目的:探讨硒对肿瘤坏死因子-α（TNF-α）诱导的AC16心肌细胞炎性损伤的影响。方法:将体外培养的AC16心肌细胞分为对照组、硒预处理组（100 μg/L亚硒酸钠预处理4 h）、50 μg/L TNF-α组、硒预处理+ 50 μg/L TNF-α组、100 μg/L TNF-α组、硒预处理+ 100 μg/L TNF-α组。各组分别培养24 h后，收集细胞培养液和细胞进行检测。Griess法检测细胞培养液一氧化氮（NO）含量；荧光倒置显微镜观察细胞Hoechst 33342核染色，分析核固缩比例；实时荧光定量PCR检测B淋巴细胞瘤-2基因（Bcl-2）、B淋巴细胞瘤-2相关X蛋白（Bax）及诱导型一氧化氮合酶（iNOS）mRNA表达水平，蛋白质印迹法检测核因子-kappa B（NF-κB）p65、NF-κB抑制蛋白-α（IκB-α）蛋白表达水平。结果:对照组、硒预处理组、50 μg/L TNF-α组、硒预处理+ 50 μg/L TNF-α组、100 μg/L TNF-α组和硒预处理+ 100 μg/L TNF-α组细胞培养液NO含量分别为（10.58 ± 2.32）、（9.07 ± 0.73）、（15.53 ± 3.97）、（12.05 ± 1.11）、（30.65 ± 4.16）、（19.02 ± 3.72）μmol/L。硒、TNF-α对细胞培养液NO含量均存在主效应（ F = 37.71、99.07，均 P < 0.001），且二者间存在交互效应（ F = 11.80， P < 0.001）。硒、TNF-α对核固缩比例，Bcl-2、Bax mRNA表达水平均存在主效应（ F = 56.37、462.81，18.04、32.85，18.38、170.77，均 P < 0.05），且硒、TNF-α对核固缩比例，Bax mRNA表达水平均存在交互效应（ F = 21.48、19.96，均 P < 0.001）。硒、TNF-α对iNOS mRNA表达水平均存在主效应（ F = 129.98、1 051.76，均 P < 0.001），且二者间存在交互效应（ F = 53.28， P < 0.001）。硒、TNF-α对NF-κB p65、IκB-α蛋白表达水平均存在主效应（ F = 73.65、145.49，710.20、105.66，均 P < 0.001），且二者间均存在交互效应（ F = 26.73、197.59，均 P < 0.001）。 结论:硒可能通过NF-κB信号系统抑制iNOS表达，保护心肌细胞免受TNF-α诱导的炎性损伤。

目的:评价多种药物对急性羰基镍中毒大鼠肾组织谷胱甘肽（GSH）和超氧化物歧化酶（SOD）活力的干预效果。方法:于2019年1月，选择250只SPF级SD雄性大鼠按随机数字表法随机分为正常对照组（10只）、染毒对照组（40只）及治疗组（200只），其中治疗组分为甲泼尼龙（20 mg/kg）组、二乙基二硫氨基甲酸钠（DDC）（100 mg/kg）组、亚硒酸钠（10 μmol/kg）组、回阳注射液（0.25 ml）组、甲泼尼龙（20 mg/kg）+DDC（100 mg/kg）组，每组各40只。除正常对照组外，其余各组大鼠静态吸入羰基镍250 mg/m 3染毒30 min，分别于染毒后4 h和30 h对各治疗组大鼠腹腔注射相应药物，连续给药3 d或7 d后取肾组织，每组各10只。采用酶联免疫吸附实验测定肾组织GSH和SOD活力，透射电镜观察大鼠肾组织超微结构变化。 结果:与正常对照组比较，染毒4 h或30 h后3 d或7 d染毒对照组肾组织GSH、SOD活力均明显降低，差异有统计学意义（ P=0.000、0.031、0.001、0.033），肾近曲小管上皮细胞核明显固缩，胞质内溶酶体增生；与染毒对照组比较，染毒4 h后给药7 d甲泼尼龙+DDC组大鼠肾组织GSH和SOD活力明显增高，差异有统计学意义（ P=0.022、0.000），甲泼尼龙组、甲泼尼龙+DDC组给药7 d大鼠肾组织的GSH和SOD活力明显高于给药3 d者，差异有统计学意义（ P=0.020、0.017、0.018、0.033），电镜结果显示该两组的肾近曲小管上皮细胞核及胞质细胞器结构基本恢复正常组织水平。 结论:甲泼尼龙、甲泼尼龙+DDC对急性羰基镍中毒大鼠肾组织酶活力水平有明显修复作用，且用药时间长的治疗效果更好。

