目的:观察电针联合五子衍宗丸对帕金森病小鼠黑质脑源性神经营养因子(BDNF)/酪氨酸激酶受体B(TrkB)/环磷酸腺苷反应原件结合蛋白(CREB)通路的影响.方法:将108只雄性C57BL/6小鼠按照随机数字表法分为正常组、模型组、电针组、五子衍宗丸组、联合观察组、抑制剂组、电针+抑制剂组、五子衍宗丸+抑制剂组、联合+抑制剂组9组,每组12只.除正常组、抑制剂组外,其余组给予1-甲基-4-苯基-1,2,3,6-四氢吡啶(MPTP)腹腔注射造模,第1天15 mg/kg,第2天20 mg/kg,第3～7天30 mg/kg,均0.2 mL/次,1次/d.自造模第1天进行干预,电针观察组别给予电针干预,五子衍宗丸观察组别早晚给予五子衍宗丸药液,抑制剂注射组别腹腔注射TrkB抑制剂ANA-12,连续干预14 d.干预结束后对比各组步态实验、旷场实验、爬杆实验结果,小鼠黑质酪氨酸羟化酶(TH)及BDNF、TrkB、CREB表达.结果:与正常组比较,模型组出现明显的运动障碍,黑质TH平均荧光强度及TH、BDNF、TrkB、CREB蛋白表达低(P＜0.05);与模型组比较,电针组、五子衍宗丸组、联合观察组运动障碍均得到改善,黑质TH平均荧光强度及TH、BDNF、TrkB、CREB蛋白表达高(P＜0.05);与电针组、五子衍宗丸组比较,联合观察组的运动障碍得到改善,其他指标表达增高(P＜0.05).结论:电针联合五子衍宗丸可能通过调控BDNF/TrkB/CREB信号通路来改善PD小鼠的运动障碍,保护多巴胺能神经元.

目的 探究五子衍宗丸(WZYZP)治疗少弱精子症(OAS)的药效与作用机制.方法 应用环磷酰胺(CTX)诱导的SD大鼠作为OAS的体内模型,通过ig0.5、1.5 g·kg-1 WZYZP探究其治疗OAS大鼠的体内药效与作用机制.通过全自动精子分析系统检测大鼠精子参数;应用酶联免疫吸附法测定大鼠血清中睾酮的量,通过HE染色法观察给药后OAS大鼠睾丸组织形态学改变.采用网络药理学预测WZYZP治疗OAS的具体靶点.应用酶联免疫吸附法测定大鼠睾丸组织炎症因子白细胞介素1β(IL-1β)、白细胞介素6(IL-6)和肿瘤坏死因子α(TNF-α)水平;通过TUNEL染色测定大鼠睾丸组织中细胞凋亡情况;免疫组织化学染色检测睾丸组织白细胞介素17(IL-17)表达情况;Western blotting检测Caspase-3、热休克蛋白90AA1(HSP90AA1)、磷酸化核因子κB(p-NF-κB)、核因子κB(NF-κB)、磷酸化细胞外调节蛋白激酶1/2(p-ERK1/2)、细胞外调节蛋白激酶1/2(ERK1/2)、p-p38和p38的表达水平.使用HPLC检测WZYZP中的主要活性成分并与网络药理学所得靶点进行分子对接模拟以探索其具体机制.结果 体内实验结果表明,WZYZP可显著改善CTX诱导的OAS大鼠精子参数、血清睾酮水平(P＜0.001)和睾丸组织形态学.网络药理学结果表明WZYZP与OAS的关键通路为IL-17,关键靶点为Caspase3、p38、NF-κB、HSP90和ERK1/2.TUNEL染色结果表明,1.5 g·kg-1 WZYZP可显著降低OAS大鼠睾丸组织细胞凋亡(P＜0.05).Western Blotting 结果显示,与模型组相比,1.5 g·kg-1WZYZP 组 Caspase-3(P＜0.001)和HSP90AA1(P＜0.01)的表达水平明显降低,NF-κB(P＜0.05)、ERK1/2(P＜0.05)和p38(P＜0.05)磷酸化水平明显降低.分子对接模拟结果发现,8种主要活性成分(槲皮素、五味子醇甲、金丝桃苷、山柰酚、紫云英苷、五味子甲素、异槲皮素和绿原酸)和IL-17通路5种相关靶点(HSP90AA1、ERK、p38、NF-κB和Caspase3)的结合能均小于-20.92 kJ·mol-1,具有较好的结合亲和力.结论 WZYZP可通过下调IL-17通路减少细胞凋亡发挥治疗OAS作用.

