目的:探究转胶蛋白(transgelin, TAGLN)在甲状腺乳头状癌(papillary thyroid carcinoma, PTC)发生发展中的作用及其可能的信号通路。方法:收集100例PTC组织及对应100例癌旁正常甲状腺组织，分别采用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)技术、Western印迹法和免疫组化分析PTC组织和癌旁正常甲状腺组织中TAGLN的表达水平。分别使用质粒和shRNA慢病毒载体过表达和敲减PTC细胞中的TAGLN，通过细胞增殖实验(cell counting kit-8, CCK-8)、细胞侵袭和迁移实验(Transwell)检测TAGLN对PTC细胞增殖、侵袭和迁移的影响。应用Western印迹法检测TAGLN对丝裂原活化蛋白激酶(mitogen-activated protein kinase, MAPK)/细胞外信号调节激酶(extracellular-signal regulating kinase, ERK)信号通路的影响。结果:RT-qPCR结果显示，PTC组织中的TAGLN mRNA表达与癌旁正常甲状腺组织无差异( P>0.05)；Western印迹结果显示，TAGLN蛋白在PTC组织中表达水平明显低于癌旁正常甲状腺组织( P<0.01)；免疫组化结果显示，在PTC组织中TAGLN的表达水平明显低于癌旁正常甲状腺组织。上调TAGLN的表达抑制PTC细胞的增殖、侵袭和迁移( P<0.01)，而下调TAGLN的表达促进PTC细胞的增殖、侵袭和迁移( P<0.01)。在PTC细胞中，过表达TAGLN可降低磷酸化ERK的表达( P<0.05)，而沉默TAGLN可增加磷酸化ERK的表达( P<0.01)。 结论:TAGLN在PTC中表达显著降低且与PTC的发生发展相关，其作用机制可能与MAPK/ERK信号通路有关。

形状记忆聚合物(SMP)是一种可编程的智能材料,它具有一定的初级形状,可按需求被塑形为相关的次级结构,经高于其形变阈值的刺激处理后,聚合物可恢复其初级结构.由次级结构转变为初级结构的过程称为形状记忆效应(SME).触发其SME的刺激包括温度、光激发、电磁感应、酸碱度和水溶液等.该文对SMP在脑卒中疾病中的应用进行综述,包括聚氨酯基SMP的动脉瘤闭塞效应、聚氨酯/镍钛诺复合型SMP应用于血管内机械取栓,以及负载干细胞的SMP支架在继发性脑损伤中的应用等.

目的 探索丝胶蛋白对胃癌MKN45细胞增殖活性的影响及作用机制.方法 用LC3双荧光自噬病毒转染胃癌MKN45细胞,用嘌呤霉素筛选LC3双荧光自噬病毒的MKN45稳转株.实验分为3组,空白对照组(Blank)、丝胶蛋白阳性组(Sericin)、丝胶蛋白加自噬抑制剂组(Sericin+3-MA).培育48 h后用cck-8试剂测定细胞增殖活性,根据所测数据得出丝胶蛋白半数致死浓度IC50,按此浓度处理细胞并培育48h,用流式细胞仪分别检测凋亡、周期,电镜检测细胞自噬,Western blotting检测LC3、p62、Beclin蛋白表达.将种植胃癌的裸鼠分为2组,即对照组(Saline)、丝胶蛋白阳性组(Sericin),每组5只;分别注射生理盐水和丝胶蛋白,测量肿瘤体积和质量.结果 丝胶蛋白阳性组(Sericin)与空白对照组(Blank)相比,MKN45细胞增殖活性明显受到抑制,且细胞凋亡增加(P<0.01),细胞阻滞于G2/M期(P<0.01).相对于空白组,丝胶蛋白处理后细胞在电镜观察到自噬小体明显增多;Western blotting检测到LC3-2表达上调,Beclin表达增加,p62表达逐渐下调;丝胶蛋白加自噬抑制剂组(Sericin+3-MA)实验结果则介于两者之间.动物实验中,丝胶蛋白阳性组(Sericin)与对照组(Saline)相比,肿瘤体积和质量有显著下降.结论 丝胶蛋白可通过调控胃癌MKN45细胞自噬影响细胞增殖活性.

