目的:观察过表达S100A4蛋白对视网膜缺血再灌注损伤（RIRI）后视网膜毛细血管细胞和视网膜神经节细胞（RGC）的影响。方法:采用随机数字表法将100只健康雄性成年C57BL/6小鼠分为正常对照组（C组）、RIRI组、玻璃体腔注射腺相关病毒（AAV2）-S100A4-绿色荧光蛋白（GFP）组（S组）、RIRI＋玻璃体腔注射AAV2-GFP组（GIR组）、RIRI＋玻璃体腔注射AAV2-S100A4-GFP组（SIR组），每组各20只。RIRI组、GIR组、SIR组小鼠采用前房高眼压法建立RIRI模型。建模后3 d过量麻醉处死摘除眼球。视网膜胰蛋白酶消化铺片和苏木精-伊红、高碘酸-雪夫染色观察各组小鼠视网膜毛细血管内皮细胞、周细胞数量；免疫荧光染色观察内皮细胞、周细胞覆盖率和RGC存活率；蛋白质免疫印迹法检测小鼠视网膜组织中Toll-样受体4 (TLR4）、p38蛋白、核因子E2相关因子2 （NRF2）蛋白相对表达量。多组间数据比较采用单因素方差分析。结果:建模后3 d，内皮细胞与周细胞比值：C组与S组、SIR组比较，差异均无统计学意义（ F=106.30， P>0.05）；SIR组与RIRI组、GIR组比较，差异均有统计学意义（ F=106.30， P<0.000 1 ）。内皮细胞覆盖率：各组比较，差异无统计学意义（ F=3.44， P>0.05 ）。周细胞覆盖率：与C组比较，RIRI组、GIR组显著降低，差异均有统计学意义（ F=62.69， P<0.001 ）。RGC存活率：与C组比较，RIRI组、GIR组明显降低，差异有统计学意义（ F=171.60， P<0.000 1 ）；与RIRI组、GIR组比较，SIR组明显增高，差异有统计学意义（ F=171.60， P<0.000 1）。TLR4、p38、NRF2蛋白相对表达量：各组比较，差异均有统计学意义（ F=42.65、20.78、11.55， P<0.05 ）。 结论:RIRI后，周细胞较内皮细胞对缺血更敏感，早期毛细血管细胞变性以周细胞丢失为主，而不是内皮细胞。S100A4蛋白过表达通过抑制TLR4/p38/NRF2信号通路保护了RIRI后周细胞和RGC的丢失。

目的:评估改良式深板层角膜移植手术治疗中晚期圆锥角膜的效果及安全性。方法:回顾性病例对照研究。纳入苏州大学附属理想眼科医院2018年6月至2020年6月中晚期圆锥角膜39例(42只眼)的临床资料。将患者按手术方式分为2组：A组20例(22只眼)行改良式前部深板层角膜移植术(MDALK)，B组19例(20只眼)行常规前部深板层角膜移植术(DALK)。术后随访18个月，比较两组术后裸眼视力、最佳矫正视力、球镜度、散光度、平均前角膜曲率、角膜内皮细胞丢失率；同时观察两组术后后弹力层皱褶以及其它并发症发生率。结果:术后18个月，A组裸眼视力优于B组( t＝-2.57， P＝0.014)；两组最佳矫正视力相近( t＝-1.80， P＝0.080)；A组近视度低于B组( t＝2.56， P＝0.015)。两组散光、平均前角膜曲率及角膜内皮细胞丢失率差异无统计学意义( P>0.05)。两组均未发生术中或术后并发症，MDALK组后弹力层皱褶发生率低于DALK组( χ2＝4.89， P＝0.027)。 结论:中晚期圆锥角膜患者MDALK术后较DALK术后能获得更好的裸眼视力、有效降低后弹力层皱褶发生率，更安全可靠。

