目的 探究内源性和外源性趋化因子CXC基序配体1(CXCL1)对乳腺癌细胞干细胞样特性表达的影响.方法 外源性实验将 MDA-MB-231 和 MCF-7 乳腺癌细胞分为 4 组:0 nmol/L CXCL1 组,1 nmol/L CXCL1 组,10 nmol/L CXCL1 组,anti-CXCR2组(先用CXCL1的受体CXCR2阻断剂处理后再加入10 nmol/L外源性CXCL1).内源性实验将MDA-MB-231细胞分为3组:control组(仅加入等量PBS溶液),siNC组(加入空白转染试剂),siCXCL1组(转染CXCL1特异性小干扰RNA).平板克隆形成实验检测乳腺癌细胞增殖能力;微球形成实验通过细胞球的形成能力评价乳腺癌干细胞的自我更新能力;流式细胞术检测干细胞比例(表达CD133+的MDA-MB-231细胞比例和表达CD44+/CD24-/low的MCF-7细胞比例)及表达干细胞标志物乙醛脱氢酶1(ALDH1)阳性的细胞比例;Western blot法检测各组ALDH1和Oct3/4表达的变化.为进一步探索PI3K通路在其中的作用,本实验用PI3K特异性抑制剂Ly294002对MDA-MB-231和MCF-7细胞进行预处理后,再加入10 nmol/L外源性CXCL1,检测ALDH1和Oct3/4的表达.结果 与0 nmol/L组相比,1,10 nmol/L CXCL1组克隆形成数均明显增多(P＜0.001),乳腺癌细胞形成的微球数量更多(P＜0.001)、直径更大(P＜0.05),表达CD133+的MDA-MB-231细胞数量增多(P＜0.001),表达 CD44+/CD24-/low的 MCF-7 细胞增多(P＜0.05),表达 ALDH1+的 MDA-MB-231 和 MCF-7 细胞数均增多(P＜0.05,P＜0.01);Western blot结果提示MDA-MB-231和MCF-7两种乳腺癌细胞中干细胞标志物ALDH1和Oct3/4的表达均随CXCL1的浓度增加明显增多.与10 nmol/L CXCL1组相比,anti-CXCR2组克隆形成数、干细胞比例及ALDH1的表达均有所减少(P＜0.05).与control组和siNC组相比,siCXCL1组微球培养后形成的细胞球直径减小(P＜0.001),细胞球数量减少(P＜0.01);表达CD133+的MDA-MB-231乳腺癌细胞比例下降(P＜0.001);ALDH1和Oct3/4蛋白表达量均明显减少(P＜0.001).Ly294002组MDA-MB-231和MCF-7细胞中ALDH1和Oct3/4表达较CXCL1组减少.结论 内、外源性CXCL1均可促进乳腺癌细胞向乳腺癌干细胞的转化,促进其干细胞样特性的表达,其机制可能与调控PI3K/Akt通路有关.

乙醛脱氢酶2（ALDH2）是线粒体内一种重要的醛脱氢酶，具有清除乙醛和其他有毒醛类物质的作用，在肝脏中含量丰富，且与多种肝脏疾病的发生与发展密切相关。在人群中，ALDH2基因多态性对多种肝脏疾病的发生有重要影响。现主要综述近年来ALDH2在肝脏疾病中的研究进展，以期为临床预防和治疗提供理论依据。

目的:比较乙醛脱氢酶1B1(ALDH1B1)与乙醛脱氢酶1A1(ALDH1A1)在结直肠癌组织中的表达，探讨乙醛脱氢酶1B1的阳性表达与患者生存预后关系。方法:收集自沧州市中心医院肛肠外科2010年1月至2012年1月手术切除的86例结直肠癌组织和18例配对的癌旁组织；检测结直肠癌组织及癌旁组织中ALDH1B1与ALDH1A1的表达，比较ALDH1B1与ALDH1A1在癌组织及癌旁组织中的表达，判断ALDH1B1阳性表达与肿瘤组织分化、患者生存预后的关系。计数资料的比较采用 χ2检验。 结果:ALDH1B1在细胞质内表达，染色后呈棕黄或棕褐色。ALDH1B1癌组织中阳性率91.86%(79/86)高于ALDH1A1癌组织中阳性率69.8%(60/86)，差异有统计学意义( χ2＝13.537， P<0.05)。ALDH1B1在癌组织低分化阳性率97.95%(48/49)高于中高分化阳性率83.78%(31/37)，差异有统计学意义( χ2＝5.666， P<0.05)。ALDH1B1高表达患者的总生存期(OS)为33.3%(23/69)低于低表达患者的OS为58.8%(10/17)，差异有统计学意义( χ2＝15.000， P<0.05)。 结论:ALDH1B1可能是影响结直肠癌患者的生存预后的不良因素。

