目的:探讨微小RNA(miR)-29b-3p对大鼠膝骨关节炎模型的保护作用及其机制。方法:30只SD大鼠随机分为对照组、模型组和miR-29b-3p KD组，miR-29b-3p KD组大鼠经膝关节腔注射过表达miR-29b-3p沉默腺相关病毒，对照组和模型组经膝关节腔给予对照腺相关病毒。3组大鼠表达30 d后，模型组和miR-29b-3p KD组大鼠采用木瓜蛋白酶局部注射复制膝骨关节炎动物模型。建模4周后，采用荧光定量聚合酶链反应(PCR)分析膝关节miR-29b-3p表达水平；Mankin组织学评分和Pelletier评分分析关节炎病变程度；分析3组大鼠膝关节最大活动度；采用酶联免疫吸附实验分析白细胞介素(IL)-1β、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和转化生长因子-β1(TGF-β1)水平；采用免疫组织化学分析基质金属蛋白酶(MMP)-13和Ⅱ型胶原的表达水平。组间比较采用单因素方差分析。结果:miR-29b-3p KD组大鼠膝关节组织miR-29b-3p表达水平(0.76±0.11)明显低于模型组(2.09±0.15)，差异有统计学意义( t＝22.240， P<0.05)。miR-29b-3p KD组大鼠膝关节最大屈伸角度[(126.51±6.50)°]明显大于模型组[(102.53±5.33)°]，差异有统计学意义( t＝9.017， P<0.05)。miR-29b-3p KD组大鼠膝关节Pelletier评分[(2.36±0.24)分]明显低于模型组[(3.40±0.84)分]，差异有统计学意义( t＝5.196， P<0.05)，miR-29b-3p KD组大鼠膝关节Mankin评分[(2.50±0.85)分]明显低于模型组[(3.70±0.0.82)分]，差异有统计学意义( t＝3.207， P<0.05)。miR-29b-3p KD组大鼠膝关节滑膜液IL-1β和TNF-α水平[(82.62±8.76)、(51.43±5.61) ng/mg]明显低于模型组[(163.02±11.87)、(122.07±13.21) ng/mg]，差异有统计学意义( t＝17.250， P<0.05； t＝15.560， P<0.05)。miR-29b-3p KD组大鼠膝关节滑膜液TGF-β1水平[(55.44±5.91) ng/mg]明显高于模型组[(25.40±4.09) ng/mg]，差异有统计学意义( t＝13.230， P<0.05)。miR-29b-3pKD组大鼠膝关节胶原酶Ⅱ水平(50.12±4.17)明显高于模型组(33.43±3.61)，差异有统计学意义( t＝9.579， P<0.05)。miR-29b-3p KD组大鼠膝关节MMP-13水平(82.62±8.76)明显低于模型组(163.02±11.87)，差异有统计学意义( t＝17.250， P<0.05)。 结论:miR-29b-3p沉默可显著上调TGF-β1表达水平，进而对大鼠膝关节软骨具有修复与保护作用。

目的:建立一种更加符合腹主动脉瘤(AAA)演变过程的动脉瘤模型。方法:选择体重为2 kg的16只新西兰兔，对其进行编号，并采取随机数字表法将16只兔分为实验组和对照组，每组各8只。实验组采用"左侧肾动脉狭窄"联合木瓜蛋白酶局部湿敷的方法建模，对照组采用局部生理盐水湿敷。术后分别在第2周和第4周对两组新西兰兔进行彩色多普勒超声检查，测量湿敷段主动脉直径的变化。处死新西兰兔后，对第2周和第4周的主动脉标本进行苏木精-伊红(HE)、Verhoeff’s Van Gieson(EVG)染色、Masson、转位蛋白(TSPO)和波形蛋白(Vimentin)染色，以及TSPO、Vimentin、α-平滑肌动蛋白(α-SMA)/成纤维细胞活化蛋白(FAP)的免疫荧光染色。