目的:评价青蒿琥酯对小鼠肠缺血再灌注致肺损伤的影响及其与血红素加氧酶-1(HO-1)的关系。方法:SPF级健康雄性C57BL/6小鼠24只，8~9周龄，体重18~22 g，采用随机数字表法分为4组( n＝6)：假手术组(Sham组)、肠缺血再灌注组(I/R组)、青蒿琥酯组(A组)和青蒿琥酯＋HO-1抑制剂锡原卟啉Ⅸ组(AS组)。采用夹闭肠系膜上动脉45 min再灌注2 h的方法建立肠缺血再灌注损伤模型。A组于缺血前1 h经尾静脉注射青蒿琥酯40 mg/kg，AS组于缺血前12 h经尾静脉注射锡原卟啉Ⅸ 7.5 mg/kg，缺血前1 h经尾静脉注射青蒿琥酯40 mg/kg。于再灌注2 h时麻醉处死动物，取肺组织，测定湿重/干重(W/D)比值，HE染色光镜下观察病理学结果并进行肺损伤评分，采用比色法测定肺组织髓过氧化物酶(MPO)活性及MDA含量，采用荧光定量PCR法测定肺组织IL-6 mRNA的表达，采用TUNEL法检测细胞凋亡指数(AI)。 结果:与Sham组比较，I/R组肺损伤评分、W/D比值、MPO活性、MDA含量和AI升高，IL-6 mRNA表达上调( P<0.05)；与I/R组比较，A组肺损伤评分、W/D比值、MPO活性、MDA含量和AI降低，IL-6 mRNA表达下调( P<0.05)；与A组比较，AS组肺损伤评分、W/D比值、MPO活性、MDA含量和AI升高，IL-6 mRNA表达上调( P<0.05)。 结论:青蒿琥酯可减轻小鼠肠缺血再灌注致肺损伤，机制可能与激活HO-1有关。

目的:探究青蒿琥酯(artesunate，ART)对大鼠脑卒中后神经元凋亡、炎性反应及小胶质细胞极化的影响。方法:(1)动物实验：将27只雄性SPF级SD大鼠按照随机数字表法分为假手术组、模型组及ART治疗组，每组9只。模型组和ART治疗组大鼠通过大脑中动脉闭塞法(middle cerebral artery occlusion，MCAO)建立脑卒中模型。ART治疗组大鼠于造模前3 d每天单次腹腔注射ART(25 mg/kg)，假手术组和模型组注射等体积溶剂。造模24 h后，采用TTC染色评估脑梗死体积，Western blot检测梗死区、半暗带及海马区抗凋亡蛋白Bcl2的表达，TUNEL法检测神经元凋亡，组织免疫荧光观察大脑皮质半暗带区域肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α，TNF-α)的表达。(2)细胞实验：培养小胶质细胞BV2，分为对照组、氧糖剥夺/复氧组、氧糖剥夺/复氧+0.05 μmol/L ART组、氧糖剥夺/复氧+0.1 μmol/L ART组及氧糖剥夺/复氧+ 0.5 μmol/L ART组。通过qRT-PCR检测炎性因子白介素-6(interleukin-6，IL-6)、白介素-1β(interleukin-1β，IL-1β)及TNF-α的表达；通过Western blot检测M2型小胶质细胞标志蛋白CD206和ARG1的表达；收集上述各组的BV2细胞培养基作为条件培养基，培养海马神经元细胞HT22，通过CCK8法检测细胞活性。采用GraphPad Prism 7软件进行数据分析，多组间比较采用单因素方差分析，进一步的两两比较采用LSD法。结果:(1)动物实验结果：TTC染色结果显示，ART治疗组大鼠脑梗死体积百分比小于模型组[(23.09± 8.51)%，(39.63±5.71)%， t＝33.93， P<0.01]。TUNEL染色结果显示，模型组和ART治疗组凋亡细胞数目均高于假手术组[(638.90±177.82)个/mm 2，(72.75±13.21)个/mm 2，(16.16±2.73)个/mm 2，均 P<0.05]，且ART治疗组凋亡细胞数低于模型组( P<0.05)。Western blot结果显示，模型组的半暗带及梗死区的Bcl2蛋白表达均低于假手术组(均 P<0.05)。而与模型组相比，ART治疗组的半暗带、海马区和梗死区的Bcl2蛋白表达均高于模型组(均 P<0.05)。组织免疫荧光结果显示，模型组和ART治疗组TNF-α荧光强度均高于假手术组(均 P<0.05)，而ART治疗组TNF-α荧光强度低于模型组( P<0.05)。(2)细胞实验结果：qRT-PCR结果显示，与对照组相比，氧糖剥夺/复氧组细胞中IL-6 、IL-1β及TNF-α的mRNA水平均显著升高(均 P<0.05)，而氧糖剥夺/复氧+0.05 μmol/L ART组、氧糖剥夺/复氧+0.1 μmol/L ART组及氧糖剥夺/复氧+0.5 μmol/L ART组中IL-1β、IL-6、TNF-α的mRNA表达均显著低于氧糖剥夺/复氧组(均 P<0.05)。Western blot结果显示，与对照组相比，氧糖剥夺/复氧组CD206[(0.85±0.04)，(1.07±0.07)， P<0.05]表达显著下调；而与氧糖剥夺/复氧组相比，氧糖剥夺/复氧+0.1 μmol/L ART组CD206(1.22±0.06)、ARG1(1.35±0.08)，及氧糖剥夺/复氧+0.5 μmol/L ART组CD206(1.24±0.14)、ARG1 (1.14±0.07)的蛋白表达均显著高于氧糖剥夺/复氧组[(0.85±0.04)，(0.85±0.05)均 P<0.05]。CCK8结果显示，与对照组相比，氧糖剥夺/复氧组细胞活力显著下降( P<0.05)。氧糖剥夺/复氧+0.05 μmol/L ART组、氧糖剥夺/复氧+0.1 μmol/L ART组、氧糖剥夺/复氧+0.5 μmol/L ART组细胞活力均高于氧糖剥夺/复氧组(均 P<0.05)。 结论:ART可以减少脑卒中后神经元凋亡，降低脑卒中后神经炎性反应，可以促进氧糖剥夺/复氧激活的小胶质细胞BV2向M2型极化。