目的 探讨五子衍宗丸对少弱精子症小鼠生精功能、六磷酸肌醇激酶 1(IP6K1)表达及线粒体DNA(mtDNA)甲基化的影响.方法 将雄性BALB/c小鼠随机分为对照组、模型组及五子衍宗丸(1、2、4 g/kg)组,每组 10 只.除对照组外,其他各组单次ip 40 mg/kg白消安.从造模第 2 天开始,各组按剂量ig给药,给药 4 周后计算睾丸和附睾脏器系数,检测精子数量和活力,苏木精-伊红(HE)染色观察小鼠睾丸病理组织学改变,TUNEL染色观察睾丸细胞凋亡情况,RT-qPCR、Western blotting和免疫组化(IHC)染色检测IP6K1 表达,Western blotting检测DNA甲基转移酶 1(DNMT1)表达,焦磷酸测序检测mtDNA D-loop甲基化,RT-qPCR检测线粒体基因表达.结果 五子衍宗丸可恢复少弱精子症小鼠的睾丸和附睾系数,显著提高精子数量和活力,明显改善睾丸组织病理学损伤和生精细胞的凋亡,显著促进IP6K1的表达,显著抑制DNMT1表达和线粒体D-loop甲基化水平,显著上调线粒体编码基因的表达(P＜0.5、0.1、0.001).结论 五子衍宗丸可改善少弱精子症小鼠的生精功能,其机制可能与促进IP6K1 表达,抑制DNMT1/mtDNA D-loop甲基化,进而促进线粒体编码基因的表达有关.

目的 探讨五子衍宗丸对黄体功能不全不孕(肾精亏虚)患者的治疗效果.方法 选取衡水市第二人民医院2020年2月至2022年1月收治的120例黄体功能不全不孕(肾精亏虚)患者,采用随机数字表法分为观察组和对照组,各60例.对照组予以地屈孕酮治疗,观察组予以地屈孕酮联合五子衍宗丸治疗.比较两组治疗前后症状评分、疗效、治疗前后内分泌和代谢指标、安全性及妊娠成功率.结果 治疗后两组主症、次症评分与总分均降低且观察均较低(P＜0.05);观察组总有效率高于对照组(P＜0.05);治疗后两组血清孕酮(P)、黄体生成素(LH)、卵泡刺激素(FSH)、雌二醇(E2)水平,以及高温相持续时间(HTPD)、高低温差(HLTD)、基础体温曲线高温相评分(HPS)均升高,且观察组均较高(P＜0.05);两组移行天数均减少且观察组较少(P＜0.05);两组不良反应发生率差异无统计学意义(P＞0.05);观察组妊娠成功率高于对照组(P＜0.05).结论 对黄体功能不全不孕(肾精亏虚)以五子衍宗丸联合地屈孕酮治疗可减轻症状、增强效果、改善内分泌及代谢状态,安全性高,且能显著提高妊娠成功率.

