目的:采用基于脑损伤标志物的潜在类别分析，评价老年患者术前脑损伤程度与术后谵妄(POD)的关系。方法:选择拟行单侧全髋关节置换术老年患者131例，年龄65～84岁，BMI 18～28 kg/m 2，ASA分级Ⅰ-Ⅲ级。术前通过简易智力状态检查量表(MMSE)评估认知功能，麻醉前取动脉血样，采用ELISA法检测血浆脑源性神经营养因子(BDNF)、诱导型一氧化氮合酶(iNOS)、前列腺素E2 (PGE2)、中枢神经特异性蛋白(S100β)、神经胶质酸性蛋白(GFAP)、神经纤维丝轻链(NFL)、基质金属蛋白酶(MMP9)、成纤维细胞生长因子23(FGF-23)、补体3(C3)、补体3a(C3a)、补体5a(C5a)及鸢尾素(Irisin)浓度。术后3 d内采用意识模糊评估法(CAM)评估POD发生情况，将患者分为POD组与非POD组。使用潜在类别分析，根据脑损伤标志物水平将患者分为不同损伤程度亚型，并用logistic多因素回归分析患者POD的独立危险因素。 结果:与非POD组比较，POD组患者血浆NFL、GFAP、S100β和PGE2浓度差异有统计学意义( P<0.05)。应用这4种脑损伤标记物进行潜在类别分析，将患者分为高脑损伤程度(91.51%)和低脑损伤程度(8.49%)。logistic多因素回归结果显示，脑损伤程度亚型( OR＝8.31，95% CI 1.77～38.90， P＝0.007)、年龄( OR＝1.14，95% CI 1.03～1.24， P＝0.007)及血浆Irisin浓度( OR＝0.99，95% CI 0.98～0.99， P＝0.027)是POD的独立危险因素。 结论:术前脑损伤程度较高是老年患者POD的独立危险因素。

目的:探讨高压氧联合针灸辅助治疗对糖尿病周围神经病变(diabetic peripheral neuropathy, DPN)患者神经传导速度、腓肠肌神经阈值、病情相关因子及氧化应激的影响。方法:从2018年6月至2019年5月烟台山医院内分泌科收治的DPN患者中随机选取114例，按照随机数字表法分为研究组(57例)与对照组(57例)。2组患者均给予控制血糖、饮食疗法及运动指导等常规治疗，在此基础上，对照组仅给予高压氧治疗，研究组给予高压氧联合针灸治疗。观察2组患者的临床疗效、神经传导速度、腓肠肌神经阈值、病情相关因子和氧化应激指标变化。结果:对照组和研究组患者临床有效率分别为77.19%和91.23%，研究组明显高于对照组，差异有统计学意义( P<0.05)。与治疗前相比，治疗后研究组患者胫神经、腓神经、正中神经的感觉神经传导速度和运动神经传导速度均明显快于对照组，腓肠肌神经阈值均明显低于对照组，血清C肽(C peptide，CP)、脑源性神经营养因子(brain derived neurotrophic factor，BDNF)、基质细胞衍生因子-1α(stromal cell derived factor -1α，SDF-1α)、超氧化物歧化酶(superoxide dismutase，SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(glutathione peroxidase , GSH-Px)、一氧化氮(nitric oxide，NO)、过氧化氢酶(catalase，CAT)水平均明显高于对照组，高迁移率族蛋白B1(high mobility group protein B1，HMGB1)、髓鞘碱性蛋白(myelin basic protein，MBP)、胱抑素C(cystatin C，CysC)及丙二醛(malondialdehyde ，MDA)水平均明显低于对照组，差异均有统计学意义(均 P<0.05)。 结论:高压氧联合针灸治疗DPN的临床疗效显著，能够明显改善患者的神经传导速度，调节HMGB1、CP、BDNF、MBP、SDF-1α、CysC等因子水平，减轻机体氧化应激反应。