目的:基于单细胞转录组测序(scRNA-seq)探讨小鼠脉络膜新生血管(CNV)中内皮细胞(EC)的分子表达与病理特征。方法:取6只6~8周龄C57BL/6小鼠按照随机数字表法随机分为2个组，每组3只，处死后摘取双眼眼球，分别采用剪碎脉络膜巩膜复合体法和刮取脉络膜法分离脉络膜组织，采用胰蛋白酶/Ⅰ型胶原酶37 ℃连续消化制得单细胞悬液，流式细胞术检测细胞活率及EC比例，确定单细胞悬液制备方法。选取6只小鼠随机分为正常对照组和CNV组，每组3只，其中CNV组小鼠建立激光诱导的CNV模型；于造模后7 d制备单细胞悬液，采用10xGenomics进行单细胞分离并构建测序文库，Illumina Novaseq6000进行高通量测序，获得基因表达矩阵；根据文献报道并参考Cellmarker数据库定义细胞亚群；选取EC亚群进行拟时序分析，生成各个细胞分化状态(State)的基因表达矩阵，筛选CNV-EC并初步分析表达特征。另选取6只小鼠建立CNV模型，于造模后7 d取小鼠眼球制备冰冻切片，免疫荧光染色检测EC标志物Pecam1与线粒体外膜蛋白Tomm20、mt-Co1和毛细血管标志物Kdr、Plvap的共定位及面积占比情况，并统计血管直径。结果:剪碎复合体和刮取脉络膜所制备单细胞悬液的细胞活率分别为99.4%和99.1%，符合测序要求；流式细胞术检测EC占比约为1.58%。scRNA-seq结果显示，正常对照组和CNV组小鼠脉络膜均包含13个细胞亚群，与正常对照组比较，CNV组视锥/视杆细胞、EC和造血系细胞比例增加，视网膜色素上皮(RPE)细胞和施万细胞比例相应减少。在所有细胞亚群中，EC比例为18.40%。EC拟时序分析显示，脉络膜EC可分为4个State，CNV组中位于State 2状态的EC比例为29.1%，较正常对照组的9.5%明显升高；差异基因分析显示，State 2 EC中线粒体相关基因 mt-Nd4和 mt-Atp6等表达上调而毛细血管基因 Kdr和 Esm1等表达显著下调。免疫荧光染色结果显示，CNV区域内Tomm20和mt-Co1在Pecam1阳性EC内表达分布面积比例分别为(19.50±4.68)%和(4.64±2.82)%，明显高于正常区域的(3.00±2.09)%和(0.18±0.34)%，差异均有统计学意义( t＝7.88、3.84，均 P<0.01)。CNV区域内Kdr和Plvap在Pecam1阳性EC内表达面积比例分别为(1.50±0.29)%和(0.79±0.97)%，明显低于正常区域的(31.30±5.44)%和(10.43±2.28)%，差异均有统计学意义( t＝13.40、9.48，均 P<0.01)。CNV区域血管直径为(5.52±1.85)μm，明显大于正常区域的(4.21±1.84)μm，差异有统计学意义( t＝9.57， P<0.001)。 结论:CNV发生时，脉络膜组织中EC比例增加，CNV-EC呈现线粒体代谢活化和毛细血管特性丢失的病理特征，提示EC线粒体活化可能在CNV生成中具有一定的作用。

