目的:探究甘露糖结合凝集素相关丝氨酸蛋白酶1(MASP1)对肝癌细胞生物学行为的影响及可能分子机制。方法:选取2022年1月10日至10月25日在南通大学附属医院行肝癌切除手术患者的20对新鲜肝癌组织和癌旁(距癌组织3 cm)正常组织标本并分析MASP1的表达情况。收集2012年3月1日至2017年5月20日南通大学附属医院病理科组织标本库中67例肝癌患者的癌组织及对应的癌旁(距癌组织3 cm)正常组织，分析MASP1的表达水平与肝癌患者临床资料的相关性。培养人肝癌细胞系SK-Hep1、Hep3B并构建 MASP1过表达和 MASP1敲减细胞株，设立SK-Hep1阴性对照、SK-Hep1 MASP1过表达组与Hep3B阴性对照和Hep3B MASP1敲减组。通过裸鼠皮下移植瘤实验分析MASP1对肝癌细胞增殖的影响。通过蛋白质印迹法检测MASP1对上皮-间质转化相关蛋白质[神经钙黏素、基质金属蛋白酶9(MMP9)、上皮钙黏素]表达的影响，以及MASP1对磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)/蛋白激酶B(Akt)/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)信号通路相关蛋白质的表达及其磷酸化水平的影响。统计学方法采用独立样本 t检验、配对 t检验和卡方检验。 结果:20对新鲜组织标本的免疫组织化学染色结果显示，MASP1在肝癌组织中的表达低于癌旁正常组织(3.73±1.03比6.76±1.46)，差异有统计学意义( t＝16.97， P<0.001)。67例肝癌患者的临床资料与MASP1的表达水平相关性分析显示，MASP1的表达水平与肿瘤有无侵犯血管有关，差异有统计学意义( χ2＝5.20， P＝0.023)。裸鼠皮下移植瘤实验显示，SK-Hep1 MASP1过表达组小鼠的皮下肿瘤比SK-Hep1阴性对照组体积更小、重量更轻[(165.42±149.08) mm 3比(260.42±179.78) mm 3、(0.13±0.12) g比(0.18±0.12) g]，差异均有统计学意义( t＝5.15、3.89，均 P<0.05)。蛋白质印迹法显示，SK-Hep1 MASP1过表达组神经钙黏素和MMP9表达低于SK-Hep1阴性对照组，上皮钙黏素表达高于SK-Hep1阴性对照组(0.73±0.01比1.02±0.02、0.40±0.01比0.69±0.01、0.91±0.02比0.78±0.02)，差异均有统计学意义( t＝24.23、36.87、9.27，均 P<0.001)。Hep3B MASP1敲减组神经钙黏素和MMP9表达高于Hep3B阴性对照组，上皮钙黏素表达低于Hep3B阴性对照组(1.04±0.01比0.31±0.01、0.54±0.02比0.04±0.01、0.56±0.01比0.93±0.01)，差异均有统计学意义( t＝163.20、53.16、60.74，均 P<0.001)。SK-Hep1 MASP1过表达组的磷酸化PI3K、磷酸化Akt、磷酸化mTOR的表达低于SK-Hep1阴性对照组(0.59±0.01比1.02±0.01、0.64±0.01比1.12±0.02、0.10±0.01比1.05±0.02)，Hep3B MASP1敲减组的磷酸化PI3K、磷酸化Akt、磷酸化mTOR的表达高于Hep3B阴性对照组(0.96±0.01比0.55±0.01、0.99±0.01比0.38±0.01、0.93±0.02比0.06±0.01)，差异均有统计学意义( t＝40.87、40.91、87.30、44.17、107.50、67.28，均 P<0.001)。 结论:MASP1在肝癌组织中低表达，并且与肝癌患者的不良预后及肿瘤血管侵袭的发生显著相关，其可能通过调控PI3K/Akt/mTOR信号通路影响肝癌细胞的增殖和迁移能力，提示 MASP1有望成为治疗肝癌的关键基因。

甘露糖结合凝集素相关丝氨酸蛋白酶3(MASP3)是补体凝集素途径的酶成分之一,由MASP1/3基因编码.既往资料证实,MASP3不参与凝集素途径活化,对补体蛋白C3、C4以及C2均无酶切活性,而近期研究表明MASP3是参与补体D因子活化的关键酶,进而可能是联系补体凝集素途径和旁路途径活化的重要成分.此外,人们通过动物疾病模型研究发现MASP3可能作为补体旁路途径异常相关疾病的新治疗靶点,从而为相关疾病提供新的治疗思路.本文旨在对MASP3的编码基因、蛋白结构、生物学功能以及其在旁路途径功能异常相关疾病模型中的研究进展进行综述.