目的:探讨硒抑制长链非编码RNA HOXB cluster antisense RNA1(HOXB-AS1)表达调控胃癌增殖的作用及其机制。方法:对人胃癌HGC-27、SNU-1，KATO Ⅲ细胞和人胃黏膜上皮细胞使用实时聚合酶链反应(RT-PCR)检测细胞内HOXB-AS1基因表达水平；根据亚硒酸钠添加的浓度将高表达HOXB-AS1基因的细胞分为空白组、5 μmol/L组、10 μmol/L组、15 μmol/L组、20 μmol/L组、25 μmol/L组、30 μmol/L组，分别培养24、48、72 h后采用细胞计数试剂(CCK-8)检测各组细胞活力，筛选亚硒酸钠的最佳作用浓度；用30 μmol/L亚硒酸钠干预人胃癌HGC-27细胞，采用RT-qPCR检测细胞内HOXB-AS1基因表达水平，采用CCK-8检测细胞活力，采用流式细胞术检测细胞凋亡比例变化，运用蛋白质印迹法(Western blot)法检测蛋白激酶B(Akt)及雷帕霉素的哺乳动物靶标蛋白(mTOR)的表达水平。组间比较采用 t检验，多组间比较采用单因素方差分析。 结果:RT-PCR检测结果表明，与其他细胞株比较，人胃癌HGC-27细胞HOXB-AS1基因的表达水平最高(5.37±0.14， F＝386.913， P<0.05)；CCK-8结果显示30 μmol/L亚硒酸钠组的平均细胞抑制率都显著高于其他5组( F24 h＝178.105， F48 h＝1 093.759， F72 h＝473.833， P<0.05)；RT-PCR检测结果表明，亚硒酸钠干预后的HGC-27人胃癌细胞的HOXB-AS1表达水平(0.11±0.01)显著低于对照组( t＝43.895， P<0.05)，而细胞凋亡率[(36.36±0.46)%]则显著高于对照组( t＝－26.737， P<0.05)；Western blot结果显示亚硒酸钠组的Akt(1.02±0.00)、磷酸化Akt(p-Akt，0.32±0.02)、mTOR(0.79±0.00)和磷酸化mTOR(p-mTOR，0.49±0.02)的相对表达量都显著低于对照组( tAkt＝27.951， tp-Akt＝47.666， tmTOR＝37.898， tp-mTOR＝25.307， P<0.05)。 结论:硒能够通过抑制人胃癌细胞的lncRNA HOXB-AS1表达来影响Akt/mTOR通路，从而促进人胃癌细胞的凋亡来抑制胃癌的增殖。

目的:探讨亚硒酸钠对帕金森病(Parkinson's disease，PD)大鼠的运动功能及黑质区抗氧化能力的影响。方法:选取48只爬杆得分为0分的雄性SD大鼠，其中8只作为对照组(Ⅰ组)，其余40只连续7 d腹腔注射MPTP建立PD模型。利用行为学筛选建模成功的24只PD大鼠，随机分为MPTP组(Ⅱ组)、MPTP＋0.05 mg/kg Se组(Ⅲ组)、MPTP＋0.1 mg/kg Se组(Ⅳ组)，每组8只。灌胃30 d后对各组行为学、黑质部脂质过氧化物含量、谷胱甘肽过氧化物酶及超氧化物歧化酶的活性、黑质部病理变化、TH ＋细胞数量及TH mRNA水平进行分析。 结果:与Ⅰ组相比，Ⅱ组的方格间穿行格数显著降低[(95.40±14.66)格，(6.11±4.17)格， P<0.05]，竖起次数显著降低，爬杆得分显著增加( P<0.05)；MDA含量显著升高[(4.02±0.62)nmol/mg，(12.75±1.59)nmol/mg， P<0.05]；SOD、GSH-Px活性显著降低(均 P<0.05)；黑质区神经细胞皱缩、神经元数量减少，TH ＋细胞数和TH mRNA的表达水平显著降低(均 P<0.05) 。与Ⅱ组相比，Ⅲ组与Ⅳ组的方格间穿行格数显著增加[(88.80±24.61)格，(38.86±19.77)格，均 P<0.05]，竖起次数显著增加，爬杆得分显著降低(均 P<0.05)；Ⅲ组MDA含量显著降低(均 P<0.05)；SOD、GSH-Px活性显著升高( P<0.05)；黑质区神经细胞结构完整并且排列整齐，TH ＋细胞数和TH mRNA的表达水平显著增加( P<0.05)；Ⅳ组MDA含量没有差异性；SOD、GSH-Px活性升高，但差异无统计学意义( P>0.05)；黑质区神经细胞有所恢复，TH ＋细胞数有所增加，差异无统计学意义( P>0.05)。 结论:0.05 mg/kg的亚硒酸钠能明显改善PD大鼠运动功能，提高黑质部抗氧化能力，从而保护黑质区神经元。