目的：:观察分析飞秒激光辅助大泡技术深板层角膜移植治疗角膜基质层营养不良的疗效及安全性。方法：:回顾性系列病例研究。选择2015年1月至2017年9月于山东省眼科医院接受飞秒激光辅助大泡技术深板层角膜移植治疗的角膜基质层营养不良患者16例（19眼），术后随访1年以上且随访资料完整。其中包括颗粒状角膜营养不良6眼，斑块状角膜营养不良8眼，格子状角膜营养不良5眼。随访12～32（17.1±1.3）个月，观察患者术前及随访时裸眼视力（UCVA）、最佳矫正视力（BCVA）、眼压、角膜散光度、等效球镜度（SE）、平均角膜曲率、角膜内皮细胞密度、植片排斥反应、术后并发症及复发情况等。结果：:所有患者手术均顺利完成。术前BCVA为光感～0.25，其中小于0.10者10眼，0.10～0.25者9眼；末次随诊时为0.12～0.80，其中0.10～0.25者5眼，0.30～0.40者5眼，≥0.50者9眼。视力（标准对数视力表）提高2.00～8.00（5.3±1.8）行。术前角膜散光0.50～2.60（1.62±0.57）D，末次随诊时1.30～4.20（2.56±0.87）D；术前SE -4.00～+1.25（-1.29±1.86）D，末次随诊时-7.50～+8.00（-0.48±3.84）D；术前角膜曲率42.78～45.38（44.24±0.95）D，末次随诊时39.20～45.06（43.12±2.22）D；术后12个月时的角膜内皮细胞较术后1个月时的角膜内皮细胞丢失率为8%。末次随诊时测量植床厚度为20～39（29.4±6.1）μm。术后并发症为1眼术中植床微小穿孔，1眼术后首日可见植片、植床层间少量积血，处理后病情稳定。所有患者末次随诊时均可见角膜植片与植床紧密贴合且透明，未见松线、层间积液及植片免疫排斥反应，未见营养不良病变复发。结论：:飞秒激光辅助大泡技术深板层角膜移植是治疗角膜基质层营养不良的安全方法，术后散光较少，视力较好。

目的:评估中央孔型有晶状体眼后房型人工晶状体（pIOL）植入术矫正中高度近视眼的远期安全性、有效性、预测性及稳定性。方法:回顾性病例系列研究。收集2015年于复旦大学附属眼耳鼻喉科医院行中央孔型pIOL植入术，且完成术后5年随访的患者资料共50例（95只眼），其中男性15例，女性35例；年龄（29.27±7.81）岁。随访裸眼视力、矫正视力、屈光度数、眼轴长度、眼压、角膜内皮细胞计数、拱高及并发症至术后5年，计算术后1个月和5年的安全性指数（术后矫正视力/术前矫正视力）和有效性指数（术后裸眼视力/术前矫正视力）。采用配对 t检验、重复度量单因素方差分析及Pearson相关分析进行统计学分析。 结果:患者术前、术后1个月及5年等效球镜度数分别为（-12.16±3.04）、（-0.19±0.55）、（-1.14±0.84）D。术后1个月及5年的安全性指数分别为1.24±0.27和1.13±0.27，有效性指数分别为1.14±0.25和0.87±0.26。术后1个月时，76只眼（80.00%）实际矫正度数在预期矫正度数±0.50 D及以内，92只眼（96.84%）在±1.00 D及以内。术后眼压与术前相比差异无统计学意义（ F=2.607， P=0.175）。术后5年内皮细胞平均丢失率为3.87%（ t=27.411， P<0.001），拱高平均下降106.32 μm（ t=6.596， P<0.001）。 结论:植入中央孔型pIOL用于矫正中高度近视眼具有较好的远期安全性、有效性、预测性及稳定性。中央孔的存在可维持眼压的长期稳定，对避免前囊膜下混浊有一定作用。

腹膜超滤衰竭是腹膜透析（peritoneal dialysis，PD）患者PD技术失败和心血管疾病死亡的常见原因。基于三孔模型的血管内皮细胞间小孔和跨内皮细胞超小孔（水孔蛋白1）是腹膜水转运的主要通道。随着PD的进行，小孔和超小孔依赖水（自由水）转运均降低，其中以自由水转运下降更为显著，导致腹膜超滤衰竭。自由水转运下降与腹膜溶质快速转运、间质葡萄糖吸收增加导致的晶体渗透压下降及水孔蛋白1功能异常和腹膜间质纤维化导致的葡萄糖渗透传导率下降等因素相关。而小孔依赖水转运降低受PD液晶体渗透压的快速丢失、腹膜毛细血管病变介导的静水压下降和小孔数量减少等因素影响。本文主要综述长期PD中继发性腹膜超滤衰竭发生机制的研究进展。