目的 系统评价五子衍宗丸治疗少弱精子症的有效性.方法 检索CNKI、Wanfang Database、VIP、CBM、Pubmed、Cochrane Library、Embase数据库中五子衍宗丸治疗少弱精子症的随机对照试验,检索时限为自建库-2022年7月31日,对文献进行筛选、资料提取,评估偏倚风险,采用RevMan 5.3软件进行Meta分析.结果 最终共纳入16项研究,包含1 960例患者,依据干预措施进行亚组分析,Meta分析结果显示,五子衍宗丸组治疗后在精子密度[MD=5.28,95％CI(1.55,9.02),P=0.006]、A 级精子[MD=6.69,95％CI(5.01,8.38),P＜0.000 01]、A+B 级精子[MD=10.57,95％CI(7.28,13.85),P＜0.000 01]、配偶妊娠率[RR=1.25,95％CI(1.13,1.39),P＜0.000 01]、总有效率[RR=1.46,95％CI(1.3,1.63),P＜0.000 01]均显著高于西药组;联合用药组治疗后在精液量[MD=0.88,95％CI(0.71,1.04),P＜0.000 01]、精子密度[MD=7.19,95％CI(1.92,12.46),P=0.007]、A 级精子[MD=7.9,95％CI(4.59,11.2),P＜0.000 01]、A+B 级精子[MD=8.52,95％CI(3.99,13.04),P=0.000 2]、配偶妊娠率[RR=1.79,95％CI(1.31,2.44),P=0.000 3]、总有效率[RR=1.23,95％CI(1.12,1.35),P＜0.000 01]均显著高于西药组.结论 五子衍宗丸单用或联合西药在改善精子密度、A级精子、A+B级精子、配偶妊娠率、总有效率指标上优于西药.

从溺窍的角度辨治反复发作性尿路感染(rUTI),提出尿路属"溺窍"范畴,认为排尿的生理过程与溺窍的功能密切相关.从窍体、窍枢、窍神三个维度架构了溺窍与五脏功能的生理联系,即肺热阴伤邪侮则窍体失养、心火灼燔神乱则窍神不利、肾虚肝郁脾滞则窍枢不利.rUTI初期以窍枢不利为主,当标本兼治,虚实兼顾,注重伴随症状的治疗,常根据辨证选用滋水清肝饮、肾着汤加减;中期窍体失养与窍神、窍枢不利同时存在,治当利窍通淋,常以清心莲子饮加减;后期以窍体失养为主,需进一步养窍体以防复,常以五子衍宗丸合二仙汤加减.同时针对窍体、窍枢、窍神选用特色药物,以祛外邪、扶正气以养窍体,畅情志、通气机以利窍枢,通心肾、养心神以安窍神.

目的 明确疏肝补肾毓麟汤畅通自噬流,通过PTEN诱导假定激酶1(PTEN-induced putative kinase 1,PINK1)/帕金蛋白(Parkin)通路,调节线粒体功能,提高精子活力的作用机制.方法 通过随机数字表法将SD大鼠分为正常组、模型组、疏肝补肾毓麟汤高剂量组、疏肝补肾毓麟汤低剂量组、五子衍宗丸对照组.采用腺嘌呤(0.05 g·kg-1)灌胃14 d,复制少弱精症大鼠模型.正常组与模型组给予等容0.9％氯化钠溶液,疏肝补肾毓麟汤高、低剂量组给药32.4 g/(kg·d)、8.1 g/(kg·d),五子衍宗丸对照组给药2.6 g/(kg·d).全自动精子分析仪检测精子活力,透射电镜观察睾丸组织中线粒体自噬的超微结构变化、JC-1线粒体膜电位检测试剂盒与流式细胞仪检测线粒体膜电位水平变化、免疫荧光标记线粒体外膜易位酶20(Translocase of the outer membrane of mitochondrion 20,TOMM20)与微管相关蛋白 1 轻链3Ⅱ(Microtubule-associat-ed protein 1 light chain 3Ⅱ,LC3Ⅱ)的共定位、PCR 与 Western Blot 检测睾丸组织 PINK1、Parkin、选择性自噬接头蛋白 62(Se-lective autophagy adaptor protein 62,P62)、微管相关蛋白1A/1B-轻链3(LC3Ⅱ/Ⅰ)的表达.结果 与正常组相比,模型组的精子活动力下降(P＜0.05),线粒体膜电位比例下降(P＜0.05),线粒体超微结构出现核周聚集,嵴受损或丢失,除了碎裂外,还有暗基质,以及外膜不规则,并且受损的线粒体与包括线粒体吞噬体在内的线粒体空泡相关,免疫双染中发现LC3Ⅱ的存在量明显增多,LC3Ⅱ与TOMM20的双重标记也增加,自噬相关指标PINK1、Parkin、LC3Ⅱ/Ⅰ、P62的基因与蛋白表达增加(P＜0.05).与模型组相比,疏肝补肾毓麟汤高剂量组、疏肝补肾毓麟汤低剂量组、对照组的精子活动力升高(P＜0.05),线粒体膜电位比例增加(P＜0.05),超微结构下正常形态的线粒体比例明显增多,且线粒体溶酶体的数量也减少,免疫双染中发现LC3Ⅱ的存在量明显减少,LC3Ⅱ与TOMM20的双重标记减少,自噬相关指标PINK1、Parkin、LC3Ⅱ/Ⅰ、P62的基因与蛋白表达减少(P＜0.05).与对照组相比,高剂量组的线粒体膜电位比例增加(P＜0.05);疏肝补肾毓麟汤高剂量组、疏肝补肾毓麟汤低剂量组超微结构下正常形态的线粒体比例明显增多,且线粒体溶酶体的数量也减少,免疫双染中发现LC3Ⅱ的存在量明显减少,LC3Ⅱ与TOMM20的双重标记减少,自噬相关指标PINK1、Parkin、LC3Ⅱ/Ⅰ、P62的基因与蛋白表达减少(P＜0.05).结论 疏肝补肾毓麟汤能改善精子活力低下症模型大鼠的精子活动力,可能是通过提高模型大鼠的线粒体膜电位水平,保护线粒体功能,下调PINK1、Parkin、LC3 Ⅱ/Ⅰ、P62的表达,并畅通自噬流,减轻线粒体的过度自噬来发挥作用.