目的:探讨甘露糖结合凝集素(MBL)途径相关蛋白甘露糖结合丝氨酸蛋白酶-2(MASP2)、MASP3在C3肾小球病(C3G)患者血清中的表达及其在C3G发病中的作用.方法:回顾性分析15例C3G患者(14例C3肾小球肾炎和1例致密物沉积病)的临床资料,用ELISA测定肾活检当天血清MASP2、MASP3水平,分析MASP2、MASP3与临床及病理指标的关系.10名健康志愿者为对照.结果:C3G患者血清MASP2、MASP3水平均高于对照组(P<0.05).血清MASP2、MASP3水平与肾小球滤过率及血清补体C3水平均无关(P>0.05),血清MASP3水平与24 h尿蛋白定量呈正相关(r=0.563,P=0.036).C3荧光强度高或有基底膜内电子致密物沉积的C3G患者血清MASP2水平较低(P<0.05).结论:C3G患者尿蛋白量随着血清MASP3的升高而升高,提示MBL途径可能参与该病的发生发展;MASP2水平的异常降低可能与C3G病理损伤程度加重有关.

目的:研究血清甘露糖结合凝集素相关丝氨酸蛋白酶2、3(MASP2、MASP3)在IgA肾病(IgAN)患者血清中的表达及其在IgAN发病中的作用.方法:收集我院2016年9月至2017年3月首次经肾活检确诊的143例IgAN患者作为病例组,同期在我院体检科的60例健康体检者作为对照组.用ELISA方法测定血清MASP2、MASP3浓度,分析血清MASP2、MASP3浓度与各临床指标、牛津病理评分、IgA/C3免疫荧光沉积强度以及预后的关系.结果:(1)IgAN组与对照组血清MASP2浓度无统计学差异(Z=-0.347,P=0.729),IgAN组血清MASP3浓度高于对照组(Z=-3.8,P<0.001).(2)与血清中等浓度MASP2(224.22,2540.50 ng/ml)的IgAN患者相比,血清低浓度MASP2(<224.22 ng/ml)患者肉眼血尿发生率更高(χ2=9.892,P=0.002),而血清高浓度MASP2(>2540.50 ng/ml)患者有更严重的蛋白尿(Z=-2.64,P=0.008)和更高的新月体评分(χ2=5.165,P=0.023).(3)与血清低中量浓度MASP3(≤2512.83 ng/ml)的IgAN患者相比,血清高浓度MASP3(>2512.83 ng/ml)患者有更严重的蛋白尿(Z=-4.526,P<0.001),且系膜增生比例、毛细血管内增生比例、肾小管萎缩/间质纤维化比例、新月体比例较高(χ2=8.955,P=0.003;χ2=4.484,P=0.034;χ2=9.853,P=0.002;χ2=9.516,P=0.002).(4)IgA荧光强度弱阳性组血清MASP2浓度高于强阳性组(Z=-2.546,P=0.011),不同C3荧光强度血清MASP2、MASP3浓度间差异均无统计学意义(P>0.05).(5)Kaplan-Meier生存曲线显示血清MASP2低浓度组和高浓度组患者肾脏生存率明显低于中等浓度组(P<0.05).血清高MASP3浓度组患者肾脏生存率明显低于低中量浓度组(P<0.05).结论:(1)血清中过高或过低浓度的MASP2在IgAN的发展中均起作用,MASP2可能在IgAN中具有多重作用机制.(2)血清中高浓度的MASP3可能促进了IgAN的进展.