目的:探讨角膜后弹力层剥除联合自动角膜刀取材内皮移植术(DSAEK)供体中央植片厚度(CGT)和大小对角膜内皮细胞密度(ECD)的远期影响。方法:采用系列病例观察研究，收集2013年1月至2017年12月因角膜内皮功能失代偿在北京大学第三医院眼科中心接受DSAEK手术并严格完成2年或以上随访的患者134例144眼。采用角膜内皮镜测量术前供体ECD；术后1、3、6、12和24个月，采用激光扫描共聚焦显微镜测量术后ECD，计算角膜内皮细胞丢失率；采用眼前节光相干断层扫描仪测量供体CGT。根据术后3个月供体CGT将患者分为薄植片组45眼、中等厚植片组66眼和厚植片组33眼，分别为供体CGT<100 μm、≥100~<150 μm和≥150 μm。根据角膜环钻切割的供体植片大小将患者分为小植片组31眼和大植片组113眼，分别为供体植片直径≥7~<8 mm和≥8~<9 mm。比较手术后供体CGT变化及术后不同时间点角膜内皮细胞丢失率；分析术后24个月ECD与术前供体植片ECD、大小及CGT的相关性。结果:术后1、3、6、12和24个月供体CGT分别为129.0(90.8，160.8)、115.5(93.0，146.0)、115.5(89.0，151.0)、112.5(94.3，146.8)和114.0(89.0，144.5)μm，总体比较差异有统计学意义( H＝37.369， P<0.001)，其中术后1个月供体CGT与术后3个月相比差异有统计学意义( P<0.001)。术后1、3、6、12、24个月，薄植片组、中等厚植片组和厚植片组以及大植片组、小植片组角膜内皮细胞丢失率比较差异均无统计学意义(均 P>0.05)。Spearman相关性分析显示，术后24个月时ECD与术前供体植片ECD呈强正相关( rs＝0.783， P<0.001)，与供体植片大小和CGT均无明显相关性( rs＝0.141， P＝0.093； rs＝－0.044， P＝0.600)。 结论:术前供体植片ECD越大，术后ECD越大；供体植片越薄、直径越大，DSAEK术后远期角膜内皮细胞丢失率越低。

目的：:探讨飞秒激光辅助白内障超声乳化术治疗假性剥脱综合征性白内障的有效性和安全性。方法：:前瞻性队列研究。连续性纳入2021年1月至2022年2月在新疆四七四医院就诊的假性剥脱综合征患者100例，均行手术治疗，依据患者自愿原则选择分为飞秒激光辅助超声乳化组（FLACS）50例（50眼）和传统白内障超声乳化吸除术组（CPCS）50例（50眼），运用酶联免疫吸附法分析2组房水中前列腺素E2（PGE2）、白介素-6（IL-6）、白介素-8（IL-8）的变化。采用独立样本 t检验、重复测量方差分析、卡方检验对2组术中超声时间（EPT）、超声能量（CDE），术后角膜内皮损伤程度、最佳矫正视力（BCVA）及并发症情况进行分析。 结果：:2组患者术前一般资料比较差异无统计学意义（ P>0.05）。FLACS组房水中PGE2表达水平较CPCS组明显升高（ t=8.81， P<0.001），组间IL-6、IL-8差异无统计学意义（ P>0.05）。术后1 d时FLACS组BCVA较术前明显提高，较CPCS组更显著（ P=0.003），但在术后1、3、6个月时2组BCVA的改善程度差异无统计学意义（ P>0.05）。FLACS组术中CDE和EPT明显低于CPCS组（ t=-17.64、-14.89，均 P<0.001）。CPCS组在术后6个月时角膜内皮细胞丢失较FLACS组更明显（ t=2.03， P=0.037）；随访6个月，FLACS组的并发症较CPCS组明显降低（ χ2=4.76， P=0.021），其中悬韧带离断、角膜水肿发生率均低于CPCS组。 结论：:飞秒激光辅助超声乳化治疗假性剥脱综合征性白内障具有良好的安全性，相较于传统手术，可显著减少并发症，更早地帮助假性剥脱综合征患者获得清晰的视力。