目的:探讨青蒿素抑制Nod样受体家族包含pyrin结构域蛋白3(NLRP3)复合物对心肌缺血再灌注损伤的保护作用。方法:选用SD大鼠，结扎左冠状动脉前降支，构建大鼠心肌缺血再灌注损伤模型，并随机分为对照组、模型组和青蒿素组，每组10只。其中10只不结扎的大鼠作为假手术组。青蒿素组大鼠建模前灌胃25 mg/kg青蒿素，模型组和对照组建模前灌胃等体积生理盐水。3组大鼠造模1 d后采用生化酶法检测心肌损伤标志物酸激酶(CK-MB)、乳酸脱氢酶(LDH)和肌钙蛋白Ⅰ(cTn Ⅰ)；采用TTC染色分析3组大鼠梗死百分比；采用酶联免疫吸附试验(ELISA)分析白细胞介素(IL)-1β和IL-18的表达水平；采用蛋白质印迹法(Western blot)分析大鼠心肌组织半胱氨酰天冬氨酸特异性蛋白酶(Caspase)-1/NLRP3表达水平。组间比较采用单因素方差分析。结果:青蒿素组大鼠血清CK-MB、LDH和cTn Ⅰ水平[(2 424.30±199.06) U/L、(1 128.30±118.46) U/L、(35.26±3.56) pg/ml]明显低于模型组[(4 105.10±191.55) U/L、(1 682.00±155.21) U/L、(73.46±8.67) pg/ml]，差异有统计学意义( t＝19.240、8.968、12.890， P<0.05)。青蒿素组大鼠心肌梗死百分比[(28.05±4.51)%]明显低于模型组[(46.07±4.27)%]，差异有统计学意义( t＝9.163， P<0.05)。青蒿素组大鼠血清IL-1β和IL-18水平[(92.80±7.94)、(81.40±4.50) pg/ml]明显低于模型组[(172.60±11.62)、(117.70±7.89) pg/ml]，差异有统计学意义( t＝17.930、12.640， P<0.05)。青蒿素组大鼠心肌组织Caspase-1和NLRP3表达水平(1.37±0.10、1.34±0.05)明显低于模型组(1.80±0.11、2.00±0.13)，差异有统计学意义( t＝9.542、14.670， P<0.05)。 结论:青蒿素通过抑制NLRP3复合物活性，降低IL-1β和IL-18表达水平，进而对大鼠缺血再灌注损伤心肌组织起保护作用。