目的:建立苯乙烯尿中代谢产物苯乙醇酸和苯乙醛酸的分散液液微萃取-高效液相色谱法的测定方法。方法:以正辛醇为萃取剂，乙醇为分散剂，对尿中苯乙醇酸和苯乙醛酸进行萃取，涡旋离心后取上层液体，以高效液相色谱仪测定。结果:苯乙醇酸在0~10.0 mg/L浓度范围内的线性相关系数>0.999，方法检出限为9.9 μg/L，加标回收率为86.1%~101.6%，日内精密度（ RSD）为1.07%~3.76%，日间精密度（ RSD）为1.24%~3.33%。苯乙醛酸在0.0~2.0 mg/L浓度内的线性相关系数>0.999，方法检出限为2.6 μg/L，加标回收率为88.8%~100.3%，日内精密度（ RSD）为1.02%~3.17%，日间精密度（ RSD）为1.59%~2.41%。 结论:本方法方法检出限低，富集倍数高，灵敏度好，适用于职业接触苯乙烯人群尿中苯乙醇酸和苯乙醛酸的测定。

原发性高草酸尿症(primary hyperoxaluria,PH)是一种罕见的常染色体隐性遗传病,PH1型(PH1)为其中最常见的类型,主要表现为反复性肾结石和肾钙质沉积,可诱发急性肾衰竭.婴儿PH1易导致早期终末期肾病,病死率高.本文报道1例就诊于山东大学第二医院的急性肾衰竭婴儿,该病例通过全外显子基因测序确诊为PH1,基因型为AGXT基因c.596-2A＞G纯合突变,在中国人群中为首次报道.既往文献表明尿草酸、结石成分分析等可提示PH1,PH1诊断的金标准是肝活检结合丙氨酸-乙醛酸转氨酶(alanine-glyoxylate aminotransferase,AGT)活性鉴定,而AGXT基因测序因其便捷性逐步成为首选诊断方法.PH1的保守治疗方法有补充充足液体量、枸橼酸盐、维生素B6和持续肾脏替代等,但肝移植是其唯一的根治方法.对于不明原因的急性肾衰竭婴儿应警惕PH1,尽早行尿草酸盐水平的检测和基因筛查.

目的:评价α-硫辛酸对大鼠肝缺血再灌注损伤的影响及乙醛脱氢酶2(ALDH2)在其中的作用。方法:在体实验：雄性SD大鼠24只，体重250~300 g，8~10周龄，采用随机数字表法分为4组( n＝6)：假手术组(Sham组)、肝缺血再灌注组(IR组)、肝缺血再灌注+α-硫辛酸组(IR+ALA组)和肝缺血再灌注+α-硫辛酸+黄豆苷组(IR+ALA+D组)。采用阻断肝左叶及中叶肝蒂60 min后再灌注的方法建立大鼠肝缺血再灌注损伤模型。缺血前45 min时，IR+ALA+D组腹腔注射ALDH2拮抗剂黄豆苷50 mg/kg；缺血前30 min时，IR+ALA组和IR+ALA+D组腹腔注射α-硫辛酸100 mg/kg。于再灌注6 h时，采集下腔静脉血标本，检测血清AST和ALT活性；然后处死大鼠，取肝组织，行HE染色光镜下观察病理学结果，并行肝损伤评分，测定ALDH2活性和ROS水平，采用免疫组化法测定4-羟基壬烯醛(4-HNE)和MDA表达。离体实验：体外培养的大鼠肝细胞BRL-3A，采用随机数字表法分为4组( n＝15)：对照组(C组)、缺氧复氧组(HR组)、缺氧复氧+α-硫辛酸组(HR+ALA组)和缺氧复氧+α-硫辛酸+黄豆苷组(HR+ALA+D组)。HR组、HR+ALA组和HR+ALA+D组于37 ℃、95% N 2+5% CO 2条件下培养6 h，然后于37 ℃、95%空气+ 5% CO 2条件下培养24 h；于缺氧前60 min时，HR+ALA组加入α-硫辛酸100 μmol/L，HR+ALA+D组加入α-硫辛酸100 μmol/L和黄豆苷60 μmol/L。于复氧24 h时，采用CCK-8法检测细胞活力，分光光度法检测ALDH2活性，DCFH-DA荧光探针法检测ROS水平，JC-1法检测线粒体膜电位。 结果:在体实验：与Sham组比较，IR组血清AST和ALT活性、肝损伤评分、肝组织ROS水平、4-HNE和MDA表达水平升高( P<0.05)，ALDH2活性差异无统计学意义( P>0.05)；与IR组比较，IR+ALA组血清AST和ALT活性、肝损伤评分、肝组织ROS水平、4-HNE和MDA表达水平降低，ALDH2活性升高( P<0.05)；与IR+ALA组，HR+ALA+D组血清AST和ALT活性、肝损伤评分、肝组织ROS水平、4-HNE和MDA表达水平升高，ALDH2活性降低( P<0.05)。离体实验：与C组比较，HR组细胞活力和线粒体膜电位降低，ROS水平升高( P<0.05)，ALDH2活性差异无统计学意义( P>0.05)；与HR组比较，HR+ALA组细胞活力、ALDH2活性和线粒体膜电位升高，ROS水平降低( P<0.05)；与HR+ALA组比较，HR+ALA+D组细胞活力、ALDH2活性和线粒体膜电位降低，ROS水平升高( P<0.05)。 结论:α-硫辛酸可减轻大鼠肝缺血再灌注损伤，其机制与激活ALDH2，减少毒性醛类物质积聚，恢复线粒体膜电位有关。