目的:观察补硒对慢型克山病患者10年生存率的影响。方法:采用回顾性研究方法，自陕西省地方病防治研究所及西安交通大学收集陕西省克山病监测点302例慢型克山病患者的10年跟踪随访资料，其中170例（56.3%）患者在随访期内进行补硒（口服亚硒酸钠，每周1次，1 mg/次）,即为补硒组，其余132例为非补硒组。采用多因素COX比例风险模型，分析慢型克山病10年生存率的影响因素；随访期内慢型克山病10年生存率分析采用Kaplan-Meier法，组间慢型克山病患者10年生存率比较采用Log-rank检验。结果:随访截止日期是2019年10月。在随访期内，共199例（199/302，65.9%）慢型克山病患者死亡，其中101例（101/170，59.4%）为补硒组，98例（98/132，74.2%）为非补硒组。在COX比例风险模型中，经过其他基线特征[年龄、性别、身体质量指数（BMI）、克山病家族史、吸烟、血压、心率、心电图异常、初始心胸比、左室射血分数（LVEF）、血硒含量]调整后，补硒、使用血管紧张素转换酶抑制剂+ β-受体阻滞剂（ACEI + BBs）治疗均是慢型克山病患者10年生存的保护因素[补硒：风险比（ HR） = 0.39，95%置信区间（ CI）：0.28 ~ 0.53；ACEI + BBs： HR = 0.57，95% CI：0.39 ~ 0.84]。慢型克山病患者补硒后10年生存率明显高于非补硒组（Log-rank检验， P < 0.05）。 结论:补硒以及使用ACEI + BBs治疗，对于慢型克山病患者10年生存率有积极影响。

目的:基于溶质载体家族7 成员11-谷胱甘肽过氧化酶4(SLC7A11-GPx4)信号通路探讨硒对环磷酰胺(CTX)致生精功能损伤(SI)模型小鼠精子发生的改善作用及机制.方法:将36 只KM小鼠随机分为6 组,每组6 只,分别为SI模型对照组、缺硒模型(-SeSI)组、加硒模型(+SeSI)组,所有模型组均腹腔注射 100 mg/kg CTX,正常对照组、-Se对照组、+Se对照组,对照组均注射生理盐水,注射周期为每周1 次,连续6 周.采用HE染色法观察各组小鼠睾丸组织形态学及病理学变化,并对附睾中精子进行计数,Western 印迹试验检测 GPx4 和SLC7A11 蛋白表达,RT-qPCR检测铁死亡相关基因变化.将GC2-spd细胞随机分为正常对照组,Ferrostatin(Fer-1)组,Erastin组,-Se组,亚硒酸钠(SeS)0.5、5.0 μmol/L组,硒代蛋氨酸(SeM)5.0、50 μmol/L组,SeS+Erastin组,SeS+Fer-1 组,SeM+Erastin组,SeM+Fer-1 组,观察GC2-spd细胞铁死亡相关蛋白和基因水平的变化.结果:CTX诱导的SI模型组小鼠睾丸和前列腺脏器指数明显低于正常对照组,生精细胞内层次减少,空洞增加,血清铁蛋白浓度下降(P<0.05),转铁蛋白浓度上升(P<0.05);+Se SI模型组、+Se对照组分别较-Se SI模型组、-Se对照组的脏器系数升高(P<0.05,P<0.01),且+Se组睾丸组织病理变化明显改善.SI模型对照组较正常对照组小鼠睾丸GPx4 和SLC7A11 基因表达量降低(P<0.01),而+Se SI模型组、+Se对照组分别较-Se SI模型组、-Se对照组小鼠睾丸GPx4 和SLC7A11 基因显著上升(P<0.01,P<0.05),但两种蛋白表达量却无明显差异.体外GC2-spd细胞实验结果显示,-Se组较正常对照组GPx4 基因和GPx4 蛋白水平均显著降低(P<0.05),SLC7A11 基因水平下降(P<0.01);不同剂量的SeS和SeM均显著提高-Se组GPx4 蛋白表达,低剂量SeM促进GPx4 基因水平显著上升,高剂量SeS使SLC7A11 基因和SLC7A11 蛋白表达量增加(P<0.05,P<0.01).-Se组较正常对照组,acsl4 和ptgs2 基因水平明显下降,SeM促进acsl4 表达,SeS促进ptgs2 和fth1 的表达(P<0.01,P<0.05).GC2-spd干预结果显示Erastin组较正常对照组ptgs2 降低,SeS+Erastin、SeM+Erastin组较Erastin组ptgs2 基因表达均增加,但Fer-1 较正常对照组ptgs2 表达降低,SeS+Fer-1、SeM+Fer-1 组较Fer-1 组ptgs2 基因水平降低(P<0.05);SeM+Erastin、SeM+Fer-1 组分别较Erastin、Fer-1 组均GPx4 的基因量增加(P<0.01,P<0.05);SeM+Erastin、SeS+Erastin较Erastin组和SeM+Fer-1、SeS+Fer-1 组较Fer-1 组SLC7A11 均降低,且伴随着acsl4 和fth1 的升高(P<0.01).结论:硒缺乏导致小鼠睾丸和精母细胞SLC7A11 和GPx4 基因水平降低,铁死亡相关基因表达异常,GPx4 蛋白表达下降.硒促进GPx4 基因和GPx4 蛋白表达,提高SLC7A11 基因表达量,改善生精功能损伤小鼠睾丸的精子发生,且有机硒SeM和无机硒SeS对铁死亡通路相关基因的调控存在差异.

