目的 观察决明子提取物调控骨骼肌LKB1-AMPK-GLUT4信号通路改善糖尿病大鼠胰岛素抵抗的效果.方法 采用高脂饮食联合链脲佐菌素(STZ)建立2型糖尿病大鼠模型,选择健康大鼠10只为正常组,40只建模成功大鼠分为模型组、高剂量决明子提取物组(高剂量组)、中剂量决明子提取物组(中剂量组)和低剂量决明子提取物组(低剂量组)各10只,高剂量组给予450 mg/(kg·d)、中剂量组给予150 mg/(kg·d)和低剂量组给予50 mg/(kg·d)决明子提取物灌胃,连续治疗12周,正常组及模型组均给予等体积生理盐水灌胃.12周后采用实时荧光定量PCR、蛋白免疫印迹法检测大鼠腓肠肌LKB1-AMPK-GLUT4信号通路的肝脏激酶B1(LKB1)、腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)和葡萄糖转运蛋白-4(GLUT4)基因及蛋白的相对表达量,采用高胰岛素-正糖钳夹试验(HEC)、胰岛素耐量试验(IPITT)综合评价胰岛素抵抗水平.采用酶联接免疫吸附剂测定法(ELISA)检测大鼠腓肠肌(骨骼肌)组织中氧化应激指标.结果 与正常组比较,模型组大鼠体质量明显降低,空腹血糖及空腹胰岛素(FINS)水平明显增高,差异均有统计学意义(P<0.05);与模型组比较,决明子各给药组体质量明显增加,空腹血糖及FINS水平明显降低,差异均有统计学意义(P<0.05),且各给药组间比较呈剂量依赖性.与正常组比较,模型组大鼠葡萄糖输注率(GIR)水平明显降低,差异具有统计学意义(P<0.05);与模型组比较,决明子各给药组GIR水平明显增加,差异具有统计学意义(P<0.05),且各给药组间比较呈剂量依赖性.与正常组比较,模型组大鼠各时点的胰岛素耐量均明显增加,差异具有统计学意义(P<0.05);与模型组比较,决明子各给药组大鼠各时点的胰岛素耐量均明显降低,差异具有统计学意义(P<0.05),且各给药组间比较呈剂量依赖性.与正常组比较,模型组大鼠谷胱甘肽(GSH)及超氧化物歧化酶(SOD)水平明显降低,活性氧(ROS)及丙二醛(MDA)水平明显增加,差异具有统计学意义(P<0.05);与模型组比较,决明子各给药组大鼠GSH及SOD水平明显升高,ROS及MDA水平明显降低,差异具有统计学意义(P<0.05),且各给药组间比较呈剂量依赖性.与正常组比较,模型组大鼠P-LKB1、P-AMPKa12、P-AMPKa2和GLUT4的蛋白及mRNA表达水平均明显降低,差异均有统计学意义(P<0.05);与模型组比较,决明子各给药组大鼠P-LKB1、P-AMPKa12、P-AMPKa2和GLUT4的蛋白及mRNA表达水平均明显升高,差异具有统计学意义(P<0.05),且各给药组间比较呈剂量依赖性.结论 决明子提取物能调控糖尿病大鼠骨骼肌LKB1-AMPK-GLUT4 信号通路,修复其骨骼肌氧化应激损伤,改善糖尿病大鼠胰岛素抵抗.

目的 研究决明子(Cassia obtusifolia L.)的化学成分.方法 综合运用多种色谱学分离手段进行分离纯化,根据化合物波谱学数据对其结构进行鉴定.结果 从决明子中共分离得到5个化合物,分别鉴定为2-甲基-5,10-二羟基-8-甲氧基-4H-萘[1,2-b]吡喃-4-酮-10-O-β-D-吡喃葡萄糖基-(1→3)-O-β-D-吡喃葡萄糖基-(1→6)-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(1)、demethylflavasperone gentiobioside (2)、去甲基红镰霉素-6-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(3)、去甲基红镰霉素-6-O-β-D-(6'-O-乙酰基)吡喃葡萄糖苷(4)、nor-rubrofusarin gentiobioside (5).结论 化合物1为新化合物.

