人类生殖细胞低温冷冻作为生育力保存的一种方式，在辅助生殖技术（assisted reproductive technology，ART）发展中起着重要作用，目前该技术已成为生殖医学领域的研究热点之一，并在辅助生殖实践中得到越来越广泛的应用。为提高ART的成功率，冷冻保存技术在发展中不断改进，尤其是冷冻策略的选择和冷冻保护剂的改良与优化。冷冻保存技术适用于行ART治疗或是因疾病导致的生育力下降而进行的卵母细胞、精子、胚胎冷冻保存的群体，也适用于癌症患者为保存生育力而进行的卵巢及睾丸组织冷冻保存。然而，不同的冷冻方法对于不同生殖细胞类型的冷冻效果并不一致，且目前不同生殖细胞冷冻效果的评价尚缺乏合理有效的标准。本文综述了人类生殖细胞低温冷冻保存技术的发展现状及应用，并探讨了低温保存未来的发展方向。

新生儿缺氧缺血性脑病过去二十年经历了前亚低温支持治疗时代，作为唯一有效的治疗措施，现已从标准亚低温时代演变为后亚低温治疗时代。后亚低温时代新生儿缺氧缺血性脑病治疗以优化亚低温治疗目标患儿的选择和优化现有低温治疗方法为目标；同时为进一步降低中、重度缺氧缺血性脑病患儿的死亡和伤残率，应开展亚低温叠加新的有潜质神经保护剂的深入研究。

病毒是一种只含有一种核酸和蛋白质外壳的结构简单的非细胞结构微生物。随着分子生物学的发展，作为重要生物资源，微生物菌(毒)种的保藏价值逐渐得到人们的关注。相对于容易污染微生物的传代法和容易失活的干燥法，低温保藏作为一种便宜、简单、省时的方法，已广泛应用于微生物的保藏当中。但是关于病毒低温保藏的现有研究较少且不深入。基于此，本文根据病毒侵染特定细胞的特性，将病毒分为动物病毒、植物病毒和细菌病毒(噬菌体)，综述保藏温度、低温保护剂以及其它因素对不同种类病毒的低温保藏效果的影响，分析其病毒保藏技术问题及发展趋势，为进一步完善微生物低温保藏的现状研究提供参考。

肝移植是目前治疗终末期肝病唯一有效的方法。移植前供肝的保存至关重要，传统的静态冷藏和机械灌注均受保存时间的限制，以至于供肝的分配空间有限，不可避免地造成部分供肝的废弃。在保证供肝质量的同时，寻找更长的有效保存供肝的技术，是所有肝移植科医师共同努力的方向。最近报道的一种超低温肝脏保存技术可以增加肝脏保存时间，利用冷冻保护剂将肝脏在-6 ℃下保存3~4 d，之后经过亚常温机械灌注复苏供肝后进行肝移植。该技术在供肝保存方面取得了革命性突破，可能为供肝保存研究开拓出新的领域。但超低温肝脏保存技术目前仅处于实验阶段，将其应用于临床实践还有待进一步深入探究。

在卵母细胞低温保存过程中，冷冻保护剂的高毒性及其高渗透性，常造成卵母细胞内的氧化-抗氧化系统失衡，特别是细胞内活性氧含量的增加。褪黑素作为一种有效的抗氧化剂及自由基清除剂，能通过影响能量代谢和细胞信号转导，显著降低卵细胞内活性氧水平，保护线粒体功能，同时也发挥清除细胞内自由基的作用，实现冻融过程中抑制细胞内氧化应激水平，进而减轻卵母细胞在冷冻保存过程中的低温损伤，最终提高冷冻卵子的囊胚形成率及胚胎移植后的临床妊娠率。褪黑素应用于卵母细胞冷冻对于女性生育力保存研究具有积极意义。本文就褪黑素在卵母细胞冷冻过程中的进展进行综述。

