目的 优化基于ASTM F2131-02标准试验的重组人骨形态发生蛋白-2(recombinant human bone morphogenetic protein-2,rhBMP-2)体外生物活性的检测方法,并进行验证.方法 在美国试验材料学会(American Society for Testing Material,ASTM)建立方法的基础上,对检测细胞株(W-20-17及C2C12细胞)、rhBMP-2稀释方式(2及3倍系列稀释)、细胞培养时间(24、36、48、72h)、细胞冷冻温度(-20及-80 ℃)进行优化,并验证优化方法的特异性、中间精密性、线性及耐用性.应用优化方法检测不同厂家来源rhBMP-2的比活性.结果 确定采用C2C12细胞作为检测细胞;最佳rhBMP-2稀释方式为2倍系列稀释;最佳细胞培养时间为48 h;最佳细胞冷冻温度为-80 ℃.rhBMP-2样品中加入杂蛋白(牛血清白蛋白)时,C2C12细胞可特异性响应其中的rhBMP-2诱导作用;2名实验员于2个时间点共12次检测结果的CV为11.7％;rhBMP-2样品的理论效价在70％～142％范围内与实测效价呈良好的线性关系,拟合直线回归方程为:y=0.983 1 x-0.010 3,R2为0.996 4;采用4、11、21代次C2C12细胞检测rhBMP-2比活性的CV为5.2％.采用优化方法重复2次测定不同厂家来源rhBMP-2样品比活性的CV为1.3％～7.5％.结论 优化的方法具有良好的特异性、中间精密性、线性及耐用性,可用于rhBMP-2体外生物活性的检测,为其研究、生产和应用提供了可靠的分析方法.

目的 探讨激素替代方案准备子宫内膜的冷冻胚胎移植(FET)周期中不同孕激素给药方式对妊娠及分娩结局的影响.方法 选取接受第1周期冷冻单囊胚移植并使用激素替代方案准备内膜患者3 357例,根据孕激素给药方式分为肌内注射黄体酮组(IMP组)749例、口服地屈孕酮联合阴道微粒化黄体酮胶囊组(DYD-VPC组)2 249例及口服地屈孕酮联合阴道黄体酮凝胶组(DYD-VPG组)359例.比较三组基本临床特征、孕产期并发症及妊娠分娩结局的差异.结果 三组年龄、BMI、不孕年限、未生育、患有原发性不孕症、窦卵泡数、获卵数、FET前子宫内膜厚度、PCOS患者比例、剖宫产史、移植胚胎发育时间等基线资料比较均无统计学差异(P均>0.05).三组活产率、生化妊娠率、生化妊娠流产率、临床妊娠丢失率等均无统计学差异(P均>0.05);IMP组剖宫产率高于DYD-VPC组和DYD-VPG组(83.42%vs 76.88%vs 73.41%,P<0.05).三组妊娠期和新生儿并发症如早产、巨大儿、低出生体质量儿、大于胎龄儿、小于胎龄儿、妊娠期高血压疾病和妊娠期糖尿病发生率均无统计学差异(P均>0.05).多因素Logistic回归分析校正混杂因素后显示,肌内注射黄体酮与剖宫产风险增加相关.结论 在激素替代方案准备子宫内膜的冻胚移植周期中,口服地屈孕酮联合阴道用黄体酮的临床妊娠率和活产率与肌内注射黄体酮相同,但剖宫产率降低.

目的:基于超高效液相色谱-四级杆飞行时间质谱法(UPLC Q-TOF MS)对比不同种百合(卷丹及百合)的新鲜品和干燥品(冷冻干燥及烘干)成分的差异.方法:采用UPLC Q-TOF MS技术,对不同种百合的新鲜品和干燥品进行分析,进一步通过主成分分析(PCA)、正交偏最小二乘法-判别分析(OPLS-DA)结合单因素分析筛选百合新鲜样品及烘干样品的差异化合物.结果:UPLC Q-TOF MS结果显示,百合新鲜样品和干燥品主要成分相似.PCA结果显示,百合新鲜品与冻干品聚为一类,而两者与烘干品有明显差异,说明百合冻干样品和新鲜样品整体化学成分相近,而烘干样品经过烫片和烘干处理后化学成分发生了一定变化,故与前两者相异.OPLS-DA结果显示,卷丹新鲜品与烘干品存在 387 个差异成分,百合新鲜品与烘干品存在 335 个差异成分,经数据库比对,初步鉴定出 8 个成分.结论:相较于烘干百合,鲜百合与冷冻干燥百合成分更为相近,为百合药材临床应用与现代中药制剂开发提供依据.

