目的:探讨小分子糖蛋白丝甘蛋白聚糖(SRGN)在非小细胞肺癌(NSCLC)化疗耐药中的作用。方法:在非小细胞肺癌H1299细胞株中，采用shRNA技术干扰SRGN的表达并建立稳定干扰细胞株，并用Western blot技术和实时荧光定量PCR(qRT-PCR)验证敲低效率；采用MTS方法检测稳定敲低SRGN的肺癌细胞株对化疗药物顺铂和奥沙利铂的药物敏感性；采用ELISA、Western blot及qRT-PCR检测转化生长因子β(TGFβ)对SRGN表达的影响，以及SRGN介导TGFβ细胞外分泌的作用；采用Western blot检测SRGN对上皮间质转化(EMT)相关分子的影响，以及采用在线数据生物信息学分析SRGN与EMT相关分子表达的相关性；此外采用在线预后分析软件(kmplot)分析SRGN、TGFβ与肺癌患者预后的相关性。结果:与对照组比较，敲低SRGN可明显增强NSCLC细胞对化疗药物顺铂( P＝0.032 7)和奥沙利铂( P＝0.014 2)的敏感性；TGFβ可促进NSCLC细胞中SRGN的表达，并且SRGN可促进TGFβ的细胞外分泌；SRGN可通过Snail1促进NSCLC细胞的EMT改变，分析TCGA数据库，发现在NSCLC癌组织标本中SRGN表达与CDH1(编码Ecadherin蛋白)表达呈负相关( r＝－0.25)，而与SNAI1表达呈正相关( r＝0.37)；SRGN低表达的NSCLC患者相比高表达的患者总生存期明显延长( P＝0.007 7，平均中位生存时间延长15.9个月)，而同时SRGN与TGFβ1或TGFβ2低表达的患者中位生存时间分别延长73个月或42.8个月。 结论:SRGN与TGFβ1相互作用，促进肺癌细胞EMT改变，进而促进肺癌细胞的化疗耐药。SRGN与TGFβ1或TGFβ2同时低表达可显著延长非小细胞肺癌患者总生存期。

目的:探讨危重烧伤并发侵袭性真菌感染患者的临床特征及死亡的危险因素。方法:采用回顾性病例系列研究方法。2017年1月—2022年12月，郑州市第一人民医院收治88例符合入选标准的危重烧伤并发侵袭性真菌感染患者，其中男61例、女27例，年龄26~74岁。统计患者侵袭性真菌感染部位和病原菌检出情况。依据入院后28 d内的生存结局，将患者分为存活组（63例）和死亡组（25例）。比较2组患者入院时年龄、性别、体重、烧伤总面积、合并吸入性损伤情况、合并高血压和糖尿病情况、急性生理学和慢性健康状况评价Ⅱ（APACHE Ⅱ）评分以及伤后入院时间等基本资料与伤情，入院后24 h内检测的白细胞计数、血小板计数、红细胞计数、单核细胞计数、中性粒细胞计数、淋巴细胞计数、丙氨酸转氨酶、天冬氨酸转氨酶、葡萄糖、肌酐、尿素氮、D-二聚体、半乳甘露聚糖（GM）、1，3-β-D葡聚糖和肌酸激酶等血生化指标水平，治疗过程中连续性肾脏替代治疗、呼吸机辅助呼吸、气管切开、深静脉置管、手术植皮>2次等有创操作和应用血管活性药物情况，入院后1、3、7、14 d的C反应蛋白（CRP）、降钙素原、乳酸、白细胞介素-6（IL-6）和肿瘤坏死因子-α（TNF-α）等感染指标水平，治疗过程中病原菌检出情况。对数据行独立样本 t检验、重复测量方差分析、 χ2检验、Mann-Whitney U检验、Bonferroni校正。行多因素logistic回归分析，筛选影响危重烧伤并发侵袭性真菌感染患者死亡的独立危险因素。 结果:侵袭性真菌感染的主要部位为创面（67例）和血流（46例），感染的真菌主要为假丝酵母菌属真菌（58株），病原菌混合感染者共30例。与存活组比较，死亡组患者入院时APACHE Ⅱ评分、合并吸入性损伤和高血压比例均明显升高（ t=2.11， χ2值分别为6.26、9.48， P<0.05），其余基本资料和伤情均无明显变化（ P>0.05）。与存活组比较，死亡组患者入院后24 h内D-二聚体、GM、1，3-β-D葡聚糖水平均明显升高（ t值分别为2.42、2.05、2.21， P<0.05），入院后24 h内其余血生化指标及治疗过程中行各项有创操作和应用血管活性药物比例均无明显变化（ P>0.05）。2组患者入院后1、3 d的感染指标水平均相近（ P>0.05），死亡组患者入院后7 d的降钙素原与入院后14 d的CRP、降钙素原、乳酸、IL-6和TNF-α水平以及病原菌混合感染比例均明显高于存活组（ t值分别为4.69、3.89、6.70、6.14、4.65、3.26， χ2=12.67， P<0.05）。多因素logistic回归分析显示，合并吸入性损伤、合并高血压和病原菌混合感染均为影响危重烧伤并发侵袭性真菌感染患者死亡的独立危险因素（比值比分别为5.98、4.67、6.19，95%置信区间分别为1.42~15.39、1.41~25.28、1.86~20.58， P<0.05）。 结论:危重烧伤并发侵袭性真菌感染患者感染的主要部位为创面和血流，感染的真菌主要为假丝酵母菌属真菌，病原菌混合感染比例较高；该类患者死亡的独立危险因素为合并吸入性损伤、合并高血压和病原菌混合感染。

