目的:采用网络药理学和分子对接技术探索参芪五味子抗焦虑(AD)的作用机制。方法:通过TCMSP数据库筛选参芪五味子主要的活性成分，通过TCMSP数据库和SymMap数据库获取其活性成分对应的靶点，利用Cytoscape将药物-有效成分-靶点关系网络进行可视化展示。利用TTD、OMIM、NCBI、Drugbank、GeneCards数据库直接获取焦虑的潜在靶点。基于String数据库构建潜在靶点的相互作用图，利用Cytoscape工具得到关键的靶蛋白。基因本体(GO)富集分析和东京基因组百科全书(KEGG)信号通路分析获取参芪五味子抗焦虑的关键靶点及信号通路。利用AutodockTools软件对关键有效成分和关键靶点蛋白进行分子对接并计算得出其结合能，通过PyMol软件将分子对接结果进行可视化处理。结果:参芪五味子中63个有效成分可通过69个靶点作用于焦虑症。其中以槲皮素、木犀草素、豆甾醇为主要的药物活性成分，丝氨酸苏氨酸蛋白激酶1(AKT1)蛋白和白介素-6(IL-6)蛋白为关键靶蛋白。分子对接技术验证了这些关键活性成分和关键靶蛋白之间具有良好的结合能力。参芪五味子主要通过调节Toll样受体信号通路、肿瘤坏死因子(TNF)信号通路、癌症通路等发挥治疗焦虑症的作用。结论:参芪五味子可能是通过调节AKT1、IL-6等相关靶点，调控炎性反应、细胞凋亡等过程，发挥抗焦虑的作用。

目的 探究五子衍宗丸(WZYZP)治疗少弱精子症(OAS)的药效与作用机制.方法 应用环磷酰胺(CTX)诱导的SD大鼠作为OAS的体内模型,通过ig0.5、1.5 g·kg-1 WZYZP探究其治疗OAS大鼠的体内药效与作用机制.通过全自动精子分析系统检测大鼠精子参数;应用酶联免疫吸附法测定大鼠血清中睾酮的量,通过HE染色法观察给药后OAS大鼠睾丸组织形态学改变.采用网络药理学预测WZYZP治疗OAS的具体靶点.应用酶联免疫吸附法测定大鼠睾丸组织炎症因子白细胞介素1β(IL-1β)、白细胞介素6(IL-6)和肿瘤坏死因子α(TNF-α)水平;通过TUNEL染色测定大鼠睾丸组织中细胞凋亡情况;免疫组织化学染色检测睾丸组织白细胞介素17(IL-17)表达情况;Western blotting检测Caspase-3、热休克蛋白90AA1(HSP90AA1)、磷酸化核因子κB(p-NF-κB)、核因子κB(NF-κB)、磷酸化细胞外调节蛋白激酶1/2(p-ERK1/2)、细胞外调节蛋白激酶1/2(ERK1/2)、p-p38和p38的表达水平.使用HPLC检测WZYZP中的主要活性成分并与网络药理学所得靶点进行分子对接模拟以探索其具体机制.结果 体内实验结果表明,WZYZP可显著改善CTX诱导的OAS大鼠精子参数、血清睾酮水平(P＜0.001)和睾丸组织形态学.网络药理学结果表明WZYZP与OAS的关键通路为IL-17,关键靶点为Caspase3、p38、NF-κB、HSP90和ERK1/2.TUNEL染色结果表明,1.5 g·kg-1 WZYZP可显著降低OAS大鼠睾丸组织细胞凋亡(P＜0.05).Western Blotting 结果显示,与模型组相比,1.5 g·kg-1WZYZP 组 Caspase-3(P＜0.001)和HSP90AA1(P＜0.01)的表达水平明显降低,NF-κB(P＜0.05)、ERK1/2(P＜0.05)和p38(P＜0.05)磷酸化水平明显降低.分子对接模拟结果发现,8种主要活性成分(槲皮素、五味子醇甲、金丝桃苷、山柰酚、紫云英苷、五味子甲素、异槲皮素和绿原酸)和IL-17通路5种相关靶点(HSP90AA1、ERK、p38、NF-κB和Caspase3)的结合能均小于-20.92 kJ·mol-1,具有较好的结合亲和力.结论 WZYZP可通过下调IL-17通路减少细胞凋亡发挥治疗OAS作用.