利用SPSS和Image J软件对所得数据进行统计学分析。计数资料以频数(%)表示，计量资料以均数±标准差表示，以 P<0.05为差异有统计学意义。 结果:超声检查显示，实验组的腹主动脉直径随造模进程持续增加，与对照组比较，差异有统计学意义[(0.54±0.05) cm比(0.28±0.02) cm， Z＝－2.6， P<0.01]。此外，第4周实验组的动脉直径明显高于第2周实验组[(0.54±0.05) cm比(0.41±0.03) cm， Z＝－2.9， P<0.01]。免疫组织化学结果显示，实验组的动脉瘤壁比较对照组，具有弹力纤维断裂、中膜增厚及外膜胶原纤维沉积等表型。第4周实验组的动脉壁与第2周实验组比较，病变程度加重，相反动脉壁活化巨噬细胞浸润程度下降，且FAP ＋/α-SMA ＋的肌成纤维细胞表达明显增高，反映了在动脉瘤进展过程中血管平滑肌细胞的表型转化现象。 结论:采用"左侧肾动脉狭窄"联合木瓜蛋白酶局部湿敷的方法可以成功构建更符合人AAA演变的模型。

目的:探讨了中药单体姜黄素缓解大鼠骨关节炎的分子机制。方法:30只SD大鼠随机数字表法分为对照组、关节炎组和姜黄素组，每组10只。关节炎组和姜黄素组大鼠采用木瓜蛋白酶局部注射复制骨关节炎动物模型。姜黄素组大鼠经关节腔注射姜黄素50 mg/kg，对照组和关节炎组经关节腔注射等体积生理盐水。连续治疗3周后进行后续研究。测定3组大鼠膝关节最大活动度和关节滑膜厚度；采用分光光度法测定3组大鼠滑膜上清中糖胺多糖的含量；采用Mankin组织学评分分析关节炎病变程度；采用酶联免疫吸附试验(ELISA)分析滑膜液炎性因子水平；采用马松染色分析膝关节胶原纤维含量。组间比较采用单因素方差分析。结果:姜黄素组大鼠膝关节最大屈伸角度[(136.87±6.42)°]明显小于关节炎组[(156.81±13.90)°]，差异有统计学意义( t＝4.714， P<0.05)。姜黄素组大鼠膝关节Mankin评分[(2.36±0.24)分]明显高于关节炎组[(1.50±0.29)分]，差异有统计学意义( t＝18.051， P<0.05)。姜黄素组大鼠膝关节糖胺聚糖水平[(501.90±26.92) ng/mg]明显高于关节炎组[(445.80±49.22) ng/mg]，差异有统计学意义( t＝3.162， P<0.05)。姜黄素组大鼠膝关节TNF-α和IL-1β水平[(143.33±20.58)、(41.20±5.98) ng/mg]明显低于关节炎组膝关节TNF-α和IL-1β水平[(255.28±51.48)、(101.03±14.21) ng/mg]，差异有统计学意义( t＝6.386、12.272， P<0.05)。姜黄素组膝关节p-p65蛋白表达水平(1.49±0.13)明显低于关节炎组膝关节p-p65蛋白表达水平(2.36±0.37)，差异有统计学意义( t＝7.063， P<0.05)。 结论:姜黄素可显著下调关节炎炎症水平，促进受损关节胶原纤维合成，缓解骨关节炎的症状。