目的:探寻与卵巢癌诊断相关的血清循环多肽标志物。方法:以2018年3月至2018年9月中国医学科学院肿瘤医院妇瘤科收治的原发卵巢上皮癌患者54例(卵巢癌组)、同期在中国医学科学院肿瘤医院体检中心进行体检的健康女性40例(健康对照组)为研究对象。采用随机数字表法，将例卵巢癌患者和健康对照者各按1∶1随机分为训练集和验证集。采用基质辅助激光解吸离子飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)联合磁珠技术检测血清多肽峰，在训练集中筛选卵巢癌组与健康对照组间的差异多肽峰(评分>5)。采用受试者工作特征(ROC)曲线分析，在训练集和验证集中，筛选曲线下面积(AUC)均≥0.8、诊断卵巢癌的灵敏度和特异度均>90%的差异多肽峰。采用液相色谱-质谱/质谱(LC-MS/MS)技术鉴定差异多肽峰的成分。结果:在质荷比1 000~10 000范围内，卵巢癌组和健康对照组之间有102个差异多肽峰。ROC曲线分析显示，在训练集和验证集中，AUC均≥0.8的差异多肽峰有42个，其中19个在卵巢癌组血清中高表达，23个低表达；诊断卵巢癌灵敏度与特异度均≥90%的卵巢癌血清高表达差异多肽峰有15个，质荷比分别为7 744.27、5 913.41、5 329.87、4 634.21、4 202.02、3 879.26、3 273.35、3 253.79、3 234.34、2 950.33、2 664.51、2 018.38、1 893.37、1 498.69和1 287.55；诊断卵巢癌灵敏度与特异度均≥90%的卵巢癌血清低表达差异多肽峰有15个，质荷比分别为9 288.46、7 759.77、5 925.24、4 652.77、4 210.42、3 887.02、3 279.90、3 240.82、2 962.15、2 932.70、2 022.42、1 897.16、1 501.69、1 337.38和1 290.13。在卵巢癌患者血清低表达的15个差异多肽峰中未鉴定出多肽峰的蛋白成分，在卵巢癌患者血清高表达的15个差异多肽峰中鉴定出2个多肽峰的蛋白成分，质荷比为1 498.70者是丝甘蛋白聚糖(SRGN)，质荷比为5 913.42者是纤维蛋白原α链(FGA)，二者在全部研究对象中诊断卵巢癌的灵敏度均为100%，特异度分别为90.9%和100%。结论:SRGN和FGA在卵巢癌患者血清中高表达，可能是潜在的卵巢癌诊断标志物。