为了探讨牦牛适应高海拔低氧环境的基因表达特征与规律,对在高海拔(3 560 m)和低海拔(478 m)地区饲育4个月的2.5 ～3岁健康雄性麦洼牦牛肺组织进行转录组测序.转录组测序采用Illumina高通量测序平台(HiSeqTM2500/4000)进行,并以qRT-PCR验证差异表达基因的表达量.结果 显示,高海拔组牦牛肺脏转录组平均每个测序样本得到约5.76亿条Clean Reads,低海拔组牦牛得到约6.10亿条Clean Reads,比对到参考基因组上的Reads数分别占91.74％和91.28％以上,共发现了2 047个新转录本.低海拔组与高海拔组牦牛肺脏组织之间共有199个差异表达基因,其中含89个差异上调表达基因和110个差异下调表达基因.所得差异表达基因富集在297个GO条目和146个KEGG通路中,包含62个低氧适应相关的GO条目和35个低氧适应相关代谢通路.其中低氧适应相关GO条目在生物过程、细胞组成和分子功能三种类别中占比最多的分别为细胞粘附、蛋白复合物和钙离子结合.低氧适应相关KEGG通路中占比最多的为肿瘤坏死因子(TNF)信号通路,其次为低氧诱导因子1(HIF-1)信号通路.qRT-PCR验证结果显示,Ⅱ类人类白细胞抗原α链(HLA-DOA、HLA-DRA)、补体因子(C2)和甘露糖结合凝集素相关丝氨酸蛋白酶1(MASP1)基因的表达量变化与转录组测序结果相符.本研究为全局和深入理解牦牛肺组织转录本表达对高海拔低氧的响应提供了有价值的切入点.

目的 探讨载脂蛋白E(APOE)及甘露糖结合凝集素相关丝氨酸蛋白酶2(MASP-2)基因多态性与颅脑损伤患者术后肺部感染易感性的关系.方法 收集2018年12月-2019年12月武汉市普仁医院诊治的126例颅脑损伤患者临床资料,依据患者术后是否发生肺部感染分为感染组和未感染组.比较两组临床资料,检测两组样本APOE和MASP-2的基因多态性,分析APOE和MASP-2的基因多态性与颅脑损伤患者术后肺部感染易感性的相关性.结果 126例颅脑损伤患者术后43例发生肺部感染,占34.13％;感染组与未感染组入院时GCS评分、术后卧床时间、术前血清白蛋白水平比较差异有统计学意义(P＜0.05).感染组APOE等位基因ε3分布频率低于未感染组,而等位基因ε4的分布频率则高于未感染组(P＜0.05).感染组MASP-2基因位点rs72550870基因型AA分布频率和等位基因A分布频率高于未感染组(P＜0.05).多因素非条件Logistic回归分析提示APOE等位基因ε4和MASP-2位点rs72550870基因型AA和等位基因A与颅脑损伤患者术后肺部感染的发生有关(P＜0.001).结论 APOE和MASP-2的基因多态性与颅脑损伤患者术后肺部感染易感性密切相关,其中APOE等位基因ε4和MASP-2位点rs72550870基因型AA和等位基因A的存在是颅脑损伤患者术后肺部感染风险增高的影响因素.

目的 观察老年肺腺癌患者血清甘露糖结合凝集素相关丝氨酸蛋白酶-2(mannose-binding lectin associated serine protease-2,MASP-2)、半乳糖凝集素-3(galectin-3,Gal-3)表达情况,探讨其对老年肺腺癌患者淋巴结转移的预测价值.方法 117例老年肺腺癌患者均行手术治疗及术后组织病理检查,根据淋巴结转移情况分为转移组30例和未转移组87例,比较2组患者临床资料,采用电化学发光免疫分析法检测患者术前血清癌胚抗原、糖类抗原125水平,采用ELISA法检测患者术前血清MASP-2、Gal-3水平,采用一般线性双变量Spearman直线相关性分析老年肺腺癌患者血清MASP-2、Gal-3水平与癌胚抗原、MASP-2与Gal-3的相关性;绘制ROC曲线,评估术前血清MASP-2、Gal-3水平预测老年肺腺癌患者淋巴结转移的效能.结果 117例老年肺腺癌患者30例发生淋巴结转移,发生率为25.64％;转移组术前血清癌胚抗原-22.54(19.31,24.65)μg/L]、糖类抗原125[40.12(38.05,44.47) u/mL]、MASP-2[377.63(372.91,388.86) μg/L]、Gal-3[3.77 (3.42,4.58)μg/L]水平均高于未转移组[15.28(12.89,18.61)μg/L、35.08 (33.96,37.03)u/mL、361.32(357.35,369.21)μg/L、2.85(2.33,3.46)μg/L](P＜0.05);老年肺腺癌患者血清MASP-2、Gal-3水平与癌胚抗原均呈正相关(r=0.292,P=0.001;r=0.307,P=0.001),血清MASP-2水平与Gal-3呈正相关(r=0.194,P=0.036);术前血清MASP-2、Gal-3水平的最佳截断值分别为366.24 μg/L、3.18 μg/L时,单独及联合检测预测老年肺腺癌患者淋巴结转移的AUC分别为0.875(95％CI:0.800～0.951,P＜0.001)、0.870(95％CI:0.805～0.936,P＜0.001)、0.903(95％CI:0.836～0.970,P＜0.001),灵敏度分别为86.7％、90.0％、93.3％,特异度分别为69.0％、62.1％、57.5％.结论 老年肺腺癌淋巴结转移患者血清MASP-2、Gal-3水平增高,早期监测患者血清MASP-2、Gal-3水平对预测肺腺癌淋巴结转移有一定价值.

