症性脱水7例、高IgE 5例、生长迟缓4例、呼吸衰竭3例、特应性体质2例、腹泻2例及吞咽不协调、低体温、喘息、高血压、肝衰竭、代谢性碱中毒各1例。 结论:NS由 SPINK5基因突变导致，新生儿期NS临床表现多不典型。生后早期出现全身皮肤弥漫性红斑及脱屑、反复感染、毛发干结，尤其血IgE偏高的患儿，应考虑NS可能，基因检测有助于早期诊断、指导治疗，并为遗传咨询提供依据。

目的:探讨脂肪组织丝氨酸蛋白酶抑制剂(visceral adipose tissue-derived serpin, Vaspin)对脂肪组织巨噬细胞极化的影响，为Vaspin改善糖代谢提供新的理论依据。方法:选取8周龄SD雄性大鼠50只，随机分为正常组(NC组)、2型糖尿病组(T2DM组)、不同浓度Vaspin干预组(V1：480 ng/kg、V2：960 ng/kg、V3：1 440 ng/kg)。Vaspin腹腔注射干预大鼠8周，干预结束后采集外周血分析糖脂代谢相关指标，通过腹腔注射葡萄糖耐量试验(intraperitoneal glucose tolerance test, IPGTT)、腹腔注射胰岛素耐量试验(intraperitoneal insulin tolerance test, IPITT)、高胰岛素-正葡萄糖钳夹技术评估各组大鼠糖耐量和胰岛素抵抗。通过免疫荧光技术(immunofluorescence, IF)测定附睾白色脂肪组织(epididymal white adipose tissue, eWAT)中CD11c、CD206、PPARγ荧光表达；实时荧光定量PCR(real-time polymerase chain reaction，RT-PCR)测定eWAT CD11c和CD206及肿瘤坏死因子(TNF)-α、白细胞介素(IL)-1β及IL-10的mRNA表达水平；酶联免疫吸附试验(enzyme linked immunosorbent assay，ELISA)检测血清中TNF-α、IL-1β及IL-10的浓度；免疫印迹法(Western blotting，WB)检测eWAT中iNOS、Arg-1、p-Akt、Akt和PPARγ的蛋白表达。结果:干预8周后，各组的体重及血脂水平差异无统计学意义，IPGTT、IPITT及高胰岛素-正葡萄糖钳夹实验显示Vapsin干预组血糖及胰岛素敏感性改善，且呈剂量依赖性( P<0.05)；IF及RT-PCR显示Vaspin可下调eWAT中CD11c、IL-1β、TNF-α的表达，上调CD206、IL-10、PPARγ的表达，且与Vaspin干预浓度相关( P<0.05)；ELISA显示Vaspin干预可下调血清中IL-1β、TNF-α的浓度，上调IL-10的浓度( P<0.05)；WB显示Vaspin可下调iNOS蛋白的表达，上调Arg1、p-Akt及PPARγ的表达，且呈剂量依赖性( P<0.05)。 结论:Vaspin通过上调巨噬细胞PPARγ通路，使脂肪组织巨噬细胞向M2型极化，改善脂肪组织炎症因子谱，从受体后水平改善胰岛素抵抗，从而改善T2DM大鼠的糖耐量。