目的 本研究建立免疫抑制大鼠侵袭性黑曲霉菌肺病模型,为抗侵袭性肺曲霉病药物药效学评价及机制研究提供理论支持.方法 将60只SD大鼠随机分为正常对照组、环磷酰胺对照组、环磷酰胺+真菌感染低、中、高剂量组,每组12只动物.每天进行一般临床观察,分别于造模第3、7天采用ELISA法检测血清中免疫球蛋白G(IgG)、免疫球蛋白M(IgM)、血清半乳甘露聚糖(GM)水平,并检测外周血CD4+、CD8+细胞比例及白细胞(WBC)、中性粒细胞(Neu)含量,同时观察肺泡灌洗液黑曲霉菌负荷和大鼠肺组织形态学变化.结果 环磷酰胺对照组、环磷酰胺+真菌感染低、中、高剂量组大鼠造模后均出现自主活动减少及竖毛,且环磷酰胺+真菌感染低、中、高剂量组大鼠伴有呼吸急促,可闻及肺部湿啰音;与正常对照组比较,环磷酰胺对照组大鼠血中CD4+、WBC、Neu、IgG、IgM水平均显著减少,CD8+比例显著增加(P＜0.05,P＜0.01);与环磷酰胺对照组比较,环磷酰胺+真菌感染中、高剂量组大鼠血中IgG、IgM、CD4+水平均显著减少(P＜0.05,P＜0.01),环磷酰胺+真菌感染低、中、高剂量组大鼠血中WBC、Neu水平均显著减少(P＜0.05,P＜0.01),环磷酰胺+真菌感染中、高剂量组大鼠血中CD8+水平显著升高(P＜0.05,P＜0.01),环磷酰胺+真菌感染低、中、高剂量组大鼠血中GM水平及肺泡灌洗液黑曲霉菌负荷均显著增加(P＜0.05,P＜0.01);环磷酰胺+真菌感染低、中、高剂量组大鼠肺组织出现菌丝分布和肺泡上皮破坏、肺泡内支气管上皮杯状细胞增多、炎症细胞浸润,其病变程度与造模剂量呈正相关.结论 本研究采用黑曲霉菌联合环磷酰胺免疫抑制剂构建侵袭性黑曲霉菌肺病模型,病程与菌液浓度和造模时间呈正相关,证实细胞免疫在该病发病机制方面中发挥重要作用,同时免疫球蛋白也可影响侵袭性肺曲霉病疾病的发展过程,推测侵袭性肺曲霉病发病机制可能与体液免疫中免疫球蛋白水平有关.

目的 观察芪术增力方对裸鼠癌因性疲乏的影响,探讨其可能的作用机制.方法 在TCMSP平台搜索芪术增力方活性成分,通过Uniprot数据库转化为相关靶点;在GeneCards数据库、OMIM数据库、DrugBank数据库搜索癌因性疲乏相关靶点,通过Jvenn平台绘制药物、疾病靶点交集图,String平台制作蛋白质互作网络(protein-protein interaction networks,PPI),Metascape平台进行GO和KEGG富集分析,选取癌症蛋白聚糖(proteoglycans in cancer)信号通路进行研究.将 25 只裸鼠随机分为空白组、模型组、中药组、化疗组(顺铂)及地塞米松组.构建癌因性疲乏模型,干预 3 周后,ELISA法检测裸鼠瘤体内磷脂酰肌酶聚糖受体(glypican,GPC)1、GPC5、多配体蛋白聚糖(syndecan,SDC)2、丝甘蛋白聚糖(serglycin gene,SRGN)表达;观察光镜下各组裸鼠瘤体组织的病理形态.结果 与模型组比较,中药组及化疗组的GPC1 水平显著降低(P<0.01);中药组SDC2 水平降低(P<0.05);中药组、化疗组、地塞米松组瘤体内SRGN水平均降低(P<0.05).结论 芪术增力方通过降低裸鼠瘤体内GPC1、SDC2、SRGN水平达到缓解疲乏的效果,其机制可能与抑制肿瘤生长、转移有关.

