目的 探讨一种新型溴结构域和超末端结构域(BET)小分子抑制剂ABBV-744在干预心力衰竭小鼠心脏纤维化中的作用.方法 将24只8～10周龄雄性C57BL/6J小鼠随机分为假手术组、模型组、JQ1干预组和ABBV-744干预组,每组6只.假手术组不建立心力衰竭模型,其余3组小鼠行主动脉缩窄术(TAC)构建心力衰竭模型,通过检测主动脉弓流速确定造模成功.在TAC术后18 d开始2个干预组小鼠分别进行JQ1腹腔注射和ABBV-744灌胃,1次/d,连续给药30 d.给药结束后,采用超声心动图检测小鼠心功能情况;心脏相关指数分析小鼠心脏肥大情况;苏木精-伊红(HE)染色分析小鼠心脏以及肾脏组织炎症细胞浸润情况;天狼星红染色评估小鼠心脏组织纤维化程度;蛋白质印迹法和荧光定量聚合酶链反应验证小鼠心脏组织α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、α1-Ⅰ型胶原(COL1A1)、α1-Ⅲ型胶原(COL3A1)表达情况;取血浆检测天冬氨酸转氨酶(AST)、总胆红素、血肌酐、血尿素氮指标评估药物对肝肾功能的影响.结果 超声心动图显示与模型组比较,ABBV-744干预组小鼠的左心室射血分数和左心室短轴缩短率均显著升高[(55±4)％比(45±4)％、(28.0±2.6)％比(22.4±2.4)％],左心室收缩末期内径和左心室舒张末期内径均显著降低(P＜0.05或P＜0.01).与模型组比较,ABBV-744干预组小鼠心脏重量与体重比值、心脏重量与胫骨长度比值均明显减小(P＜0.05或P＜0.001).HE染色表明ABBV-744减轻了心脏微血管的炎症细胞浸润;天狼星红染色表明ABBV-744能够减轻TAC后心力衰竭的胶原沉积,减轻心脏纤维化.与模型组比较,ABBV-744干预组α-SMA蛋白和COL1 A1、COL3A1 mRNA表达均明显下调(P＜0.05或P＜0.01).小鼠肾脏HE染色和血浆生化检测提示与JQ1相比,ABBV-744对小鼠肝肾损伤更轻.结论 ABBV-744能有效改善TAC小鼠心力衰竭并减轻心脏纤维化,可能与抑制成纤维细胞激活蛋白相关,与JQ1相比对肝肾功能影响更小.

目的:探讨N 6-甲基腺嘌呤（N 6-methyladenosine，m 6A）甲基转移酶3（methyltransferase- like 3，METTL3）调控凋亡相关蛋白在慢性肾脏病（chronic kidney disease，CKD）血管钙化中的作用机制。 方法:（1）临床试验：实时荧光定量PCR法检测维持性血液透析（maintenance hemodialysis，MHD）患者血清METTL3 mRNA水平。（2）细胞实验：Western印迹法检测高磷刺激的血管平滑肌细胞（vascular smooth muscle cells，VSMCs）中METTL3蛋白表达，免疫荧光双染法观察METTL3与Runt相关转录因子2（Runt-related transcription factor 2，Runx2）的分布。构建METTL3过表达和敲低质粒，分别转染VSMCs，茜素红染色检测钙化情况，Western印迹法检测成骨标志物Runx2、骨形态发生蛋白2（bone morphogenetic protein-2，BMP-2）、Ⅰ型胶原（collagen Ⅰ）和凋亡相关蛋白Bax、Bcl-2表达。（3）动物实验：30只SD大鼠被随机分为对照组、CKD血管钙化组、S-腺苷高半胱氨酸（S-adenosylhomocysteine，SAH）干预组，硝酸银染色评估胸主动脉钙化情况，免疫组化及Western印迹法检测Runx2、Bax、Bcl-2蛋白表达。结果:（1）MHD血管钙化患者血清中METTL3 mRNA水平明显低于无钙化患者（ P<0.05），且与冠状动脉钙化积分呈负相关（ r=-0.65， P<0.001）。（2）高磷刺激的VSMCs中METTL3蛋白表达降低，并呈现时间依赖性。免疫荧光双染发现METTL3与Runx2共表达于细胞核。在高磷处理的VSMCs中过表达METTL3后Runx2、BMP-2、Collagen I表达明显降低，并伴有钙化结节减少，且凋亡蛋白Bax/Bcl-2比值降低（均 P<0.05）。反之，敲低METTL3通过诱导凋亡加重VSMCs钙化。（3）进一步在体内模型中给予METTL3抑制剂SAH，发现抑制METTL3表达可显著增加大鼠胸主动脉钙化，且Bax/Bcl-2比值、Runx2表达上调。 结论:MHD血管钙化患者血清METTL3水平降低，体内外实验证实METTL3可通过介导凋亡相关蛋白Bax /Bcl-2抑制CKD血管钙化。