目的:探讨急性期川崎病(Kawasaki disease，KD)患儿粒细胞样髓源抑制细胞(granulocyte-like myeloid-derived suppressor cells，G-MDSC)改变及其在KD免疫发病机制中的作用。方法:急性期KD患儿42例，分别于静脉输注丙种球蛋白(intravenous immune globulin, IVIG)治疗前、后直接取血备检，正常同龄儿童32例为对照组。流式细胞术检测外周血HLA-DR -CD11b +CD33 +CD14 -CD15 +G-MDSC比例、活性氧(reactive oxygen species, ROS)浓度以及精氨酸酶-1(arginase-1, Arg-1)、细胞程序性死亡配体1(programmed death-ligand 1, PD-L1)、细胞毒性T淋巴细胞相关蛋白4(cytotoxic T lymphocyte associated protein 4, CTLA4)、糖蛋白130(glycoprotein 130, gp130)、磷酸化信号转导和转录激活因子3(phosphorylated signal transducer and activator of transcription 3, pSTAT3)的蛋白质表达水平；实时荧光定量PCR检测诱导型一氧化氮合酶(inducible nitric oxide synthase, iNOS)、干扰素调节因子8(interferon regulatory factor 8, IRF-8)、IL-6受体α(IL-6 receptor α subunit, IL-6Rα)、粒细胞集落刺激因子受体(granulocyte colony-stimulating factor receptor, G-CSFR)、CCAAT/增强子强合蛋白β(CCAAT/enhancer binding protein β，C/EBPβ)、细胞因子信号抑制物1(suppressor of cytokine signaling 1, SOCS1)、SOCS3 mRNA表达；染色质免疫共沉淀法检测SOCS1、SOCS3基因启动子组蛋白H3乙酰化水平；ELISA检测血浆IL-6、粒细胞集落刺激因子(granulocyte colony-stimulating factor, G-CSF)及培养上清中IL-10、转化生长因子-β(transforming growth factor-β，TGF-β)、一氧化氮(nitric oxide, NO)浓度。 结果:(1)与对照组比较，急性期KD患儿外周血G-MDSC比例、胞内ROS浓度以及Arg-1、PD-L1、CTLA4表达水平明显增高( P<0.05)，LPS刺激的G-MDSC培养上清中IL-10、TGF-β浓度亦高于对照组( P<0.05)，但合并冠状动脉损伤组(CAL)患儿前述7项指标均低于未合并冠状动脉损伤组(NCAL)，差异有统计学意义( P<0.05)，经IVIG治疗呈不同程度恢复( P<0.05)；各组间iNOS表达及培养上清中NO浓度差异无统计学意义( P>0.05)。(2)急性期KD患儿血浆IL-6、G-CSF浓度及G-MDSC中IL-6Rα、gp130、G-CSFR、pSTAT3、C/EBPβ表达显著增高，抑制性转录因子IRF-8表达水平明显低于对照组( P<0.05)，其中CAL组血浆IL-6、G-CSF浓度及IL-6Rα、gp130、G-CSFR、IRF-8表达高于NCAL组( P<0.05)，而pSTAT3、C/EBPβ表达低于NCAL组( P<0.05)，经IVIG治疗后明显恢复( P<0.05)。(3)与对照组比较，急性期KD患儿外周血G-MDSC胞内SOCS1、SOCS3表达水平及其启动子组蛋白H3乙酰化水平明显降低( P<0.05)，但CAL组前述4项指标均高于NCAL组( P<0.05)，经IVIG治疗后明显恢复( P<0.05)。相关分析显示，急性期KD患儿G-MDSC胞内SOCS1、SOCS3表达与pSTAT3的蛋白质水平呈负相关( r＝-0.46和-0.32, P<0.05)。 结论:SOCS1和SOCS3基因组蛋白乙酰化修饰水平异常所致G-MDSC数量及功能缺陷可能与KD患儿免疫功能紊乱及血管损伤有关。