目的:研究绿原酸(CRA)联合伏立康唑(VRC)对侵袭性肺曲霉病的体内干预效果及免疫机制.方法:将大鼠分为正常对照组、模型组、CRA组、VRC组、联合治疗组(CRA+VRC组),成功建立侵袭性肺曲霉病大鼠模型后,正常对照组和模型组给予生理盐水,其余各组分别给予CRA单药、VRC单药及CRA+VRC联合干预7d.观察大鼠一般情况以评估全身感染的严重程度;测定大鼠肺组织真菌负荷、肺泡灌洗液中半乳甘露聚糖(GM)含量;采用苏木精—伊红(HE)以及六胺银(PASM)染色观察肺部感染灶病理结构变化;免疫组化法检测CD68、诱导型一氧化氮合酶(iNOS)和精氨酸酶-1(Arg-1)蛋白表达水平;酶联免疫吸附试验(ELISA)检测肺组织匀浆中巨噬细胞的M1 表型细胞因子肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)以及M2 表型细胞因子白细胞介素-10(IL-10)水平.结果:与模型组比较,CRA+VRC组大鼠一般状况最佳,且体重下降趋势明显减缓(P＜0.05),真菌负荷及肺泡灌洗液中GM浓度显著降低(P＜0.01).模型组大鼠肺组织血管、支气管明显受真菌侵袭,大量菌丝、孢子生长,且有广泛炎症、出血,而CRA+VRC组大鼠肺组织则菌丝明显减少,损伤较轻.与模型组比较,CRA+VRC组大鼠肺组织CD68、Arg-1 蛋白表达水平显著降低(P＜0.01),而iNOS蛋白表达水平显著升高(P＜0.05),肺组织TNF-α、IL-6 水平均明显升高(P＜0.05,P＜0.01).结论:CRA联合VRC对侵袭性肺曲霉病模型大鼠具有协同治疗作用,其作用机制可能与CRA促进巨噬细胞M1表型极化有关.

目的 检测肝细胞肝癌患者血浆中甘露糖结合凝集素(MBL)、MBL相关丝氨酸蛋白酶-2(MASP-2)的表达水平,探讨其与肝细胞肝癌发生发展的相关性.方法 用酶联免疫吸附测定方法检测64例肝细胞肝癌患者及30例健康人血浆中MBL及MASP-2的表达水平,并用统计学方法分析患者血浆中MBL及MASP-2的浓度与各临床指标的相关性.结果 肝细胞肝癌患者血浆中MBL和MASP-2的浓度均显著高于健康人群(P=0.014、0.002),MBL/MASP-2比值在健康人群与肝细胞肝癌患者中的差异无统计学意义,此外,患者血浆中MBL与MASP-2并无相关性.在肝细胞肝癌患者中,血浆MBL水平与肿瘤的血管侵犯(r=0.253,P=0.047)和总胆红素水平(r=0.283,P=0.024)呈正相关;血浆中MASP-2水平与肝细胞肝癌的TNM分期呈正相关(r=0.276,P=0.027),而与血浆白蛋白呈负相关(r=0.-0.317,P=0.015).经ROC曲线分析,MBL和MASP-2曲线下面积分别为0.665(P=0.010)和0.694(P=0.003),对肝细胞肝癌诊断的敏感性分别为50%和89.1%.结论 补体凝集素途径的关键分子MBL、MASP-2与肝细胞肝癌患者的炎症状态和疾病进展相关,参与了肝癌的发生与发展.