目的:探讨体外受精-胚胎移植治疗中，多囊卵巢综合征（PCOS）患者的基础黄体生成素/卵泡刺激素（LH/FSH）比值与治疗结局之间的关系。方法:采用回顾性队列研究方法，根据纳入排除标准，共纳入2 868例2015年10月至2021年10月间在安徽医科大学附属第一医院生殖医学中心行体外受精-胚胎移植的PCOS患者，其中基础LH/FSH比值>2者为观察组（818例），比值≤2者作为对照组（2 050例）。采用倾向性评分匹配（1∶2.5）来调节患者的非随机分配。通过单因素分析验证基础LH/FSH比值是否与治疗结局相关。结果:经倾向性评分匹配（1∶2.5）后，观察组（778例）与对照组（2 024例）患者的基线数据均无显著差异（ P均>0.05），具有可比性。观察组患者使用促性腺激素总量及持续时间均少于对照组（ t=4.989， P<0.001； t=3.267， P=0.001），卵母细胞体外成熟率高于对照组（ χ2=4.938， P=0.026），获卵数和卵裂数均高于对照组（ t=-2.305， P=0.021； t=-2.816， P=0.005），但两组优质胚胎数和优质胚胎率比较均无显著差异（ P均>0.05）。观察组患者的中重度卵巢过度刺激综合征发生率高于对照组（ χ2=17.277， P<0.001）。无论新鲜胚胎移植还是冻融胚胎移植周期中，剔除多胎妊娠数据后，观察组患者的妊娠期糖尿病发生率仍显著高于对照组（ χ2=9.174， P=0.002； χ2=4.204， P=0.040）。在新鲜胚胎移植周期中，观察组患者的临床妊娠率［分别为30.30%（20/66）、47.75%（53/111）］和分娩率［分别为30.30%（20/66）、46.85%（52/111）］均显著低于对照组（ χ2=5.198， P=0.023； χ2=4.695， P=0.030）；而在冻融胚胎移植周期中，观察组的分娩率显著高于对照组［分别为59.41%（423/712）、55.04%（1 053/1 913）； χ2=7.526， P=0.023］。观察组新鲜胚胎移植周期的临床妊娠率及分娩率均显著低于冻融胚胎移植周期（ χ2=21.308， P<0.001； χ2=20.871， P<0.001），对照组则均无显著差异（ P均>0.05）。 结论:PCOS患者中基础LH/FSH比值较高者，促排卵后更易发生中重度卵巢过度刺激综合征，妊娠期糖尿病的发生率更高。全胚胎冷冻后行冻融胚胎移植可获得更好的妊娠结局。