目的:研究丹参作为寄主植物对檀香幼苗生长的影响.方法:设置檀香空白对照组(TXCK)、檀香+假蒿寄生组(TXJH)、檀香+丹参寄生组(TXDS)3个不同处理组,测定檀香幼苗的生物量、叶绿素含量、生化组分和土壤营养成分等指标.结果:TXDS组的株高、根长、吸器直径均显著高于TXJH组(P＜0.05),是TXJH组的1.32～1.82倍.TXDS组的叶绿素a、叶绿素b及叶绿素总量均显著高于TXJH组(P＜0.05),为TXJH组的1.41～1.49倍.TX-DS组地上部分SOD和可溶性糖含量最高,但与TXJH组无显著差异;TXDS组地下部分SOD、可溶性糖含量显著高于TXCK、TXJH组(P＜0.05);TXCK组地下部分蛋白含量显著高于TXDS组(P＜0.05).TXCK组全氮、全磷、碱解氮、速效磷和速效钾含量均显著高于TXDS组(P＜0.05),是TXDS组的1.44～1.73倍,但与TXJH组无显著差异,TXCK组全钾含量为1.94％,显著高于TXJH组(P＜0.05),是TXJH组的1.60倍,但与TXDS组无显著差异.结论:寄主植物丹参能更好地促进檀香的生长,提高其光合作用,增加营养物质含量,促进对土壤营养成分的吸收,是檀香幼苗期的优良寄主植物,为栽培檀香寄主植物的选择提供了参考.

目的:探究不同寄主种类对半寄生植物百蕊草植株生长及有效成分含量的影响.方法:采用丹参、夏枯草、截叶铁扫帚、决明、紫花地丁、假蒿、鼠曲草、小麦和假俭草为百蕊草的寄主进行盆栽试验,从百蕊草生长指标叶片数、株高、根长、根粗、吸器数、吸器大小、全草重及有效成分含量进行综合评价.结果:百蕊草叶片数和全草重在小麦寄主组表现最高,分别为43片、0.51 g;百蕊草根长和吸器数在丹参寄主组表现最高,分别为17.4 cm、86.6个;百蕊草的百蕊草素Ⅰ、紫云英苷和5种黄酮类成分总含量在丹参寄主组中含量最高,分别为3.99、0.08、7.36 mg/g;小麦寄主组的山柰酚-7-O-葡萄糖苷和芹菜素-7-O-β-D-吡喃葡萄糖苷含量最高,分别为0.19、3.42 mg/g;综合评价结果显示丹参、小麦、决明和假俭草寄主组的综合得分较高,分别为0.2263、0.1757、0.1623、0.1558.结论:丹参是最适合百蕊草生长的寄主,其次小麦、决明、假俭草可作为百蕊草的适宜寄主.

随着各种环境压力的日益增大,传粉昆虫多样性及其保护研究逐渐得到重视.为了调查三江源地区传粉昆虫的基本概况,于2021年7-9月通过随机样点法和定点观测法对14类(4目12科)传粉昆虫类群的传粉活动进行了观测.共得到传粉活动记录7 247条,观察到受访植物37种(13科31属).分析结果表明,三江源地区传粉昆虫类群的传粉活力由高到低依次是熊蜂(访花频次占总频次的70.13％)、其他双翅目昆虫(11.19％)、灰蝶(10.49％)和蛱蝶(3.08％),而其他的传粉昆虫类群的访花频次占比不足1％,传粉作用较弱;其中,熊蜂在不同植物上的访花活动会呈现不同的高峰期:如在甘肃马先蒿Pedicularis kansuensis上呈现两个访花高峰期(11:00-12:00 和 18:00-19:00),而在假水生龙胆 Gentiana pseudoaquatica 上只有一个访花高峰期(11:00-12:00)等.研究显示,熊蜂是三江源地区传粉活力最高的传粉昆虫类群,且其访花的日活动规律因自身特性、受访植物种类和外界环境变化呈现不同的访花高峰期.三江源地区的生态平衡离不开传粉昆虫的作用,加强对传粉昆虫的保护有助于三江源地区的生态恢复.本研究可为未来开展三江源地区传粉昆虫的传粉生物学研究提供参考,同时也对三江源地区生物多样性的保护提供理论数据.