以黄独微型块茎为材料,进行了4℃低温离体保存,并对其进行了转录组分析.结果表明:原始数据进行质量预处理后,对照组(Con25)和处理组(Con4)的reads有效比分别为98.67％和98.69％;对拼接序列去重复后最终得到了219 792个长度大于200bp的transcripts(177 Mb)和161066个Unigenes (99 Mb);Unigenes的NR注释数目最多的10个物种分别为出芽短梗霉EXF-150、葡萄、可可、水稻粳稻组、无油樟、谷子、出芽短梗霉变种nami-biae CBS 147.97、麻疯树、短至生黑醋杆菌CBS 110374和无花果拟盘多毛孢w106-1;样本注释基因最多的5个KOG是一般的功能预测、信号转导机制、翻译后修饰和蛋白质周转以及伴侣、翻译和核糖体结构和生物合成、能源生产和转换;样本KEGG注释Unigenes最多的5个pathway分别为碳代谢、氨基酸生物合成、糖酵解途径、淀粉蔗糖代谢和丙酮酸代谢.注释到的Unigenes个数为26006,注释到的不同酶数为1 177,映射到的不同pathway数为327;样本基因的功能在Biological Process分类中主要聚集于cellular process和metabiolic process,在Cellular Component分类中主要聚集于cell和cell part,在Molecular Function分类中主要聚集于binding和catalytic activity;在黄独微型块茎低温离体保存中,共获得164 145个差异表达基因,其中有63 305个基因表达上调,有100 840个基因表达下调;差异表达基因部分极其显著的GO term有液泡继承、单链断裂修复、纺锤体伸长、麦芽糖分解代谢过程、甘露糖基转移酶的活性、甘露糖磷酸转移酶活性、细胞壁甘露糖蛋白的生物合成过程、G1期细胞有丝分裂周期早期细胞芽和有丝分裂纺锤体定位的建立;差异表达基因部分极其显著的pathway有原发性胆汁酸的生物合成、类固醇激素的合成、氯代环己烷和氯苯降解、双酚A降解、氟苯甲酸降解、糖胺聚糖合成硫酸软骨素、糖胺聚糖合成硫酸乙酰肝素、甲苯降解、萘的降解和核黄素代谢.本实验结果可为黄独微型块茎的种质保存和后续萌发提供理论依据.

目的 研究雷公藤多苷对糖尿病大鼠肾组织甘露糖结合凝集素(MBL)及甘露聚糖结合凝集素丝氨酸肽酶2(MASP2)表达的影响,探讨雷公藤多苷对糖尿病大鼠肾脏损伤的保护机制.方法 45只雄性SD大鼠随机分为实验组(n=35)和正常对照组(n=10).实验组喂以高糖高脂饲料6周后,腹腔注射链脲佐菌素(STZ)建立糖尿病肾病大鼠模型.实验组有33只大鼠造模成功,将33只大鼠随机分为糖尿病肾病模型组(n=16)和雷公藤多苷治疗组(n=17),治疗组以雷公藤多苷[10 mg/(kg·d)]灌胃8周.第14周末,比较模型组和治疗组24h尿蛋白定量及血清生化指标;过碘酸希夫反应(PAS)观察肾组织形态学改变;荧光定量PCR检测肾组织MBL1、MASP2、核因子κB(NF-κB)、单核细胞趋化蛋白1(MCP-1) mRNA水平,Western blot法检测肾组织MBL-A、MASP2、NF-κB、MCP-1的蛋白水平,免疫组织化学染色检测MBL-A、MASP2蛋白在肾组织的表达和分布.结果 与治疗组相比,模型组大鼠24h尿蛋白定量、血清肌酐、尿素氮增高,肾组织MBL、MASP2、NF-κB及MCP-1表达明显增加;相关性分析显示,MBL与MASP2、NF-κB、MCP-1表达及24h尿蛋白定量呈显著正相关.结论 雷公藤多苷能抑制糖尿病模型大鼠肾组织MBL及MASP2的表达,减轻糖尿病大鼠肾损伤.

甘露糖结合凝集素相关丝氨酸蛋白酶3(MASP3)是补体凝集素途径的酶成分之一,由MASP1/3基因编码.既往资料证实,MASP3不参与凝集素途径活化,对补体蛋白C3、C4以及C2均无酶切活性,而近期研究表明MASP3是参与补体D因子活化的关键酶,进而可能是联系补体凝集素途径和旁路途径活化的重要成分.此外,人们通过动物疾病模型研究发现MASP3可能作为补体旁路途径异常相关疾病的新治疗靶点,从而为相关疾病提供新的治疗思路.本文旨在对MASP3的编码基因、蛋白结构、生物学功能以及其在旁路途径功能异常相关疾病模型中的研究进展进行综述.