目的 建立HPLC法,同时测定不同炒制程度下决明子中决明子苷、决明子苷B2、决明子苷C、红链霉素-龙胆二糖苷、决明素、黄决明素、橙黄决明素、美决明子素、大黄素、大黄酚、大黄素甲醚11种主要活性成分的含量,并探寻在不同炒制程度下决明子中11种成分的变化规律.方法 将决明子在140℃、160℃及180℃下分别炒制3 min、5 min、8 min、10 min、12 min及15 min,采用YMC-PackODS-A C18(250 mm×4.6 mm,5μm)色谱柱,流动相A为乙腈,流动相B为0.1％甲酸水溶液,梯度洗脱,流速为0.5 mL·min-1,检测波长为284 nm,柱温30℃.结果 11种成分在相应的线性范围内线性关系良好,平均加样回收率(n=6)均在99.09％-103.60％范围内,RSD<3.0％.决明子炒制过程中决明子苷、决明子苷B2、决明子苷C及红链霉素-龙胆二糖苷4种苷类成分的含量整体呈下降趋势;决明素、黄决明素、橙黄决明素、美决明子素及大黄素5种苷元类成分的含量在决明子不同炒制程度下变化较小;大黄酚及大黄素甲醚2种苷元类成分的含量在决明子炒制过程中显著升高;11种成分的变化尤以180℃炒制时含量变化最为明显.结论 该方法准确、灵敏、高效可用于决明子中11种成分的含量测定;不同的炒制温度及炒制时间对决明子中11种成分的含量影响较大,在决明子炮制过程中,表面颜色及气味不能作为判断炒决明子炮制终点的依据,为保证炒决明子质量均一稳定,在决明子炮制过程中需建立量化的炮制参数.

目的:研究高效液相色谱-串联质谱(HPLC-MS/MS)法同时测定首荟通便胶囊中8种成份的作用.方法:采用HPLC-MS/MS法同时对首荟通便胶囊中8种成份进行分析,采用Agilent ZORBAX C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),将乙腈(A)-10 mmol/L乙酸铵溶液(B)作为流动相.梯度洗脱(0～1.2 min,5％A;1.2～2 min,5％A→20％A;2～4 min,20％A→40％A;4～8 min,40％A;8～10 min,40％A→95％A;10～17 min,95％A;17～25 min,5％A),设置流速为0.8 mL/min,进样量为5μL.以电喷雾离子源,通过SIM模式,正负离子同时监测方式.结果:何首乌中大黄素、芦荟中芦荟大黄素、决明子中橙黄决明素、枸杞子中枸杞多糖、阿胶中强脯氨酸、人参中人参皂苷、白术中苍术酮、枳实中橙皮苷的线性范围分别为0.04～2.50μg/mL(r=0.9998)、0.034～0.9980μg/mL(r=0.9996)、0.14～20μg/mL(r=0.9994)、0.04～20μg/mL(r=0.9999)、0.004～2μg/mL(r=0.9999)、0.05～2μg/mL(r=0.9996)、0.034～2.5μg/mL(r=0.9993)、0.007～0.2μg/mL(r=0.9995).本方式的精密度、稳定性及重复性试验的RSD<3％,且平均回收率在97.3～102.7％范围内,RSD均<3％.3种样品中大黄素、芦荟大黄素、橙黄决明素、枸杞多糖、强脯氨酸、人参皂苷、苍术酮、橙皮苷的含量分别为0.491～0.499、1.790～1.802、0.506～0.512、0.681～0.684、0.610～0.614、0.102～0.110、0.056～0.058、0.020～0.022 mg/g.结论:HPLC-MS/MS法可为首荟通便胶囊的质量控制提供指导作用,值得临床推广应用.