目的 分析加味五子衍宗丸治疗黄体功能不全(LPD)不孕症患者的效果及对雌性激素、妊娠相关蛋白(PAPP-A)、血管内皮生长因子(VEGF)的影响.方法 选取 2021 年 11 月—2022 年 12 月收治的 160 例LPD所致肾虚精亏证不孕症.采用随机数字表法分为对照组和研究组,各80 例.对照组采用地屈孕酮片治疗,研究组在对照组基础上联用加味五子衍宗丸治疗,均治疗3 个月经周期.比较2 组临床疗效、妊娠成功率及治疗期间不良反应发生情况.比较治疗前后中医证候积分、血清PAPP-A、VEGF、卵泡素(FSH)、促黄体生成素(LH)、雌二醇(E2)和孕酮水平.结果 研究组总有效率为93.75%(75/80)高于对照组的82.50%(66/80)(P<0.05).治疗后,研究组FSH、LH、E2、孕酮、PAPP-A、VEGF水平高于对照组(P<0.05).随访3 个月经周期,研究组妊娠成功率为51.25%(41/80)明显高于对照组的35.00%(28/80)(P<0.05).2 组治疗期间均无药物不良反应发生.结论 地屈孕酮片联合加味五子衍宗丸治疗LPD所致肾虚精亏证不孕症获得较好临床效果,调节患者内分泌代谢,提高血清PAPP-A、VEGF水平,提高妊娠成功率.

