目的:探索基于显微注射方法构建胶质母细胞瘤(GBM)融合大脑类器官模型的可行性，观察该模型肿瘤组织对替莫唑胺(TMZ)的敏感性。方法:GBM组织和脑肿瘤旁组织标本(定义为正常脑组织)来源于中南大学湘雅医院神经外科行手术治疗的患者。采用绿色荧光蛋白(GFP)标记过的人诱导多能干细胞株(hiPSCs)培养24 d构建大脑类器官模型，通过免疫荧光染色方法检测蛋白标志物的表达，评估模型是否成功建立。采用显微注射方法将用红色荧光染料标记过的患者来源的GBM单细胞或U-251 MG细胞株注射到培养约30 d的大脑类器官中，构建GBM融合大脑类器官模型。采用免疫荧光染色法、HE染色等方法观察GBM细胞在大脑类器官中的增殖及浸润情况。采用免疫荧光染色法检测GBM融合大脑类器官中肿瘤细胞基质金属蛋白酶类(MMPs)及BrdU的表达情况，采用HE染色观察形态及结构变化。将10 μmol/L TMZ加入GBM融合大脑类器官模型及GBM肿瘤类组织中培养48 h，采用免疫荧光染色法检测两种模型中Caspase-3的表达。结果:(1)hiPSCs培养至第24天，形成具有明确芽和分层边缘的块状组织样结构；免疫荧光染色显示，该结构阳性表达前脑、脑室样结构、前额叶皮质及海马的标志蛋白FOXG1、N-cadherin、Auts2及Frizzled 9，以及星形胶质细胞标志蛋白胶质纤维酸性蛋白(GFAP)和神经元标志蛋白TUJ1。(2)荧光显微镜下及HE染色均显示肿瘤细胞在大脑类器官内快速增殖，呈浸润性生长。免疫荧光检测显示，与大脑类器官比较，GBM融合大脑类器官的肿瘤细胞中，MMP2和MMP13的表达明显增加，Fibronectin、MMP3及MMP9的表达明显减弱，差异均有统计学意义(均 P<0.05)，MMP10的表达差异无统计学意义( P>0.05)；GFAP和BrdU的表达水平均增高(均 P<0.05)。(3)TMZ处理48 h后，免疫荧光染色显示，GBM类肿瘤组织中Caspase-3的表达明显高于GBM融合大脑类器官。 结论:采用显微注射方法能够成功构建GBM融合大脑类器官模型。该模型中的肿瘤组织对TMZ的敏感性低于GBM肿瘤类组织。

目的:探究门静脉血栓与非急诊内镜下治疗食管胃静脉曲张（GV）术后再出血的关联。方法:回顾性纳入2017年1月至2023年3月郑州大学人民医院诊断的肝硬化伴食管GV患者，根据是否存在门静脉血栓，将患者分为血栓组和非血栓组，比较两组患者经治疗后的内镜治疗失败率、不同时间段内的再出血率。采用受试者工作特征（ROC）曲线选取影响两组随访时间内总再出血的GV直径的最佳截断值。分析两组患者12、36个月内再出血的影响因素，并进一步分析血栓组36个月内再出血的影响因素。结果:共纳入106例患者，血栓组53例，男37例，女16例，年龄18~78（54±13）岁；非血栓组53例，男37例，女16例，年龄27~83（55±12）岁；两组随访时间分别为（20±15）和（25±15）个月。血栓组总再出血率高于非血栓组［30.2%（16/53）比13.2%（7/53）， P<0.05］；其中血栓组6、12、24和36个月内再出血率均高于非血栓组［分别为18.9%（10/53）比5.7%（3/53），18.9%（10/53）比5.7%（3/53），28.3%（15/53）比9.4%（5/53），30.2%（16/53）比11.3%（6/53），均 P<0.05］。影响两组总再出血的GV直径的最佳截断值为10.4 mm（从实际临床应用方便考虑，选择10 mm作为最佳截断值）。血红蛋白<85 g/L（ HR=0.202，95% CI：0.043~0.953， P=0.043）、10 mm