目的:建立一种更加符合腹主动脉瘤(AAA)演变过程的动脉瘤模型。方法:选择体重为2 kg的16只新西兰兔，对其进行编号，并采取随机数字表法将16只兔分为实验组和对照组，每组各8只。实验组采用"左侧肾动脉狭窄"联合木瓜蛋白酶局部湿敷的方法建模，对照组采用局部生理盐水湿敷。术后分别在第2周和第4周对两组新西兰兔进行彩色多普勒超声检查，测量湿敷段主动脉直径的变化。处死新西兰兔后，对第2周和第4周的主动脉标本进行苏木精-伊红(HE)、Verhoeff’s Van Gieson(EVG)染色、Masson、转位蛋白(TSPO)和波形蛋白(Vimentin)染色，以及TSPO、Vimentin、α-平滑肌动蛋白(α-SMA)/成纤维细胞活化蛋白(FAP)的免疫荧光染色。利用SPSS和Image J软件对所得数据进行统计学分析。计数资料以频数(%)表示，计量资料以均数±标准差表示，以 P<0.05为差异有统计学意义。 结果:超声检查显示，实验组的腹主动脉直径随造模进程持续增加，与对照组比较，差异有统计学意义[(0.54±0.05) cm比(0.28±0.02) cm， Z＝－2.6， P<0.01]。此外，第4周实验组的动脉直径明显高于第2周实验组[(0.54±0.05) cm比(0.41±0.03) cm， Z＝－2.9， P<0.01]。免疫组织化学结果显示，实验组的动脉瘤壁比较对照组，具有弹力纤维断裂、中膜增厚及外膜胶原纤维沉积等表型。第4周实验组的动脉壁与第2周实验组比较，病变程度加重，相反动脉壁活化巨噬细胞浸润程度下降，且FAP ＋/α-SMA ＋的肌成纤维细胞表达明显增高，反映了在动脉瘤进展过程中血管平滑肌细胞的表型转化现象。 结论:采用"左侧肾动脉狭窄"联合木瓜蛋白酶局部湿敷的方法可以成功构建更符合人AAA演变的模型。

主动脉夹层是指主动脉内膜撕裂，血液经内膜撕裂口进入主动脉壁造成正常主动脉壁分离，形成真假腔的一种凶险的心血管疾病。常见于中老年人群，尽管发病率低，但发病突然，且病死率极高。主动脉夹层的诱因错综复杂，发病机制尚未完全明确，主要与主动脉壁结构异常、血管壁炎症反应和血流动力学有关。该文重点整理了炎性细胞和主动脉固有细胞在主动脉夹层发生发展过程中的作用，为该疾病的治疗提供新思路。

腹主动脉瘤(AAA)是指腹主动脉永久性、局限性的扩张，是血管外科常见的血管退化性疾病。除手术外，目前尚无有效的药物。腹主动脉瘤的主要病理表现为管壁炎性细胞浸润、平滑肌细胞凋亡及弹力蛋白降解。本文从慢性炎症、平滑肌细胞凋亡、细胞外基质降解三个方面综述AAA的发病机制，为临床干预和药物治疗提供指导。