目的:评价以自制灌注器进行硅油取出联合白内障超声乳化人工晶状体植入术的临床效果。方法:采用回顾性病例对照研究。选择2018年1月至2020年10月河南省立眼科医院硅油填充眼合并白内障120例(120眼)，其中接受改良的硅油取出联合白内障手术60例作为改良组，同期行睫状体平坦部硅油取出联合白内障手术60例作为对照组，对比分析两组患者手术耗时、术后眼压变化、角膜内皮细胞丢失率及脉络膜脱离的发生率。结果:改良组和对照组术前术后角膜内皮细胞密度差异无统计学意义( F组间＝0.04， P＝0.845； F时间＝0.13， P＝0.719);术后3个月改良组和对照组角膜内皮细胞丢失率分别为12.3%和11.8%，差异无统计学意义( χ2＝0.74， P＝0.460)。改良组硅油取出耗时为(17.50±2.20)min，短于对照组的(27.98±2.67)min( t＝23.51， P<0.001)。两组术前术后眼压差异比较均无统计学意义(均 P>0.05)。改良组及对照组术后脉络膜脱离发生率分别为3.3%(2/60)和10.0%(6/60)，二者差异无统计学意义( χ2＝1.21， P＝0.272)。 结论:自制灌注器硅油取出联合白内障手术具有手术时间短的特点。

目的:探讨双切口囊外白内障摘除术（ECCE）治疗低角膜内皮细胞数的硬核白内障的疗效及安全性。方法:病例对照研究。收集2009年6月至2018年12月于山东省眼科医院就诊的角膜内皮细胞数低的硬核白内障患者46例（47只眼），其中男性22例，女性24例，年龄（63.8±6.3）岁。入选标准：患者术前角膜内皮细胞计数<1 000个/mm 2且白内障核硬度≥Ⅳ级。根据ECCE手术方法分为两组：单切口组（24只眼），双切口组（23只眼）。双切口组手术方法为：采取先行上方巩膜预切口，从颞侧或鼻侧2.6 mm透明角膜隧道切口完成常规撕囊，水分离，切开上方巩膜切口，娩出晶体核，巩膜切口缝合，从角膜切口灌吸残余皮质，折叠式人工晶状体植入，吸除黏弹剂。观察术中前房维持情况，术后角膜水肿情况。术后随访6个月，对比两组角膜内皮计数及视力、散光情况。采用χ 2检验对计数资料、 t检验对计量数据进行比较。 结果:两组患者年龄、术前视力、核硬度分级等差异均无统计学意义（ P>0.05）。双切口与单切口组患者术前角膜内皮细胞计数分别为（827±164）和（802±121）个/mm 2，差异无统计学意义（ t=1.12， P=0.28）。术后6个月双切口组与单切口组患者角膜内皮细胞计数分别为（793±147）和（706±101）个/mm 2，差异有统计学意义（ t=4.37， P<0.01）；角膜内皮细胞丢失率分别为4.16%±3.12%和11.69%±2.96%，差异亦有统计学意义（ t=9.52， P<0.01）；角膜内皮六边形细胞比例分别为9.67%±6.11%和28.33%±8.39%，差异有统计学意义（ t=5.52， P<0.05）。随访6个月，双切口组所有患者均未出现角膜内皮功能失代偿，单切口组3只眼出现角膜大泡、角膜内皮功能失代偿。两组患者术后散光度数和术源性散光度数差异均无统计学意义（ t=-0.71，0.15； P>0.05）。 结论:采用巩膜大切口娩出硬核联合角膜隧道切口完成其余手术步骤的双切口ECCE，对低角膜内皮细胞数硬核白内障是安全、有效的手术治疗方式。 （中华眼科杂志，2020，56：126-130）