目的:探讨复方黄芩含漱液结合牙周基础治疗对牙周炎伴2型糖尿病(T2DM)患者牙周状态及龈沟液丝氨酸蛋白酶抑制剂(vaspin)、白介素-1β(IL-1β)、基质金属蛋白酶-3(MMP-3)水平的影响。方法:选取华北理工大学附属医院60例牙周炎伴T2DM患者，根据自愿原则将其分为两组，单一组30例予以牙周基础治疗，联合组30例予以复方黄芩含漱液＋牙周基础治疗，治疗2个月，比较两组中医症候积分(牙龈肿痛、牙宣、口干舌燥、口臭、便秘)，牙周状态相关指标[牙龈指数(GI)、龈沟出血指数(SBI)、牙周袋探诊深度(PD)、牙菌斑指数(PLI)、附着丧失程度(CAL)、牙齿松动度(TM)]以及龈沟液细胞因子(vaspin、IL-1β、MMP-3)水平的变化情况，并观察记录治疗期间不良反应。结果:治疗后，两组牙龈肿痛、牙宣、口干舌燥、口臭、便秘各项积分显著降低( P<0.05)，联合组治疗后各项积分低于单一组( P<0.05)；两组治疗后GI、SBI、PD、PLI、CAL、TM显著降低( P<0.05)，联合组治疗后优于单一组( P<0.05)；两组治疗后龈沟液vaspin、IL-1β、MMP-3水平显著降低( P<0.05)，联合组治疗后低于单一组( P<0.05)；两组不良反应发生率差异无统计学意义( P>0.05)。 结论:复方黄芩含漱液结合牙周基础治疗，可显著缓解牙周炎伴T2DM患者症状，改善患者牙周状态，降低龈沟液vaspin、IL-1β、MMP-3水平，控制疾病进展。

目的:探讨丝氨酸蛋白酶抑制剂E2(SERPINE2)在食管鳞癌细胞迁移和侵袭中的作用及相关分子机制。方法:运用TCGA(http：//gepia.cancer-pku.cn/detail.php和http：//ualcan.path.uab.edu/index.html)数据库对SERPINE2在食管癌中的表达进行分析。采用定量逆转录聚合酶链反应(qRT-PCR)法检测正常食管上皮细胞NE2、食管鳞癌细胞KYSE30和KYSE150中SERPINE2 mRNA的表达。在KYSE30细胞中转染SERPINE2敲降或过表达质粒，以qRT-PCR法检测表达效果。采用体外迁移侵袭实验分析SERPINE2与食管鳞癌细胞迁移和侵袭的关系。采用免疫荧光、qRT-PCR和Western blot等实验检测SERPINE2与β-catenin和靶基因c-Myc、cyclin D1和CD44表达的相关性。结果:数据库中182例和95例食管癌和食管鳞癌组织样本中，SERPINE2 mRNA在食管癌和食管鳞癌组织中表达均增高( P<0.05)；SERPINE2在食管鳞癌KYSE30和KYSE150细胞中均呈高水平表达( P<0.01)。对照组细胞的迁移和侵袭数分别为(212.66±24.11)个/视野和(136.00±14.42)个/视野，SERPINE2敲降组1细胞的迁移和侵袭数分别为(88.33±9.71)个/视野和(77.00±9.53)个/视野，SERPINE2敲降组2细胞的迁移和侵袭数分别为(66.00±8.00)个/视野和(45.66±3.78)个/视野，与对照组相比，差异均有统计学意义(均 P<0.01)。对照组细胞的迁移和侵袭数分别为(250.00±30.00)个/视野和(203.33±15.27)个/视野，SERPINE2过表达组细胞的迁移和侵袭数分别为(383.33±35.11)个/视野和(246.66±25.16)个/视野，与对照组比较，差异均有统计学意义(均 P<0.01)。SERPINE2过表达组细胞中β-catenin表达上调，p-β-catenin表达下调，β-catenin转录活性增强，c-Myc、cyclin D1和CD44 mRNA表达上调。在对照组和SERPINE2过表达组细胞培养基中分别加入iCRT14后，对照组和SERPINE2过表达组细胞的迁移数分别为(200.00±36.05)个/视野和(258.33±22.54)个/视野，侵袭数分别为(160.00±17.32)个/视野和(188.33±25.65)个/视野，与未加入iCRT14组比较，差异均有统计学意义(均 P<0.01)。 结论:SERPINE2在食管鳞癌细胞中表达增高，通过激活β-catenin在促进食管鳞癌细胞迁移和侵袭中发挥重要的作用。

