目的 探讨水苏碱(Sta)调节超音速刺猬因子(Shh)/胶质瘤相关癌基因同源物1(Gli1)信号通路对口腔癌(OC)细胞迁移、侵袭和上皮间质转化(EMT)的影响.方法 采用蛋白质印迹技术检测Shh、Gli1在正常口腔上皮角质细胞HOK和OC细胞株系(Cal-27、Tca8113、SCC-9、HSC-3)中的表达,选择其中高表达的HSC-3细胞为研究对象,随机分为Control组、L-Sta组、M-Sta组、H-Sta组、PM组.EdU染色检测HSC-3细胞增殖;划痕实验检测HSC-3细胞的迁移;Transwell实验检测HSC-3细胞侵袭;采用蛋白质印迹技术检测Sta对E-cadherin、N-cadherin、Vimentin、Shh、Gli1蛋白表达的影响;小鼠荷瘤实验验证Sta对OC肿瘤生长和OC组织Shh、Gli1蛋白表达的影响.结果 L-Sta组、M-Sta组、H-Sta组HSC-3细胞EdU阳性细胞率、划痕愈合率、侵袭数、N-cadherin、Vimentin、Shh、Gli1表达低于Control组,E-cadherin表达高于Control组(P<0.05);与H-Sta组相比,PM组EdU阳性细胞率、划痕愈合率、侵袭数、N-cadherin、Vimentin、Shh、Gli1表达升高,E-cadherin表达降低(P<0.05).Sta组移植瘤质量、体积、Shh阳性率、Gli1阳性率低于对照组(P<0.05).结论 Sta可以抑制OC细胞迁移、侵袭和EMT,其机制可能是通过调节Shh/Gli1信号通路实现的.

目的:探讨一个多指(趾)畸形家系潜在的致病基因及机制。方法:收集多指(趾)家系5代11人的临床资料及外周血，全外显子测序，Sanger测序进行验证，确定突变位点。构建重组质粒，在293T细胞中进行外源表达，进行免疫印迹实验和免疫共沉淀实验确定突变蛋白分子量及融合抑制因子(suppressor of fused，SUFU)相互作用情况。结果:先证者及其外曾外祖母、外祖母、母亲、舅舅均存在NM_000168.6( GLI3)：[c.2880del，p.(Asp962MetfsTer41)]移码突变，正常成员未见异常。其表达一个分子量约为130 kDa截短的突变体，与SUFU的相互作用显著降低，音速刺猬(sonic hedgehog signaling，SHH)信号通路激活强度受限。根据美国医学遗传学和与基因组学学会遗传变异分类标准与指南评级为致病变异。 结论:GLI3：c.2880del突变是家系中多指(趾)的致病因， GLI3基因突变谱进一步丰富。

印度刺猬蛋白(indian hedgehog，IHH)与软骨退变程度密切相关 [1]。本研究旨在探讨集落中的软骨细胞表达IHH蛋白对软骨组织退变的意义。

目的:观察孕期邻苯二甲酸二丁酯(DBP)暴露对后代肾脏的毒理作用，并探讨其机制。方法:将6只孕鼠在孕期14~18 d分别随机予以850 mg/(kg·d)的DBP处理3只孕鼠为染毒组，另外3只孕鼠予以等剂量的玉米油处理为对照组。在产后第1天分别随机收集各组6只子代鼠的肾脏组织，采用免疫组织化学(IHC)染色检测肾脏自噬水平，蛋白质印迹法(Western blot)及定量分析验证自噬相关基因Beclin-1在肾脏中的表达。用Western blot及实时定量反转录聚合酶链反应(RT-qPCR)检测肾脏组织中Hedgehog信号通路上的相关标志物的表达水平。在体外实验中，分别予以Hedgehog信号通路的抑制剂索尼德吉Sonidegib及激动剂重组音刺猬蛋白(SHH)处理NRK52E肾小管上皮细胞，采用Western blot分析各组的自噬水平。组间比较采用独立 t检验。 结果:IHC提示染毒组Beclin-1的表达高于对照组(2.37±0.12比1.00±0.10， t＝15.190， P<0.05)，蛋白印记及其定量分析显示染毒组Beclin-1蛋白表达量高于对照组(1.20±0.104比1.00±0.01， t＝3.317， P<0.01)。同时，Western blot及其定量分析表明，暴露组Hedgehog信号通路标记物Gli1和Ptch1表达低于对照组(1.00±0.15比0.43±0.09， t＝5.644， P<0.01；1.00±0.01比0.35±0.10， t＝11.20， P<0.01)。RT-qPCR也提示暴露组Gli1和Ptch1表达低于对照组(1.00±0.18比0.51±0.10， t＝4.122， P<0.01；1.00±0.10比0.62±0.08， t＝5.140， P<0.01)。体外研究证实当加入Hedgehog抑制剂Sonidegib后，实验组的NRK52E细胞自噬指数(LC3Ⅱ/LC3Ⅰ)高于对照组(0.49±0.11比1.25±0.05， t＝10.890， P<0.01)，而当加入其激动剂SHH后，实验组的自噬指数低于对照组(0.49±0.11比0.36±0.09， t＝11.260， P<0.01)。 结论:孕期DBP暴露通过抑制Hedgehog信号引起后代肾脏发生自噬，从而可能引起肾脏相关疾病。