目的:探讨内源性一氧化氮(NO)对人脐静脉内皮细胞(HUVECs)超氧化物歧化酶1(SOD1)活性及内皮细胞凋亡的调节作用。方法:以HUVECs为研究对象，采用内皮型一氧化氮合酶(eNOS)短发夹RNA (shRNA)慢病毒转染对内皮细胞eNOS进行敲低，HUVECs分为4组：空载体组(scramble)、转染eNOS shRNA组(eNOS shRNA)、转染eNOS shRNA+硝普钠(SNP)组(eNOS shRNA+SNP)及转染eNOS shRNA+SNP+三(2-羧乙基)膦盐酸盐(TCEP)组(eNOS shRNA+SNP+TCEP)。采用Western blot法检测eNOS蛋白表达和SOD1二聚体/单体蛋白表达，采用酶联免疫吸附法检测SOD酶活性，采用NO荧光探针法检测内皮细胞NO水平，采用二氢乙锭(DHE)检测内皮细胞超氧化物阴离子水平，采用原位末端转移酶标记技术检测内皮细胞凋亡情况。结果:与空载体组相比，eNOS shRNA组中内源性NO水平(2.690±0.420比15.029±2.193， P<0.01)、eNOS蛋白表达(1.000±0.778比3.141±0.199， P<0.01)、SOD1二聚体/单体比例(4.6±1.0比7.6±2.0， P<0.05)和SOD活性[(0.432±0.254) Carmen′s unit/10 4 cell比(1.000±0.116) Carmen′s unit/10 4 cell， P<0.01]均显著降低，细胞内超氧阴离子水平(11.180±1.560比6.146±1.007， P<0.01)和HUVECs凋亡水平[75.0(55.0，100.0)%比0(0，0)%， P<0.01]均显著增加。与eNOS shRNA组相比，eNOS shRNA+SNP组中内源性NO含量(16.705±0.116比2.690±0.420， P<0.01)、SOD1二聚体/单体比例(7.3±2.0比4.6±1.0， P<0.05)和SOD活性[(0.737±0.060) Carmen′s unit/10 4 cell比(0.432±0.254) Carmen′s unit/10 4 cell， P<0.05]均显著增加，细胞内超氧阴离子水平(6.897±1.648比11.180±1.560， P<0.01)和HUVECs凋亡水平[0(0，0)%比75.0(55.0，100.0)%， P<0.01]均显著下降。与eNOS shRNA+SNP组相比，eNOS shRNA+SNP+TCEP组中SOD1二聚体/单体比例(4.4±0.9比7.3±2.0， P<0.05)和SOD活性[(0.214±0.084) Carmen′s unit/10 4 cell比(0.737±0.060) Carmen′s unit/10 4 cell， P<0.01]均显著降低，超氧阴离子水平(10.917±1.552比6.897±1.640， P<0.01)和HUVECs凋亡水平[63.6(55.0，90.0)%比0(0，0)%， P<0.01]均显著增加；但NO水平(16.112±0.926比16.705±0.116， P>0.05)无明显变化。 结论:内源性NO通过上调SOD1二聚体/单体比例，增强SOD活性，抑制活性氧积累，从而有效对抗人脐静脉内皮细胞凋亡。

目的:分析微RNA-506(miR-506)对M2型巨噬细胞极化及胰腺癌小鼠免疫干预的影响。方法:体外培养健康志愿者外周血来源单核细胞，诱导为M1或M2型巨噬细胞，分别转染miR-506或阴性对照序列(miR-ctrl)。收集M1+miR-ctrl组、M1+miR-506组、M2+miR-ctrl组和M2+miR-506组极化巨噬细胞，以聚合酶链反应检测M1和M2型巨噬细胞标志性基因相对表达，并检测四组巨噬细胞功能：吞噬功能和一氧化氮(NO)合成(M1型巨噬细胞特征性功能)，精氨酸酶1活性和血管内皮生长因子(VEGF)、转化生长因子-β(TGF-β)、白细胞介素-10(IL-10)分泌(M2型巨噬细胞特征性功能)。60只无特定病原体健康雄性C57BL/6小鼠，体重20~25 g，建立胰腺癌原位成瘤模型，随机分为miR-ctrl PD-1组、miR-506 PD-1组、miR-ctrl iso组、miR-506 iso组，分别注射miR-506、miR-ctrl、程序性死亡蛋白-1(PD-1)抗体、同型对照抗体，每组15只。3周后检测肿瘤体积和重量、Ki-67、γ干扰素。 结果:与M2+miR-ctrl组比较，M2+miR-506组M1型巨噬细胞标志性基因mRNA相对表达升高，M2型巨噬细胞标志性基因mRNA相对表达降低，差异均有统计学意义(均 P<0.05)。与M2+miR-ctrl组比较，M2+miR-506组巨噬细胞吞噬功能和NO合成升高，精氨酸酶1活性以及VEGF、TGF-β、IL-10分泌水平下降，差异均有统计学意义(均 P<0.05)。miR-ctrl iso组与miR-ctrl PD-1组肿瘤重量、肿瘤体积、Ki-67、γ干扰素比较，差异均无统计学意义(均 P>0.05)。miR-506 PD-1组肿瘤重量、肿瘤体积、Ki-67低于miR-ctrl PD-1组[(0.32±0.13)g比(0.85±0.24)g；(0.72±0.23)cm 3比(2.03±0.21)cm 3；(25.9±10.3)%比(55.6±12.5)%]，γ干扰素高于miR-ctrl PD-1组[(122.4±15.3)ng/g比(82.4±22.2)ng/g]，差异均有统计学意义(均 P<0.05)。 结论:miR-506抑制M2型巨噬细胞极化，miR-506增强PD-1抗体对小鼠胰腺癌的抑制作用。