以含量明确、化学组成相对固定的决明子萘骈吡喃酮类对照提取物为研究对象,对其主要化学成分进行分析,并开展定值研究.分别采用超高效液相色谱-LTQ-Orbitrap XL质谱联用技术和高效液相色谱分析方法,从主要化学成分组成及主要指标成分定值2个层面对决明子对照提取物展开系统研究.结果 表明,决明子萘骈吡喃酮类对照提取物化学组成相对固定,鉴定出7个萘骈吡喃酮类成分;其中决明子苷B2、决明子苷C2、红镰霉素-6-O-β-D-龙胆二糖苷和决明子苷C为主要化学成分的定值结果及不确定度分别为(11.40±0.26)％,(11.68±0.24)％,(16.60±0.22)％,(28.8±0.48)％.该研究实现了对决明子对照提取物的准确赋值,为决明子萘骈吡喃酮类对照提取物应用于决明子药材质量控制奠定基础,同时也为中药对照提取物替代单一化学对照品提供新思路.

目的:建立HPLC梯度洗脱法同时测定芪明颗粒中毛蕊花糖苷、焦地黄苯乙醇苷B1、3'-羟基葛根素、葛根素、3'-甲氧基葛根素、决明子苷B2、红镰霉素-6-O-β-龙胆二糖苷、决明子苷C的含量.方法:采用Kromasil C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),柱温30℃,流动相为乙腈-0.1％甲酸溶液,梯度洗脱,体积流量1.0 ml·min-1,检测波长为330 nm(检测毛蕊花糖苷和焦地黄苯乙醇苷B1)、250 nm(检测3'-羟基葛根素、葛根素和3'-甲氧基葛根素)和284 nm(检测决明子苷B2、红镰霉素-6-O-β-龙胆二糖苷、决明子苷C).采用SPSS 26.0统计软件对含量测定结果进行聚类分析.结果:毛蕊花糖苷、焦地黄苯乙醇苷B1、3'-羟基葛根素、葛根素、3'-甲氧基葛根素、决明子苷B2、红镰霉素-6-O-β-龙胆二糖苷、决明子苷C分别在1.76～35.20μg·ml-1,0.64～12.80μg·ml-1,4.48～89.60μg·ml-1,13.59～271.80μg·ml-1,3.52～70.40μg·ml-1,2.18～43.60μg·ml-1,4.66～93.20μg·ml-1和1.29～25.80μg·ml-1范围内线性关系良好(r≥0.9991);平均加样回收率分别为99.24％,96.85％,99.69％,100.02％,98.89％,99.22％,98.11％和97.64％,RSD分别为0.95％,1.06％,0.81％,0.74％,1.45％,1.34％,1.17％和1.25％(n=9).10批样品聚类分析为2类.结论:所建立的方法操作简便、重复性好,通过聚类分析提出了含量差异的影响因素,可用于芪明颗粒的质量控制.

决明子是我国传统中药材,具有食用和药用双重价值,主要分布于长江以南地区,主产于安徽、广西、四川等地.近年来,随着决明子在药品及保健用品中应用越来越广泛,其多种类型化学成分及药理作用研究逐步深入.在对决明子化学成分、药理作用进行综述的基础上,结合中药质量标志物(qualitymarker,Q-Marker)概念,从植物亲缘性、化学成分特有性、有效性、可测性及炮制对化学成分影响等不同方面对决明子Q-Marker进行预测分析,大黄素、大黄酸、大黄酚、芦荟大黄素、大黄素甲醚、橙黄决明素、决明子苷、决明子苷C、红镰霉素龙胆二糖苷、决明子苷B2为主要筛选对象,决明子质量控制研究提供科学依据.