目的:观察五子衍宗丸干预肾病综合征SD大鼠对生精细胞T型Ca2+通道及顶体酶PPEF1活性的影响及作用机制.方法:按照随机数字表法将70只SD大鼠分为空白组(蒸馏水1 mL灌胃)、肾病模型组(蒸馏水1 mL灌胃)、肾病模型+雷公藤多苷组(雷公藤多苷0.04 mg·kg-1·d-1灌胃)、肾病模型+五子衍宗丸组(五子衍宗丸1.07 g·kg-1·d-1灌胃)、肾病模型+雷公藤多苷+低剂量五子衍宗丸组(雷公藤多苷0.04 mg·kg-1·d-1与五子衍宗丸0.54 g·kg-1·d-1同时灌胃)、肾病模型+雷公藤多苷+中剂量五子衍宗丸组(雷公藤多苷0.04 mg·kg-1·d-1与五子衍宗丸1.07 g·kg-1·d-1同时灌胃)、肾病模型+雷公藤多苷+高剂量五子衍宗丸组(雷公藤多苷0.04 mg·kg-1·d-1与五子衍宗丸2.14 g·kg-1·d-1同时灌胃).通过鼠尾静脉注射阿霉素造成肾病综合征模型,除空白组外,其余各组于实验第1天和第8天分别鼠尾静脉注射阿霉素,第1天以4.0 mg/kg剂量注射、第8天以3.5 mg/kg剂量注射.实验各组连续灌胃干预30 d.采用膜片钳放大法记录生精细胞T型Ca2+通道电流变化情况;ELISA法测定顶体酶PPEF1活性;ELISA法测定血清中促性腺激素释放激素(GnRH)、雌二醇(E2)、促卵泡激素(FSH)、睾酮(T)和黄体生成素(LH)水平;荧光标记法测定顶体反应发生率.结果:与空白组比较,肾病模型组生精细胞T型Ca2+活性降低(P<0.01)、顶体酶PPEF1活性降低(P<0.05)、性激素GnRH、E2、T水平降低(P<0.05),性激素FSH、LH水平升高(P<0.05);与肾病模型组比较,肾病模型+雷公藤多苷组生精细胞T型Ca2+活性降低(P<0.01)、顶体反应发生率降低(P<0.05),性激素T水平降低(P<0.05),性激素FSH水平增高(P<0.05);与肾病模型+雷公藤多苷组比较,肾病模型+雷公藤多苷+中剂量五子衍宗丸组T型Ca2+活性升高、顶体酶PPEF1活性升高、顶体反应发生率升高、性激素GnRH、E2、T水平升高,FSH、LH水平降低(P<0.05);与肾病模型+雷公藤多苷+低剂量五子衍宗丸组比较,肾病模型+雷公藤多苷+中剂量五子衍宗丸组、肾病模型+雷公藤多苷+高剂量五子衍宗丸组T型Ca2+活性升高、性激素T水平升高(P<0.05).结论:五子衍宗丸可以提高生精细胞T型Ca2+电流、顶体酶PPEF1活性,促进顶体反应的发生,五子衍宗丸可以防治雷公藤多苷在肾病综合征治疗中的致不育副作用.

目的 加味五子衍宗丸联合地屈孕酮片在黄体功能不全(LPD)不孕症患者中的应用效果.方法 选取2021 年11 月—2022 年12 月180 例LPD不孕症,随机数字表法分为对照组和观察组,每组90 例,对照组采取地屈孕酮片治疗,于此基础上观察组联合加味五子衍宗丸治疗.观察2 组疗效、不良反应、妊娠率,比较治疗前后中医证候积分、高温相评分(HPS)、性激素[孕酮(P)、雌二醇(E2)]、子宫动脉血流阻力指数(RI)、搏动指数(PI)、子宫内膜厚度、Th1/Th2 细胞因子[白细胞介素-4(IL-4)、白细胞介素-13(IL-13)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、干扰素-γ(IFN-γ)]及子宫内膜容受性相关 miRNA 表达.结果 观察组总有效率 86.67%(78/90)高于对照组 65.56%(59/90)(P＜0.05).治疗后观察组各中医证候积分、RI、PI、TNF-α、IFN-γ水平低于对照组,基础体温HPS、子宫内膜厚度、P、E2、IL-4、IL-13 水平高于对照组(P＜0.05).治疗后观察组miR-494-5p、miR-544b表达量低于对照组,miR-4427 表达量高于对照组(P＜0.05).观察组不良反应总发生率10.00%与对照组6.67%比较,无显著差异(P＞0.05);观察组妊娠率高于对照组(P＜0.05).结论 在LPD不孕症患者治疗中,加味五子衍宗丸联合地屈孕酮片可增强疗效,改善子宫内膜容受性,促进胚胎植入,提高妊娠率,这可能与Th1/Th2 免疫应答、miRNA调控有关.