目的:观察SD大鼠乳鼠胫骨生长板软骨细胞甲状旁腺激素相关蛋白(parathyroid hormone-related protein，PTHrp)的表达情况并分析其对印度刺猬蛋白(indian hedgehog，IHH)-PTHrp信号通路的意义。方法:SD大鼠乳鼠10只，颈椎脱臼处死后取膝关节标本并制作组织学切片。应用免疫组织化学技术检测PTHrp蛋白在乳鼠胫骨生长板的表达区域，同时应用原位杂交技术检测生长板PTHrp mRNA的表达区域；应用免疫组织化学技术检测IHH-PTHrp信号通路关键因子IHH蛋白、Patched(Ptc)蛋白、PTHrp受体蛋白在胫骨生长板的表达区域。结果:乳鼠胫骨生长板软骨膜下软骨细胞、生长板前肥大区软骨细胞内均表达PTHrp蛋白及PTHrp mRNA；IHH蛋白主要在生长板前肥大区软骨细胞内表达，Ptc蛋白主要在生长板周围软骨膜细胞内表达，PTHrp受体蛋白主要在生长板增殖区软骨细胞内表达，少量在前肥大区软骨细胞内表达。结论:乳鼠胫骨生长板软骨膜下软骨细胞和前肥大区软骨细胞内均表达PTHrp蛋白；PTHrp蛋白在前肥大区软骨细胞内表达，可以补充调控胫骨生长板纵向发育的IHH-PTHrp信号通路学说。

生长板(软骨组织)是骨骼发育、线性生长的关键，但随着青春期进展，生长板的增殖能力将不断耗竭，最终骨生长板闭合。在骨生长过程中，有多种调节因子通过不同的机制调节软骨细胞增殖、分化。其中，内分泌调节(生长激素、胰岛素样生长因子、甲状腺素、性激素、糖皮质激素等)、转录因子通过系统调节对生长板调控起重要作用。局部调节因子，如印第安刺猬蛋白及甲状旁腺素相关肽、骨形成发生蛋白、成纤维细胞生长因子等也对生长板调控起一定作用。现就影响软骨细胞增殖分化调控的机制进行概述。

目的:探讨中医治疗慢性萎缩性胃炎（CAG）的用药规律及作用的信号通路、分子靶标分布。方法:检索2010年1月1日－2022年5月31日中国学术期刊全文数据库（CNKI）、中国生物医学文献数据库（CBM）、中文科技期刊数据库（重庆维普）、中国学术期刊数据库（万方数据）、PubMed及Web of Science数据库中有关中医药治疗CAG模型大鼠的基础研究文献。根据纳入与排除标准对文献进行筛选和评价，对最终纳入文献中实验方药的药物组成、选用的信号通路及分子靶标等信息进行整理并统计分析。结果:共纳入文献304篇，涉及复方118个，包含中药174味，其中高频药物有白术、甘草、莪术等；常用药对有白芍-甘草、白花蛇舌草-莪术、白术-甘草等；高置信度关联规则有黄连-党参-半夏、黄连-甘草-半夏、党参-白花蛇舌草-莪术等。信号通路共涉及16条，研究频次较高的有PI3K/Akt、刺猬（hedgehog）、Wnt及TLR4信号通路等。分子靶标共包含198个，包括炎症及免疫相关分子如IL-6、NF-κB、TNF-α；增殖凋亡等相关分子如Bcl-2、增殖细胞核抗原（PCNA）、Bax；氧化损伤指标如SOD、MDA；胃黏膜分泌相关指标如胃泌素（GAS）、胃蛋白酶原（PG），以及缺氧、血管新生相关分子如HIF-1α、VEGF等。结论:总结了CAG实验方药的药物分布规律及其作用机制途径，为整体了解中医药干预CAG的基础研究概况提供一定参考。