目的 考察参松养心胶囊中巴马汀、小檗碱、五味子甲素、丹参酮ⅡA在大鼠血浆中的药动学过程.方法 大鼠以0.43 g-kg-1药物剂量给予参松养心胶囊灌胃,于不同时间点采血.以卡马西平为内标,建立LC-MS/MS法测定大鼠血浆中的巴马汀、小檗碱、五味子甲素、丹参酮ⅡA的血药浓度并计算主要药动学参数.结果 巴马汀、小檗碱、五味子甲素、丹参酮ⅡA在各自浓度范围内与峰面积比值线性关系良好,精密度,准确度,提取回收率,基质效应结果均符合测定要求.并根据PKSolver分别计算出以上4种成分药动学参数tmax、Cmax、t1/2、AUC0～t、AUC0～inf值.结论 所建立的LC-MS/MS分析方法,可灵敏、快速、准确地应用于大鼠血浆中参松养心胶囊的主要活性成分,为参松养心胶囊的临床研究和合理用药提供参考.

目的 建立瑶药小钻特征图谱及其主要成分安五脂素含量测定方法,并评价安五脂素抗炎活性.方法 采用高效液相色谱法,以乙腈-0.5%磷酸溶液为流动相进行梯度洗脱,采用《中药色谱指纹图谱相似度评价系统(2012版)》建立小钻药材的特征图谱和进行相似度评价,并测定小钻中安五脂素含量.以脂多糖诱导的RAW264.7巨噬细胞为炎症细胞模型,考察安五脂素对细胞上清液中肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素1β(IL-1β)、IL-6水平的影响.结果 10批小钻样品的特征图谱相似度为0.901～0.994;标定了9个共有峰,指认了3个成分,分别为长南五味子素E、南五味子内酯A、安五脂素;安五脂素的含量为(0.72±0.05)～(1.21±0.03)mg/g(n=3).0.125～0.5 μg/mL的安五脂素可显著降低炎症模型细胞上清液中TNF-α、IL-1β、IL-6水平(P＜0.05或P＜0.01).结论 建立了小钻药材HPLC特征图谱及其安五脂素含量测定方法;安五脂素可能是小钻药材发挥抗炎作用的有效成分.

目的 运用网络药理学技术分析复方玉液汤防治糖尿病心肌病(DCM)的作用机制,并通过动物实验进行验证.方法 利用TCMSP数据库检索复方玉液汤所含6种中药(黄芪、山药、知母、葛根、五味子、天花粉)中的化学成分,根据口服生物利用度(OB)和药物相似性(DL)筛选出活性化学成分以及与DCM相关的靶点;利用Drugbank、Gene Cards、OMIM和PharmGKb数据库获取与DCM相关靶点;STRING数据库对核心靶点进行PPI网络的构建和分析;Metascape进行核心靶点的GO和KEGG富集分析;利用Cytoscape3.9.1构建"中药-关键成分-核心靶点-关键通路"网络,并对核心靶点对接的关键成分进行分子对接.建立糖尿病心肌病Wistar大鼠动物模型,将大鼠分为正常组、模型组、玉液汤低剂量组(YYT-低组,0.29 g/kg)、玉液汤高剂量组(YYT-高组,1.15 g/kg),15只/组,药物剂量为生药含量.给药8周后观察各组大鼠的心脏组织病理切片,检测各组大鼠心脏电生理变化、血清中的LDH、CK、CK-MB含量变化以及心脏组织中PI3K、P-PI3K、Akt、P-AKT、BAX、IL-6、TNF-α蛋白的表达情况.结果 筛选后得到复方玉液汤中61个活性化合物,1057个靶点;3682个DCM相关疾病靶点,共同靶点551个.根据筛选获得的核心靶点富集得到的核心通路发现,凋亡和炎症及相关PI3K/Akt信号通路可能是治疗DCM的关键信号通路;分子对接结果显示,金色酰胺醇酯、山柰酚等活性成分与AKT1和PIK3R1的结合活性较好.利用动物实验对筛选的靶点及通路进行验证,结果显示,与DCM模型组大鼠比较,复方玉液汤能改善模型大鼠心肌组织细胞紊乱及炎性浸润的病理特征,降低模型大鼠血清中LDH、CK、CK-MB水平及模型大鼠心脏组织中BAX、IL-6、TNF-α的蛋白含量并升高P-PI3K和P-AKT的蛋白含量(P<0.05).结论 复方玉液汤防治DCM是多成分、多靶点和多信号通路共同作用的结果.复方中主要活性成分金色酰胺醇酯、山柰酚等通过调控PI3K/Akt信号通路,抑制DCM发病过程中心肌细胞凋亡及炎症反应,发挥对DCM的保护作用.