目的:探讨冷冻消融技术治疗前列腺癌根治性放疗后原发灶复发患者的临床价值。方法:回顾性分析2017年8月至2021年2月复旦大学附属肿瘤医院21例行冷冻消融治疗的前列腺癌根治性放疗后原发灶复发患者的临床资料。平均年龄73.1(57.3~85.0)岁，初诊Gleason评分6分5例，7分8例，≥8分8例。初诊临床分期：cT 2期13例；cT 3期8例。放疗前基线前列腺特异性抗原(PSA)35.3(6.4~78.5) ng/ml，放疗后PSA最低值为1.8ng/ml；中位随访8(3~12)个月后均因PSA持续升高就诊。盆腔MRI及PSMA SPECT检查提示前列腺癌原发灶复发。21例均行挽救性内分泌治疗，冷冻消融术前PSA 4.1(1.8~14.4)ng/ml。术前检查综合评估，患者仅原发灶复发，未见淋巴结或远处转移。采用氩气-氦气低温手术治疗系统，针对复发病灶留置1~3根冷冻针，采用两个冷热循环进行冷冻消融。术后继续应用内分泌治疗。观察不良反应，以及PSA进展、原发灶复发或转移等预后指标。 结果:21例手术均顺利完成，术中评估前列腺体积中位值为42.0(23.0~85.0)ml。21例中术后2例出现尿潴留，1例尿路感染，2例排尿后出现组织脱落。11例术后2~3个月PSA快速下降，下降至中位最低值0.400(0.003~2.800)ng/ml。冷冻消融术后中位随访18(6~51)个月，1例影像学检查提示前列腺局部仍有弥散受限或PSMA摄取增高；4例出现PSA进展，PSA进展时间中位值13(4~36)个月；16例疾病控制良好。无复发转移病例。PSA进展患者较疾病控制良好患者的前列腺体积更大[69.2(59.2~85.0)ml与38.7(23.0~48.7)ml， P<0.001]，冷冻消融术前PSA更高[9.8(6.4~14.4)ng/ml与2.0(1.8~13.8) ng/ml， P＝0.021]。 结论:前列腺冷冻消融可延缓前列腺癌根治性放疗后原发肿瘤复发后的进展，尿潴留、尿路感染等并发症的发生率不高，可作为根治性放疗后原发灶复发的一种局部治疗选择。

目的:探讨体重指数(BMI)对年轻育龄期(20~35岁)单纯输卵管因素不孕妇女首次接受体外受精/卵胞质内单精子注射(IVF/ICSI)治疗的影响。方法:回顾性分析2019年1月1日至2021年9月30日于常德市第一人民医院生殖医学中心首次行IVF/ICSI治疗的747例患者的临床资料，患者年龄20~35岁，均采用卵泡期长效长方案进行控制性超促排卵治疗。按患者助孕治疗前体检时BMI值分为四组：消瘦组(BMI<18.5 kg/m 2 72例)、正常体重组(18.5 kg/m 2≤BMI<24 kg/m 2 455例)、超重组(24 kg/m 2≤BMI<28 kg/m 2 161例)、肥胖组(BMI≥28 kg/m 2 59例)，分析各组控制性超促排卵治疗过程中相关指标及新鲜胚胎移植后妊娠结局的差异。 结果:消瘦组、正常体重组、超重组、肥胖组的年龄、不孕年限、原发不孕/继发不孕比、基础促卵泡激素水平、窦卵泡数比较差异均无统计学意义(均 P>0.05)。四组间促性腺激素(Gn)用药时间、扳机日直径≥14 mm卵泡数、扳机日雌激素水平、获卵数、双原核数、成囊率、移植率、全胚冷冻率比较差异均无统计学意义(均 P>0.05)。Gn用药总量分别为消瘦组(2 374.5±892.5)U、正常体重组(2 643.8±1 213.5)U、超重组(2 950.5±1 156.5)U、肥胖组(2 949.8±1 030.5)U，差异有统计学意义( P＝0.001)。优胚数分别为消瘦组(3.06±2.50)个、正常体重组(2.96±2.16)个、超重组(2.45±1.96)个、肥胖组(2.39±2.03)个，差异有统计学意义( P＝0.015)。四组间无胚率随着BMI增加而显著升高，差异有统计学意义( P＝0.039)。四组间移植胚胎数、生化妊娠率、临床妊娠率、胚胎着床率、多胎率、早期流产率、中期流产率、活产率比较差异均无统计学意义(均 P>0.05)。 结论:在接受卵泡期长方案助孕治疗的单纯输卵管因素不孕患者中，BMI的上升可明显增加Gn用量，降低优胚数、增加无胚率。虽然不同BMI组的鲜胚移植后妊娠结局的各项指标之间差异暂无统计学意义，但早期或中期流产率均随着BMI增加有上升的风险。