目的 研究自发性高血压大鼠(spontaneously hypertensive rats,SHR)左心室肥厚心肌组织的蛋白质变化.方法 对8只SHR与8只WKY大鼠组织蛋白质进行iTRAQ检测分析;通过对差异蛋白Pathway富集分析选择与通路相关的蛋白质.结果 筛选出与通路相关的40个差异蛋白,SHR与WKY比较上调的差异蛋白有:1主要组织相容性复合物、2血小板活化因子乙酰水解酶、3有丝分裂原蛋白激酶、4热休克27kDa蛋白、5 Ighg3、6 14-3-3γ/蛋白、7纤维蛋白原、8蛋白酶体26S、9纤维蛋白原γ链、10中性胆固醇酯水解酶、11溶血PAF乙酰转移酶、12纤连蛋白.下调的差异蛋白有:13丝氨酸蛋白酶、14载脂蛋白H、15血清锌α2糖蛋白、16泛醌9、17泛醌7、18α2-AP、19激肽原、20肝素2、21未知蛋白、22钠钾ATP转移酶、23胶原蛋白、24集聚蛋白、25对羟基苯丙酮酸双氧化酶、26C反应蛋白、27整合素、28凝血因子Ⅻ、29胎球蛋白、30整合素α7、31碳酸酐酶、32CD36、33免疫球蛋白重链γ多肽、34转胶蛋白、35血红蛋白-α.结论 SHR左心室肥厚发生涉及心肌凋亡、细胞增殖增生、炎症等多种细胞因子,导致细胞损伤与保护作用失衡.

三种丝胶通过DPPH自由基的清除率来体现它们的抗氧化活性大小,同时以VC和VE作为对照.结果 表明,三种丝胶的抗氧化能力大小为绿茧＞白茧＞黄茧,IC50值分别为3.38 g/L、5.39 g/L、6.28 g/L,相比较VC与VE,它们都具有明显的抗氧化能力.

目的 探讨丝胶蛋白对2型糖尿病模型大鼠肾脏细胞外信号调节激酶(ERK)表达的影响.方法 36只健康成年雄性SD大鼠随机均分为正常对照组、模型组和丝胶蛋白组.腹腔注射小剂量链脲佐菌素建立2型糖尿病大鼠模型;成功建模后,丝胶蛋白组大鼠给予丝胶〔2.4 g/(kg·d)〕灌胃用药35 d.检测各组大鼠血糖、24 h尿蛋白、血尿素氮和血肌酐含量;分别采用免疫印迹法和逆转录PCR法检测肾脏ERK蛋白和mRNA的表达情况.结果 与正常对照组比较,模型组空腹血糖、24 h尿蛋白、血尿素氮、血肌酐和肾脏ERK的表达明显升高(P<0.05);与模型组比较,丝胶蛋白组空腹血糖、24 h尿蛋白、血尿素氮、血肌酐和肾脏ERK的表达明显降低,差异有统计学意义(P<0.05).结论 丝胶可能通过降低血糖影响肾脏ERK的激活,从而改善糖尿病肾脏损害.

目的:探讨缫丝水对高脂模型大鼠的降血脂作用.方法:取50只SD大鼠,随机分为两组,其中一组10只大鼠作为阴性对照组给予基础饲料喂养,另一组40只大鼠给予高脂饲料喂养,复制高脂血症模型.2周后测定血清总胆固醇(TC)水平,将模型复制成功的大鼠分为高脂模型对照组、缫丝水高剂量组(500mg/kg)、中剂量组(250 mg/kg)和低剂量组(125mg/kg),均给予高脂饲料喂养.连续灌胃30 d后,检测各组大鼠血清TC、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)和低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)的水平.结果:缫丝水高、中、低剂量组大鼠HDL-C含量、体重及增重量与高脂模型对照组比较,差异均无统计学意义(均P＞0.05);缫丝水高、中、低剂量组血清TC含量低于高脂模型对照组,缫丝水高剂量组血清TG和LDL-C含量均低于高脂模型对照组(P＜0.05或P＜0.01).结论:缫丝水具有降低高脂模型大鼠血脂水平的作用.