目的:评价内镜超声（endoscopic ultrasound，EUS）引导弹簧圈栓塞联合内镜组织胶注射治疗合并较大自发性分流道的胃底静脉曲张的疗效和安全性。方法:回顾性分析武汉大学人民医院2016年12月—2020年12月因胃底静脉曲张伴较大自发性分流道（分流道最窄处直径5~15 mm）接受EUS引导弹簧圈栓塞联合内镜组织胶注射的24例患者资料，统计并分析短期疗效（技术成功率、术后5 d再出血率、6周死亡率）、远期疗效（1年再出血率和死亡率、3年死亡率）及安全性（异位栓塞发生率）。结果:EUS引导弹簧圈栓塞联合内镜组织胶注射技术成功率91.7%（22/24），5 d再出血率0（0/22）。1例（4.5%）术后2 d复查门静脉系统血管CT成像显示脾静脉主干部分栓塞。22例患者中2例失访，随访时间14.9（1.0~48.6）个月，术后6周死亡率0（0/20），术后1年再出血率35.0%（7/20）。12例行胃镜随访的患者中，5例出现不同程度食管静脉曲张加重，5例出现不同程度门静脉高压性胃病加重。术后1年死亡率5.0%（1/20），术后3年死亡率20.0%（4/20），均与出血及异位栓塞事件无关。结论:对于合并较大自发性分流道的胃底静脉曲张患者，EUS引导弹簧圈栓塞联合内镜组织胶注射治疗短期安全有效，并能降低异位栓塞发生风险，远期疗效及安全性仍有待进一步证实。

目的:观察利拉鲁肽对老年2型糖尿病(T2DM)大鼠肾脏组织转化生长因子β1(TGF-β1)/细胞内信号蛋白Smads基因通路的影响并探讨其作用机制。方法:20月龄、体重(500±100)g的健康雄性SD大鼠75只，应用随机数字表法按1∶2随机分为对照组(25只)和造模组(50只)，造模组给予高糖、高脂饲料喂养8周后，一次性腹腔内推注1%链脲佐菌素30 mg/kg，成模后剩余48只再随机分为T2DM组(24只)和干预组(24只)，干预组给予利拉鲁肽200 μg·kg -1·d -1腹腔注射，对照组和T2DM组大鼠给予等量生理盐水。各组分别于分组后第4、8、12周末随机取8只大鼠，留取24 h尿液检测24 h尿蛋白。随后麻醉采血测生化指标，留取肾脏组织，行苏木素伊红(HE)染色后光学显微镜下观察其病变，并用免疫组化法测Ⅳ型胶原蛋白(Col-Ⅳ)的表达，应用实时荧光定量聚合酶链反应法测TGF-β1、Smad3、Smad7 mRNA的表达。组间比较采用单因素方差分析，两两比较采用LSD- t检验。 结果:在各时间段，与对照组大鼠比较，T2DM组大鼠出现肾小球基底膜增厚、系膜增生及间质纤维化改变，且随时间延长逐渐加重，TGF-β1、Smad3 mRNA及Col-Ⅳ表达增加(12周：0.69±0.01比0.15±0.01、0.51±0.02比0.02±0.01、183.33±2.08比221.67±2.08， t值分别为89.22、60.87、24.52，均 P<0.05)，而Smad7 mRNA减少( t＝13.42， P<0.05)；与同期T2DM组比较，干预组大鼠肾脏纤维化程度减轻，TGF-β1、Smad3 mRNA及Col-Ⅳ表达减少( t值分别为71.70、37.58、20.04，均 P<0.05)，而Smad7 mRNA增多( t＝9.96， P<0.05)。且随利拉鲁肽干预时间延长，病变逐渐减轻，TGF-β1、Smad3 mRNA及Col-Ⅳ逐渐减少，Smad7 mRNA逐渐增多(均 P<0.05)。 结论:利拉鲁肽可能通过抑制TGF-β1/Smads通路从而减少其下游Col-Ⅳ的生成，发挥抗肾纤维化的作用，延缓老年T2DM大鼠肾脏病变的进展。