生脉饮是由红参、麦冬、五味子3味药组成的常用中药经典方剂,具有益气复脉、养阴生津的作用.现代研究发现,生脉饮的化学成分主要包括皂苷类、木脂素类、高异黄酮类、多糖类和有机酸类等.相关药理学实验研究表明,生脉饮具有抗心律失常、抗心力衰竭、抗肿瘤等药理作用,临床上常与各类常规治疗药物联合使用发挥疗效,从而改善患者的临床症状.文章对近年来生脉饮的化学成分、药理作用和临床应用的研究进行了系统的阐述,以期为该方剂的进一步研究及开发利用提供支持和参考.

细胞焦亡可能是引起桥本甲状腺炎(Hashimoto's thyroiditis,HT)发病的主要原因,而中药可通过调节细胞焦亡通路降低细胞损伤、抑制免疫反应和抗氧化应激,从而发挥对甲状腺细胞的保护作用.槲皮素、木犀草素、连翘提取物、五味子素B等为治疗HT的有效中药成分,能够通过多种机制延缓细胞焦亡的进程,部分成分还可减轻由焦亡引发的免疫激活、免疫失衡和氧化应激.此外,中药复方以其多靶点、协同增效、整体调理等优点广泛用于HT的治疗.但现有研究主要聚焦于单一机制,忽略了整体分析与药物制备及临床应用标准的优化,因此将实验和临床实践结合,全面探讨中药在HT防治中的作用机制和临床应用对于深化其治疗潜力至关重要.

[目的]通过网络药理学和分子对接技术探讨参芪五味子胶囊治疗焦虑症的作用机制.[方法]利用中药系统药理学数据库与分析平台(TCMSP)预测和筛选参芪五味子胶囊的主要生物活性成分及其靶点,与GeneCards、OMIM、DisGeNET、TTD数据库检索筛选出的焦虑症疾病靶点交集整合;借助String平台绘制蛋白质相互作用(PPI)网络,并开展基因本体(GO)注释功能与京都基因与基因组百科全书(KEGG)通路富集分析;依托Cytoscape软件绘制"药物-成分-靶点"以及"成分-靶点-通路"的网络关系图;采用Autodock分子对接技术将关键靶点与参芪五味子胶囊中关键活性成分进行验证.[结果]获得成分靶点 238 个,疾病靶点 919 个,交集靶点 62 个,通过CytoNCA插件筛选出 19 个核心靶点;GO分析表明,主要涉及信号转导、基因表达正调控、同种蛋白结合、细胞外配体门控离子通道活性、苯二氮卓类受体活性等;KEGG分析表明,主要富集通路涵盖AGE-RAGE信号通路、神经活性配体-受体相互作用通路、流体剪切应力和动脉粥样硬化通路等;分子对接显示,36 组关键靶点与活性成分组合结合能均小于-20.92 kJ/mol,证明结合良好.[结论]参芪五味子胶囊可通过多成分-多靶点-多通路发挥治疗焦虑症的作用,为后续探究参芪五味子胶囊治疗焦虑症提供研究思路.