目的:探讨miRNA-205在慢性肾脏病（chronic kidney disease，CKD）患者血管钙化中的作用及诊断价值。方法:该研究分为体外细胞实验和回顾性队列研究。采用大鼠胸主动脉平滑肌细胞进行体外实验，茜素红染色法、钙含量检测血管平滑肌细胞（vascular smooth muscle cells，VSMCs）的钙化情况，碱性磷酸酶检测试剂盒测定碱性磷酸酶活性，Western印迹检测VSMCs成骨转录因子Runt相关转录因子2（Runt-related transcription factor 2，Runx2）、α平滑肌肌动蛋白（α-SMA）及平滑肌22α蛋白（smooth muscle 22α，SM-22α）的蛋白表达水平，实时荧光定量PCR检测VSMCs中miRNA-205和Runx2的表达含量。双荧光素酶报告基因实验验证miRNA-205与Runx2的靶向关系。回顾性选择2020年6月至2021年1月河北医科大学第四医院肾内科的CKD 3～5期非透析患者，并按照冠状动脉钙化积分（coronary artery calcium score，CACs）将患者分为无钙化组（CACs=0）、轻中度钙化组（0400）。采用Spearman相关分析法评价血清miRNA-205、Runx2与CKD患者血管钙化的相关性，Logistic回归模型及受试者工作特征曲线分析miRNA-205预测CKD患者血管钙化的价值。结果:（1）与对照组相比，高磷组VSMCs钙结节较多，钙含量、碱性磷酸酶活性、Runx2蛋白表达均显著较高，α-SMA、SM-22α蛋白及miRNA-205表达水平均较低（均 P<0.05）。过表达miRNA-205时，VSMCs钙化减轻，α-SMA和SM22α蛋白表达水平均升高，Runx2蛋白表达水平降低（均 P<0.05）。双荧光素酶报告基因实验结果显示，miRNA-205-5p过表达后野生型Runx2 3’端非编码区质粒荧光素酶活性降低。（2）纳入CKD患者80例，年龄（57.50±14.93）岁，其中男性49例（61.3%）。无钙化组（ n=26）、轻中度钙化组（ n=30）和重度钙化组（ n=24）患者miRNA-205和Runx2表达水平比较结果显示，钙化程度越高，miRNA-205表达水平越低，Runx2 mRNA表达水平越高（均 P<0.05）。血清miRNA-205与CACs呈负相关（ r=-0.50， P<0.01），Runx2与CACs呈正相关（ r=0.55， P<0.01）。多因素Logistic回归分析结果显示，miRNA-205（ OR=0.451，95% CI 0.122～0.873）是CKD患者发生血管钙化的独立影响因素。miRNA-205和miRNA-205联合Runx2预测血管钙化的受试者工作特征曲线下面积分别为0.796（95% CI 0.697～0.859）和0.924（95% CI 0.866～0.982）。 结论:miRNA-205通过靶向Runx2负向调控VSMCs成骨样表型转化进而抑制血管钙化，有望成为早期诊断CKD患者血管钙化的生物标志物。

血管平滑肌细胞(vascular smooth muscle cell，VSMC)的增殖、迁移和表型转换是多种心血管疾病，尤其是主动脉疾病发生发展的核心环节。血小板衍生生长因子(platelet derived growth factor，PDGF)是一类从损伤血管释放的强效有丝分裂原，其中PDGF-BB是诱导血管平滑肌细胞表型转换的开关之一，但其中具体的分子机制尚不清晰，本文就PDGF-BB诱导主动脉平滑肌细胞表型转换的可能机制进行归纳总结。