目的 采用高效液相一测多评法(HPLC-QAMS)同时测定菊明降压丸中决明子苷B2、红镰霉素-6-O-β-龙胆二糖苷、决明子苷C、橙黄决明素、美决明子素、木犀草苷、蒙花苷等7种成分的含量.方法 采用Agilent Zorbax SB-C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5 μm),柱温30℃,流动相为乙腈-0.1％甲酸水溶液,梯度洗脱,流速1.0 mL·min-1.以橙黄决明素为内参物,建立其他6种成分的相对校正因子,计算各成分的含量.结果 决明子苷B2、红镰霉素-6-O-β-龙胆二糖苷、决明子苷C、橙黄决明素、美决明子素、木犀草苷、蒙花苷的线性范围分别为1.46～36.50 μg·mL-1(r=0.9997)、2.58～64.50μg·mL-1(r=0.9993)、1.27～31.75 μg·mL-1(r=0.9998)、0.89～22.25 μg·mL-1(r=0.9995)、0.66～16.50 μg·mL-1(r=0.9996)、1.74～43.50 μg·mL-1(r=0.9997)、4.87～121.75 μg·mL-1(r=0.9991),平均加样回收率分别为99.64％、100.02％、98.42％、98.89％、96.98％、97.85％、99.67％,RSD 分别为0.78％、0.89％、1.36％、0.98％、1.24％、0.95％、1.16％;一测多评法的计算结果与外标法实测值无明显差异.结论 所用方法结果准确,可用于菊明降压丸的质量控制.

目的 研究不同品种和产地决明子的化学轮廓特征,筛选和鉴定影响决明子质量的特征性成分.方法 采用液相色谱-飞行时间-质谱联用技术(LC-TOF-MS)分析并获得不同品种和不同产地决明子的色谱图数据集,运用多变量统计分析方法比较不同品种和不同产地决明子的化学轮廓差异,筛选出导致这些差异的特征性化学成分,并对其进行质谱分析和比对.结果 分析出15个特征峰并鉴定出了8个特征峰,包括决明子苷C、红链霉素-6-O-β-D-龙胆二糖苷、决明子苷B、钝叶决明子素、2-葡萄糖-大黄素、橙黄决明素、黄决明素和大黄素甲醚.结论 LC-TOF-MS可简便、快速地对不同品种和产地决明子中化学物质进行轮廓差异性研究,为决明子品质评价和药效物质基础研究提供了一定的实验依据.

目的 建立山菊降压胶囊中多指标成分高效液相色谱测定方法,并联合化学计量学方法对其进行综合质量评价.方法 以Eclipse Plus C18柱(250 mm×4.6 mm,5μm)为色谱柱,乙腈–0.1％磷酸为流动相进行梯度洗脱;检测波长分别为340 nm(0～22 min检测牡荆素葡萄糖苷、牡荆素鼠李糖苷和牡荆素)、284 nm(22～41 min检测橙黄决明素、黄决明素和美决明子素)和208 nm(41～75 min检测泽泻醇A、24-乙酰泽泻醇A和23-乙酰泽泻醇B);柱温30℃;体积流量0.9 mL/min;进样量10μL.采用SPSS 26.0统计软件对10批山菊降压胶囊含量测定结果进行主成分分析和聚类分析.结果 9种成分牡荆素葡萄糖苷、牡荆素鼠李糖苷、牡荆素、橙黄决明素、黄决明素、美决明子素、泽泻醇A、24-乙酰泽泻醇A和23-乙酰泽泻醇B线性范围良好,平均加样回收率96.90％～100.02％,RSD值均小于2.0％;聚类分析和主成分分析结果一致,10批山菊降压胶囊聚为2类,主成分1～3是影响山菊降压胶囊质量评价的主要因子.结论 所建立的HPLC法可用于山菊降压胶囊中9种指标成分牡荆素葡萄糖苷、牡荆素鼠李糖苷、牡荆素、橙黄决明素、黄决明素、美决明子素、泽泻醇A、24-乙酰泽泻醇A和23-乙酰泽泻醇B的定量控制和综合质量评价.