目的 探讨青蒿琥酯(Art)对氟化钠(NaF)所致骨细胞MLO-Y4损伤的改善作用及其分子机制.方法 NaF(2 mmol·L-1)与MLO-Y4细胞共孵育 48 h,构建MLO-Y4细胞损伤模型.细胞分为细胞对照组、NaF组及NaF+Art 0.25,0.50和1.00 μmol·L-1组(Art预孵育2h后,加NaF继续孵育12或48 h).MTT法检测细胞存活率.钙黄绿素乙酰甲酯(calcein-AM)染色观察细胞活性.化学比色法检测乳酸脱氢酶(LDH)水平,DCFH-DA染色检测活性氧(ROS)水平,化学比色法检测丙二醛(MDA)含量和超氧化物歧化酶(SOD)活性,Hoechst33342染色和Annexin-V/PI染色分析细胞凋亡,JC-1染色检测线粒体膜电位(MMP),Lyso-Tracker和Mito-Tracker染色观察自噬泡形成和线粒体形态,荧光素酶法检测腺嘌呤核苷三磷酸(ATP)含量,免疫荧光染色检测微管相关蛋白轻链3(LC-3)在线粒体中的表达,Western印迹法检测LC-3、p62、PTEN诱导假定激酶1(PINK1)和E3泛素-连接酶(Parkin)蛋白表达水平.结果 与细胞对照组比较,NaF组细胞存活率和细胞活性显著降低(P<0.01),LDH含量、ROS水平、MDA含量、细胞凋亡率和自噬泡形成明显增加(P<0.01),PINK1和Parkin蛋白表达增加(P<0.01),LC3在线粒体中的表达增加且LC-3Ⅰ向LC-3Ⅱ转换增加(P<0.01),SOD活性、MMP水平、ATP水平和P62蛋白表达显著降低(P<0.05,P<0.01).与NaF组比较,NaF+Art 0.25,0.50和1.00 μmol·L-1组细胞活性和存活率显著增加(P<0.01),LDH含量、ROS水平、MDA含量、细胞凋亡率和自噬泡形成明显减少(P<0.05,P<0.01),PINK1和Parkin蛋白表达下降(P<0.01),LC3在线粒体中的表达下降且LC-3Ⅰ向LC-3Ⅱ转换减少(P<0.01),SOD活性、MMP、ATP水平和P62蛋白表达显著增加(P<0.05,P<0.01).结论 Art对NaF所致MLO-Y4细胞氧化损伤具有改善作用,其机制可能与减少细胞凋亡和线粒体自噬水平有关.

目的 探讨青蒿素减轻心脏骤停-心肺复苏(CPR)所致肺损伤的作用及机制.方法 22头大白猪随机分为假手术(S)组(6头)、CPR组(8头)和CPR+青蒿素组(8头).CPR组和CPR+青蒿素组采用电刺激诱导心脏骤停9 min与人工CPR 6 min的方法建立猪CPR模型.造模成功后,CPR+青蒿素组在2 h内静脉匀速泵入青蒿素4.8 mg/kg,S组和CPR组采用相同方法给予等量生理盐水.于造模前及造模后1、2、4h,应用脉搏指示连续心排血量监测仪检测血管外肺水指数(ELWI)和肺血管通透性指数(PVPI)的变化.于造模后24 h,采用Western blot法检测NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3(NLRP3)、剪切型Caspase-1(cleaved Caspase-1)和消皮素D-N端(GSDMD-N)蛋白表达,ELISA法检测IL-1β和IL-18含量.结果 与S组相比,在造模后1、2、4 h时CPR组ELWI和PVPI升高,在造模后1、2 h时CPR+青蒿素组PVPI升高(P＜0.05).与CPR组相比,在造模后2、4 h时CPR+青蒿素组ELWI和PVPI降低(P＜0.05).与S组相比,CPR组和CPR+青蒿素组肺组织中cleaved Caspase-1和GSDMD-N蛋白表达及IL-1β和IL-18含量升高(P＜0.05).与CPR组相比,CPR+青蒿素组肺组织中NLRP3、cleaved Caspase-1和GSDMD-N蛋白表达及IL-1β、IL-18含量下降(P＜0.05).结论 青蒿素能抑制猪心脏骤停-CPR后肺组织中NLRP3炎症小体介导的细胞焦亡过程,从而减轻心脏骤停-CPR所致肺损伤.