目的:探讨Ang Ⅱ诱导内皮细胞来源外泌体(VECs-AngⅡ exos)在小鼠腹主动脉瘤(AAA)发生发展的作用。方法:使用8周龄雄性敲除Apoe小鼠皮下埋泵构建血管紧张素Ⅱ(Ang Ⅱ)诱导的腹主动脉瘤模型。提取并鉴定健康内皮细胞来源外泌体(VECs-exos)及Ang Ⅱ诱导内皮细胞来源外泌体(VECs-AngⅡ exos)，使用收集的外泌体(20 μg/ml)处理小鼠原代血管平滑肌细胞(VSMCs)。VECs-exos及VECs-AngⅡ exos每周尾静脉注射至腹主动脉瘤模型小鼠体内，4周后获取小鼠动脉瘤组织行苏木精-伊红(HE)、EVG和马松(Masson)染色观察腹主动脉形态改变、弹性纤维断裂和胶原沉积。蛋白质印迹法(Western blot)检测小鼠动脉组织收缩型标志物α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、SM22α和CNN表达。采用 t检验分析数据统计学差异。 结果:小鼠实验组动脉瘤发生率[(80.670±4.842)%， t＝16.66， P<0.01]、最大主动脉直径[(0.554 3±0.096 2) mm， t＝5.759， P<0.01)及主动脉质量比[(0.560 0±0.106 0) mg/g， t＝5.285， P<0.01)高于对照组。VECs-AngⅡ exos刺激VSMCs后α-SMA(0.608 4±0.056 6， t＝10.76， P<0.01)、SM22α(0.465 6±0.076 6， t＝6.082， P<0.01)、CNN(0.490 8±0.161 5， t＝3.039， P<0.01)表达低于VECs-exos组。尾静脉注射VECs-AngⅡ exos组小鼠动脉瘤发生率[(48.330±6.839)%， t＝7.067， P<0.01]，最大主动脉直径[(0.527 1±0.138 6) mm， t＝3.803， P<0.01]及主动脉质量比[(0.557 1±0.138 9) mg/g， t＝4.012， P<0.01]高于VECs-exos组。尾静脉注射VECs-AngⅡ exos组小鼠主动脉组织中α-SMA(0.719 1±0.141 0， t＝5.101， P<0.01)、SM22α(0.578 2±0.101 8， t＝5.677， P<0.01)、CNN(－0.520 2±0.068 8， t＝7.564， P<0.01)表达低于VECs-exos组。 结论:Ang Ⅱ诱导内皮细胞来源的外泌体介导血管平滑肌细胞表型转换参与腹主动脉瘤发生发展。

目的:探讨FERM、ARH/RhoGEF和pleckstrin结构域蛋白1(Farp1)在胸主动脉夹层中的表达及作用。方法:胸主动脉夹层(TAD)组织来源于2022年12月至2023年3月在武汉大学中南医院因Stanford A型主动脉夹层行外科手术的患者，收集心脏移植供体残余的胸主动脉作为对照(CRTL)组。通过蛋白质印迹法(Western blot)和免疫组织化学检测TAD与CRTL组胸主动脉组织中Farp1的表达水平；3周龄雄性C57BL/6J小鼠喂养0.25%的β-氨基丙腈酯(BAPN)4周构建胸主动脉夹层模型，检测指标及方法同人胸主动脉组织；血管紧张素Ⅱ(AngⅡ，1×10 －7 mol/L)刺激原代大鼠胸主动脉平滑肌细胞(RAVSMCs)24 h模拟胸主动脉夹层，构建Ad-sh-Farp1敲低腺病毒干扰RAVSMCs中Farp1的表达，通过Western blot检测RAVSMCs中收缩表型蛋白标志物。采用非配对 t检验进行统计学分析。 结果:Western blot(1.723±0.084， t＝5.667， P<0.05)及免疫组织化学染色(3.507±0.232， t＝4.393， P<0.05)结果显示人TAD组织中Farp1的蛋白水平高于对照组；小鼠主动脉夹层组织Western blot(1.304±0.042， t＝2.996， P<0.05)和免疫组织化学染色(0.458±0.030， t＝4.060， P<0.05)显示了相同结果，且免疫组织化学染色进一步提示Farp1蛋白水平改变主要发生于主动脉中层(平滑肌)；细胞实验显示AngⅡ促进RAVSMCs中Farp1蛋白表达上调(1.469±0.115， t＝3.912， P<0.05)，敲低Farp1抑制了RAVSMCs表型转换[α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)：1.762±0.202， t＝3.123， P<0.05；CNN1：1.615±0.101， t＝5.288， P<0.05；SM22α：1.618±0.135， t＝2.964， P<0.05]。 结论:Farp1与主动脉平滑肌细胞表型转换明显相关，Farp1蛋白水平增高可能促进胸主动脉夹层的发生发展。