肾脏疾病的发病率逐年升高，已经成为影响人类健康的重要疾病之一。硫化氢(H 2S)是继一氧化碳(CO)、一氧化氮(NO)之后的第三种气体信号分子，可由内源性产生，也可外源性给药，参与了人体多种病理生理过程。近年来研究发现，H 2S在肾脏病理生理过程中发挥着重要作用，其机制与抗氧化应激、抑制炎症反应、拮抗细胞增殖与凋亡、抑制肾脏纤维化、血管效应、调控肠道菌群等密切相关。本文就H 2S在肾脏疾病中作用的研究进展作一综述，旨在为H 2S治疗肾脏疾病提供文献资料。

目的:探索骨髓间充质干细胞（bone marrow mesenchymal stem cell，BMMSC）来源凋亡囊泡对小鼠巨噬细胞系RAW264.7极化状态的影响及对牙龈卟啉单胞菌（ Porphyromonas gingivalis，Pg）诱导的促炎状态巨噬细胞的调控，为牙周炎治疗提供依据。 方法:使用Operetta CLS高内涵分析系统动态观察星形孢菌素（staurosporine，STS）诱导的BMMSC的凋亡过程；使用场发射扫描电镜、动态光散射技术、流动电势法测量凋亡囊泡相关表征；使用Operetta CLS高内涵分析系统动态观察小鼠巨噬细胞系RAW264.7对5-羧基四甲基罗丹明琥珀酰亚胺酯（5-carboxy-tetramethylrhodamine，succinimidyl ester，5-TAMRA-SE）标记的凋亡囊泡的吞噬作用；采用实时荧光定量PCR检测精氨酸合酶-1（arginase-1，Arg-1）mRNA相对表达量；采用细胞免疫荧光、蛋白质印迹法检测凋亡囊泡对Pg来源的脂多糖（lipopolysaccharide from Pg，Pg-LPS）诱导的RAW264.7中诱导型一氧化氮合酶（inducible nitric oxide synthase，iNOS）表达的影响；采用酶联免疫吸附测定法检测Pg-LPS诱导的促炎状态RAW264.7培养上清液中肿瘤坏死因子-α（tumor necrosis factro-α，TNF-α）的分泌情况。结果:0.5 μmol/L STS处理12 h后小鼠BMMSC形态皱缩，周围有明显的凋亡囊泡产生；凋亡囊泡的粒径为100~1 000 nm，平均Zeta电势为-16.6 mV；RAW264.7可以通过伪足吞噬小鼠BMMSC来源的凋亡囊泡；小鼠BMMSC来源的凋亡囊泡联合白介素-4（interleukin4，IL-4）刺激的RAW 264.7 Arg-1 mRNA表达量（261.97±15.91）较单独IL-4刺激的 mRNA表达量（115.29±15.42）显著升高（ P<0.01）；凋亡囊泡与Pg-LPS共同作用下，RAW 264.7 iNOS阳性细胞数量［（39.33±4.70）个］显著低于Pg-LPS单独诱导的RAW 264.7 iNOS阳性细胞数量［（95.33±4.70）个］（ P=0.007），RAW264.7 iNOS蛋白相对表达量（5.84±1.05）显著低于Pg-LPS单独诱导的RAW 264.7 iNOS蛋白相对表达量（14.91±3.87）（ P<0.01），RAW264.7细胞培养上清液中TNF-α含量［（21 899.71±409.73） ng/L］显著低于Pg-LPS单独诱导下RAW264.7细胞培养上清液中TNF-α含量［（71 296.50±2 344.22） ng/L］（ P =0.003）。 结论:小鼠BMMSC来源的凋亡囊泡可以调控巨噬细胞极化状态，并可减轻Pg-LPS诱导下巨噬细胞的促炎状态。

