目的:分析毒死蜱对大鼠海马神经元自噬相关蛋白表达的影响，探讨自噬在急性毒死蜱中毒中枢神经损伤中的作用。方法:于2018年10月，将35只雄性清洁级SD大鼠根据观察时间点随机分成7组，即0.5 d、1 d、2 d、3 d、5 d、7 d组和对照组，每组5只。各观察组采用81.5 mg/kg毒死蜱一次性灌胃处理，对照组给予橄榄油灌胃。连续观察大鼠一般情况和中毒症状，蛋白质免疫印迹（Western blot）法检测海马组织中自噬相关蛋白Beclin1、P62/SQSTM1、LC3的表达，免疫组织化学染色观察脑组织细胞形态和LC3表达。结果:Western blot结果显示，与对照组比较，1 d、2 d、3 d组大鼠海马神经元Beclin1蛋白表达升高，0.5 d、1 d、2 d组P62/SQSTM1蛋白表达降低，2 d组大鼠海马神经元LC3蛋白表达升高，差异均有统计学意义（ P<0.05）。免疫组织化学结果显示，5 d组大鼠海马神经元排列紊乱，部分细胞核轮廓消失，7 d组尤其明显，LC3蛋白呈胞质表达，表达量逐渐增高，第2天达高峰。 结论:急性毒死蜱中毒大鼠自噬的早期激活可能参与了毒死蜱诱导的海马神经元损伤。

目前，大多的假性肝硬化发生于恶性肿瘤肝转移患者，可以出现水肿、腹水、消化道出血等门静脉高压相关临床表现。以"恶性肿瘤肝转移、伴或不伴肝脏轮廓呈结节样、肝节段性体积减小、尾状叶增大"等为影像学特点，而组织学为弥漫性肿瘤细胞浸润、浸润灶周围纤维化、肝窦血管形成血管栓塞、结节样增生，不伴桥接坏死、桥接纤维化、假小叶形成等典型肝硬化病理表现。肿瘤细胞浸润、肿瘤细胞和肝细胞对化疗毒性反应是假性肝硬化可能的发病机制。对已确诊恶性肿瘤的患者，假性肝硬化的存在是影响其生存期的挑战之一，出现假性肝硬化的肿瘤患者中位生存时间缩短。其发病与肿瘤类型和转移、化疗药物应用之间的关系尚不明确，不典型的临床表现、影像学特征给临床医师和患者带来巨大挑战。因此，现根据已有个案报道、观察性研究及已有的荟萃分析结果，就假性肝硬化的流行概况、病因、发病机制、诊断、治疗及预后等研究进展进行综述。

目的:探讨乳腺实性乳头状癌（SPC）的临床病理特征、鉴别诊断、治疗及预后。方法:回顾性分析扬州大学附属医院2017年10月至2022年7月收治的21例乳腺SPC患者的临床资料，并复习相关文献。结果:患者均为女性，发病中位年龄65岁（41~77岁）。肿瘤呈结节状膨胀性生长，可见纤细的纤维血管轴心，肿瘤细胞黏附性好，细胞形态相对一致；浸润性SPC可见轮廓不规则的巢团伴周围促纤维间质反应；可合并黏液癌等其他类型浸润性癌成分。雌激素受体高表达、孕激素受体低~高表达、人表皮生长因子受体2无扩增，Ki-67增值指数较低。神经内分泌标志物Syn、CgA、CD56至少其中一项有表达。1例拒绝任何治疗，20例行手术治疗，酌情追加化疗或放疗或内分泌治疗。随访5~62个月，2例死亡（1例肺栓塞，1例合并非特殊型浸润性癌），19例均无复发和转移。结论:乳腺SPC肿瘤细胞膨胀性生长，由纤维血管支撑，形成局限性结节；细胞形态相对单一，显示神经内分泌分化的同时呈现低级别的细胞学特征，多为LuminalA型或B型。其局部复发和淋巴结转移少见，临床进展较慢、侵袭性有限，大部分患者术后预后良好。