目的:评价海马乙醛脱氢酶2(ALDH2)在大鼠心肌缺血再灌注后记忆功能减退中的作用。方法:健康雄性SD大鼠24只，2~3月龄，体重220~280 g，采用随机数字表法分为3组( n＝8)：假手术组(S组)、心肌缺血再灌注组(I/R组)和ALDH2激动剂ALDA-1组(ALDA-1组)。采用结扎左冠状动脉前降支30 min再灌注120 min的方法制备心肌缺血再灌注损伤模型。ALDA-1组于缺血前5 min腹腔注射ALDA-1 10 mg/kg。于造模前6 d开始进行Morris水迷宫定位航行训练，模型制备后24 h进行Morris水迷宫空间探索实验。行为学实验结束以后处死大鼠，取海马组织，HE染色观察病理学结果，TUNEL法确定细胞凋亡指数(AI)，比色法检测ALDH2活性，ELISA法检测4-羟基壬烯酸(4-HNE)和MDA含量，Western blot法检测ALDH2和4-HNE的表达水平。 结果:与S组比较，I/R组穿越原平台位置次数减少，目标象限停留时间缩短，海马组织ALDH2活性降低，4-HNE表达上调，4-HNE、MDA含量和AI升高( P<0.05)；与I/R组比较，ALDA-1组穿越原平台位置次数增加，目标象限停留时间延长，ALDH2活性升高，4-HNE表达下调，4-HNE、MDA含量和AI降低( P<0.05)；3组海马组织ALDH2表达差异无统计学意义( P>0.05)。 结论:大鼠心肌缺血再灌注后记忆功能减退的发生机制可能与海马ALDH2活性降低，促进醛类物质蓄积有关。

目的:探讨经二代测序确诊的5例吡哆醇依赖性癫痫（PDE）的临床表型、治疗及乙醛脱氢酶7家族成员A1（ALDH7A1）基因突变的遗传学特点。方法:回顾性分析2018年2月至2019年11月郑州大学附属儿童医院神经内科确诊的5例以早期癫痫起病的吡哆醇依赖性癫痫患儿的临床资料，采用二代测序方法对先证者进行ALDH7A1基因测序，并对其家系成员进行一代Sanger验证，对其基因突变特点进行分析。结果:在5例确诊为吡哆醇依赖性癫痫的患儿中，男女比例为4∶1，就诊年龄为出生2~10个月。临床表型中5例患儿均为新生儿期起病，有反复癫痫发作，表现为肌阵挛发作、痉挛发作或局灶性发作；应用抗癫痫药物控制发作较差，长期大剂量口服吡哆醇疗效较好；5例患儿均来自其父亲和（或）母亲的复合杂合突变；例1为剪切纯合突变c.247-2（IVS2）A>T，例2为错义突变c.584A>G（p.N195S）及无义突变c.1003C>T（p.R335 *），例3为错义突变c.1553G>C（p.R518T）及c.1547A>G（p.Y516C），例4为错义突变c.1547A>G（p.Y516C）及移码突变c.1566_1568delTAC（p.522_523delCTinsC），例5为错义突变c.1061A>G（p.Y354C）及无义突变c.841C>T（p.Q281X， 259）。其中c.247-2（IVS2）A>T为未报道过的新生剪切位点突变。 结论:吡哆醇依赖性癫痫由ALDH7A1基因突变引起，早期临床表现多以新生儿期难治性癫痫起病；抗癫痫药物治疗疗效差，经吡哆醇有效控制，对该类患者应尽早行基因分析以早期确诊。