目的 研究温心方治疗冠心病抑郁症的分子机制,探索温阳益心调神法作用机理.方法 通过TCMSP、ETCM、化源网、PubChem、SwissTarget Prediction、Gene Cards、DrugBank、TTD 等获取中药有效成分、药物和疾病靶点.通过 STRING11.5、Cytoscape3.9.1 获取核心成分和核心靶点,构建蛋白质-蛋白质互相作用(protein-protein interaction,PPI)和"药物-成分-核心靶点"网络.通过Metascape进行富集分析,筛选通路.通过Cytoscape3.9.1 算法分析,获取蛋白受体(关键基因)和小分子配体(逆靶向化合物),由RCSB PDB、TCMSP、PubChem、AutoDockTools1.5.6、pymol等进行分子对接及可视化呈现.结果 温心方有效成分 103个,核心成分5 个,分别为五味子酯乙(gomisin B)、黄芩素(baicalein)、柚皮素(naringenin)、维生素E(vitamin E,VE)、前列腺素B1(prostaglandinB1,PGB1).作用靶点608 个,核心靶点 138 个,主要募集在磷脂酰肌醇-3-激酶(phosphatidylinositol-3-kinase,PI3K)-蛋白激酶B(protein kinase B,AKT)通路、晚期糖基化终末产物(advanced glycation end product,AGE)-晚期糖基化终产物受体(receptor for advanced glycosylation end products,RAGE)通路、叉头盒转录因子(forkhead box,FOXO)通路、两面神激酶(janus kinase,JAK)-信号转导及转录激活蛋白(signal transducer and activator of transcription,STAT)通路,涉及细胞增殖与凋亡、细胞形态调节与骨架重构、细胞周期调节、轴突运输、血管内皮生长、血管紧张度等细胞功能和生物进程.关键基因和逆靶向化合物对接构象合理,对接结果可行.结论 黄芩素、柚皮素、维生素E等可能是温心方加减治疗冠心病抑郁症的重要成分,通过VEGFA、NFKB1、MAPK1 等靶点调控AGE-RAGE通路、JAK-STAT通路、PI3K-AKT通路、FOXO通路,发挥药理作用.温阳益心调神法通过降低心肌细胞、神经元的氧化应激反应,促进抗氧化机制启动,清除氧化应激物质,抑制炎症过程,从而调节细胞增殖、凋亡的动态平衡,维持机体稳态,保护血管内皮生长、改善神经功能,达到治疗冠心病抑郁症的目的.该研究也间接表明冠心病和抑郁症的共病机制与氧化应激有关.

目的:对比研究不同部位东南五味子挥发油成分,并探究其体外药理活性.方法:采用水蒸气蒸馏法提取东南五味子叶、茎、根挥发油,经GC-MS技术分离和鉴定不同部位挥发油,利用归一化法测定其相对百分含量.通过ABTS测定抗氧化活性,采用Griess法检测细胞培养液中NO的含量,比较不同部位东南五味子挥发油的抗氧化活性和抗炎活性.结果:共鉴定出46个成分.东南五味子叶、茎、根分别鉴定出33、32、29个成分,分别占各自挥发油总量的93.01％、89.15％、88.90％;东南五味子根、茎、叶抗氧化测定结果的IC50值分别0.339、0.175、1.111 mg/mL,均有较好的抗氧化能力,抗炎测定结果显示东南五味子叶处理组的细胞培养液中NO的含量均显著降低(P＜0.05),且随着剂量的增加,NO含量有减少的趋势.结论:东南五味子挥发油成分种类主要为醇类和烯烃类,不同部位挥发油成分及相对百分含量具有一定差异,但均有较好的抗氧化活性,且叶具有抗炎活性.