代谢组学作为系统生物学的重要组成部分，通过定性和定量检测分析机体受病理生理或基因修饰等刺激前后所有内源性低相对分子质量代谢产物的变化规律，揭示机体生命活动代谢本质特征，为探索疾病的发病机制、早期诊断、治疗及预后等提供指导。代谢组学主要依赖于色谱、质谱、磁共振波谱等分析化学技术获取数据，眼科检查标本通常为血液、泪液、房水等体液标本及小梁网、玻璃体或视网膜等组织。青光眼是一种具有特征性视盘损伤和视野缺损的视神经疾病，目前已有国内外研究者通过代谢组学技术分析了青光眼动物模型或患者的代谢物轮廓特征，筛选出较多有价值的潜在代谢标志物以及与青光眼病情进展密切相关的代谢产物。代谢组学与基因组学、转录组学、蛋白质组学共同构成了生物信息系统，多组学联合研究的开展将是未来发展的方向。本文在对代谢组学概述的基础上，就青光眼基于不同组织、体液标本的代谢组学研究进展进行综述。

目的:制备靶向转铁蛋白受体（TfR）的多肽分子探针 99Tc m-组氨酸-精氨酸-脯氨酸-酪氨酸-异亮氨酸-丙氨酸-组氨酸（简称 99Tc m-T7），并评估其在荷瘤裸鼠模型micro SPECT/CT显像中的效果。 方法:采用间接标记法，在共配体N-三（羟甲基）甲基甘氨酸和乙二胺二乙酸的协同下，制备 99Tc m-T7。采用流式细胞术测定人胰腺癌PANC-1细胞和人乳腺癌MX-1细胞表面TfR的表达水平，采用体外细胞结合及细胞竞争抑制实验评估 99Tc m-T7体外结合TfR的亲合力及特异性。构建荷瘤裸鼠模型，注射 99Tc m-T7后进行micro SPECT/CT显像及生物学分布实验。采用离体组织放射性磷屏自显影成像及组织病理学检查，观察TfR的表达情况。2组间的比较采用独立样本 t检验。 结果:成功制备了分子探针 99Tc m-T7，其标记率>95%，分别在与生理盐水、胎牛血清的混合液中孵育4 h后的放射化学纯度为（95.3±0.3）%和（90.6±0.4）%。流式细胞术实验结果显示，PANC-1细胞与TfR单克隆抗体的结合率为（98.9±0.1）%，而MX-1细胞与TfR单克隆抗体的结合率为（0.2±0.1）%。体外细胞结合实验结果表明，PANC-1细胞与 99Tc m-T7共孵育60 min后结合率达到峰值[(16.12±0.01)%]，高于MX-1细胞[（1.20±0.01）%]，且二者间的差异有统计学意义（ t=28.67， P<0.001）；细胞竞争抑制实验结果表明，PANC-1阻断组与 99Tc m-T7的结合率降低至（2.40±0.01）%，与PANC-1实验组的差异有统计学意义（ t=26.91， P<0.001）。荷瘤裸鼠体内micro SPECT/CT显像结果显示， 99Tc m-T7可从血液中迅速清除，主要通过肾脏排泄。PANC-1荷瘤裸鼠模型在注射 99Tc m-T7后30 min时肿瘤轮廓显示清晰，肿瘤/肌肉比值达2.80±0.22。生物学分布实验结果显示，肿瘤及各脏器对 99Tc m-T7的摄取[每克组织百分注射剂量率（%ID/g）]与显像结果一致，且 99Tc m-T7在PANC-1细胞中的摄取[（0.55±0.18）%ID/g]高于MX-1细胞[（0.16±0.11）%ID/g]，差异有统计学意义（ t=6.42， P<0.001）。放射性磷屏自显影结果显示，在注射 99Tc m-T7 30 min后，相较于MX-1细胞，PANC-1细胞显著摄取 99Tc m-T7 ；在正常组织脏器中，以肾脏摄取最为显著，其次为肝脏。苏木精-伊红染色法及免疫组织化学染色法结果显示，肿瘤实质内未见明显坏死，在PANC-1细胞中TfR呈高表达，而在MX-1细胞中TfR呈低表达。 结论:成功制备了靶向TfR的特异性多肽分子探针 99Tc m-T7，其在荷瘤裸鼠模型中具有良好的显像效能，有望为在体监测肿瘤TfR的表达提供新的影像学手段。