目的:利用癌症基因组图谱(TCGA)中的大量胃癌基因组数据，在胃癌组织差异表达的基因中挖掘与预后相关的基因。方法:在TCGA数据库中下载胃腺癌相关基因芯片数据，经R语言数据预处理及用edgeR对基因表达数据进行差异表达分析，利用R语言对差异基因进行基因本体论(GO)富集及KEGG生物通路分析。多因素逐步回归Cox分析预测影响生存期的基因，利用Kaplan-Meier Plotter(http：//Kaplan-Meier Plotter.com)网站对上述得到的基因进行在线生存分析。结果:TCGA数据库中共筛选胃癌标本305个，癌旁组织30个。得到3 231个胃癌差异基因，其中上调2 005个基因，下调1 226个基因。GO富集主要集中于抗原连接、丝氨酸水解酶活性、受体配体活性、丝氨酸型肽酶活性、丝氨酸型内肽酶活性、糖胺聚糖结合、细胞因子活性、激素活性、肽酶抑制剂活性、金属钛酶活性等分子功能。KEGG生物通路分析主要涉及化学致癌物、神经活性受体-配体相互作用、细胞因子-细胞因子受体相互作用、细胞色素P450对有害物质的代谢、蛋白质的消化与吸收、金黄色葡萄球菌感染、视黄醇代谢、药物代谢P450、类固醇激素生物代谢、胰液分泌等。Cox分析显示，基因GPX3和SERPINE1对胃癌患者生存期有显著影响。受试者工作特征曲线分析显示，GPX3和SERPINE1表达量的高低对胃癌患者生存期有一定的预测价值，二者临界值分别为0.46、0.68时，敏感性为60.35%，特异性为82.06%，曲线下面积为0.763(95% CI为0.828～0.936)。Kaplan-Meier分析发现，GPX3( P<0.001)和SERPINE1基因( P＝0.001)高表达与胃腺癌不良预后有明显关系。 结论:SERPINE1、GPX3基因表达越高，胃癌患者生存期越短，二者可能作为胃癌预测预后的靶点。

目的:制备 68Ga－成纤维细胞活化蛋白抑制剂(FAPI)－04，进行实验研究及健康志愿者PET/CT显像，探讨其临床转化价值。 方法:手工标记 68Ga－FAPI－04，进行标记率、放化纯及体内外稳定性检测。取ICR小鼠16只，于注射 68Ga－FAPI－04 1.11 MBq后5、30、60和120 min分别处死(每个时间点4只)，获得主要器官的放射性计数，计算每克组织百分注射剂量率(%ID/g)。另取3只ICR小鼠，于注射 68Ga－FAPI－04后行microPET动态显像，观察药物在正常小鼠体内的药代动力学特性。利用HepG2人肝细胞肝癌动物模型观察肿瘤对 68Ga－FAPI－04摄取情况。予2名健康志愿者(男女各1名，年龄分别为64岁、56岁)注射 68Ga－FAPI－04后行PET/CT摇篮床动态显像，观察体内 68Ga－FAPI－04分布情况。 结果:68Ga－FAPI－04手工合成需时约20 min，放化产率为(68.7±4.0)%(经衰变校正)，放化纯>99%。室温放置180 min及血样中放置90 min，测定放化纯仍>99%。ICR小鼠体内生物学分布及microPET显像均提示 68Ga－FAPI－04主要通过泌尿系统排泄，其余器官放射性摄取较低。荷HepG2瘤裸鼠microPET显像示肿瘤显像清晰，35 min时肿瘤与肝的靶本底比值(TBR)为2.14±0.01。健康志愿者PET/CT显像表明 68Ga－FAPI－04在体内清除迅速。 结论:68Ga－FAPI－04合成工艺简单，质量控制合格，动物实验结果及健康志愿者显像良好，是一种非常有应用前景的成纤维细胞活化蛋白(FAP)显像剂。