目的:探究自噬在紫杉醇(PTX)抑制血管平滑肌细胞增殖和迁移中的作用及机制。方法:使用紫杉醇作用人主动脉平滑肌细胞(HASMCs)，采用细胞计数盒(CCK-8)法和5-乙炔-2’-脱氧尿苷(EdU)掺入法检测紫杉醇对HASMCs的增殖能力的影响，采用划痕实验检测紫杉醇对HASMCs迁移能力的影响，蛋白质印迹法(Western blot)及利用GFP-RFP-LC3Ⅱ-HASMCs观察PTX对自噬关键蛋白LC3Ⅱ表达水平的影响；利用自噬相关蛋白7(ATG7)小干扰RNA转染HASMCs，抑制自噬水平，检测PTX对HASMCs增殖及迁移能力的作用。两组间比较采用 t检验。 结果:在紫杉醇作用下，其细胞活性在2.5 nmol/L组(0.669 ±0.010， t＝17.620， P<0.01)及5 nmol/L组(0.535±0.012， t＝22.300， P<0.01)时明显低于对照组(1.008±0.018)；Edu阳性细胞率在2.5 nmol/L组(0.356±0.016， t＝14.380， P<0.005)与5 nmol/L组(0.293±0.018， t＝16.560， P<0.01)明显低于对照组(0.657±0.013)；划痕愈合率在2.5 nmol/L组(0.096±0.012， t＝8.367, P<0.01)与5 nmol/L组(0.065±0.008， t＝11.900， P<0.01)明显低于对照组(0.238±0.012)。相较于对照组，2.5 nmol/L及5 nmol/L浓度下PTX处理的GFP-RFP-LC3Ⅱ-HASMCs点状荧光颗粒表达明显增加，电镜下观察到自噬囊泡明显增多。自噬蛋白LC3Ⅱ表达水平在PTX 2.5 nmol/L组(1.454±0.102， t＝3.656, P<0.05)与5 nmol/L组中(1.770±0.075， t＝7.604, P<0.005)明显高于对照组(1.014±0.065)；P62蛋白表达水平在2.5 nmol/L组(0.884±0.028， t＝3.086, P<0.05)与5 nmol/L组(0.791± 0.054， t＝3.680， P<0.05)明显低于对照组(1.111 ±0.068)。抑制自噬关键基因ATG7表达后，低表达ATG7的HASMCs在PTX 2.5 nmol/L组(1.117±0.017)及5 nmol/L(0.969± 0.020)组细胞活性明显高于正常表达ATG7的HASMCs 2.5 nmol/L组(0.722±0.010， t＝19.720， P<0.01)及5 nmol/L组(0.651± 0.013， t＝13.230， P<0.01)；低表达ATG7的HASMCs在PTX 2.5 nmol/L组(0.513±0.014)及5 nmol/L (0.466±0.025)中Edu阳性细胞率相较于正常表达ATG7的HASMCs 2.5 nmol/L组(0.353±0.012， t＝8.575， P<0.005)及5 nmol/L组(0.368±0.013， t＝3.610， P<0.05)明显增加；低表达ATG7的HASMCs在PTX 2.5 nmol/L组(0.129± 0.007)及5 nmol/L组(0.121± 0.017)划痕愈合率相较于正常表达ATG7的2.5 nmol/L组(0.096± 0.012， t＝2.429, P<0.05)及5 nmol/L组(0.065± 0.008， t＝2.943， P<0.05)明显增加。 结论:紫杉醇通过ATG7介导的自噬抑制HASMCs的增殖和迁移，可能是其抗心血管介入术后再狭窄的新机制。