目的:观察特发性黄斑前膜(IMEM)手术后微视野联合OCTA分析视功能情况。方法:回顾性分析南京医科大学附属眼科医院2019年10月至2020年11月IMEM 42例(46只眼)的临床资料，患者均行25 G玻璃体切除联合黄斑前膜剥除手术，术后进行微视野计及光学相干断层扫描血管成像(OCTA)等检查并加以分析。随访1个月。结果:术后1个月，视力(logMAR，BCVA)较术前明显提高( t＝5.056, P<0.001)；黄斑中心区厚度(CMT)较术前明显减小( t＝7.766， P<0.001)。微视野联合OCTA结果显示：视网膜敏感度阈值、2°注视率及4°注视率均较术前明显增加( t＝-7.500，-6.577，-7.759；均 P<0.001)；由注视点组成的63%二元轮廓椭圆面积和95%二元轮廓椭圆面积均较术前明显减小( t＝5.414，8.615；均 P<0.001)；黄斑中心区浅层和深层视网膜血管密度、围绕黄斑中心凹血管密度值与术前相似( t＝-0.089，-1.717，-1.552； P＝0.929，0.093，0.128)，但面积较术前增加( t＝-2.257， P＝0.029)。 结论:玻璃体切除联合黄斑前膜剥除术后通过微视野联合OCTA评估能有效提高IMEM患者的视功能。

患者女，26岁。因突发右眼视物不清1 d，于2023年4月13日到遵义医科大学第二附属医院眼科就诊。患者半个月前因右侧腘静脉血栓栓塞行下腔静脉滤器置入手术及尿激酶溶栓、那屈肝素钠抗凝治疗。否认其他全身病史。眼科检查：右眼、左眼最佳矫正视力分别为数指/10 cm、1.0。右眼、左眼眼压分别为14、11 mm Hg （1 mm Hg=0.133 kPa）。右眼直接对光反射消失。眼底检查，右眼视盘水肿，盘缘小片状出血，视网膜静脉纡曲扩张，"串珠样"改变，静脉旁多发散在视网膜前出血，对应静脉处可见白色栓子样梗塞，动脉变细，反光增强（图1A）。红外眼底扫描激光检查，右眼仅见上方及颞侧涡静脉轮廓（图1B）。光相干断层扫描（OCT）检查，右眼黄斑区鼻侧视网膜水肿增厚，视网膜层间结构模糊，脉络膜厚度不均（图1C）。左眼眼前节及眼底检查均未见明显异常。右下肢静脉CT血管成像检查，右侧股静脉下段-腘静脉栓塞，周围软组织肿胀（图2A）。右下肢静脉3D-CT血管造影检查，右侧胫前、胫后及腓静脉显影变淡，右侧腘动脉局限性轻度狭窄（图2B）。实验室检查，活化部分凝血活酶时间109.4 s（正常值范围31 ～43 s）。给予患者静脉注射800 ml冰冻血浆补充凝血因子、维生素K40 mg/d促进凝血因子合成。治疗2 d后患者自觉右眼视力降至无光感。眼底检查，右眼视网膜大量散在Roth斑样出血，视网膜静脉系统"串珠样"改变伴多发散在节段性栓子栓塞，黄斑区内界膜隆起伴内界膜下出血（图3A）。OCT检查，右眼后极部视网膜重度水肿，层间结构紊乱、内界膜脱离（图3B）。荧光素眼底血管造影（FFA）检查，右眼全周视网膜大范围遮蔽荧光，隐约可见动脉前峰充盈，遮蔽区域见脉络膜背景荧光弥漫增强；造影晚期仍未见视网膜静脉荧光充盈（图3C）。实验室检查：抗核抗体（＋）、抗双链DNA抗体（＋）、抗史密斯抗体（抗SM抗体）（＋），抗磷脂抗体、狼疮抗凝物（＋）；其余血常规、生物化学检测结果无明显异常。血栓弹力检查，凝血因子及纤维蛋白原活性减弱。诊断：（1）右眼视网膜中央动脉阻塞（CRAO）并视网膜中央静脉阻塞；（2）系统性红斑狼疮（SLE）合并抗磷脂综合征（APS）；（3）狼疮抗凝物-低凝血酶原综合征。给予患者眼球按摩、高通量氧气间断吸氧、静脉注射甲泼尼龙琥珀酸钠免疫抑制、维生素促进凝血因子合成、达肝素钠抗凝、球后注射硫酸阿托品扩血管、噻吗洛尔滴眼液点眼降眼压、血栓通活血化瘀治疗。但患者视力无明显改善。