目的:探讨上皮-间充质转化(EMT)关键基因与结直肠癌(CRC)预后的关系，构建个体化预后风险评分模型。方法:从癌症基因组图谱(TCGA)和基因表达数据库(GEO)分别获取416例和532例信息完整的CRC样本数据，从基因集富集分析(GSEA)数据库下载200个EMT相关基因。分析TCGA的测序数据得到肿瘤和正常组织中的差异表达基因，与EMT基因集取交集得到62个差异表达的EMT基因，包括23个上调基因，39个下调基因。通过单因素Cox分析筛选出7个预后相关基因。进一步通过最小收缩与选择算子(LASSO)回归筛选出4个预后价值最高的基因构建风险评分模型。根据评分模型将患者分为高、低风险组，Kaplan-Meier生存曲线分析高、低风险组的生存差异。用GEO数据集对EMT风险评分模型进行验证，分析高、低风险组生存差异。通过单因素和多因素Cox分析计算风险评分模型的风险死亡比。依据风险评分模型和临床病理特征构建临床列线图。高、低风险组间比较生存差异采用Log-rank检验。结果:TCGA下载的CRC样本信息经过分析得到4个与预后相关的EMT基因[胶原C-蛋白酶增强剂2(PCOLCE2)、催产素受体(OXTR)、脑源性神经营养因子(BDNF)以及丝氨酸蛋白酶抑制剂E家族1(SERPINE1)]，用于构建风险评分模型，低风险组的总生存优于高风险组，差异有统计学意义( χ2＝13.9， P<0.01)，ROC曲线提示风险评分模型具有良好的准确性，1、3、5年曲线下面积(AUC)分别为0.815、0.863、0.870。GEO数据集验证风险评分模型的预测能力，高、低风险组的生存差异有统计学意义( χ2＝ 8.4， P<0.01)。单因素和多因素分析结果显示风险评分模型是独立的预后因子。列线图可有效评估CRC患者1年、3年和5年的预后。 结论:基于EMT关键基因的风险评分模型可以准确预测CRC患者的总生存期，基于该模型的列线图有助于评估患者的预后。

丝氨酸蛋白酶抑制剂-2(serine protease inhibitor 2，SERPINB2)属于serpin超家族亚群成员，也被称作纤溶酶原激活物抑制剂2。近年来发现SERPINB2与肿瘤、自身免疫性疾病、感染及损伤等多种疾病的发生发展有着重要联系。SERPINB2表达受病原体、环境毒物、炎性刺激等影响，有研究表明芳香烃受体(aryl hydrocarbon receptor，AhR)和microRNA对其也具有不同的调节作用。文章就影响SERPINB2表达调控的因素、机制以及其生物学功能的研究进展进行综述。