目的:探讨臭氧水关节腔注射治疗膝关节骨关节炎（knee osteoarthritis，KOA）对关节软骨损伤的修复作用及其内在的修复机制。方法:将48只SPF级SD大鼠随机分为空白组、模型组、生理盐水对照组和臭氧水组共4组，每组各12只。除空白组外，余各组采用木瓜蛋白酶关节腔注射建立KOA模型。取关节软骨行HE染色确认造模成功后，臭氧水组和生理盐水组分别行臭氧水和生理盐水关节注射治疗，每周1次，连续3周，空白组和模型组则不进行干预。分别于治疗前、后行大鼠膝关节行为学评分、治疗后行关节软骨表面大体评分、软骨组织HE染色及改良Mankin评分、Western blot和Rt-PCR分别检测软骨NF-κBp65（P65）、IKKβ及IκBα的mRNA和蛋白表达。结果:与模型组和生理盐水组相比，治疗后臭氧水组大鼠的膝关节行为学评分显著降低（均 P<0.05）；与模型组和生理盐水对照组相比，臭氧水组大鼠关节软骨表面大体评分、改良的Mankin评分均显著降低（均 P<0.05）；与模型组和生理盐水组相比，臭氧水组大鼠软骨组织P65和IKKβ的mRNA和蛋白表达明显降低（均 P<0.05），IκBα的mRNA和蛋白表达均明显升高（均 P<0.05）。 结论:臭氧水关节腔注射治疗KOA能有效修复损伤的关节软骨，其修复机制可能是通过调控NF-κB信号通路而实现的。

目的:探索富血小板血浆(PRP)与软骨细胞力学信号转导通路的协同机制，并将该机制应用于PRP治疗大鼠软骨损伤的修复治疗。方法:体外实验部分，采用酶消法获取大鼠软骨细胞，给与PRP处理和(或)流体剪切力刺激(摇床每日3 h，40 r/min)，分组为对照组、PRP组、力学+PRP组、先力学后PRP组，通过实时定量反转录聚合酶链反应(RT-qPCR)法检测Ⅱ型胶原、蛋白聚糖及整合素(Integrin β2)的mRNA表达。体内实验部分，大鼠经木瓜蛋白酶注射后建立膝关节炎/软骨损伤模型，分为对照组(制动+注射生理盐水)、PRP组(制动+注射PRP)，运动+PRP组(运动+注射PRP)，运动后PRP组(先运动+后注射PRP)，4周后取材切片进行苏木精-伊红(HE)、番红O染色评估软骨修复程度，并通过PCR测定Ⅱ型胶原、蛋白聚糖的mRNA表达。两组间比较行One way-ANOVA及LSD- t检验。 结果:体外实验正常培养的大鼠软骨细胞，PRP及力学+PRP均促进了Ⅱ型胶原及蛋白聚糖转录增多，但差异无统计学意义(3.085±1.166比2.153±0.705/0.818±0.116比1.045±0.266， t＝0.561、1.550， P>0.05)，然而先力学刺激后给予PRP处理则Ⅱ型胶原及蛋白聚糖转录增多最明显，显著高于PRP组及力学+PRP组(倍数为5.308±0.978及2.845±1.100， t＝4.439、5.000、3.695、5.245， P<0.01)。这一机制可能与力学反应性Integrin β2表达升高有关。该体外实验趋势与大鼠体内实验结果相符合。大鼠对照组软骨损伤明显且表面缺损，PRP组及运动+PRP组软骨损伤有所恢复但表面仍有不平整。大鼠给与先主动运动后PRP治疗方案后，软骨损伤恢复最佳，Ⅱ型胶原纤维及蛋白聚糖mRNA含量最高(倍数分别为46.833±7.400及15.177±3.288， t＝6.161、2.683、5.109、3.545， P<0.05)。 结论:PRP通过整合素β2受体，与软骨细胞的力学反应性信号转导存在协同效应，PRP治疗宜结合运动后PRP的组合方式，提高软骨修复治疗的疗效。

目的:探讨缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)在大鼠膝骨关节炎模型中表达及靶向干预效果。方法:10只大鼠采用木瓜蛋白酶局部注射复制膝骨关节炎动物模型，另外10只作为对照组，建模后采用酶联免疫吸附试验(ELISA)分析膝关节液中HIF-1α表达水平。另30只SD大鼠随机分为假手术组、模型组和PX-478组，模型组和PX-478组建立膝骨关节炎模型，PX-478组大鼠经膝关节腔注射PX-478 5 mg/kg，假手术组和模型组分别注射等体积生理盐水。