目前二甲基亚砜联用胎牛血清是冻存细胞常用的保护剂,但是二甲基亚砜对细胞具有毒性损伤,胎牛血清存在携带病毒、感染疾病的风险.蚕丝蛋白是一种天然的高分子纤维蛋白,具有良好的生物相容性和亲水性.本文将蚕丝蛋白用于低温保护中,探究其作为低温保护剂的机制.使用差示扫描量热法计算蚕丝蛋白的热滞活性,得出10 mg/mL的丝胶蛋白的热滞活性为0.96℃,10％丝素蛋白的热滞活性为1.15℃.使用低温显微镜观察蚕丝蛋白-磷酸盐缓冲液混合溶液的重结晶现象,发现在-7℃的停滞温度下,孵育40 min后,丝胶和丝素蛋白平均晶粒尺寸分别为磷酸盐缓冲液的28.99％、3.18％,说明丝胶蛋白和丝素蛋白具有一定的抑制冰晶重结晶的效应.利用傅里叶变换红外光谱技术分析蚕丝蛋白的基团和二级结构,并定量得到蚕丝蛋白的二级结构含量,其中丝胶蛋白二级结构中无规卷曲含量为75.62％,β-折叠结构含量为24.38％;丝素蛋白二级结构中β-折叠结构含量为56.68％,无规卷曲结构含量为22.38％,α-螺旋结构含量为16.84％.以上分析论证了蚕丝蛋白作为保护剂的可行性,为今后低温保护剂的选择提供新的思路.

目的 研究复方钩藤降压片干预自发性高血压大鼠(SHR)心肌组织蛋白质变化及高血压左心室肥厚潜在机制.方法 将16只SHR分为2组后,治疗组予以复方钩藤降压片灌胃干预,对照组予以蒸馏水灌胃,干预12周后采取大鼠心肌组织蛋白质进行同位素标记相对和绝对定量(iTRAQ)检测分析.通过对富集Pathway分析,得到差异蛋白及通路,并将得到的差异蛋白利用STRING数据库绘制差异蛋白功能联系.结果 差异蛋白富集Pathway分析提示存在11条通路.差异蛋白中上调蛋白6种,分别为:转胶蛋白、碳酸酐酶3、S期激酶相关蛋白1、C反应蛋白、纤维蛋白5、C-1-四氢叶酸合成酶;下调蛋白12种,分别为:谷胱甘肽S-转移酶、Ighg3蛋白、组氨酸三联核苷酸结合蛋白2、60S核糖体蛋白L4、40S核糖体蛋白S6、60S核糖体蛋白L13、14-3-3蛋白、LOC100911337蛋白、谷胱甘肽过氧化物酶1、丝氨酸羟甲基转移酶、蛋白激酶B、泛素-40S核糖体蛋白S27A.在string绘制的关系网中:60S核糖体蛋白L4、40S核糖体蛋白S6、60S核糖体蛋白L13、泛素-40S核糖体蛋白S27A之间关系最为密切.结论 复方钩藤降压片对高血压左心室肥厚的干预主要与改善血供、优化能量代谢、抑制心肌细胞的异常生长、增加血管和心脏的纤维蛋白密切相关;高血压左心室肥厚的发生可能与核糖体蛋白有关.

目的 探讨丝胶蛋白(彩色蚕茧水提物)对2型糖尿病大鼠肾脏氧化应激损伤和磷脂酰肌醇-3-激酶(PI3K)/蛋白激酶B(Akt)信号通路的影响.方法 48只SD大鼠随机均分为四组各12只,正常对照组、2型糖尿病模型组、丝胶低剂量灌胃组、丝胶高剂量灌胃组.采用高脂高糖饲料饲养+链脲佐菌素(35 mg/kg,2次)腹腔注射的方法建模,成模标准是空腹血糖≥11.1 mmol/L.待建模成功后,丝胶低〔1.8 g/(kg·d)〕、高〔2.4 g(kg·d)〕剂量组大鼠分别给予不同剂量丝胶连续灌胃35 d.分别检测各组大鼠血糖,血尿素氮和肌酐水平;分别检测各组大鼠肾脏超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)、总一氧化氮合酶(tNOS)、过氧化氢(H2O2)的水平;采用Real Time Q-PCR法分别检测各组大鼠肾脏PI3K、Akt mRNA的表达.结果 丝胶低、高剂量组大鼠肾脏SOD、CAT水平及肾脏PI3K、Akt mRNA的表达明显高于模型组(P<0.01,P<0.05);血糖,血尿素氮和肌酐水平及肾脏tNOS、H2O2水平明显低于对照组(P<0.01).并且,丝胶高剂量组大鼠肾脏CAT水平、PI3K mRNA的表达明显高于低剂量组,血尿素氮和肾脏H2O2水平明显低于低剂量组(P<0.01).结论 丝胶蛋白对2型糖尿病时肾脏损伤具有保护作用,其机制可能与丝胶蛋白能抑制肾脏氧化应激损伤和激活PI3K/Akt信号通路有关.