目的:探讨超声引导下经皮心肌内室间隔冷冻消融离体猪心的可行性，观察经皮心肌内室间隔射频消融与冷冻消融的效果。方法:实验一：将6只离体猪心按照冷冻消融时间分为1 min组、3 min组和5 min组(各2只)，均以100%功率进行超声引导下经皮心肌内室间隔冷冻消融，冷冻消融结束后测量超声图像、实体解剖的冰球大小及冷冻冰球融化后坏死区大小。实验二：将离体猪心分为冷冻消融组和射频消融组(各3只)，分别行超声引导下经皮心肌内室间隔冷冻消融和射频消融，冷冻功率100%，射频功率40 W，均消融1 min后，观察比较两种消融方式完全坏死区及不完全坏死区的范围。结果:实验一：冷冻消融时间1 min组超声测量冰球短径为(8.00±0.84)mm，实体测量冰球短径为(8.38±1.19)mm，实体测量坏死区短径为(8.35±0.83)mm；3 min组超声测量冰球短径为(19.4±0.28)mm，实体测量冰球短径为(19.03±0.33)mm，实体测量坏死区短径为(19.16±0.25)mm；5 min组超声下测量冰球短径为(26.4±2.54)mm，实体测量冰球短径为(26.01±0.24)mm，实体测量坏死区短径为(24.82±0.25)mm。对上述数据进行随机区组设计的方差分析，区组因素b(冷冻时间1 min、3 min、5 min)差异有统计学意义( F＝505.884， P<0.001)，进一步行三组之间两两比较差异有统计学意义(均 P<0.05)；处理因素k(测量方式包括超声图像测量、实体解剖的冰球测量及冷冻冰球融化后坏死区测量)组间比较差异无统计学意义( F＝0.470， P＝0.635)。实验二：射频消融组不完全坏死带占射频消融区半径比例为0.64±0.01，冷冻消融组不完全坏死带占消融区域半径比例为0.26±0.02，两组比较差异有统计学意义( P＝0.002)，可以认为冷冻消融的不完全坏死区小于射频消融。 结论:超声引导下经皮心肌内室间隔冷冻消融范围可控，消融区域超声图像评估较为准确，不完全坏死区小，在心脏消融方面可能有潜在应用价值。

目的:探讨二代冷冻球囊电隔离共干肺静脉有效性、安全性。方法:入选2016年8月至2017年12月在中国医学科学院阜外医院接受二代冷冻球囊消融治疗的心房颤动（房颤）患者456例，其中男368例，年龄平均54.6岁，年龄范围33~85岁。根据术前左心房肺静脉CT结果分为肺静脉共干（CPV）组45例，对照组90例。分析与比较两组患者术前左心房CT、手术资料及术后随访情况，包括肺静脉电隔离时间（TTI）、隔离时温度、冷冻次数、射频补点次数、术中并发症以及术后房颤复发情况。结果:CPV组冷冻135支肺静脉，对照组360支。两组患者TTI[（51.3±28.4） s对（48.6±29.2） s， P=0.41]、隔离时温度[（-47.6±7.4）℃对（-49.4±6.0）℃， P=0.334]、射频补点（ P=0.827）差异无统计学意义。CPV组X线曝光时间及手术时间较对照组长，差异有统计学意义（ P<0.05）。两组术后随访时间[（24.2±3.7）个月对（23.9±4.8）个月]、并发症及房颤复发率差异无统计学意义。 结论:房颤患者左侧肺静脉共干临床非常常见，手术时间和冷冻消融次数较正常解剖肺静脉略有增加。二代冷冻球囊消融是一种安全和有效的消融策略，其中远期疗效较好。