尿酸的重吸收和排泄依赖尿酸转运蛋白的作用，人体内尿酸转运蛋白数目众多，如葡萄糖转运蛋白9(GLUT9)、有机阴离子转运体1(OAT1)、尿酸盐转运蛋白1(URAT1)等，但单一尿酸转运蛋白的错义翻译很少直接导致高尿酸血症的发生，尿酸转运蛋白的相互作用蛋白，如跨膜整合蛋白2B(ITM2B)、乙醛脱氢酶16家族A1(ALDH16A1)、PDZ结构域蛋白1(PDZK1)等在高尿酸血症的发生、发展过程中同样有着举足轻重的地位。因此不仅仅研究单一尿酸转运蛋白的错义翻译，同时关注尿酸转运蛋白及其相互作用蛋白在尿酸代谢中的作用，有利于更加深入了解高尿酸血症的发病机制。

目的:研究毛稔果提取物对乙醇、对乙酰氨基酚（APAP）及四氯化碳（CCl 4）诱导的化学性肝损伤小鼠的肝脏保护作用，探讨其作用机制。 方法:将96只小鼠按随机数字表法分为正常对照组、乙醇模型组、乙醇+联苯双酯对照组及乙醇+毛稔果提取物高、中、低剂量组，APAP模型组、APAP+联苯双酯对照组及APAP+毛稔果提取物高、中、低剂量组，CCl 4模型组、CCl 4+联苯双酯对照组及CCl 4+毛稔果提取物高、中、低剂量组，每组6只。除正常对照组，其余各组分别制备乙醇模型、APAP模型、CCl 4模型。毛稔果提取物高、中、低剂量组小鼠灌胃毛稔果提取物100、50、25 g/kg，联苯双酯对照组腹腔注射15 mg/ml联苯双酯溶液75 mg/kg，正常对照组腹腔注射等体积生理盐水/花生油溶液，1次/d，连续给药25 d。检测小鼠血清中GPT、GOT、TBIL水平；肝组织中SOD、GSH-Px活性及MDA水平；应用qRT-PCR法检测TNF-α、IL-6、乙醇脱氢酶（ADH）、乙醛脱氢酶（ALDH）mRNA表达；Western blot法检测肝组织中细胞色素P450 CYP1A1、CYP1A2、CYP3A蛋白表达；HE染色观察肝组织病理改变。 结果:与相应的乙醇、APAP及CCl 4模型组比较，乙醇+联苯双酯对照组及乙醇+毛稔果提取物高、中剂量组，APAP+联苯双酯对照组及APAP+毛稔果提取物高、中剂量组，CCl 4+联苯双酯对照组及CCl 4+毛稔果提取物高、中剂量组小鼠血清GPT、GOT、TBIL水平降低（ P<0.01或 P<0.05），肝组织SOD、GSH-Px活力升高（ P<0.01或 P<0.05），MDA水平降低（ P<0.01或 P<0.05），IL-6、TNF-α mRNA水平降低（ P<0.01）；乙醇+毛稔果提取物高、中、低剂量组ADH、ALDH mRNA水平降低（ P<0.01）；与APAP模型组比较，APAP+毛稔果提取物组CYP1A1、CYP1A2表达升高（ P<0.01），CYP3A蛋白表达降低（ P<0.05）；与CCl 4模型组比较，CCl 4+毛稔果提取物组CYP1A1、CYP1A2和CYP3A蛋白表达降低（ P<0.05）。 结论:毛稔果提取物对乙醇、APAP及CCl 4所致的小鼠化学性肝损伤具有保护作用，其机制可能与抗氧化应激、抑制炎症反应及调节细胞色素P450相关酶系表达有关。