目的 分析血清甘露糖结合凝集素相关丝氨酸蛋白酶3(MASP-3)、甘露聚糖结合凝集素(MBL)及对称二甲基精氨酸(SDMA)对老年急性缺血性脑卒中(AIS)的诊断价值.方法 选取2019年1月—2020年12月华润辽健集团阜新矿总医院神经内科收治的老年AIS患者86例为AIS组,另选取老年体检健康者50例为健康对照组.酶联免疫吸附法检测血清一氧化氮(NO)、白介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、MASP-3、MBL、SDMA水平.Pearson相关性分析老年AIS患者血清MASP-3、MBL、SDMA水平与血清NO、IL-6、TNF-α水平的相关性.多因素Logistic回归分析血清MASP-3、MBL、SDMA水平与老年AIS的关系.ROC曲线分析血清MASP-3、MBL、SDMA水平对老年AIS的诊断价值.结果 与健康对照组比较,AIS组血清MASP-3、MBL、NO水平降低(t/P=6.368/<0.001、5.587/<0.001、7.884/<0.001),SDMA、IL-6、TNF-α水平显著升高(t/P=6.857/<0.001、8.161/<0.001、6.823/<0.001).老年AIS患者血清MASP-3、MBL水平与IL-6、TNF-α水平均呈负相关,与NO水平均呈正相关(P均<0.01);SDMA与NO水平呈负相关,与IL-6、TNF-α水平呈正相关(P均<0.01).血清MASP-3、MBL升高是老年AIS发生的独立保护因素[OR(95％CI)=0.977(0.957～0.997)、0.830(0.697～0.989)],SDMA升高是老年AIS发生的独立危险因素[OR(95％CI)=2.052(1.412～2.984)].血清MASP-3、MBL、SDMA及三者联合诊断老年AIS的AUC为0.790、0.796、0.792、0.911,三者联合诊断老年AIS的曲线下面积大于血清MASP-3、MBL、SDMA单独诊断(Z/P=3.543/<0.001、2.709/0.007、3.921/<0.001).结论 老年AIS患者血清MASP-3、MBL水平降低,为老年AIS发生的独立保护因素;SDMA水平升高,为老年AIS发生的独立危险因素,可作为老年AIS诊断的生物学标志物.

目的 分析T细胞免疫球蛋白黏蛋白分子3(TIM-3)、白细胞介素-27(IL-27)、甘露糖结合凝集素相关丝氨酸蛋白酶1(MASP1)在肝包虫病合并乙型肝炎病毒(HBV)感染患者中的表达情况及临床意义.方法 选取2020年3月-2021年3月内蒙古民族大学附属医院蒙医外科收治的肝包虫病患者168例,根据是否合并HBV感染分为非感染组89例、感染组79例.另外同期选取于医院行健康体检的健康志愿者80名作为健康组.检测血清TIM-3、IL-27水平及外周血单个核细胞中MASP1表达量,对比分析在三组研究对象中的表达差异及在不同包虫类型、肝功能分级中的表达差异.结果 感染组TIM-3、IL-27水平、MASP1表达量高于非感染组、健康组(P<0.05).TIM-3、IL-27水平、MASP1表达在感染组不同包虫类型中比较,差异无统计学意义.肝功能分级为B～C级的患者TIM-3、IL-27水平、MASP1表达量高于A级患者(P<0.05).受试者工作特征曲线(ROC)分析显示,与TIM-3、IL-27、MASP1单项诊断相比,三项联合对肝包虫病合并HBV感染的诊断价值较高(P<0.05).结论 TIM-3、IL-27、MASP1在肝包虫病合并HBV感染中表达升高,且与患者肝功能损伤程度相关,临床可根据其指标表达高低评估疾病.