目的 利用网络药理学方法、分子对接及体外细胞实验探究通关藤(marsdenia tenacissima,MT)口服液抑制胃癌(gastric cancer,GC)增殖的潜在作用机制.方法 通过搜索文献、检索TCMSP、Swiss Target Prediction数据库完成MT化学成分、靶点基因的收集;采用 GeneCards 数据库获取疾病相关靶点;利用 STRING 平台和 Cytoscape 软件构建交集靶点的蛋白互作网络(protein-protein interaction,PPI);采用Metascape 网络平台进行GO和KEGG信号通路分析;运用 AutoDock 对部分活性成分与潜在靶点进行分子对接验证;采用四甲基偶氮唑盐(methyl thiazolyl tetrazolium,MTT)法检测MT口服液对GC细胞增殖的抑制作用,分别与厄洛替尼和阿帕替尼联用的协同作用、流式细胞术检测 MT 口服液诱导 GC 细胞凋亡及对胃癌细胞周期的影响;采用RT-qPCR法检测MT口服液对GC细胞周期、凋亡相关基因表达的影响;采用Western blot法验证网络药理学和分子对接筛选的靶点.结果 共得到MT主要活性成分 17 个,胃癌关键靶点1 880 个,主要信号通路 167 条.体外实验结果表明,40～200 mg/mL 的MT口服液可有效抑制GC细胞增殖(P<0.01),与厄洛替尼和与阿帕替尼联用时,具有协同效应.40～160 mg/mL的MT口服液可诱导胃癌细胞凋亡(P<0.01),阻滞细胞周期G0/G1 期(P<0.01).RT-qPCR 结果显示,通关藤口服液可以上调B淋巴细胞瘤-2(B-cell lymphoma-2,Bcl-2)相关X蛋白(Bcl-2-associated X protein,BAX)的表达量,下调Bcl-2、细胞周期蛋白依赖性激酶(cyclin dependent kinase,CDK)4、CDK6(P<0.05)的表达量.Western blot 结果显示 MT 口服液,抑制磷酸化-表皮生长因子受体(phosphorylated-epidermal growth factor receptor,p-EGFR)、磷酸化-磷脂酰肌醇-3 激酶(phosphorylated-phosphatidylinositol 3-kinase,p-PI3K)、磷酸化 AKT 丝氨酸/苏氨酸激酶(p-AKT)、磷酸化-雷帕霉素激酶的机制靶点(phosphorylated-mechanistic target of rapamycin kinase,p-mTOR)的表达水平,降低p-EGFR/EGFR、p-PI3K/PI3K、p-AKT/AKT1、p-mTOR/mTOR比值;同时上调BAX、肿瘤蛋白p53(tumor protein p53,P53)、细胞周期蛋白依赖性激酶抑制剂(cyclin dependent kinase inhibitor 1A,CDKN1A/P21),下调Bcl-2、CDK4、CDK6(P<0.05)水平.结论 MT口服液可有效抑制胃癌细胞的增殖,阻滞细胞周期并诱导胃癌细胞凋亡,并提高小分子靶向药物厄洛替尼和阿帕替尼治疗胃癌的敏感性.其机制与经调控 PI3K/AKT/mTOR 信号通路上调 BAX、P53、P21,下调Bcl-2、CDK4、CDK6 的表达,并抑制EGFR信号通路有关,实验结果验证了网络药理学和分子对接的结果.

目的:探讨血清丝氨酸蛋白酶抑制剂B1(Serpin B1)水平与终末期肾病新入血液透析患者发生心血管事件关联性.方法:回顾性分析160例终末期肾病患者的临床资料,根据患者治疗期间是否发生心血管事件将患者分为发生组(94例)与未发生组(66例).比较2组患者一般资料(性别、年龄、合并症等)、血生化指标(总胆固醇、血红蛋白、甘油三酯等).采用单因素分析终末期肾病新入血液透析患者发生心血管事件发生的影响因素,并将有统计学意义的项目纳入多因素Logistic回归,分析终末期肾病血液透析患者发生心血管事件的危险因素.采用受试者工作特征(ROC)曲线分析血清Serpin B1水平对终末期肾病新入血液透析患者发生心血管事件的预测价值.结果:2组患者年龄、甘油三酯、肌钙蛋白、C反应蛋白、血肌酐、甲状旁腺激素及Serpin B1比较,差异有统计学意义(P均＜0.05).进一步进行Logistic回归分析,结果显示年龄(OR=2.34,95％CI:1.11～4.93)、C 反应蛋白(OR=3.57,95％CI:2.22～5.76)、肌钙蛋白(OR=7.19,95％CI:3.15～16.37)及血清 Serpin B1(OR=14.94,95％CI:2.69～82.85)是终末期肾病新入血液透析患者发生心血管事件的危险因素(P均＜0.05).ROC曲线分析表明血清Serpin B1具有较高的预测价值,其最佳截断值为70.34 ng/mL,曲线下面积(AUC)为0.879(95％CI:0.84～0.92),其敏感度与特异性分别为79.89％与76.65％.结论:终末期肾病新入血液透析发生心血管事件患者血清Serpin B1水平较高,血清Serpin B1水平对于预测此类患者发生心血管事件提供一定参考价值.