目的:提高对成人肺表面活性蛋白C（SFTPC）基因突变相关家族性间质性肺疾病的临床表现、影像表现、诊断和治疗的认识。方法:回顾分析宁波大学医学院附属医院诊断的2例成人SFTPC基因突变相关家族性间质性肺疾病，结合文献进行复习。以“familial interstitial lung disease”“SFTPC gene”“surfactant protein C gene”“SFTPC gene mutation associated with familial interstitial lung disease”和“surfactant protein C gene mutation associated with familial interstitial lung disease”为检索词在PubMed、Embase及Ovid数据库，以“家族性间质性肺疾病”“SFTPC基因”“肺表面活性物质相关蛋白C基因”“SFTPC基因突变相关家族性间质性肺疾病”及“肺表面活性物质相关蛋白C基因突变相关家族性间质性肺疾病”为检索词在万方数据库及中国期刊网全文数据，检索时间截至2021年3月。结果:本组2例家族发病患者1男1女，平均年龄27.5岁，Ⅱ-2患者存在干咳、气促症状，Ⅱ-3无症状，2例影像表现均存在多发囊腔及细网格状影，Ⅱ-2患者存在两下肺多发磨玻璃影，Ⅱ-2患者经支气管镜冷冻肺活检病理诊断为UIP。文献复习共纳入35例患者，其中男20例，平均年龄为33.5岁，主要表现为气促（22/30）、干咳（18/30）、杵状指（12/30），而无症状体检或家族其他成员发现而行胸部CT发现占30%（9/30）。最常见胸部CT表现为双肺多发细网格状影（17/17）及多发囊状影或囊腔（12/17）和磨玻璃影（7/17）。病理主要表现为UIP（24/26）。结论:成人SFTPC基因突变相关家族性间质性肺疾病临床主要表现为气促、干咳及杵状指，影像学表现具有一定特征性，主要表现为双肺多发囊腔影及细网格状影伴或不伴两下肺多发磨玻璃影，治疗上目前无特效药，尽早使用羟氯喹可能有较好的疗效。对于影像表现为双肺多发囊腔影伴细网格影及磨玻璃影且发病年龄<50岁时，需要考虑该病可能。

目的:评估蚕丝-胶原支架用于兔前交叉韧带(ACL)重建后，关节腔内韧带再生和骨隧道内腱-骨愈合。方法:Na 2CO 3脱胶法对生蚕丝进行脱胶处理，乙酸抽提法获取Ⅰ型胶原，然后使用热交联和冷冻干燥法制备蚕丝-胶原材料。20只12周龄新西兰大白兔(由河南省实验动物中心提供)，对左膝关节使用蚕丝-胶原支架重建ACL。术后4、16周两个时间点随机处死实验动物的一半，每组标本中的5个进行组织学检测，包括关节腔内韧带的组织学检测和骨隧道腱-骨愈合的组织学检测；每组中余下5个标本进行Micro-CT和生物力学检测。组间比较采用两独立样本 t检验。 结果:术后4周，关节腔内的蚕丝-胶原支架表面可见大量的细胞浸润，细胞排列方向杂乱，细胞周围基质较少，且材料内部细胞浸润较少；骨道内蚕丝-胶原材料内可见细胞浸润，细胞排列较为松散，腱-骨界面可见新生骨组织，骨小梁结构明显；Micro-CT显示骨隧道内新生骨较少，新生骨小梁稀疏，骨体积分数(BV/TV)＝(19.36±2.29)%，骨密度(BMD)＝(245.04±17.68) mg/cm 3。术后16周，关节腔内支架表面和内部均可见大量细胞浸润，细胞呈纤维细胞形态，排列方向较为一致，与支架长轴方向一致，细胞周围基质较多，免疫组织化学染色显示肌腱蛋白-C(Tenascin-C)表达较4周明显增多；骨道内蚕丝-胶原材料内细胞浸润进一步增多，细胞排列较4周时更为有序，腱-骨界面骨组织趋于成熟，骨组织与支架材料结合更加紧密；Micro-CT显示骨隧道内新生骨较4周明显增多，BV/TV＝(39.25±1.51)%( t＝16.010， P<0.05)，BMD＝(400.88±58.32) mg/cm 3，组间比较差异有计学意义( t＝5.718， P<0.05)；16周5例标本测得最大拉力[(43.67±6.52) N]，刚度[(9.18±0.76) N/mm]，较4周差异有统计学意义[最大拉力(25.87±4.57) N， t＝4.994， P<0.05；刚度(4.85±0.84) N/mm， t＝8.556， P<0.05]。 结论:蚕丝-胶原支架用于兔ACL重建，不仅能获得较好的关节腔内韧带再生，同时能够达到良好的腱-骨愈合。