明确双氢青蒿素(dihydroartemisinin,DHA)与普瑞巴林(pregabalin,PGB)联用对小鼠神经病理性疼痛(neuropathic pain,NP)的干预作用,并探索其神经炎症调控的初步机制.以脊神经结扎法建立NP小鼠模型,假手术组暴露脊神经而不结扎.随机分为假手术组,模型组,PGB低、中、高剂量(PGB-L、PGB-M、PGB-H,22、45、91 mg·kg-1)组、DHA(16 mg·kg-1)组、DHA联合PGB低剂量、中剂量、高剂量(DHA+PGB-L、DHA+PGB-M、DHA+PGB-H)组.造模第 1～18 天灌胃给药.以Von Frey法检测小鼠机械痛阈值,冷板法检测冷痛敏,悬尾及强迫游泳实验检测抑郁行为,旷场实验检测焦虑行为,Morris水迷宫检测认知功能.液相悬浮芯片技术对免疫炎症相关因子进行定量分析,免疫荧光检测CC趋化因子配体 3(CCL3)、跨膜蛋白119(TMEM119)表达.结果显示,与假手术组比较,模型组小鼠机械痛及冷痛敏阈值显著降低;悬尾实验、强迫游泳停止挣扎时间显著增加;旷场实验在中心区域活动时间显著减少;Morris水迷宫在第二/四象限的停留时间显著多于其余象限,撤台后上台潜伏期显著增加,免疫荧光TMEM119 阳性细胞数量显著增多,胞体面积显著增大,CCL3 表达显著增加.与模型组比较,DHA+PGB-M组机械痛、冷痛敏阈值显著增加,悬尾、强迫游泳停止挣扎时间显著增加,旷场实验在中心区域活动时间显著减少,Morris水迷宫在第二/四象限的停留时间显著少于其余象限,撤台后上台潜伏期显著减少.与PGB-M组比较,DHA+PGB-M组D14-17 机械痛阈值显著增加,强迫游泳停止挣扎时间显著增加,Morris水迷宫在第二/四象限的停留时间显著少于其余象限.与模型组比较,DHA+PGB-M组TMEM119 阳性细胞数量明显减少,胞体面积明显减小,CCL3 表达明显降低.该研究表明,DHA-PGB联用可以增强PGB对NP小鼠的镇痛效果,突破PGB耐受性的局限,弥补PGB在抗抑郁、改善认知方面的不足,相关机制可能与抑制小胶质细胞活化及CCL3 表达调控神经炎症有关.

目的 分析苦蒿素改善急性肺损伤(acute lung injury,ALI)的机制.方法 60 只新生大鼠随机等分为假手术组、模型组、苦蒿素低、中、高剂量组和地塞米松组.血氧分压(PaO2)和肺干湿重比(W/D)评估肺水肿;HE染色检测肺组织病理损伤;ELISA检测大鼠支气管肺泡灌洗液(bronchoalveolar lavage fluid,BALF)中氧化应激和炎性水平;蛋白质印迹法检测大鼠肺组织高迁移率族蛋白B1(high mob-ility group box 1 protein,HMGB1)/核因子κB(nuclear factor kappa-B,NF-κB)信号通路相关蛋白表达.结果 与模型组相比,苦蒿素高剂量组PaO2明显上升,W/D和肺损伤评分、BALF炎症和氧化应激水平、肺组织HMGB1、TLR4 和p-NF-κB P65/NF-κB P65 表达明显下降(P<0.05).结论 苦蒿素通过提高抗氧化抗炎活性及阻断HMGB1/NF-κB信号通路改善ALI.