[目的]探讨参芪扶正汤治疗桥本氏甲状腺炎(HT)合并甲状腺功能减退的临床疗效,初步分析其治疗机制.[方法]选择秦皇岛市中医医院2020年1月—2023年1月收治的HT患者110例,按照随机数字表法分为观察组和对照组,每组55例,两组均口服左甲状腺素钠片,在此基础上,对照组口服亚硒酸钠片,观察组口服中药参芪扶正汤,疗程12周.比较两组治疗前后中医证候评分、甲状腺体积和峡部厚度、游离三碘甲状腺原氨酸(FT3)、游离甲状腺素(FT4)、促甲状腺素(TSH)、甲状腺球蛋白抗体(TGAb)、甲状腺过氧化物酶抗体(TPOAb),长链非编码RNA人母系表达基因3(lncRNA MEG3)、微小RNA-17(miR-17)、辅助性T淋巴细胞亚群17(Th17)、调节性T细胞(Treg)含量、Th17/Treg值,并比较两组治疗总有效率.[结果]治疗后观察组中医证候评分低于对照组(P＜0.05),甲状腺体积和峡部厚度均低于对照组(P＜0.05);血清FT3、FT4水平高于对照组(P＜0.05),TSH、TGAb、TPOAb水平低于对照组(P＜0.05);观察组 Th17、Th17/Treg、miR-17 低于对照组(P＜0.05),Treg、lncRNA MEG3 高于对照组(P＜0.05);治疗总有效率高于对照组(P＜0.05).[结论]参芪扶正汤可以改善中医证候和甲状腺功能,调节甲状腺自身抗体,减小甲状腺体积,治疗HT合并甲状腺功能减退效果显著,其机制可能与调节血清lncRNA MEG3、miR-17有关.