细胞冷冻保存应用广泛，但冷冻会损伤细胞导致代谢紊乱，而冷冻保护剂可缓解该过程。脯氨酸是一种渗透性冷冻保护剂，可快速透过细胞膜进入细胞内，与细胞内水氢键结合抑制低温下冰晶形成，同时可与细胞内水结合减少细胞内水流失，保护细胞内蛋白质的结构和功能，保护细胞膜。脯氨酸可提高植物、动物及人类体细胞冷冻复苏后存活率。在生殖细胞冷冻中，研究表明脯氨酸可用于卵母细胞冷冻，可提高小鼠卵母细胞冷冻后存活率及保护线粒体功能，但其对于精子的冷冻效果报道尚不一致。脯氨酸冷冻保护剂涉及多种细胞类型且冷冻效果较强，其未来可能更广泛应用于低温生物学领域。本文总结了脯氨酸作为天然小分子冷冻保护剂的应用研究进展，希望能够帮助人们更好地了解生殖细胞冻存的低温生物学机制，为改良生育力冷冻保存技术提供参考。

新生儿缺氧缺血性脑病(hypoxic-ischemic encephalopathy，HIE)是新生儿病房中的危重症之一，可导致新生儿死亡或远期遗留严重的神经系统后遗症。亚低温治疗是目前公认的治疗方法，虽然其在一定程度上能降低中重度HIE新生儿的病死率和神经系统后遗症的风险，但仍有部分患儿死亡或留有神经功能障碍。神经保护剂在抗兴奋毒性、抗氧化、抗炎和抗凋亡等方面发挥作用。本文就亚低温与神经保护剂联合治疗新生儿HIE的研究进展进行综述。

目前临床上应用最广泛的肝脏保存方式为静态低温保存技术，理论上仅可保存肝脏12 h。随着静态低温保存时间的延长，肝脏的活性会逐步下降。这限制了器官的运输和匹配。超低温(不结冰)保存联合亚常温机械灌注技术可以显著延长大鼠肝脏的有效保存时间长达3～4 d。这对保证肝脏的公平分配，降低肝脏的废弃率，具有极大的现实意义和临床价值。本文综述了超低温联合亚常温机械灌注保存肝脏实验技术研究进展。

卵巢组织冻存与移植技术不仅保护女性生育力,还可保存卵巢内分泌功能,有效防治医源性早发性卵巢功能不全,尤其适用于青春期前女童与亟需原发病治疗的女性.卵巢组织冻存的有效性与安全性已得到了广泛验证,目前的临床金标准为慢速冻存,而玻璃化冻存仅适用于研究.尽管该技术近年来发展迅速,但仍面临超低温冻存损伤、冷冻保护剂毒性、卵泡储备量的评估、冻存与移植的安全性等问题.本文针对以上问题的研究进展进行综述.

目的 以人血浆中的纤维蛋白原为研究对象,探索真空冷冻干燥过程中如何优选保护剂,并对冻干品进行评价,从而通过正交试验法建立一种高效的保护剂筛选方法.方法 通过初筛选取出甘露醇、甘氨酸和叠氮钠,分别按照正交试验法以高低浓度组合添加到血浆中冻干.采用极差分析法和方差分析法确定各保护剂的主次关系及最终浓度.同时对冻干品进行无菌评价、质量评价、均匀性和稳定性进行评价,以验证所选保护剂的适用性.结果 采用正交试验并绘制二元图发现甘露醇与叠氮钠之间存在交互作用.利用优于极差法的方差分析法并确定甘露醇与叠氮钠的交互作用和叠氮钠二者为主要因素,其余为次要因素.保护剂最佳组合为:甘露醇5％、甘氨酸0.5％、叠氮钠0.1％.评价冻干品无菌性、外观、含水量、复溶性均符合要求;冻干品均匀,CV瓶间为2.7％,复溶后8h内稳定,2～8℃低温冷藏可保持运输14d内稳定,-20℃冷冻可保持6个月稳定.结论 正交试验法能够在多因素冻干保护剂选择中高效精准地筛选出最佳组合,具有广泛的应用价值.