治疗30 d后，采用Mankin组织学评分和Pelletier评分分析膝骨关节炎病变程度；原位缺口末端标记法(TUNEL)染色分析3组大鼠膝关节软骨的凋亡水平；蛋白质免疫印迹分析3组大鼠膝关节软骨半胱氨酰天冬氨酸特异性蛋白酶(Caspase)-3和B细胞淋巴瘤/白血病-2(bcl-2)蛋白表达水平。组间比较采用单因素方差分析。结果:膝骨关节炎大鼠膝关节组织液HIF-1α水平[(281.71±26.14) ng/ml]明显高于对照组[(116.37±19.98) ng/ml]，差异有统计学意义( t＝15.890， P<0.05)。PX-478组大鼠膝关节Pelletier评分[(1.50±0.53)分]明显低于模型组[(3.80±0.92)分]，差异有统计学意义( t＝6.866， P<0.05)；PX-478组大鼠膝关节Mankin评分[(2.20±0.42)分]明显低于模型组[(4.20±0.79)分]，差异有统计学意义( t＝7.071， P<0.05)；PX-478组大鼠膝关节滑膜液白细胞介素(IL)-1β和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平[(92.78±9.75)、(61.59±5.69) ng/mg]明显低于模型组[(173.21±11.87)、(132.23±13.21) ng/mg]，差异有统计学意义( t＝22.390、15.697， P<0.05)。PX-478组大鼠膝关节软骨TUNEL染色阳性率[(12.41±2.45)%]明显低于模型组大鼠膝关节Mankin评分[(31.82±3.38)%]，差异有统计学意义( t＝8.982， P<0.05)。PX-478组大鼠膝关节软骨Caspase-3表达水平(1.36±0.07)明显低于模型组(1.92±0.18)，差异有统计学意义( t＝9.538， P<0.05)。PX-478组大鼠膝关节软骨bcl-2表达水平(1.28±0.09)明显低于模型组(0.96±0.05)，差异有统计学意义( t＝9.577， P<0.05)。 结论:膝骨关节炎大鼠膝关节液中HIF-1α表达水平明显增加，采用PX-478治疗可显著抑制HIF-1α活性，下调炎性因子水平，改善膝关节病变程度，对膝关节起保护作用。

目的:评价关节内注射不同浓度臭氧水对兔骨性关节炎(OA)时关节软骨损伤及软骨细胞凋亡的影响。方法:清洁级健康新西兰大白兔24只，雌雄各半，6月龄，体重2.0~3.0 kg，采用随机数字表法分为4组( n＝6)：对照组(C组)、OA组、低浓度臭氧水组(L组)和高浓度臭氧水组(H组)。采用木瓜蛋白酶法制备OA模型，2周后，L组、H组关节腔分别注射10.0、20.0 μg/ml臭氧水1.0 ml，OA组注射0.9%氯化钠溶液1.0 ml，1次/周，共3次。末次注射1周后，取膝关节软骨组织，行甲苯胺蓝染色，光镜下评测Mankin评分；采用ELISA法检测软骨细胞caspase-3活性。 结果:与C组比较，其余各组Mankin评分、caspase-3活性升高( P<0.05)；与OA组比较，L组和H组Mankin评分、caspase-3活性降低( P<0.05)；与L组比较，H组Mankin评分升高，caspase-3活性降低( P<0.05)。 结论:膝关节内注射10.0、20.0 μg/ml臭氧水均可抑制软骨细胞凋亡，减轻OA兔关节软骨损伤，而高浓度臭氧水可引起关节软骨基质变性。