目的 研究硒(Se)对肺炎支原体(MP)感染大鼠血清中环氧合酶(COX-2)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的影响.方法 45只SD雄性大鼠,随机分为5组:空白对照组、模型对照组、实验A组(灌喂亚硒酸钠溶液,硒含量0.1 mg/kg)、实验B组(灌喂亚硒酸钠溶液,硒含量0.2 mg/kg)、实验C组(灌喂亚硒酸钠溶液,硒含量0.4 mg/kg),每组9只,不同浓度亚硒酸钠饲养12周后,模型对照组、实验A组、实验B组、实验C组大鼠均予MP菌液1×106 CFU/mL缓慢滴入大鼠鼻腔,共3 d,采用酶联免疫吸附试验(ELISA)方法检测MP干预后第3、7、14天大鼠血清中COX-2、TNF-α水平,并对肺组织炎症浸润程度进行评分.结果 MP感染后3、7、14 d,补充硒元素的实验A、B、C组肺组织炎性反应程度明显减轻,肺组织病理评分明显小于模型对照组,差异均有统计学意义(F=37.13、72.23、64.41,P均<0.001),实验组的炎性浸润及肺组织病理评分高峰时间大约出现在第7天,较模型对照组第14天明显缩短.MP感染第3、7、14天,实验A组、实验B组、实验C组血清谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)含量均明显高于模型对照组,差异有统计学意义(F=196.01、264.27、3 354.50,P均<0.05).与空白对照组比较,MP感染会引起血清中COX-2升高,MP接种干预第3、14天,实验A组、实验 B 组、实验 C 组血清中 COX-2 浓度明显低于模型对照组,差异均有统计学意义(F=1 321.80、875.70,P均<0.001);与空白对照组比较,MP感染会引起血清中TNF-α升高,MP接种干预第3、7、14天,实验A组、实验B组、实验C组血清中TNF-α的浓度明显低于模型对照组,差异均有统计学意义(F=955.68、7 408.61、87.18,P均<0.001).结论 Se可能参与调节MP感染后肺部的免疫炎症反应,下调MP感染后COX-2、TNF-α炎症因子的表达,减轻MP感染后肺部的炎症损伤.

目的 探讨化学修饰对血满草酸性多糖免疫活性的影响.方法 以血满草酸性多糖SPS-1 为原料,采用氯磺酸-吡啶法、氢氧化钠-氯乙酸法和乙酸-亚硒酸钠法分别制备了SPS-1硫酸化、羧甲基化和硒化衍生物,通过测定硫酸化、羧甲基化的取代度和硒含量以及红外光谱对衍生物进行验证,采用HPGPC分析其均一性和分子量,采用MTT法测定SPS-1及其衍生物对小鼠单核巨噬细胞RAW264.7 细胞增殖的影响,采用Griess法和ELISA技术测定细胞释放NO和细胞因子的水平.结果 SSPS-1 和CSPS-1 的取代度分别为 0.624 4 和 0.489 8,SeSPS-1 的硒含量为 1.702 1 μg/mg,红外光谱表明3 种修饰方法均可用于SPS-1的化学修饰,HPGPC结果显示化学修饰导致多糖分子量降低,但分布仍较均一.SPS-1及其衍生物均可显著促进RAW264.7 细胞的增殖及分泌NO、IL-1β、IL-6和TNF-α(P＜0.05,P＜0.01).结论 本研究为深入开展多糖结构与功能的关系分析奠定了基础.

探索岩藻多糖纳米硒(fucoidan-selenium nanoparticles,FD-SeNPs)的制备工艺条件,并进一步对其进行结构表征和抑制肿瘤细胞增殖的研究.以岩藻多糖(fucoidan,FD)为模板,采用抗坏血酸(ascorbic acid,Vc)还原亚硒酸钠(Na2SeO3)制备FD-SeNPs,通过单因素和响应面实验优化其工艺参数.采用傅里叶变换红外光谱仪(FT-IR)、扫描电子显微镜(SEM)、能量色散X射线谱仪(EDX)、透射电子显微镜(TEM)和X射线衍射仪(XRD)对其进行结构表征;运用MTT法测定其对HepG2肝癌细胞和A549肺癌细胞存活率的影响.结果表明,FD-SeNPs的最佳制备工艺参数为:反应时间为1 h、反应温度为35 ℃、抗坏血酸与亚硒酸钠的摩尔比为14∶1、FD浓度为0.8 mg/mL,在此条件下制备得到的FD-SeNPs粒径为(83.40±0.55)nm、电位为(-31.89±0.47)mV、含硒量达29.93％.经鉴定,FD-SeNPs的表面形貌为均一的球形,由77.59％ Se、17.70％C和3.41％ O元素组成.MTT实验结果表明,FD-SeNPs能显著抑制HepG2肝癌细胞和A549肺癌细胞的增殖,具有良好的剂量效应.上述结果表明,已成功制备FD-SeNPs并表现出一定的抑制肿瘤细胞增殖的能力,为其在抗肿瘤临床药物的应用开发提供了一定的技术手段和理论数据参考.