目的:探讨刺猬蛋白（Hedgehog，Hh）信号通路相关因子（Ihh、Shh、Smo）在慢性氟中毒大鼠骨组织中的表达变化及意义。方法:36只健康SD大鼠，根据体质量（100 ~ 120 g）采用随机数字表法分为3组（12只/组，雌雄各半）；对照组大鼠饮用自来水（含氟量< 1 mg/L），低氟组和高氟组染氟剂量分别为5、50 mg/L。各组大鼠饲养6个月时，收集24 h尿样，取大鼠股骨干骺端，氟离子选择电极法检测尿氟、骨氟含量；HE染色，光镜观察骨组织形态学改变；酶联免疫吸附法检测血清骨碱性磷酸酶（BALP）水平；实时荧光定量PCR（Real-time PCR）和免疫组织化学法检测骨组织Ihh、Shh、Smo mRNA和蛋白表达水平。结果:随着染氟含量的增加，各组大鼠尿氟、骨氟含量和血清BALP水平[尿氟：（1.37 ± 0.44）、（5.96 ± 0.56）、（7.60 ± 0.61）mg/L，骨氟：（306.04 ± 12.58）、（652.91 ± 51.83）、（1 094.11 ± 126.34）mg/kg，血清BALP：（27.78 ± 4.09）、（46.59 ± 5.75）、（57.45 ± 3.99）U/L]逐渐增加（ P均< 0.05）。光镜下染氟组大鼠股骨干骺端呈骨质硬化表现。高氟组大鼠Ihh、Shh、Smo mRNA表达水平（1.39 ± 0.36、0.56 ± 0.23、0.40 ± 0.15）高于对照组和低氟组（0.73 ± 0.19、0.92 ± 0.34，0.19 ± 0.04、0.36 ± 0.16，0.14 ± 0.04、0.24 ± 0.13， P均< 0.05），低氟组Shh mRNA表达水平高于对照组（ P < 0.05）。高氟组大鼠Ihh、Smo蛋白表达水平（138.89 ± 3.72、149.29 ± 7.63）高于对照组和低氟组（127.39 ± 2.69、134.81 ± 3.53，129.64 ± 12.62、139.07 ± 9.30），且低氟组高于对照组（ P均< 0.05）；高氟组大鼠Shh蛋白表达水平（141.26 ± 7.49）高于对照组（130.96 ± 11.10， P < 0.05）。 结论:Hh信号通路相关因子在氟中毒大鼠骨组织中出现表达改变，氟可能通过诱导Hh信号活化来影响骨形成。