目的:探讨负载蛋白聚糖4(PRG4)的温度敏感性聚己内酯-聚乙二醇-聚己内酯共聚物(PCEC)可注射水凝胶材料表征及修复新西兰兔软骨缺损的效果。方法:2022年3月至2023年6月，利用PCEC温敏性水凝胶负载了PRG4效应因子(PRG4@PCEC)，使用扫描电子显微镜观察冷冻干燥的PRG4@PCEC水凝胶的形貌，测量PCEC和PRG4@PCEC水凝胶的最低共溶温度；使用活/死细胞染色技术评估水凝胶的生物安全性；采用雄性新西兰大白兔18只，36个膝关节缺损样本，随机分为3组，其中12个缺损组用PRG4@PCEC水凝胶修复，12个缺损组用PCEC水凝胶修复，12个缺损组为空白对照组，观察水凝胶的软骨修复能力；通过微型计算机断层扫描(Micro-CT)分析软骨下骨再生，标本组织切片苏木精-伊红(HE)、马松(Masson)染色及荧光定量聚合酶链反应(PCR)评估水凝胶对软骨缺损的修复作用。组间比较采用 t检验。 结果:水凝胶具有明显的多孔微观结构，PCEC和PRG4@PCEC水凝胶分别在35 ℃和38 ℃表现出最低共溶温度；激光共聚焦观察活/死细胞染色结果证明PRG4@PCEC水凝胶对于兔软骨细胞具有良好的生物相容性；载有PRG4的水凝胶组在8周时，缺损已经完全被高含量的新生软骨组织填充，表明软骨缺损修复最佳；Micro-CT显示在8周时PCEC组[(37.33±0.39) mm 3]和PRG4@PCEC组[(25.33±0.21) mm 3]软骨下骨缺损体积均小于对照组[(51.57±0.49) mm 3， t＝32.19、69.56， P<0.01]；切片染色显示PRG4@PCEC水凝胶组软骨下骨有效形成；荧光定量PCR结果显示在4周和8周PCEC组(2.79±0.07、2.18±0.10)与PRG4@PCEC组白细胞介素-1β(IL-1β)表达水平(1.54±0.07、0.80±0.10)均低于对照组(3.21±0.08、2.54±0.07， t＝0.68、4.97、27.63、24.43， P<0.01)，同时PCEC组(0.95±0.24、1.45±0.34)和PRG4@PCEC组Ⅱ型胶原蛋白(COL2)基因表达水平(1.19±0.45、1.53±0.26)高于对照组(0.64±0.07、1.01±0.14， t＝7.47、0.08、10.70、3.12， P<0.05)。 结论:负载PRG4的温度敏感性PCEC可注射水凝胶具有良好的温度敏感性和生物安全性，对关节软骨缺损有明显修复作用。

目的:探讨可充气球囊压迫辅助下硬化剂注射治疗(bc-EIS)对食管-胃底静脉曲张(EGV)的疗效和安全性。方法:前瞻性选择2020年6月12日至9月12日于安徽医科大学第一附属医院行bc-EIS的38例EGV患者，统计硬化剂使用量、硬化剂注射点数，观察术中注射点是否出血(不出血、渗血、喷血或射血)、是否需要压迫止血(无需压迫止血、针鞘压迫止血、透明帽压迫止血)，术后早期(术后72 h~6周)再出血、迟发性(术后6周后)出血情况，并记录达到静脉曲张完全消失的治疗次数。术后随访1、3、6个月，评估bc-EIS的疗效和术后并发症。采用描述性方法进行统计学分析。结果:38例EGV患者中，男24例，女14例，年龄(范围)为(53.2±11.3)岁(30~79岁)。bc-EIS术中，每例患者硬化剂使用量(范围)为(20.03±7.49) mL(6~40 mL) ，硬化剂注射点数(范围)为(4.97±1.83)点(2~10点)。第1、2、3次bc-EIS后静脉曲张完全消失率分别为71.1%(27/38)、89.5%(34/38)、100.0%(38/38)。38例EGV患者均未发生术后静脉曲张相关再出血。随访发现2例患者于术后1个月出现呕血、黑便，内镜诊断为贲门下方胃底静脉曲张出血，经内镜下组织胶注射治疗后好转。所有患者bc-EIS术后均未发生发热、自发性细菌性腹膜炎、肝性脑病、异位栓塞和死亡等严重不良反应。结论:bc-EIS的硬化剂用量较指南推荐量约减少1/2，注射点出血少，特别是1次治疗后静脉曲张完全消失率>70%。