目的:研究氧化石墨烯（GO）载脐带间充质干细胞（UCMSCs）对两种膝骨性关节炎（KOA）动物模型的软骨修复作用。方法:选择12周雄性新西兰兔30只，按随机数字表法分为两组（每组15只）：A组采用改良Hulth+软骨缺损法建立KOA动物模型，B组采用改良木瓜蛋白酶控释剂注射法建立KOA动物模型。每组造模后分为4个亚组：空白对照组（ n=3）、GO组（ n=4）、UCMSCs组（ n=4）、GO+UCMSCs组（ n=4）。分别于动物模型的右膝关节腔内注射0.5 ml的质量浓度为9 g/L的NaCl溶液、GO颗粒润滑剂（GO质量浓度为30 μg/ml，溶剂为质量分数为0.25%的透明质酸）、UCMSCs悬液（5×10 6个/ml）、GO颗粒润滑剂载UCMSCs混合悬液（GO质量浓度为30 μg/ml，UCMSCs浓度为5×10 6个/ml）。采用酶联免疫吸附测定（ELISA）法检测治疗后8周各组动物的血清一氧化氮（NO）、Ⅱ型胶原蛋白（COL-Ⅱ）、糖胺聚糖（GAG）、白细胞介素-6（IL-6）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）水平。 结果:治疗后8周，A、B两组中GO+UCMSCs组的血清NO、IL-6、TNF-α水平均低于空白对照组（均 P<0.01），血清COL-Ⅱ、GAG水平均高于空白对照组（均 P<0.01）。A组中空白对照组的血清NO水平低于B组中空白对照组，差异具有统计学意义[（22.097±0.352） ng/ml比（23.662±0.056） ng/ml， P<0.05]；A组中UCMSCs组、GO+UCMSCs组的血清COL-Ⅱ水平分别高于B组中对应组，差异均具有统计学意义[（15.589±0.063） ng/ml比（14.429±0.092） ng/ml，（19.372±0.063） ng/ml比（16.257±0.416） ng/ml，均 P<0.01]；A组中空白对照组、GO+UCMSCs组的血清GAG水平分别高于B组中对应组，差异均具有统计学意义[（23.832±0.891） ng/ml比（18.709±0.552） ng/ml，（37.439±2.155） ng/ml比（26.554±0.450） ng/ml，均 P<0.01）；A组中空白对照组、GO+UCMSCs组的血清IL-6水平分别低于B组中对应组，差异均具有统计学意义[（16.082±0.323） ng/ml比（18.367±0.861） ng/ml， P<0.05；（7.426±0.294） ng/ml比（8.680±0.242） ng/ml， P<0.01]；A组中空白对照组、GO+UCMSCs组的血清TNF-α水平分别低于B组中对应组，差异均具有统计学意义[（9.466±0.177） ng/ml比（10.013±0.197） ng/ml， P<0.05；（5.139±0.183） ng/ml比（6.210±0.058） ng/ml， P<0.01]。 结论:GO载UCMSCs能促进两种KOA动物模型软骨细胞分泌，降低关节内炎症因子水平，起到软骨修复作用。

目的:观察针刺治疗膝关节骨性关节炎的效果及对低氧诱导因子-1α(HIF-1α)和血管内皮生长因子(VEGF)表达的影响。方法:30只SD大鼠根据随机数字表法随机分为对照组、模型组和针刺组，每组10只，模型组和针刺组采用木瓜蛋白酶膝关节注射建模。建模成功后，对照组和模型组不做处理，针刺组采用无菌电疗仪每天连续治疗20 min。5次为一个疗程，治疗2个疗程。采用Mankin’s病理评分法评估关节软骨病理损伤程度；采用行为观测系统分析大鼠关节活动程度；采用酶联免疫吸附实验(ELISA)分析大鼠关节滑液炎性因子肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)和血VEGF水平；采用蛋白质免疫印迹分析大鼠关节组织HIF-1α表达水平。