急性呼吸窘迫综合征(ARDS)是指由各种肺内外因素导致的非心源性低氧性呼吸衰竭，是临床常见的急危重症。与成人一样，肺保护性通气策略辅以药物支持仍然是治疗儿童ARDS的主要手段。药物治疗已经开展了大量的临床研究，取得了一定的进展，本文就肺泡表面活性物质、激素、一氧化氮、血管紧张素转换酶2、免疫营养等在ARDS治疗进展进行介绍，以期为后续的治疗提供参考。

硝酸盐经外源摄入后，在体内可以转化为亚硝酸盐，最终通过多种途径形成细胞生物学上经典的信号分子一氧化氮（NO）。近年来NO已被发现参与、介导体内诸多复杂的生理和病理生理反应，同时其在不同来源、不同含量、不同作用对象和通路途径中可发挥保护、损伤等不同作用。而脑血管病具有高发病率、高复发率、高致残率等特点，目前已知硝酸盐代谢和NO在脑血管病发生发展通路上参与多种调节和调控。通过对硝酸盐代谢在脑血管病中的复杂调控进行阐述，讨论硝酸盐代谢与脑血管病发病机制、并发症、预后等相关内容，为未来临床诊疗提供依据。

目的:评价内毒素性急性肺损伤(ALI)小鼠肺泡巨噬细胞极化时血红素氧合酶-1(HO-1)与过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARγ)的关系。方法:选择清洁级雄性C57BL/6小鼠30只(野生型小鼠24只和HO-1基因敲除小鼠6只)，6~8周龄，体重18~22 g。采用随机数字表法将野生型小鼠分为4组( n＝6)：对照组(C组)、ALI组、ALI+ HO-1激动剂氯高铁血红素(Hemin)组(ALI+H组)和ALI+Hemin+PPARγ拮抗剂T0070907组(ALI+H+T组)。HO-1基因敲除小鼠建立ALI模型为ALI+HO-1 -/-组。采用尾静脉注射LPS 15 mg/kg制备内毒素性ALI模型。ALI+H+T组于给予LPS前1 h时腹腔注射T0070907 1.5 mg/kg; ALI+H组和ALI+H+T组于给予LPS前30 min时腹腔注射Hemin 50 mg/kg。给予LPS 12 h后处死小鼠取肺组织，测定湿重/干重(W/D)比值，观察肺组织病理学结果，并行肺损伤评分；采用流式细胞术检测F4/80 +/CD86 +标记的M1型肺泡巨噬细胞水平和F4/80 +/CD206 +标记的M2型肺泡巨噬细胞水平；采用ELISA法测定细胞上清液M1型肺泡巨噬细胞相关基因诱导型一氧化氮合酶(iNOS)和M2型肺泡巨噬细胞相关基因精氨酸酶-1(Arg-1)含量；采用Western blot法测定肺组织HO-1和PPARγ表达。 结果:与C组比较，其余4组肺损伤评分、肺组织W/D比值、CD86和CD206水平、iNOS和Arg-1含量均升高，PPARγ表达上调，ALI组、ALI+H组和ALI+H+T组肺组织HO-1表达上调( P<0.05)。与ALI组比较，ALI+HO-1 -/-组肺损伤评分、肺组织W/D比值、CD86和iNOS水平均升高，CD206和Arg-1水平降低，HO-1和PPARγ表达下调，ALI+H组肺损伤评分、肺组织W/D比值、CD86和iNOS水平均降低，CD206和Arg-1水平升高，HO-1和PPARγ表达上调( P<0.05)，ALI+H+T组上述各指标差异无统计学意义( P>0.05)。与ALI+H组比较，ALI+H+T组肺损伤评分、肺组织W/D比值、CD86和iNOS水平均升高，CD206和Arg-1水平降低，PPARγ表达下调( P<0.05)，HO-1表达差异无统计学意义( P>0.05)。 结论:HO-1可通过上调PPARγ的表达，抑制肺泡巨噬细胞向M1型极化，促进其向M2型极化，从而在小鼠内毒性ALI中发挥内源性保护作用。