目的:探讨糖皮质激素预防食管内镜黏膜下剥离术（ESD）术后狭窄的效果及其具体机制。方法:前瞻性选取2019年1月至2021年2月因早期食管癌或癌前病变在东南大学附属中大医院消化科行ESD治疗、剥离范围≥3/4环周的81例患者，其中男51例，女30例；年龄（62.09±7.95）岁，随机数字表法将患者分为对照组（23例）、口服醋酸泼尼松组（28例）和口服醋酸泼尼松联合局部注射曲安奈德组（30例）。分析术后12周3组患者食管狭窄的发生率、内镜下探条扩张次数，比较手术前后Atkinson分级和食管癌患者补充量表（QLQ-OES18）评分。采用荧光定量PCR法和免疫组化法分别检测3组食管黏膜组织中碳水化合物磺基转移酶15（CHST15）mRNA以及转化生长因子β1（TGF-β1）和Ⅰ型胶原蛋白（collagen-Ⅰ）的表达。结果:对照组、口服醋酸泼尼松组和口服醋酸泼尼松联合局部注射曲安奈德组患者术后食管狭窄的发生率分别为82.6%（19/23）、46.4%（13/28）和20.0%（6/30），差异有统计学意义（ P<0.001）；术后探条的扩张次数［ M（ Q1， Q3）］分别为 2（1，3）、0（0，0）和0（0，0）次，差异有统计学意义（ P<0.001）；术前和术后Atkinson分级和QLQ-OES18评分的差异均有统计学意义（均 P<0.001）。术后复查时，对照组、口服醋酸泼尼松组和口服醋酸泼尼松联合局部注射曲安奈德组患者食管组织中CHST15 mRNA的相对表达量分别为4.31±0.13、3.44±0.07、2.84±0.21，差异有统计学意义（ P<0.001）；口服醋酸泼尼松组与对照组比较，CHST15 mRNA的相对表达量下调（ P<0.001），而口服醋酸泼尼松联合局部注射曲安奈德组与口服醋酸泼尼松组比较，CHST15 mRNA的表达进一步下调（ P<0.001）。随着CHST15 mRNA表达的下调，口服醋酸泼尼松组和口服醋酸泼尼松联合局部注射曲安奈德组食管组织中TGF-β1和collagen-Ⅰ蛋白的表达亦下调（均 P<0.05）。 结论:单独口服或者口服联合局部注射糖皮质激素均可有效预防食管ESD术后狭窄，减少术后扩张次数，口服联合局部注射糖皮质激素效果更佳；糖皮质激素可降低食管黏膜组织中CHST15 mRNA的表达，抑制其所调控的TGF-β1和collagen-Ⅰ蛋白表达。

胃底静脉曲张出血是肝硬化严重并发症，内镜下组织胶注射治疗已成为胃底静脉曲张的一线治疗，其异位栓塞等并发症也多次被报道。本篇报道了1例胃底静脉曲张急诊出血病例，行内镜下组织胶注射治疗后出现罕见的脑动脉空气栓塞。

食管胃静脉曲张出血是肝硬化的严重并发症之一，死亡率较高，内镜治疗在其一级预防、控制急性出血和二级预防中均起到重要作用。为规范食管胃静脉曲张的内镜治疗，2022年我国颁布了3部相关共识及指南。现就如何开展食管胃静脉曲张规范化内镜治疗做一述评，着重介绍如何合理把握内镜治疗适应证。

目的:探讨真皮内注射二甲氨基乙醇(DMAE)复合制剂(赛雷弗 ?)对D-半乳糖诱导的亚急性衰老大鼠皮肤胶原合成代谢的影响。 方法:2014年4—10月，在青岛大学解剖教研室进行实验研究。30只Wistar雄性大鼠分为衰老对照组、衰老治疗组、正常组，每组各10只。衰老对照组、衰老治疗组两组颈背部皮下注射D-半乳糖125 mg·kg -1·d -1, 42 d。从18 d开始于衰老对照组、衰老治疗组臀背部分别注射生理盐水和赛雷弗 ? 1 ml，每周1次，连续4周。每次治疗后3 d，共聚焦显微镜(RCM)检测大鼠皮肤。42 d取大鼠注射药物区域皮肤，观察各组皮肤真皮厚度、胶原纤维密度、皮肤羟脯氨酸含量变化，RT-PCR法检测皮肤组织Ⅰ、Ⅲ型前胶原(ColⅠ、ColⅢ)、转化生长因子(TGF)β1、Smad3 mRNA表达，以及免疫组织化学检测成纤维细胞增殖细胞核抗原(PCNA)、TGFβ1表达。 结果:RCM显示，随着真皮内注射赛雷弗次数增加，衰老大鼠皮肤胶原纤维的密度逐渐增加。注射4次后，衰老治疗组大鼠真皮厚度、羟脯氨酸含量、TGFβ1 mRNA和蛋白表达高于衰老对照组，但仍低于正常组( F值分别为25.45、98.90、37.94、21.35，均 P<0.05)；胶原纤维密度、ColⅠ、Smad3 mRNA表达高于衰老对照组( F值分别为44.46、29.54、10.01，均 P<0.05)；和正常组比较，差异无统计学意义( P>0.05)。PCNA表达低于正常组，和衰老对照组比较，差异无统计学意义。各组ColⅢ mRNA表达差异均无统计学意义(均 P>0.05)。 结论:真皮内注射赛雷弗可能通过正调节TGFβ1/Smads通路分子表达促进Ⅰ型胶原蛋白合成。