组间数据比较采用单因素方差分析。结果:针刺组大鼠Mankin’s病理评分[(4.10±1.45)分]明显低于模型组[(8.90±1.20)分]，差异有统计学意义( t＝8.075， P<0.05)。针刺组大鼠关节活动度[(119.24±9.48)°]明显高于模型组[(92.39±9.15)°]，差异有统计学意义( t＝6.444， P<0.05)。针刺组大鼠关节肿胀率[(112.15±1.87)%]明显低于模型组[(23.92±3.56)%]，差异有统计学意义( t＝9.251， P<0.05)。针刺组大鼠关节滑液TNF-α和IL-6表达水平[(83.02±9.74)、(53.79±7.70) μg/ml]明显低于模型组[(130.21±17.64)、(91.98±6.56) μg/ml]，差异有统计学意义( t＝3.551、11.940， P<0.05)。针刺组大鼠滑膜液VEGF水平[(169.39±21.13) μg/ml]明显高于模型组[(92.39±9.15) μg/ml]，差异有统计学意义( t＝11.150， P<0.05)。针刺组大鼠关节活动度[(1.31±0.10)°]明显低于模型组[(1.01±0.11)°]，差异有统计学意义( t＝5.778， P<0.05)。 结论:针刺能够有效缓解骨性关节炎大鼠膝关节炎性反应，改善膝关节的功能，可能与HIF-1α表达水平下调有关。

目的:观察温针灸对早期膝骨关节炎(KOA)模型大鼠软骨细胞凋亡及miR-27a介导的PI3K/AKT/mTOR信号通路的影响。方法:采用随机数字表法将50只SD大鼠分为对照组、模型组、温针灸组、抑制剂组及抑制剂＋温针灸组(简称联合组)，每组10只大鼠。于造模前3 d对抑制剂组及联合组大鼠给予局部miR-27a抑制剂药物干预；除对照组以外，其余各组大鼠均通过局部注射木瓜蛋白酶方法制成早期KOA大鼠模型。待造模完成后，联合组及温针灸组大鼠均给予内、外侧膝眼穴温针灸治疗，每次治疗30 min，共治疗14 d。模型组及抑制剂组大鼠则同期在固定器上制动30 min。于干预2周后采用苏木精-伊红(HE)染色观察各组大鼠软骨组织病理学改变，采用TUNEL法检测软骨细胞凋亡情况，采用ELISA法检测软骨组织白介素(IL)-1β和IL-6水平；采用WB技术检测软骨组织p-PI3K、p-AKT、p-mTOR、PI3K、AKT、mTOR、LC3-Ⅱ及Beclin1蛋白表达，采用qRT-PCR技术检测软骨组织中miR-27a含量。结果:干预结束后发现温针灸组软骨细胞形态较模型组明显改善，抑制剂组及联合组软骨细胞形态较温针灸组进一步改善；温针灸组软骨细胞凋亡率明显低于模型组( P<0.05)；与温针灸组比较，抑制剂组及联合组软骨细胞凋亡率均显著降低( P<0.05)，抑制剂组与联合组软骨细胞凋亡率组间差异无统计学意义( P>0.05)；温针灸组、抑制剂组和联合组IL-1β、IL-6、LC3-Ⅱ、Beclin1、miR-27a蛋白表达及mRNA水平均较模型组明显降低( P<0.05)，抑制剂组及联合组上述指标均较温针灸组显著降低( P<0.05)；温针灸组、抑制剂组和联合组p-PI3K/PI3K、p-AKT/AKT及p-mTOR/mTOR水平均较模型组明显升高( P<0.05)，抑制剂组及联合组上述指标水平亦显著高于温针灸组( P<0.05)，抑制剂组及联合组上述蛋白表达及mRNA水平组间差异均无统计学意义( P>0.05)。 结论:温针灸可能通过下调miR-27a表达，促进PI3K/AKT/mTOR信号通路激活，能抑制早期KOA模型大鼠软骨细胞过度自噬及凋亡，有助于减轻关节炎症反应及损伤，延缓关节退变进程。