运用动物模型、血浆药物化学及代谢组学方法,探讨马钱子炮制前后干预炎症大鼠作用机制.按不同剂量灌胃小鼠,以死亡率初步考察炮制前后毒性;建立大鼠蛋清性足跖肿胀模型,通过肿胀率和炎性因子水平评价炮制前后抗炎效果;采用高分辨质谱结合多元统计学,鉴定入血后的移行成分及相应的代谢产物;比较分析各实验组代谢轮廓及差异生物标志物,并构建其代谢通路.结果显示,高剂量下马钱子砂烫品的毒性要明显低于生品.生品和砂烫品均能显著降低大鼠足肿胀率和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白介素-1β(IL-1β)、白介素-6(IL-6)的水平,炮制前后在抗炎效果上差异无统计学意义(P＞0.05).通过血浆药物分析,鉴定出了 12个移行成分,以及相应60个代谢产物,S-plot鉴定出10个差异性化合物.代谢组学实验共发现10个内源性代谢物含量发生显著变化(P＜0.05),生物标志物主要涉及苯丙氨酸代谢、甘油磷脂代谢、谷氨酸及谷氨酰胺循环、精氨酸和脯氨酸代谢等途径.通过本研究确证马钱子生品和砂烫品均有较好抗炎治疗作用,高温炮制可以降低马钱子毒性;入血后有效成分应多为生物碱,经过Ⅰ相反应就容易被体内清除;马钱子炮制抗炎、镇痛、减毒机制主要与氨基酸和脂质代谢相关.该实验结果进一步阐明了起效物质基础及体内作用机制,为后续炮制工艺改进和新药研发等提供科学支撑.