目的:探讨神经胶质瘤相关基因同源蛋白1（GLI1）及超音刺猬蛋白（Shh）在卵巢型子宫内膜异位症（EM）恶变过程中的表达及其临床意义。方法:收集2000年4月—2018年4月在青岛大学附属医院及山东省威海市立医院行手术治疗的EM相关性卵巢上皮性癌（EAOC，即卵巢型EM恶变）患者50例（EAOC组），其年龄为（49±7）岁；另收集同期的卵巢异位子宫内膜非典型增生（aEM）患者35例（aEM组），其年龄为（44±9）岁，卵巢型EM患者50例（EM组），其年龄为（37±8）岁。实时荧光定量PCR技术及免疫组化EnVision二步法分别检测3组病变组织中GLI1、Shh mRNA和蛋白的表达，比较其在卵巢型EM恶变过程中的表达差异，分析GLI1与Shh表达的相关性，并分析GLI1及Shh表达与EAOC患者临床病理特征、预后的关系。结果:（1）实时荧光定量PCR技术检测显示，EM组、aEM组、EAOC组病变组织中GLI1 mRNA的表达水平分别为1.77±0.40、3.54±0.44、7.80±0.24，Shh mRNA的表达水平分别为0.95±0.21、3.14±0.35、5.41±0.31，EAOC组GLI1、Shh mRNA的表达水平均显著高于EM组、aEM组（ P均<0.01），EM组与aEM组分别比较，差异也均有统计学意义（ P均 <0.01）。免疫组化EnVision二步法检测显示，EM组、aEM组、EAOC组病变组织中，GLI1蛋白的高表达率分别为32%（16/50）、57%（20/35）及66%（33/50），Shh蛋白的高表达率分别为20%（10/50）、49%（17/35）、54%（27/50），3组分别比较，差异均有统计学意义（ P均<0.01）。EAOC组织中，GLI1 mRNA与Shh mRNA的表达呈显著正相关（ r=0.721， P<0.01），GLI1蛋白与Shh蛋白的表达也呈显著正相关（ r=0.608， P=0.001）。（2）GLI1蛋白表达与EAOC患者的血清癌抗原125（CA 125）水平、国际妇产科联盟（FIGO）分期、淋巴结转移状态、铂敏感性显著有关（ P均<0.05）；Shh蛋白表达与EAOC患者的FIGO分期、淋巴结转移状态均显著有关（ P均<0.05）。logistic回归模型多因素分析显示，FIGO分期Ⅲ~Ⅳ期、血清CA 125≥35 kU/L、GLI1蛋白高表达是影响EAOC患者预后的独立因素（ P均<0.05）。Kaplan-Meier法生存分析显示，在EAOC患者中，GLI1蛋白高表达、低表达患者的5年总生存率分别为12.1%、35.3%，两者比较，差异有统计学意义（ χ2 =10.73， P<0.01）；Shh蛋白高表达、低表达患者的5年总生存率为11.1%、30.4%，两者比较，差异有统计学意义（ χ2 =3.96， P=0.047）。 结论:GLI1及Shh均与卵巢型EM恶变相关，两者在促进卵巢型EM恶变方面可能有一定的作用，GLI1及Shh蛋白高表达提示EAOC患者的预后不良。

目的:探讨细胞内印度刺猬蛋白(Ihh)表达水平变化对软骨终板细胞的影响与意义。方法:2018年5月至12月手术收集山西医科大学附属山西省人民医院骨科31例软骨终板(CEP)组织标本，体外分离人CEP细胞培养至P3代，随机分为过表达组、空载体组和敲减组，分别添加Ihh信使RNA质粒、空载体和Ihh沉默RNA质粒，质粒转染培养48 h后，使用蛋白质印迹法(Western blot)和实时定量聚合酶链反应法(RT-qPCR)检测标本Ihh及相关指标的蛋白和mRNA表达，免疫荧光和原位杂交染色观测细胞表型。3组实验数据因方差不齐，呈正态性分布，选择Welch检验，Games-Howell法组间多重比较。结果:质粒干预CEP软骨细胞Ihh水平表达，Westernblot结果显示过表达组、空载体组和敲减组3组细胞中Ihh(0.79±0.09，0.31±0.20，0.04±0.03)、Ⅱ型胶原(Col Ⅱ) (0.18±0.08，0.49±0.14，1.13±0.27)和基质金属蛋白酶-13(MMP-13)(0.78±0.17，0.51±0.12，0.37±0.06)灰度值差异有统计学意义( F＝176.670、37.650、26.070， P<0.01)。RT-qPCR结果显示过表达组、空载体组和敲减组3组细胞中Ihh mRNA(3.13±1.21，0.92±0.18，0.39±0.22)、Col Ⅱ mRNA(0.66±0.13，1.03±0.24，1.64±1.32)和MMP-13 mRNA(9.17±2.35，1.04±0.27，3.56±0.26)相对表达水平差异有统计学意义( F＝17.170、15.890、34.732， P<0.01)。免疫荧光和原位杂交结果显示与空载体组比较，Ihh和MMP-13在过表达组最强，敲减组最弱，而Col Ⅱ在敲减组中最强，过表达组最弱。 结论:下调软骨细胞内Ihh表达可明显增加Col Ⅱ，减少MMP-13，维持细胞表型，进一步延缓CEP软骨细胞退变。