本研究通过UPLC-Q-TOF-MS/MS技术、网络药理学策略探究尖尾芋石油醚部位抗乳腺癌药效物质基础及作用机制,并通过4T1乳腺癌荷瘤小鼠模型验证尖尾芋石油醚部位(petroleum ether fraction of Alocasia cucullata,EAC)体内抗乳腺癌作用及机制.基于UPLC-Q-TOF-MS/MS数据获取EAC化学成分41个,包括11种芳香类成分、8种萜类成分、5种生物碱类成分、4种脂肪酸类成分、2种香豆素类成分和11种其他类成分;基于鉴定出的化合物通过网络药理学得到556个潜在作用靶点;蛋白互作网络(PPI)分析发现MAPK1、Bcl-2等10个核心靶点,富集分析发现核心靶点可能通过MAPK、PI3K-Akt等细胞凋亡相关信号通路发挥抗乳腺癌作用,并通过分子对接技术验证了毛地黄毒苷配基等活性成分与细胞凋亡相关蛋白pERK、Bcl-2、Bax具有良好的结合能力.抗乳腺癌活性研究结果表明与模型对照组比较,EAC低、中、高剂量组肿瘤生长趋势渐缓,肿瘤质量减少,抑瘤率逐渐增加;EAC中、高剂量组脾脏指数有显著性差异,EAC低剂量组脾脏指数效果不显著(P＜0.05);HE染色观察到给药组肿瘤组织中细胞排列疏松,轮廓不清晰.ELISA法检测小鼠血清,发现EAC高、中剂量组、5-氟尿嘧啶阳性对照组的IL-1β、TNF-α含量均降低.动物验证实验结果表明不同浓度EAC均能下调MAPKs信号通路中p-ERK蛋白的表达(P＜0.01),而对ERK、JNK、p-38、p-JNK、p-p38蛋白水平无显著性差异;EAC能显著升高小鼠乳腺癌组织中Bax/Bcl-2蛋白水平和基因表达水平.综上,尖尾芋石油醚部位能下调p-ERK蛋白水平,促进癌细胞凋亡从而抑制4T1乳腺癌荷瘤小鼠肿瘤的生长.

目的 探究孕鼠胎盘中性粒细胞和炎性因子白细胞介素17(IL-17)在孕期刚地弓形虫(简称弓形虫)感染致不良妊娠结局中的作用机制.方法 将C57BU6孕鼠随机分为未感染组和感染组(每组6只),感染组孕鼠在孕8 d腹腔注射0.2 ml弓形虫RH株速殖子悬液(约400个速殖子),未感染组孕鼠腹腔注射等量灭菌PBS.于孕14d采用颈椎脱臼法处死孕鼠,解剖观察并记录妊娠结局.取胎盘组织,制备石蜡切片,经苏木苏-伊红(HE)染色后观察胎盘组织学改变和多形核粒细胞的浸润情况,并计算浸润指数.制备胎盘组织单细胞悬液,采用流式细胞术检测胎盘免疫细胞中中性粒细胞.采用免疫组织化学染色检测胎盘组织中弓形虫的分布、定位及IL-17的表达水平(灰度值),采用Spearman相关性分析方法分析IL-17的表达水平与中性粒细胞浸润指数的关系.两组间数据比较采用独立样本Student's t检验.结果 感染组孕鼠出现弓背、耸毛和行动迟缓等症状,胎鼠和胎盘出现明显出血及淤血点,胎鼠发育不良;未感染组孕鼠无异常表现,胎鼠和胎盘发育正常.感染组孕鼠的流产率为82.35％(42/51),高于未感染组的4.08％(2/49).HE染色结果显示,感染组孕鼠胎盘组织细胞轮廓性增强,并伴有大量的多形核粒细胞浸润,浸润指数为14.500±0.965,高于未感染组的3.917±0.633(t=9.168,P＜0.01).流式细胞术结果显示,感染组孕鼠胎盘组织中中性粒细胞占胎盘细胞的绝对百分数为(13.700±1.790)％,高于未感染组孕鼠的(4.783±0.723)％(t=5.107,P＜0.01).免疫组织化学染色结果显示,感染组孕鼠胎盘组织中检测到大量弓形虫,并且主要集中分布于中性粒细胞内;感染组孕鼠胎盘组织中IL-17的灰度值为17.510±1.372,高于未感染组孕鼠的8.178±1.293(t=4.951,P＜0.05).相关性分析结果显示,孕鼠胎盘组织中IL-17的表达水平与中性粒细胞的浸润指数呈正相关(R2=0.652,P＜0.01).结论 刚地弓形虫感染可导致孕鼠胎盘组织出现大量中性粒细胞浸润和高水平IL-17的表达,IL-17表达水平的升高可能与中性粒细胞在母胎界面的募集有关.